Proučavanje metabolizma lipida. Spektar lipida u krvi Određivanje ukupnih lipida

Studije metabolizma lipida i lipoproteina (LP), holesterola (CS), za razliku od drugih dijagnostičkih testova, od društvenog su značaja, jer zahtevaju hitne mere za prevenciju kardiovaskularnih bolesti. Problem koronarne ateroskleroze pokazao je jasan klinički značaj svakog biohemijskog indikatora kao faktora rizika za koronarnu bolest srca (CHD), a pristupi procjeni poremećaja metabolizma lipida i lipoproteina su se promijenili u posljednjoj deceniji.

Rizik od razvoja aterosklerotskih vaskularnih lezija procjenjuje se sljedećim biohemijskim testovima:

Određivanje odnosa ukupni holesterol/holesterol-HDL, holesterol-LDL/holesterol-HDL.

Trigliceridi

TG - neutralni nerastvorljivi lipidi koji ulaze u plazmu iz crijeva ili iz jetre.

U tankom crijevu, trigliceridi se sintetiziraju iz egzogenih dijetalnih masnih kiselina, glicerola i monoacilglicerola.
Formirani trigliceridi u početku ulaze u limfne žile, a zatim u obliku hilomikrona (CM) kroz torakalni limfni kanal ulaze u krvotok. Životni vek HM u plazmi je kratak, oni ulaze u depoe masti u telu.

Prisustvo HM objašnjava bjelkastu boju plazme nakon uzimanja masne hrane. HM se brzo oslobađaju iz TG uz učešće lipoprotein lipaze (LPL), ostavljajući ih u masnom tkivu. Normalno, nakon 12-satnog gladovanja, HM se ne detektuje u plazmi. Zbog niskog sadržaja proteina i velike količine TG, CM ostaje na startnoj liniji u svim vrstama elektroforeze.

Uz TG u ishrani, endogeni TG nastaju u jetri iz endogeno sintetiziranih masnih kiselina i trifosfoglicerola, čiji je izvor metabolizam ugljikohidrata. Ovi trigliceridi se prenose krvlju do tjelesnih masnih depoa kao dio lipoproteina vrlo niske gustine (VLDL). VLDL su glavni transportni oblik endogenog TG. Sadržaj VLDL u krvi korelira sa porastom nivoa TG. Sa visokim sadržajem VLDL, krvna plazma izgleda zamućena.

Za proučavanje TG se koristi krvni serum ili krvna plazma nakon 12-satnog gladovanja. Čuvanje uzoraka je moguće 5-7 dana na temperaturi od 4 °C, višekratno zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka nije dozvoljeno.

Holesterol

Holesterol je sastavni dio svih tjelesnih ćelija. Dio je ćelijskih membrana, LP, prekursor je steroidnih hormona (minerala i glukokortikoida, androgena i estrogena).

Holesterol se sintetiše u svim ćelijama tijela, ali većina se formira u jetri i dolazi s hranom. Tijelo sintetiše do 1 g holesterola dnevno.

CS je hidrofobno jedinjenje, čiji su glavni oblik transporta u krvi proteinsko-lipidni micelarni kompleksi LP. Njihov površinski sloj čine hidrofilne glave fosfolipida, apolipoproteina, esterifikovani holesterol je hidrofilniji od holesterola, pa se estri holesterola kreću od površine do centra micela lipoproteina.

Glavni dio holesterola se transportuje u krvi u obliku LDL-a iz jetre u periferna tkiva. LDL apolipoprotein je apo-B. LDL stupaju u interakciju s apo-B receptorima plazma membrana stanica, zarobljeni su od njih endocitozom. Kolesterol koji se oslobađa u stanicama koristi se za izgradnju membrana i esterificira se. Kolesterol sa površine ćelijskih membrana ulazi u micelarni kompleks koji se sastoji od fosfolipida, apo-A, i formira HDL. HDL holesterol se podvrgava esterifikaciji pod dejstvom lecitinholesterolacil transferaze (LCAT) i ulazi u jetru. U jetri, HDL-izveden holesterol prolazi kroz mikrozomalnu hidroksilaciju i pretvara se u žučne kiseline. Njegovo izlučivanje se dešava i u sastavu žuči i u obliku slobodnog holesterola ili njegovih estera.

Proučavanje nivoa holesterola ne daje dijagnostičke informacije o određenoj bolesti, već karakteriše patologiju metabolizma lipida i lipida. Najveći broj holesterola javlja se kod genetskih poremećaja metabolizma LP: porodična homo- i heterozigotna hiperholesterolemija, porodična kombinovana hiperlipidemija, poligena hiperholesterolemija. U nizu bolesti razvija se sekundarna hiperholesterolemija: nefrotski sindrom, dijabetes melitus, hipotireoza, alkoholizam.

Za procjenu stanja metabolizma lipida i LP određuju se vrijednosti ukupnog holesterola, TG, HDL holesterola, VLDL holesterola, LDL holesterola.

Određivanje ovih vrijednosti vam omogućava da izračunate koeficijent aterogenosti (Ka):

Ka = ukupni holesterol - HDL holesterol / VLDL holesterol,

I drugi pokazatelji. Za proračune je potrebno znati i sljedeće proporcije:

VLDL kolesterol \u003d TG (mmol / l) / 2,18; LDL holesterol = ukupni holesterol - (HDL holesterol + VLDL holesterol).

lipida koje se nazivaju masti koje ulaze u organizam hranom i stvaraju se u jetri. Krv (plazma ili serum) sadrži 3 glavne klase lipida: trigliceride (TG), holesterol (CS) i njegove estre, fosfolipide (PL).
Lipidi su u stanju da privlače vodu, ali se većina njih ne otapa u krvi. Oni se transportuju u stanju vezanom za proteine (u obliku lipoproteina ili, drugim riječima, lipoproteina). Lipoproteini se razlikuju ne samo po sastavu, već i po veličini i gustoći, ali im je struktura gotovo ista. Centralni dio (jezgro) predstavljaju holesterol i njegovi estri, masne kiseline, trigliceridi. Školjka molekule sastoji se od proteina (apoproteina) i lipida rastvorljivih u vodi (fosfolipida i neesterifikovanog holesterola). Vanjski dio apoproteina je u stanju da formira vodonične veze sa molekulima vode. Dakle, lipoproteini se mogu djelimično rastvoriti u mastima, delimično u vodi.
Hilomikroni se nakon ulaska u krv razlažu na glicerol i masne kiseline, što rezultira stvaranjem lipoproteina. Ostaci hilomikrona koji sadrže holesterol se obrađuju u jetri.
Od holesterola i triglicerida u jetri nastaju lipoproteini vrlo niske gustine (VLDL), koji deo triglicerida doniraju perifernim tkivima, dok se njihovi ostaci vraćaju u jetru i pretvaraju u lipoproteine niske gustine (LDL).
LPN II su transporteri holesterola za periferna tkiva, koji se koristi za izgradnju ćelijskih membrana i metaboličkih reakcija. U tom slučaju, neesterifikovani holesterol ulazi u krvnu plazmu i vezuje se za lipoproteine visoke gustine (HDL). Esterifikovani holesterol (povezan sa estrima) se pretvara u VLDL. Zatim se ciklus ponavlja.
Krv takođe sadrži lipoproteine srednje gustine (LDL), koji su ostaci hilomikrona i VLDL i sadrže velike količine holesterola. LDL u ćelijama jetre uz učešće lipaze se pretvaraju u LDL.
Krvna plazma sadrži 3,5-8 g/l lipida. Povećanje nivoa lipida u krvi naziva se hiperlipidemija, a smanjenje hipolipidemija. Pokazatelj ukupnih lipida u krvi ne daje detaljnu predstavu o stanju metabolizma masti u tijelu.
Dijagnostička vrijednost je kvantitativno određivanje specifičnih lipida. Sastav lipida krvne plazme prikazan je u tabeli.

Lipidni sastav krvne plazme

Frakcija lipida		Indikator norme
Opšti lipidi		4,6-10,4 mmol/l
Fosfolipidi		1,95-4,9 mmol/l
Lipidni fosfor		1,97-4,68 mmol/l
Neutralne masti		0-200 mg%
Trigliceridi		0,565-1,695 mmol/l (serum)
Neesterifikovane masne kiseline		400-800 mmol/l
Slobodne masne kiseline		0,3-0,8 µmol/l
Ukupni holesterol (postoje starosne norme)		3,9-6,5 mmol/l (jedinstvena metoda)
slobodni holesterol		1,04-2,33 mmol/l
Estri holesterola		2,33-3,49 mmol/l
HDL	M	1,25-4,25 g/l
	I	2,5-6,5 g/l
LDL		3-4,5 g/l

Promjena lipidnog sastava krvi - dislipidemija - važan je znak ateroskleroze ili stanja koje joj prethodi. Ateroskleroza je, pak, glavni uzrok koronarne bolesti srca i njenih akutnih oblika (angina pektoris i infarkt miokarda).
Dislipidemije se dijele na primarne, povezane s urođenim metaboličkim poremećajima, i sekundarne. Uzroci sekundarne dislipidemije su fizička neaktivnost i prekomjerna ishrana, alkoholizam, dijabetes melitus, hipertireoza, ciroza jetre i kronično zatajenje bubrega. Osim toga, mogu se razviti tijekom liječenja glukokortikosteroidima, B-blokatorima, progestinima i estrogenima. Klasifikacija dislipidemije je prikazana u tabeli.

Klasifikacija dislipidemija

Vrstu	Povećanje nivoa u krvi
Vrstu	Lipoprotein	lipida
I	Hilomikroni	Holesterol, trigliceridi
Na	LDL	Holesterol (ne uvijek)
Vrstu	Povećanje nivoa u krvi
Vrstu	Lipoprotein	lipida
Nb	LDL, VLDL	Holesterol, trigliceridi
III	VLDL, LPPP	Holesterol, trigliceridi
IV	VLDL	Holesterol (ne uvijek), trigliceridi
V	Hilomikroni, VLDL	Holesterol, trigliceridi

Različite gustine i pokazatelji su metabolizma lipida. Postoje različite metode za kvantitativno određivanje ukupnih lipida: kolorimetrijska, nefelometrijska.

Princip metode. Produkti hidrolize nezasićenih lipida formiraju crveno jedinjenje sa fosfovanilinskim reagensom, čiji je intenzitet boje direktno proporcionalan sadržaju ukupnih lipida.

Većina lipida se nalazi u krvi ne u slobodnom stanju, već kao dio proteinsko-lipidnih kompleksa: hilomikroni, α-lipoproteini, β-lipoproteini. Lipoproteini se mogu razdvojiti različitim metodama: centrifugiranjem u slanim otopinama različite gustine, elektroforezom, tankoslojnom hromatografijom. Tokom ultracentrifugiranja izoluju se hilomikroni i lipoproteini različite gustine: visoki (HDL - α-lipoproteini), niski (LDL - β-lipoproteini), vrlo niski (VLDL - pre-β-lipoproteini) itd.

Frakcije lipoproteina se razlikuju po količini proteina, relativnoj molekularnoj težini lipoproteina i postotku pojedinačnih lipidnih komponenti. Tako α-lipoproteini koji sadrže veliku količinu proteina (50-60%) imaju veću relativnu gustinu (1,063-1,21), dok β-lipoproteini i pre-β-lipoproteini sadrže manje proteina i značajnu količinu lipida - do 95% ukupne relativne molekulske težine i niska relativna gustina (1,01-1,063).

Princip metode. Kada LDL krvnog seruma stupi u interakciju s heparinskim reagensom, pojavljuje se zamućenost čiji se intenzitet određuje fotometrijski. Heparinski reagens je mješavina heparina i kalcijum hlorida.

Materijal koji se proučava: krvni serum.

Reagensi: 0,27% rastvor CaCl 2, 1% rastvor heparina.

Oprema: mikropipeta, FEK, kiveta sa optičkom dužinom puta od 5 mm, epruvete.

NAPREDAK. U epruvetu se doda 2 ml 0,27% rastvora CaCl 2 i 0,2 ml krvnog seruma, pomešano. Odredite optičku gustinu rastvora (E 1) naspram 0,27% rastvora CaCl 2 u kivetama sa filterom crvene svetlosti (630 nm). Rastvor iz kivete se sipa u epruvetu, mikropipetom se doda 0,04 ml 1% rastvora heparina, promeša i tačno nakon 4 minuta ponovo se određuje optička gustina rastvora (E 2) pod istim uslovima. .

Razlika u optičkoj gustoći se izračunava i množi sa 1000 - empirijski koeficijent koji je predložio Ledvina, budući da je konstrukcija kalibracione krive povezana s nizom poteškoća. Odgovor je izražen u g/l.

x (g / l) \u003d (E 2 - E 1) 1000.

. Sadržaj LDL (b-lipoproteina) u krvi varira u zavisnosti od starosti, pola i normalno je 3,0-4,5 g/l. Povećanje koncentracije LDL-a opaženo je kod ateroskleroze, opstruktivne žutice, akutnog hepatitisa, kroničnih bolesti jetre, dijabetesa, glikogenoze, ksantomatoze i gojaznosti, smanjenja b-plazmocitoma. Prosječan sadržaj holesterola u LDL je oko 47%.

Određivanje ukupnog holesterola u krvnom serumu na osnovu Liebermann-Burchardove reakcije (Ilk metoda)

Egzogeni holesterol u količini od 0,3-0,5 g dolazi sa hranom, a endogeni holesterol se sintetiše u organizmu u količini od 0,8-2 g dnevno. Posebno se mnogo holesterola sintetiše u jetri, bubrezima, nadbubrežnim žlezdama, arterijskom zidu. Holesterol se sintetiše iz 18 molekula acetil-CoA, 14 molekula NADPH, 18 molekula ATP-a.

Kada se u krvni serum dodaju anhidrid octene kiseline i koncentrirana sumporna kiselina, tečnost postaje crvena, plava i na kraju zelena. Reakcija je uzrokovana stvaranjem zelene sulfonske kiseline holesterilena.

Reagensi: Liebermann-Burchard reagens (mješavina glacijalne sirćetne kiseline, anhidrida sirćetne kiseline i koncentrovane sumporne kiseline u omjeru 1:5:1), standardni (1,8 g/l) rastvor holesterola.

Oprema: suve epruvete, suve pipete, FEK, kivete sa dužinom optičkog puta od 5 mm, termostat.

NAPREDAK. Sve epruvete, pipete, kivete moraju biti suve. S Liebermann-Burchardovim reagensom je potrebno raditi vrlo pažljivo. 2,1 ml Liebermann-Burchard reagensa se stavi u suhu epruvetu, 0,1 ml nehemolizovanog krvnog seruma se dodaje vrlo polako duž zida epruvete, epruveta se snažno protrese, a zatim termostatuje 20 minuta na 37ºS. Razvija se smaragdno zelena boja, koja je kolorimetrijska na FEC-u sa filterom crvene svjetlosti (630-690 nm) u odnosu na Liebermann-Burchard reagens. Optička gustina dobijena na FEC-u se koristi za određivanje koncentracije holesterola prema kalibracionoj krivulji. Pronađena koncentracija holesterola se množi sa 1000, jer se u eksperimentu uzima 0,1 ml seruma. Faktor konverzije u SI jedinice (mmol/l) je 0,0258. Normalan sadržaj ukupnog holesterola (slobodnog i esterifikovanog) u krvnom serumu je 2,97-8,79 mmol/l (115-340 mg%).

Konstrukcija kalibracionog grafikona. Od standardnog rastvora holesterola, gde 1 ml sadrži 1,8 mg holesterola, uzeti 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 ml i podešen na zapreminu od 2,2 ml sa Liebermann-Burchard reagensom (2,15; 2,1; 2,05; 2,0; 1,95 ml). Količina holesterola u uzorku je 0,09; 0,18; 0,27; 0,36; 0,45 mg. Dobijeni standardni rastvori holesterola, kao i eksperimentalne epruvete, snažno se protresu i stave u termostat na 20 minuta, nakon čega se fotometriraju. Grafikon kalibracije se gradi prema vrijednostima ekstinkcije dobijenim kao rezultat fotometrije standardnih otopina.

Klinička i dijagnostička vrijednost. Kršenjem metabolizma masti, holesterol se može akumulirati u krvi. Povećanje holesterola u krvi (hiperholesterolemija) se opaža kod ateroskleroze, dijabetes melitusa, opstruktivne žutice, nefritisa, nefroze (posebno lipoidne nefroze) i hipotireoze. Smanjenje holesterola u krvi (hipoholesterolemija) se opaža kod anemije, gladovanja, tuberkuloze, hipertireoze, kaheksije raka, parenhimske žutice, oštećenja CNS-a, febrilnih stanja, uz uvođenje

Pirogrožđana kiselina u krvi

Klinički i dijagnostički značaj studije

Norma: 0,05-0,10 mmol / l u krvnom serumu odraslih.

PVC sadržaj povećava kod hipoksičnih stanja uzrokovanih teškom kardiovaskularnom, plućnom, kardiorespiratornom insuficijencijom, anemijom, malignim novotvorinama, akutnim hepatitisom i drugim oboljenjima jetre (najizraženije u terminalnim stadijumima ciroze jetre), toksikozama, insulin-zavisnim dijabetesom melitusom, dijabetičkom ketoacidozom, respiratornom alkacidozom uremija, hepatocerebralna distrofija, hiperfunkcija hipofizno-nadbubrežnog i simpatičko-nadbubrežnog sistema, kao i unošenje kamfora, strihnina, adrenalina i pri teškim fizičkim naporima, tetanija, konvulzije (kod epilepsije).

Klinički i dijagnostički značaj određivanja sadržaja mliječne kiseline u krvi

Mliječna kiselina(MK) je krajnji proizvod glikolize i glikogenolize. Značajna količina se formira u mišiće. Iz mišićnog tkiva MK sa protokom krvi ulazi u jetru, gdje se koristi za sintezu glikogena. Istovremeno, dio mliječne kiseline iz krvi apsorbira srčani mišić, koji je koristi kao energetski materijal.

Nivo UA u krvi povećava sa hipoksičnim stanjima, akutnim gnojnim inflamatornim oštećenjem tkiva, akutnim hepatitisom, cirozom jetre, zatajenjem bubrega, malignim neoplazmama, dijabetesom melitusom (oko 50% pacijenata), blagom uremijom, infekcijama (posebno pijelonefritisom), akutnim teškim septičkim endokarditisom, bolesti krvnih sudova, leukemija, intenzivno i dugotrajno naprezanje mišića, epilepsija, tetanija, tetanus, konvulzivna stanja, hiperventilacija, trudnoća (u trećem trimestru).

Lipidi su hemijski različite supstance koje imaju niz zajedničkih fizičkih, fizičko-hemijskih i bioloških svojstava. Οʜᴎ karakterizira sposobnost rastvaranja u eteru, kloroformu, drugim masnim otapalima i samo neznatno (i ne uvijek) u vodi, a također čine glavnu strukturnu komponentu živih stanica zajedno s proteinima i ugljikohidratima. Urođena svojstva lipida određena su karakterističnim karakteristikama strukture njihovih molekula.

Uloga lipida u organizmu je veoma raznolika. Neki od njih služe kao oblik depozicije (triacilglicerola, TG) i transporta (slobodne masne kiseline - FFA) supstanci čijim se raspadom oslobađa velika količina energije, drugi su najvažnije strukturne komponente ćelijskih membrana (slobodni holesterol i fosfolipidi). Lipidi učestvuju u procesima termoregulacije, zaštiti vitalnih organa (npr. bubrega) od mehaničkih uticaja (povreda), gubitka proteina, u stvaranju elastičnosti kože, štiteći je od prekomernog uklanjanja vlage.

Neki od lipida su biološki aktivne supstance koje imaju svojstva modulatora hormonskog uticaja (prostaglandini) i vitamina (polinezasićene masne kiseline). Štaviše, lipidi podstiču apsorpciju vitamina rastvorljivih u mastima A, D, E, K; djeluju kao antioksidansi (vitamini A, E), u velikoj mjeri regulišući proces oksidacije slobodnih radikala fiziološki važnih spojeva; određuju propusnost ćelijskih membrana u odnosu na jone i organska jedinjenja.

Lipidi služe kao prekursori za niz steroida sa izraženim biološkim dejstvom - žučne kiseline, vitamine grupe D, polne hormone, hormone kore nadbubrežne žlijezde.

Koncept "ukupnih lipida" plazme uključuje neutralne masti (triacilglicerole), njihove fosforilirane derivate (fosfolipide), slobodni i esterski vezan holesterol, glikolipide, neesterifikovane (slobodne) masne kiseline.

Klinička i dijagnostička vrijednost određivanje nivoa ukupnih lipida u plazmi (serumu) krvi

Norma je 4,0-8,0 g / l.

Hiperlipidemija (hiperlipemija) - povećanje koncentracije ukupnih lipida u plazmi kao fiziološki fenomen može se uočiti 1,5 sata nakon obroka. Alimentarna hiperlipemija je izraženija, što je niži nivo lipida u krvi bolesnika na prazan želudac.

Koncentracija lipida u krvi se mijenja u nizu patoloških stanja. Dakle, kod pacijenata sa dijabetesom, uz hiperglikemiju, postoji i izražena hiperlipemija (često do 10,0-20,0 g/l). Kod nefrotskog sindroma, posebno lipoidne nefroze, sadržaj lipida u krvi može doseći čak i veće brojke - 10,0-50,0 g / l.

Hiperlipemija je stalna pojava kod pacijenata sa bilijarnom cirozom jetre i kod pacijenata sa akutnim hepatitisom (posebno u ikteričnom periodu). Povišeni lipidi u krvi obično se nalaze kod osoba koje boluju od akutnog ili kroničnog nefritisa, posebno ako je bolest praćena edemom (zbog nakupljanja LDL i VLDL u plazmi).

Patofiziološki mehanizmi koji uzrokuju pomake u sadržaju svih frakcija ukupnih lipida određuju, u većoj ili manjoj mjeri, izraženu promjenu koncentracije njegovih sastavnih subfrakcija: kolesterola, ukupnih fosfolipida i triacilglicerola.

Klinički i dijagnostički značaj proučavanja holesterola (CS) u serumu (plazmi) krvi

Proučavanje nivoa holesterola u serumu (plazmi) krvi ne daje tačne dijagnostičke informacije o određenoj bolesti, već samo odražava patologiju metabolizma lipida u organizmu.

Prema epidemiološkim studijama, gornji nivo holesterola u krvnoj plazmi praktično zdravih ljudi starosti 20-29 godina iznosi 5,17 mmol/l.

U krvnoj plazmi holesterol se nalazi uglavnom u sastavu LDL i VLDL, pri čemu je 60-70% u obliku estera (vezani holesterol), a 30-40% u obliku slobodnog, neesterifikovanog holesterola. Vezani i slobodni holesterol čine količinu ukupnog holesterola.

Visok rizik od razvoja koronarne ateroskleroze kod ljudi starosti 30-39 i starijih od 40 godina javlja se kod nivoa holesterola koji prelazi 5,20 odnosno 5,70 mmol/l.

Hiperholesterolemija je najdokazaniji faktor rizika za koronarnu aterosklerozu. To je potvrđeno brojnim epidemiološkim i kliničkim studijama koje su utvrdile vezu između hiperholesterolemije i koronarne ateroskleroze, incidencije koronarne arterijske bolesti i infarkta miokarda.

Najviši nivo holesterola uočen je kod genetskih poremećaja u metabolizmu LP: porodična homo-heterozigotna hiperholesterolemija, porodična kombinovana hiperlipidemija, poligena hiperholesterolemija.

U nizu patoloških stanja razvija se sekundarna hiperholesterolemija. . Uočava se kod oboljenja jetre, oštećenja bubrega, malignih tumora pankreasa i prostate, gihta, koronarne bolesti, akutnog infarkta miokarda, hipertenzije, endokrinih poremećaja, hroničnog alkoholizma, glikogenoze I tipa, gojaznosti (u 50-80% slučajeva) .

Smanjenje nivoa holesterola u plazmi primećuje se kod pacijenata sa pothranjenošću, oštećenjem centralnog nervnog sistema, mentalnom retardacijom, hroničnom insuficijencijom kardiovaskularnog sistema, kaheksijom, hipertireozom, akutnim infektivnim bolestima, akutnim pankreatitisom, akutnim gnojno-upalnim procesima u mekim tkivima. , febrilna stanja, plućna tuberkuloza, pneumonija, respiratorna sarkoidoza, bronhitis, anemija, hemolitička žutica, akutni hepatitis, maligni tumori jetre, reumatizam.

Određivanje frakcionog sastava holesterola u krvnoj plazmi i njegovih pojedinačnih lipoproteina (prvenstveno HDL) postalo je od velikog dijagnostičkog značaja za procenu funkcionalnog stanja jetre. Prema savremenom mišljenju, esterifikacija slobodnog holesterola u HDL-u se vrši u krvnoj plazmi zahvaljujući enzimu lecitin-holesterol-aciltransferaza, koji se formira u jetri (ovo je enzim jetre specifičan za organ). ovaj enzim je jedna od osnovnih komponenti HDL - apo - Al, koji se konstantno sintetiše u jetri.

Albumin, koji takođe proizvode hepatociti, služi kao nespecifični aktivator sistema esterifikacije holesterola u plazmi. Ovaj proces prvenstveno odražava funkcionalno stanje jetre. Ako je normalni koeficijent esterifikacije holesterola (ᴛ.ᴇ. odnos sadržaja estersko vezanog holesterola prema ukupnom) 0,6-0,8 (ili 60-80%), onda kod akutnog hepatitisa, egzacerbacije hroničnog hepatitisa, ciroze jetre, opstruktivne žutice, kao i hroničnog alkoholizma, smanjuje se. Oštar pad težine procesa esterifikacije holesterola ukazuje na nedostatak funkcije jetre.

Klinički i dijagnostički značaj proučavanja koncentracije ukupnih fosfolipida u krvnom serumu.

Fosfolipidi (PL) su grupa lipida koja sadrži, pored fosforne kiseline (kao esencijalne komponente), alkohol (obično glicerol), ostatke masnih kiselina i azotne baze. S obzirom na ovisnost o prirodi alkohola, PL se dijeli na fosfogliceride, fosfosfingozine i fosfoinozitide.

Nivo ukupnog PL (lipidnog fosfora) u krvnom serumu (plazmi) je povećan kod pacijenata sa primarnom i sekundarnom hiperlipoproteinemijom tipova IIa i IIb. Ovo povećanje je najizraženije kod glikogenoze tipa I, holestaze, opstruktivne žutice, alkoholne i bilijarne ciroze, virusnog hepatitisa (blage), bubrežne kome, posthemoragijske anemije, hroničnog pankreatitisa, teškog dijabetes melitusa, nefrotskog sindroma.

Za dijagnozu brojnih bolesti informativnije je proučavati frakcijski sastav fosfolipida krvnog seruma. U tu svrhu posljednjih godina se široko koriste metode tankoslojne lipidne hromatografije.

Sastav i svojstva lipoproteina krvne plazme

Gotovo svi lipidi u plazmi povezani su s proteinima, što im daje dobru topljivost u vodi. Ovi lipid-proteinski kompleksi se obično nazivaju lipoproteinima.

Prema savremenom konceptu, lipoproteini su visokomolekularne čestice rastvorljive u vodi, koje su kompleksi proteina (apoproteina) i lipida formiranih slabim, nekovalentnim vezama, u kojima se nalaze polarni lipidi (PL, CXC) i proteini (“apo” ) čine površinski hidrofilni monomolekularni sloj koji okružuje i štiti unutrašnju fazu (sastoji se uglavnom od ECS, TG) od vode.

Drugim riječima, LP su osebujne globule, unutar kojih se nalazi kapljica masti, jezgro (formirano uglavnom od nepolarnih jedinjenja, uglavnom triacilglicerola i estera holesterola), ograničeno od vode površinskim slojem proteina, fosfolipida i slobodnog holesterola. .

Fizičke karakteristike lipoproteina (njihova veličina, molekulska masa, gustina), kao i manifestacije fizičko-hemijskih, hemijskih i bioloških svojstava, u velikoj meri zavise, s jedne strane, od odnosa proteinske i lipidne komponente ovih čestica, od s druge strane, o sastavu proteinskih i lipidnih komponenti, ᴛ.ᴇ. njihovu prirodu.

Najveće čestice, koje se sastoje od 98% lipida i vrlo malog (oko 2%) udjela proteina, su hilomikroni (XM). Οʜᴎ se formiraju u ćelijama sluzokože tankog crijeva i predstavljaju transportni oblik za neutralne dijetetske masti, ᴛ.ᴇ. egzogeni TG.

Tabela 7.3 Sastav i neka svojstva lipoproteina u krvnom serumu (Komarov F.I., Korovkin B.F., 2000)

Kriterijumi za procjenu pojedinačnih klasa lipoproteina	HDL (alfa-LP)	LDL (beta-LP)	VLDL (pre-beta-LP)	HM
Gustina, kg/l	1,063-1,21	1,01-1,063	1,01-0,93	0,93
Molekulska težina LP, kD	180-380		3000- 128 000	-
Veličina čestica, nm	7,0-13,0	15,0-28,0	30,0-70,0	500,0 - 800,0
Ukupni proteini, %	50-57	21-22	5-12
Ukupni lipidi, %	43-50	78-79	88-95
Slobodni holesterol, %	2-3	8-10	3-5
Esterifikovani holesterol, %	19-20	36-37	10-13	4-5
Fosfolipidi, %	22-24	20-22	13-20	4-7
Triacilgliceroli, %
4-8	11-12	50-60	84-87

Ako se egzogeni TG prenose u krv hilomikronima, tada se formira transportni oblik endogeni TG su VLDL. Njihovo stvaranje je zaštitna reakcija tijela, usmjerena na sprječavanje masne infiltracije, a potom i distrofije jetre.

Dimenzije VLDL su u prosjeku 10 puta manje od veličine CM (pojedinačne čestice VLDL su 30-40 puta manje od CM čestica). Sadrže 90% lipida, među kojima više od polovine sadržaja čini TG. 10% ukupnog holesterola u plazmi prenosi VLDL. Zbog sadržaja velike količine TG VLDL, detektuje se neznatna gustoća (manja od 1,0). Odlučio to LDL i VLDL sadrže 2/3 (60%) svih holesterol plazma, dok 1/3 otpada na HDL.

HDL- najgušći lipid-proteinski kompleksi, jer sadržaj proteina u njima iznosi oko 50% mase čestica. Njihova lipidna komponenta sastoji se pola od fosfolipida, pola od holesterola, uglavnom vezanih za ester. HDL se takođe konstantno formira u jetri i delimično u crevima, kao iu krvnoj plazmi kao rezultat „razgradnje“ VLDL.

Ako LDL i VLDL dostaviti holesterola iz jetre u druga tkiva(periferni), uključujući vaskularni zid, onda HDL prenosi holesterol iz ćelijskih membrana (prvenstveno vaskularnog zida) do jetre. U jetri ide na stvaranje žučnih kiselina. U skladu sa takvim učešćem u metabolizmu holesterola, VLDL i sebe LDL su pozvani aterogena, a HDL– antiaterogenih lijekova. Pod aterogenošću je uobičajeno da se razume sposobnost lipid-proteinskih kompleksa da doprinesu (prenose) slobodni holesterol sadržan u LP u tkiva.

HDL se nadmeće za receptore ćelijske membrane sa LDL, čime se suprotstavlja iskorišćavanju aterogenih lipoproteina. Budući da površinski monosloj HDL sadrži veliku količinu fosfolipida, stvaraju se povoljni uslovi na mjestu kontakta čestice sa vanjskom membranom endotela, glatkih mišića i bilo koje druge ćelije za prijenos viška slobodnog kolesterola u HDL.

U isto vrijeme, ovaj posljednji se zadržava u površinskom monosloju HDL-a vrlo kratko, budući da se podvrgava esterifikaciji uz učešće enzima LCAT. Formirani ECS, kao nepolarna supstanca, prelazi u unutrašnju lipidnu fazu, oslobađajući slobodna mjesta za ponavljanje čina hvatanja novog CXC molekula sa ćelijske membrane. Odavde: što je veća aktivnost LCAT, to je efikasniji antiaterogeni efekat HDL-a, koji se smatraju LCAT aktivatorima.

Ako je poremećena ravnoteža između procesa priliva lipida (holesterola) u vaskularni zid i njihovog odliva iz njega, stvaraju se uslovi za nastanak lipoidoze čija je najpoznatija manifestacija ateroskleroza.

U skladu sa ABC nomenklaturom lipoproteina, razlikuju se primarni i sekundarni lipoproteini. Primarne LP formiraju bilo koji apoprotein po hemijskoj prirodi. Oni su konvencionalno klasifikovani kao LDL, koji sadrže oko 95% apoproteina-B. Sve ostalo su sekundarni lipoproteini, koji su povezani kompleksi apoproteina.

Normalno, oko 70% holesterola u plazmi je u sastavu "aterogenih" LDL i VLDL, dok oko 30% cirkuliše u sastavu "antiaterogenih" HDL. Ovim omjerom u vaskularnom zidu (i drugim tkivima) održava se ravnoteža stopa dotoka i odljeva kolesterola. Ovo određuje numeričku vrijednost koeficijent holesterola aterogenost, što uz naznačenu lipoproteinsku distribuciju ukupnog holesterola 2,33 (70/30).

Prema rezultatima masovnih, epidemioloških posmatranja, pri koncentraciji ukupnog holesterola u plazmi od 5,2 mmol/l održava se nulta ravnoteža holesterola u vaskularnom zidu. Povećanje nivoa ukupnog holesterola u krvnoj plazmi za više od 5,2 mmol/l dovodi do njegovog postepenog taloženja u žilama, a pri koncentraciji od 4,16-4,68 mmol/l dolazi do negativnog bilansa holesterola u vaskularnom zidu. posmatrano. Nivo ukupnog holesterola u plazmi (serumu) iznad 5,2 mmol/l smatra se patološkim.

Tabela 7.4 Skala za procjenu vjerovatnoće razvoja koronarne arterijske bolesti i drugih manifestacija ateroskleroze

(Komarov F.I., Korovkin B.F., 2000.)

Pirogrožđana kiselina u krvi

Klinički i dijagnostički značaj studije

Norma: 0,05-0,10 mmol / l u krvnom serumu odraslih.

Klinička i dijagnostička vrijednost određivanja sadržaja mliječne kiseline u krvi

Mliječna kiselina(MK) je krajnji proizvod glikolize i glikogenolize. Značajna količina se formira u mišiće. Iz mišićnog tkiva MK sa protokom krvi ulazi u jetru, gdje se koristi za sintezu glikogena. Osim toga, dio mliječne kiseline iz krvi apsorbira srčani mišić, koji je koristi kao energetski materijal.

Lipidi su hemijski različite supstance koje imaju niz zajedničkih fizičkih, fizičko-hemijskih i bioloških svojstava. Karakterizira ih sposobnost rastvaranja u eteru, hloroformu, drugim masnim otapalima i samo neznatno (i ne uvijek) u vodi, a također čine glavnu strukturnu komponentu živih stanica zajedno s proteinima i ugljikohidratima. Urođena svojstva lipida određena su karakterističnim karakteristikama strukture njihovih molekula.

Uloga lipida u organizmu je veoma raznolika. Neki od njih služe kao oblik depozicije (triacilglicerola, TG) i transporta (slobodne masne kiseline - FFA) supstanci čijim se raspadom oslobađa velika količina energije, drugi su najvažnije strukturne komponente ćelijskih membrana (slobodni holesterol i fosfolipidi). Lipidi su uključeni u procese termoregulacije, zaštite vitalnih organa (npr. bubrega) od mehaničkih utjecaja (povreda), gubitka proteina, u stvaranju elastičnosti kože, štiteći je od prekomjernog uklanjanja vlage.

Lipidi služe kao prekursori za niz steroida sa izraženim biološkim dejstvom - žučne kiseline, vitamine grupe D, polne hormone, hormone kore nadbubrežne žlijezde.

Klinički i dijagnostički značaj određivanja nivoa ukupnih lipida u krvnoj plazmi (serumu)

Norma je 4,0-8,0 g / l.

Klinički i dijagnostički značaj proučavanja holesterola (CS) u serumu (plazmi) krvi

Proučavanje nivoa holesterola u serumu (plazmi) krvi ne daje tačne dijagnostičke informacije o određenoj bolesti, već samo odražava patologiju metabolizma lipida u organizmu.

Prema epidemiološkim studijama, gornji nivo holesterola u krvnoj plazmi praktično zdravih ljudi starosti 20-29 godina iznosi 5,17 mmol/l.

Visok rizik od razvoja koronarne ateroskleroze kod ljudi starosti 30-39 i starijih od 40 godina javlja se kod nivoa holesterola koji prelazi 5,20 odnosno 5,70 mmol/l.

Od velikog dijagnostičkog značaja je određivanje frakcionog sastava holesterola u krvnoj plazmi i njegovih pojedinačnih lipoproteina (prvenstveno HDL) za procenu funkcionalnog stanja jetre. Prema savremenom mišljenju, esterifikacija slobodnog holesterola u HDL-u se vrši u krvnoj plazmi zahvaljujući enzimu lecitin-holesterol-aciltransferaza, koji se formira u jetri (ovo je enzim jetre specifičan za organ). ovaj enzim je jedna od glavnih komponenti HDL - apo - Al, koji se stalno sintetiše u jetri.

Albumin, koji takođe proizvode hepatociti, služi kao nespecifični aktivator sistema esterifikacije holesterola u plazmi. Ovaj proces prvenstveno odražava funkcionalno stanje jetre. Ako je normalno koeficijent esterifikacije holesterola (tj. odnos sadržaja holesterola vezanog za eter prema ukupnom) 0,6-0,8 (ili 60-80%), onda kod akutnog hepatitisa, egzacerbacije hroničnog hepatitisa, ciroze jetre, opstruktivnog žutica, kao i hronični alkoholizam, smanjuje se. Oštar pad težine procesa esterifikacije holesterola ukazuje na nedostatak funkcije jetre.

Klinički i dijagnostički značaj proučavanja koncentracije ukupnih fosfolipida u krvnom serumu.

Fosfolipidi (PL) su grupa lipida koja sadrži, pored fosforne kiseline (kao esencijalne komponente), alkohol (obično glicerol), ostatke masnih kiselina i azotne baze. Ovisno o prirodi alkohola, PL se dijeli na fosfogliceride, fosfosfingozine i fosfoinozitide.

Nivo ukupnog PL (lipidnog fosfora) u krvnom serumu (plazmi) je povećan kod pacijenata sa primarnom i sekundarnom hiperlipoproteinemijom tipova IIa i IIb. Ovo povećanje je najizraženije kod glikogenoze tipa I, holestaze, opstruktivne žutice, alkoholne i bilijarne ciroze, virusnog hepatitisa (blagog tijeka), bubrežne kome, posthemoragijske anemije, hroničnog pankreatitisa, teškog dijabetes melitusa, nefrotskog sindroma.

Za dijagnozu brojnih bolesti informativnije je proučavati frakcijski sastav fosfolipida krvnog seruma. U tu svrhu posljednjih godina se široko koriste metode tankoslojne lipidne hromatografije.

Sastav i svojstva lipoproteina krvne plazme

Gotovo svi lipidi u plazmi povezani su s proteinima, što im daje dobru topljivost u vodi. Ovi lipid-proteinski kompleksi se obično nazivaju lipoproteinima.

Fizičke karakteristike lipoproteina (njihova veličina, molekulska masa, gustina), kao i manifestacije fizičko-hemijskih, hemijskih i bioloških svojstava, u velikoj meri zavise, s jedne strane, od odnosa proteinske i lipidne komponente ovih čestica, od s druge strane, na sastav proteinskih i lipidnih komponenti, tj. njihovu prirodu.

Najveće čestice, koje se sastoje od 98% lipida i vrlo malog (oko 2%) udjela proteina, su hilomikroni (XM). Nastaju u ćelijama sluzokože tankog crijeva i predstavljaju transportni oblik za neutralne dijetetske masti, tj. egzogeni TG.

Tabela 7.3 Sastav i neka svojstva lipoproteina u krvnom serumu (Komarov F.I., Korovkin B.F., 2000)

Kriterijumi za procjenu pojedinačnih klasa lipoproteina	HDL (alfa-LP)	LDL (beta-LP)	VLDL (pre-beta-LP)	HM
Gustina, kg/l	1,063-1,21	1,01-1,063	1,01-0,93	0,93
Molekulska težina LP, kD	180-380		3000- 128 000	-
Veličina čestica, nm	7,0-13,0	15,0-28,0	30,0-70,0	500,0 - 800,0
Ukupni proteini, %	50-57	21-22	5-12
Ukupni lipidi, %	43-50	78-79	88-95
Slobodni holesterol, %	2-3	8-10	3-5
Esterifikovani holesterol, %	19-20	36-37	10-13	4-5
Fosfolipidi, %	22-24	20-22	13-20	4-7
Triacilgliceroli, %
4-8	11-12	50-60	84-87

Ako a LDL i VLDL dostaviti holesterola iz jetre u druga tkiva(periferni), uključujući vaskularni zid, onda HDL prenosi holesterol iz ćelijskih membrana (prvenstveno vaskularnog zida) do jetre. U jetri ide na stvaranje žučnih kiselina. U skladu sa takvim učešćem u metabolizmu holesterola, VLDL i sebe LDL su pozvani aterogena, a HDL– antiaterogenih lijekova. Aterogenost se odnosi na sposobnost lipid-proteinskih kompleksa da uvedu (prenose) slobodni holesterol sadržan u LP u tkiva.

Međutim, potonji se u površinskom monosloju HDL-a zadržava samo vrlo kratko, jer se podvrgava esterifikaciji uz učešće enzima LCAT. Formirani ECS, kao nepolarna supstanca, prelazi u unutrašnju lipidnu fazu, oslobađajući slobodna mjesta za ponavljanje čina hvatanja novog CXC molekula sa ćelijske membrane. Odavde: što je veća aktivnost LCAT, to je efikasniji antiaterogeni efekat HDL-a, koji se smatraju LCAT aktivatorima.

Ako se poremeti ravnoteža između priliva lipida (holesterola) u vaskularni zid i njihovog odliva iz njega, mogu se stvoriti uslovi za nastanak lipoidoze čija je najpoznatija manifestacija ateroskleroza.

U skladu sa ABC nomenklaturom lipoproteina, razlikuju se primarni i sekundarni lipoproteini. Primarne LP formiraju bilo koji apoprotein po hemijskoj prirodi. Oni se uslovno mogu klasifikovati kao LDL, koji sadrže oko 95% apoproteina-B. Sve ostalo su sekundarni lipoproteini, koji su povezani kompleksi apoproteina.

Tabela 7.4 Skala za procjenu vjerovatnoće razvoja koronarne arterijske bolesti i drugih manifestacija ateroskleroze

(Komarov F.I., Korovkin B.F., 2000.)