Pravila za uzimanje, isporuku, prijem, obradu i registraciju biološkog materijala. Opće kliničke laboratorijske studije - Dokument. Uslovi za organizaciju prostorija za PCR laboratoriju Tehnika uzorkovanja materijala za PCR ispitivanje

struja

MU 4.2.2039-05

METODOLOŠKA UPUTSTVA

4.2. METODE KONTROLE. BIOLOŠKI I MIKROBIOLOŠKI FAKTORI

Tehnika prikupljanja i transporta biomaterijala u mikrobiološke
laboratorije

Datum uvođenja 2006-07-01

2. PREPORUČENO ZA ODOBRENJE od strane Komisije za državno sanitarno-higijensko normiranje pri Federalnoj službi za nadzor zaštite prava potrošača i dobrobiti ljudi od 6. oktobra 2005. godine (Zapisnik br. 3).

3. ODOBRIO JE I PREDSTAVIO šef Federalne službe za nadzor zaštite prava potrošača i dobrobiti ljudi, glavni državni sanitarni doktor Ruske Federacije G.G. Oniščenko 23. decembra 2005.

5. PREDSTAVLJENO PRVI PUT.

1 područje upotrebe

1.1. Smjernicama su utvrđena pravila prikupljanja i transporta biološkog materijala u mikrobiološke laboratorije u cilju poboljšanja kvaliteta rezultata laboratorijskih istraživanja i organizovanja protuepidemijskih i preventivnih mjera, kao i prevencije bolničkih infekcija medicinskog osoblja i pacijenata.

1.2. Smjernice su namijenjene za korištenje organima i organizacijama Federalne službe za nadzor zaštite prava potrošača i dobrobiti ljudi, a mogu ih koristiti i zdravstveni organi i organizacije.

2. Opće odredbe

2.1. Dobijanje pouzdanih podataka o identifikaciji izvora infekcije neophodno je za pravovremenu i efikasnu organizaciju protivepidemijskih i preventivnih mera, procenu nivoa osetljivosti stanovništva tokom epidemiološkog nadzora.

2.2. Razvijena tehnika prikupljanja i transporta biološkog materijala u mikrobiološke laboratorije omogućit će smanjenje nivoa preanalitičke greške i poboljšanje kvaliteta rada laboratorija u objektivizaciji rezultata.

2.4. Smjernice se mogu koristiti prilikom provođenja epidemiološkog nadzora antimikrobne rezistencije uzročnika izolovanih i laboratorijski identificiranih, optimizacije primjene antimikrobnih lijekova i mjera u oblasti prevencije, kontrole i suzbijanja rezistencije na lokalnom, regionalnom i nacionalnom nivou.

3. Opšti zahtjevi za prikupljanje uzoraka biološkog materijala za mikrobiološka istraživanja

3.1. Da bi se spriječila infekcija medicinskog osoblja i pacijenata prilikom prikupljanja uzoraka biomaterijala i njegove dostave u laboratoriju, potrebno je:

ne kontaminiraju vanjsku površinu posuđa tokom prikupljanja i dostave uzoraka;

ne prljaju prateću dokumentaciju (uputnice);

minimizirati direktan kontakt uzorka biomaterijala s rukama medicinskog radnika koji ga prikuplja i dostavlja u laboratoriju;

koristiti sterilne jednokratne ili propisno odobrene kontejnere (kontejnere) za prikupljanje, skladištenje i dostavu uzoraka u ove svrhe;

transport uzoraka u nosačima ili naslagama s odvojenim gnijezdima;

pridržavati se aseptičnih uslova kako bi se spriječila infekcija pacijenta u procesu izvođenja invazivnih mjera;

prikupljati uzorke u sterilnom posuđu za jednokratnu upotrebu ili staklenom posuđu (nije kontaminirano biomaterijalom, nije oštećeno pukotinama, usitnjenim rubovima i drugim nedostacima)

3.2. Uzorke biomaterijala treba sakupljati na sljedeći način:

prije početka antibiotske terapije, u nedostatku takve mogućnosti - neposredno prije ponovnog uvođenja (prijema) lijekova;

u količini (težini, zapremini) potrebnoj za obavljanje analize, jer nedovoljna količina biomaterijala za istraživanje dovodi do lažnih rezultata;

uz minimalnu kontaminaciju materijala normalnom mikroflorom, tk. njegova prisutnost dovodi do pogrešne interpretacije rezultata dobivenih, na primjer, pri proučavanju sputuma, uzoraka iz nosa, ždrijela (ždrijela), genitalija itd.

3.3. Prilikom prikupljanja uzorka, pazite da se prilikom otvaranja posude s biomaterijalom u laboratoriju ne formira aerosol: uzorci krvi i drugih tjelesnih tekućina pažljivo se prebacuju iz šprica bez pjene u suhi i/ili napunjeni medijumom ( antikoagulans) posuđe.

3.4. U smjeru studije navesti: prezime, ime, patronim pacijenta; godina rođenja; filijala u kojoj se nalazi; broj anamneze (ambulantne kartice); dijagnoza; materijal koji se šalje za istraživačke i istraživačke zadatke; datum i vrijeme preuzimanja materijala (sati); antibakterijski (imuni) lijekovi, ako se uzorak daje na pozadini antibiotske i/ili imunoterapije; prezime, ime, patronimiju ljekara (konsultanta) koji šalje uzorak na pregled. Prilikom slanja biomaterijala dobijenog na obdukciji, naznačuje se i odjel na kojem je pacijent preminuo.

3.5. Prije uzimanja uzorka, posebno kada se koriste invazivne metode, utvrđuje se vjerovatnoća rizika za pacijenta i koristi, kao i značaj ove vrste biomaterijala za potrebe objektivizacije kliničke dijagnoze i evaluacije tekućih ili planiranih terapijskih mjera. u obzir.

4. Opšti zahtjevi za dostavu uzoraka biomaterijala u mikrobiološku laboratoriju

4.1. Svi prikupljeni uzorci se odmah po prijemu šalju u mikrobiološku laboratoriju, osim u slučajevima kada se koriste kontejneri sa transportnim medijima koji su odobreni za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji u skladu sa utvrđenom procedurom.

Ovo je neophodno za:

održavanje vitalnosti patogena i mogućnost izolacije mikroorganizama koji zahtijevaju posebne uslove uzgoja (Haemophylus i drugi);

spriječiti prekomjerni rast brzo rastućih i aktivnih mikroorganizama;

održavanje omjera početnih koncentracija izolata u prisustvu mikrobnih asocijacija u uzorku;

smanjenje vremena kontakta uzorka s nekim lokalnim antisepticima, koji mogu imati antibakterijsko djelovanje;

objektivizacija kliničke dijagnoze infektivno-upalne bolesti i evaluacija rezultata terapije.

4.2. Dozvoljeno je korištenje alternativnih metoda za povećanje vremena dostave biomaterijala u laboratoriju.

Uzorke treba čuvati u frižideru na 2-8°C, osim kako je navedeno u nastavku.

4.2.1. Kada se uzorak čuva u specijalizovanom transportnom kontejneru (transportnom sistemu) odobrenom za upotrebu u skladu sa utvrđenom procedurom, a to je sterilna epruveta za jednokratnu upotrebu sa agarom ili tečnim transportnim medijumom i sondom za bris ugrađena u čep i sterilno upakovana sa tube. Uzorci se čuvaju u takvim posudama na sobnoj temperaturi (18-20 °C). Transportni mediji, specijalni gusti sa i bez aktivnog uglja, omogućavaju održavanje vitalnosti mikroorganizama koji zahtijevaju posebne uslove uzgoja 48-72 sata.

Za uzorke za anaerobe i za fekalnu floru koriste se specijalne posude sa transportnim medijumom, epruvete sa podlogama za izolaciju Campylobacter i Helicobacter, odobrene za upotrebu na propisan način. Takva okruženja stvaraju anabiotičku atmosferu za mikroorganizme, što pomaže da se smanji njihov metabolizam, inhibira rast i spriječi njihovo isušivanje i nakupljanje otpadnih proizvoda.

Svaki uzorak sakupljen u tečnom mediju temeljno se pomeša sa medijumom.

4.2.2. Kada se krv uzgaja u bujonu, onda se nakon prijema uzorak čuva u termostatu na temperaturi od 35-37 °C.

Ako se uzorci sakupljaju u posebne posude za naknadno proučavanje sa dvofaznim medijumom, treba ih čuvati na sobnoj temperaturi (18-20°C).

4.2.3. Kada mogu biti prisutni mikroorganizmi ovisni o temperaturi (Neisseria sp.), uzorci se ostavljaju na sobnoj temperaturi (18-20 °C).

4.3. Za transport uzoraka ispitanih na prisustvo aerobnih i fakultativnih anaeroba koristite:

sterilne suhe epruvete za jednokratnu upotrebu sa ugrađenom sondom za bris (krtole) ili kontejneri sa transportnim medijumom odobrenim za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način; dozvoljena je upotreba sterilnih staklenih epruveta zapečaćenih gasopropusnim čepom sa ugrađenom bris sondom pripremljenom u laboratoriji;

sterilne posude za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj (dozvoljeno je staklo sa gasopropusnim čepom) - za prikupljanje uzoraka urina, sputuma, fecesa, bronho-alveolarnog ispiranja, biopsijskog (komadića tkiva) materijala;

sterilne za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili staklene epruvete - za sakupljanje sterilne tečnosti, bronho-alveolarno ispiranje, odvojeno od drenaža ili struganja;

sterilne Petrijeve posude - za sakupljanje uzoraka kose ili za transport struganja sa oznakama na dnu posude;

specijalne sterilne sonde za nazofaringealni i urogenitalni bris sa aluminijumskom osovinom (prečnik ose - 0,9 mm) i malim štapićem od pamuka ili viskoze na vrhu (prečnik tampona - 2,5 mm) postavljenim u čep koji zatvara sterilnu jednokratnu staklenu epruvetu - za uzorke iz nazofarinksa za B. pertusis i iz uretre kod muškaraca.

4.4. Za transport uzoraka ispitanih na prisustvo anaeroba koriste se kontejneri sa posebnim transportnim medijima i epruvete sa tioglikolnim medijumom; epruvete sa podlogom za izolaciju Campylobacter i Helicobacter, odobrene za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način. Uzorak sakupljen u tečnom mediju se temeljno pomiješa s njim. Za dobijanje uzoraka preporučuju se sledeće metode:

iscjedak iz drenaza koji se koristi za aktivnu aspiraciju šupljina aspirira se sterilnom štrcaljkom sa čvrstim klipom u zapremini od 2-4 ml; sterilna igla se stavlja na napunjenu špricu, zatvara se sterilnim pamučnim štapićem, višak vazduha se uklanja iz šprica; pamučni štapić se ubacuje u dezinfekcijski rastvor; kraj igle se ubrizgava u sterilni gumeni čep i u tom obliku špric sa materijalom se isporučuje u laboratoriju;

sadržaj žarišta infekcije i šupljina, dobiven probijanjem, sakuplja se u zapremini od 2-4 ml pomoću špriceva od 2, 5, 10 ml sa čvrstim klipom; višak zraka se uklanja iz šprica pokrivanjem igle sterilnim pamučnim štapićem, koji se zatim baca u otopinu za dezinfekciju; igla se dezinfikuje brisanjem štapićem navlaženim u 70% etil alkoholu; za zatvaranje, kraj igle se ubrizgava u sterilni gumeni čep i u tom obliku špric sa materijalom se dostavlja u laboratorij.

Prilikom sakupljanja velike količine materijala (3 ml ili više), anaerobne bakterije mogu ostati vitalne 24 sata na sobnoj temperaturi (18-20 °C).

Ako je iscjedak samo nekoliko kapi, iz šprica se prebacuje u malu posudu ili u epruvetu sa transportnim medijumom odmah po prijemu (posuda sa transportnim medijumom se prima u laboratoriju dan ranije).

Komadi tkiva (biopsijski materijal) u slučaju sumnje na anaerobnu infekciju sakupljaju se u sterilne posude za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj (dozvoljeno - u staklenoj posudi sa brušenim poklopcem) i odmah dostavljaju u laboratorij.

4.5. Za transport uzoraka ispitanih na prisustvo virusa koriste se specijalne posude sa tečnim medijumom za očuvanje virusa.

5. Uzorci raznih vrsta biomaterijala i okoline koja okružuje pacijenta

Tabela 1

Stakleno posuđe koje se koristi za dostavu uzoraka u laboratorij


Izvor i vrsta kliničkog materijala	Proizvodi koji se koriste za isporuku uzoraka

	Specijalni transportni kontejneri sa medijumom, sa neutralizatorima antibiotika i reagensima koji uništavaju krvna zrnca, ili bez njih, odobreni za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način; dvofazni medij u bočicama
centralnog nervnog sistema
Liquor	Sterilne epruvete za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; sterilne staklene epruvete sa čepom od celuloze ili pamučne gaze
Materijal za apscese mozga i biopsijski materijal za upalne procese u centralnom nervnom sistemu	Špric sa iglom umetnutom u sterilni gumeni čep; epruveta sa medijumom tioglikola, zatvorena sterilnim gumenim čepom; transportni kontejneri sa podlogom za čuvanje anaerobnih materija
donji respiratorni trakt
Biopsijski materijal pluća i traheje; ispljuvak koji se prirodno iskašljava i izaziva; struganje iz bronhija	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj (za sakupljanje sputuma); laboratorijski pripremljena sterilna staklena posuda
Trahealni aspirat, bronho-alveolarno ispiranje, ispiranje bronha	Sterilni kontejner za sakupljanje sputuma za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; dobro zatvorenu sterilnu staklenu bočicu
Aspirati transtrahealno i plućno	Specijalni transportni kontejneri sa medijumom za anaerobe; špric sa iglom umetnutom u sterilni gumeni čep; posuda s tioglikolnom podlogom; sterilna plastična posuda za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; dobro zatvorenu bočicu
gornjih disajnih puteva
Brisevi iz nosa, ždrijela, nazofarinksa, vanjskog uha	Sterilna sonda za bris za jednokratnu upotrebu postavljena u sterilnu suhu epruvetu (tubeser) ili transportni kontejner sa odgovarajućim medijumom; transportna posuda za viruse; sterilno stakleno posuđe sastavljeno u laboratoriji
Ispiranje nosa, nazofagusni aspirat	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; transportni brod za viruse
Tečnost iz timpanocenteze, sinusni aspirat iz aspiracije iglom	Špric s iglom dezinficiran nakon manipulacije tamponom navlaženim 70% etil alkoholom i umetnut u sterilni gumeni čep; moguće je prebaciti materijal iz šprica u sterilnu jednokratnu ili staklenu epruvetu ili specijalnu posudu sa medijumom za transport anaeroba
Tkivo dobijeno tokom operacije nosa, ždrijela, uha	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; epruveta sa tioglikolom ili drugim transportnim medijem, dobro zatvorena sterilnim gumenim čepom; dobro zatvorena sterilna jednokratna plastična ili staklena bočica

Struganje sa konjunktive ugla oka	Razmazi na sterilnim staklenim predmetima bez masti; materijal koji se unosi u poseban transportni kontejner sa podlogom ili se inokulira u hranljivu podlogu
intraokularna tečnost	Razmazi na sterilnim staklenim predmetima bez masti; materijal koji se unosi u poseban transportni kontejner sa medijumom za anaerobe ili špric sa iglom prethodno dezinfikovanom sa 70% etanolom, zaboden u sterilni gumeni čep
Iscjedak uzet sterilnom staklenom šipkom ili sterilnim pamučnim štapićem sa sluzokože donjeg prelaznog nabora, s ruba očnih kapaka, s čirom - iz rožnice (nakon anestezije), s kutnim konjunktivitisom - iz uglova kapci	Sterilna jednokratna ili staklena epruveta sa šećernom juhom, u koju je ugrađena sonda za bris, ili sterilna staklena šipka koja se koristi za uzimanje uzorka; specijalni kontejner za transport sa medijumom za viruse
Tajna iz suzne vrećice	Jednokratna sterilna sonda za bris montirana u sterilnu suhu epruvetu (tubeser) ili u staklenu epruvetu
genitourinarnog sistema

Prosječna porcija slobodnog urina; iz ilealnog kanala koji se koristi za stvaranje umjetne bešike; kateter kod pacijenata na intenzivnoj njezi. Ispiranje iz bešike. Uzorak dobijen tokom bilateralne uretralne kateterizacije	Sterilni kontejner za sakupljanje urina za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili sterilna jednokratna epruveta sa poklopcem; ili specijalnu jednokratnu cijev za sakupljanje urina. Kada koristite sterilnu staklenu epruvetu sa čepom od celuloze ili pamučne gaze, pazite da čep ne natopite materijalom (volumen uzorka 10-20 ml)
Uzorak dobijen tokom suprapubične aspiracije	Sterilni špric bez igle, zatvoren sterilnim gumenim čepom; sterilna šprica sa iglom prethodno dezinfikovanom 70% etil alkoholom i zabodenom u gumeni čep
Materijal iz ženskih genitalnih organa
Tečnosti: amnionska, jajovodna, Bartholinova	Specijalni transportni kontejner sa medijumom za anaerobe; špric bez igle, zatvoren sterilnim gumenim čepom; špric sa iglom tretiran 70% alkohola i umetnut u sterilni gumeni čep (volumen uzorka 1-2 ml)
Uzorci iz cervikalnog kanala, uretre, vagine	Jednokratna sterilna sonda za bris montirana u sterilnu suhu epruvetu (gomolj) ili transportni kontejner sa posebnim medijumom; sonda za bris postavljena u čep od celuloze ili pamučne gaze sterilne staklene cijevi. Mikroskopsko stakalce sa pripremljenim brisom za ispitivanje bakterijskih polno prenosivih infekcija i virusa. Epruveta sa transportnim medijumom sa aktivnim ugljem za očuvanje gonokoka 48 sati ili više
Uzorci materijala iz endometrijuma	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili epruvetom, ili transportni kontejner sa anaerobnim medijumom; sterilno stakleno posuđe
Materijal vanjskih genitalija	Sterilni špric bez igle, zatvoren sterilnim gumenim čepom; predmetno staklo sa razmazom prekrivenim zaštitnim staklom za određivanje T. pallidum; sonda za bris montirana u sterilnu jednokratnu (tubeser) ili staklenu epruvetu; specijalna transportna cijev sa podlogom od aktivnog uglja za očuvanje gonokoka i transportnih kontejnera za viruse i klamidiju; brisevi na staklenim predmetima za otkrivanje drugih spolno prenosivih infekcija
Materijal iz muških reproduktivnih organa
brisevi iz uretre	Sonda-tampon na aluminijskoj osi (uretralna sonda-tampon), montirana u sterilne jednokratne (tubeser) ili staklene epruvete; posebna transportna cijev sa podlogom za aktivni ugalj za očuvanje gonokoka i transportnih sudova za viruse i klamidiju; brisevi na staklenim predmetima za otkrivanje drugih spolno prenosivih infekcija
ejakulat, sperma	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; sterilna epruveta ili epruveta, jednokratna ili staklena
Materijal epididimisa kod epididimitisa	Specijalni transportni kontejner sa medijumom za anaerobe ili kontejner sa tioglikolnom podlogom; sterilna posuda za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili sterilna staklena epruveta sa čepom od celuloze ili pamučne gaze
Lezija penisa	Špric bez igle, zatvoren sterilnim gumenim čepom; predmetno staklo sa razmazom na T. pallidum, prekriveno pokrivnim staklom; sonda za bris montirana u sterilnu jednokratnu (tubeser) ili staklenu epruvetu; Transportni kontejneri za viruse i klamidiju; brisevi za otkrivanje drugih uzročnika spolno prenosivih infekcija
Materijal za sumnju na gonoreju
Brisevi iz anusa, cervikalnog kanala, uretre, vagine	Sonda za bris montirana u sterilnu jednokratnu (tubeser) ili staklenu epruvetu; specijalna transportna cijev sa podlogom za aktivni ugalj za očuvanje gonokoka 48 sati ili više
Gastrointestinalni trakt
Usnoj šupljini	Sonda za bris montirana u sterilnu jednokratnu (tubeser) ili staklenu epruvetu; sterilna jednokratna ili staklena posuda za sakupljanje lavaža iz usne šupljine
Ispiranje želuca ili tekućina za ispiranje; duodenalni aspirat; uzorak dobijen tokom sigmoidoskopije; materijal za biopsiju rektuma	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; poseban sterilni kontejner za sakupljanje sputuma; sterilna staklena posuda; aspirat - u sterilnom špricu sa prethodno dezinfikovanom iglom i zabodenom u sterilni gumeni čep
Rektalni bris	Jednokratna sterilna sonda za bris montirana u sterilnu suhu epruvetu (tuber); ili sterilna epruveta sa posebnim transportnim medijumom; bris sonda od nehrđajućeg materijala, postavljena u čep od celuloze ili pamučne gaze sterilne staklene cijevi
Izmet na prisustvo crijevnih infekcija ("razgrupa"), Helicobacter, Campylobacter	Sterilna epruveta sa tamponom u fiziološkom rastvoru sa glicerinom; transportni kontejner sa medijumom za anaerobe u fekalnim uzorcima, sa posebnim medijima sa i bez aktivnog ugljena za izolaciju Campylobacter sp. i Helicobacter sp.; bris sonde u suvoj sterilnoj jednokratnoj epruveti (tubeser); sterilna staklena cijev montirana sa bris sondom na metalnu žicu od titana, čelika, aluminija. Nije dozvoljena upotreba tampona sa drvenom osovinom
Izmet za prisustvo disbakterioze prema generičkom i specijskom sastavu mikroba ("za floru")	Specijalni transportni kontejner sa medijumom za anaerobe u fekalnim uzorcima, sa i bez specijalnih medija sa i bez aktivnog uglja, za izolaciju Campylobacter sp. i Helicobacter sp., odobrenih za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način; sonda za bris u bočici sa fiziološkom otopinom s glicerinom u sterilnoj jednokratnoj ili staklenoj bočici; poseban sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; laboratorijski montiran stakleni kontejner
Izmet za prisutnost disbakterioze s kvantitativnim obračunom izoliranih i identificiranih mikroba ("za disbakteriozu")	Specijalni sterilni kontejneri za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj i lopaticom za sakupljanje materijala i uzorkovanje za inokulaciju, standardne težine; laboratorijski montirana posebna sterilna staklena posuda
Koža i potkožno tkivo
Čirevi, noduli (nodularna zadebljanja), plitke, površinske rane (gnojne; opekotine); duboke rane ili apscesi, kosti	Specijalni sterilni kontejneri za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; sterilne epruvete sa čepovima za jednokratnu upotrebu ili staklene zapremine 5 ml; kontejneri sa specijalnim medijima za anaerobe
Eksudat potkožnih i mekih tkiva; aspirat mekog tkiva	Sterilni špric bez igle, zatvoren sterilnim gumenim čepom; špric sa iglom prethodno dezinfikovanom 70% etil alkoholom i zabodenom u gumeni čep
Sterilne tjelesne tečnosti, isključujući krv, likvor, urin (vidi gore)
Tečnosti
Pleuralna, peritonealna, ascitična, zglobna, sinovijalna	Sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; zatvoreni špric bez igle ili sa iglom prethodno dekontaminiranom sa 70% etil alkohola i zabodenom u sterilni gumeni čep
Biomaterijal za PCR dijagnostiku
Blood; druge telesne tečnosti	Sterilne epruvete za jednokratnu upotrebu sa čepom od 1,5 ml sa antikoagulansom. Epruveta se preokrene 3-5 puta kako bi se uzorak pomiješao sa antikoagulansom. Dostava u laboratoriju - u stalku od materijala za sterilizaciju u autoklavu
Materijal za biopsiju; struganje; sputum i druge vrste biomaterijala	Sterilne suhe epruvete za jednokratnu upotrebu tipa "Eppendorf" i druge slične. Isporuka u laboratoriju - u posebnom stalku od materijala za sterilizaciju u autoklavu
Uzorci okoline koja okružuje pacijenta
Zrak	Sterilne petrijeve posude za jednokratnu upotrebu (=90 mm) ili staklene (=100 mm) sa gustim hranljivim podlogama. Dostava u laboratoriju u posebnim kontejnerima za nošenje
Ispiranje iz predmeta okoline koja okružuje pacijenta
Uzorci za određivanje sterilnosti
Krv i krvni sastojci iz odjela koji ih prikuplja	Kontejneri sa pripremljenim materijalom dostavljaju se u laboratoriju u posebnim kontejnerima za nošenje.
Ispiranje sa medicinskih instrumenata, crijeva opreme koja se koristi u odjelima za reanimaciju i anesteziju, kao iu operacionim salama; ruke medicinskog osoblja; donje rublje	Sterilne sonde za bris postavljene u prozirne epruvete sa providnim bezbojnim tečnim medijumom. Uzorci se dostavljaju u laboratoriju u stalcima od materijala za sterilizaciju u autoklavu.
Hirurški materijal: tamponi, salvete, turunde, pamučni štapići na drvenoj osovini	Sterilne prozirne epruvete sa čepovima, sa providnim bezbojnim tečnim medijumom sa 3-5 sterilnih staklenih perli. Uzorci se dostavljaju u laboratoriju u stalcima od materijala za sterilizaciju u autoklavu.
Materijal za šavove: ketgut koji se čuva u operacionoj sali u alkoholnom rastvoru joda	Sterilna epruveta (boca sa čepom) sa rastvorom neutralizatora (natrijum hiposulfit)
Svila, kapron, monomerne sintetičke niti pohranjene u operacionoj sali u alkoholnom rastvoru	Sterilna epruveta sa čepom sa sterilnom destilovanom vodom kao tečnošću za ispiranje. Uzorci materijala za šavove dostavljaju se u laboratoriju u stalcima za sterilizaciju u autoklavu.
Ispiranje iz operacionog polja pacijenta	Pre obrade polja: u prozirnim epruvetama napunjenim providnim tečnim hranljivim medijumom. Nakon obrade polja: sterilna epruveta (boca sa čepom) sa rastvorom neutralizatora (natrijum hiposulfit). Dostava materijala u laboratoriju se vrši u regalima za sterilizaciju u autoklavu.
Uzorci za određivanje imunoloških faktora sistema antiinfektivne zaštite (sistem antiinfektivne rezistencije organizma - SAIR)
Krv i druge tjelesne tekućine za određivanje humoralnih zaštitnih faktora	Jednokratne šprice za epruvete (vakutaineri); sterilne epruvete za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; sterilne staklene epruvete sa sterilnim čepovima od gume, celuloze ili pamučne gaze. Uzorci se dostavljaju u laboratoriju u posebnom stalku napravljenom od materijala za sterilizaciju u autoklavu. Kada koristite staklene epruvete sa čepovima od pamučne gaze - nemojte ih namakati tokom transporta
Krv i druge tjelesne tekućine za određivanje ćelijskih zaštitnih faktora	Sterilne epruvete za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj; sterilne staklene epruvete dobro zatvorene sterilnim gumenim čepom. Epruvete za jednokratnu upotrebu sa antikoagulansom za centrifugiranje. Dostava u laboratoriju se vrši u posebnom stalku od materijala koji se sterilišu u autoklavu.
Papa testovi na bakterijske i virusne antigene (na primjer, ako se sumnja na spolno prenosive infekcije)	Sterilno staklo bez masti; za T. pallidum, predmetno staklo treba prekriti pokrovnim stakalcem. Dostava u laboratorij se vrši u kontejneru za jednokratnu upotrebu ili sterilnim jednokratnim ili staklenim Petrijevim posudama u posebnim posudama

Bilješka. Uzorke gnoja, tečnosti i tkiva treba dostaviti u laboratoriju u posebnim sterilnim kontejnerima za jednokratnu upotrebu sa poklopcima na navoj. Sonde za bris - osušite u sterilnim epruvetama za jednokratnu upotrebu (krtole) ili u posudama sa transportnim medijumom, ako se materijal ne može dostaviti u laboratoriju odmah nakon uzorkovanja. U ove svrhe možete koristiti transportne medije, uklj. u epruvetama za jednokratnu upotrebu upakovane zajedno sa sterilnom sondom za bris, odobrenom za upotrebu u Ruskoj Federaciji na propisan način. Sonde-tamponi se proizvode (pripremaju) od više materijala: za sam tampon (pamuk-gaza, pamuk, viskoza, Dacron), za osovinu sonde-tampona (drvo, plastika, nerđajući metal - titan, čelik, aluminijum) i gusta agar podloga: sa i bez ugljenika za anaerobe.

Mnogi klinički značajni anaerobi, kao što su Clostridium perfringens, Bacteroides fragilis, dovoljno su tolerantni na prisustvo kiseonika i dobro su očuvani u velikoj količini gnoja, uzoraka tečnosti i tjelesnih tkiva, kao i na bris sonde u specijalnom transportu ili tioglikolu. medija.

Osjetljivije na kisik (na primjer, fuzobakterije) također su dobro očuvane u uzorku biološkog materijala, a ako je materijal posijan u roku od 2-3 sata od trenutka sakupljanja, onda nije potrebna posebna pažnja na način isporuke. . Anaerobi koji zahtijevaju posebne uslove uzgoja ne preživljavaju na sondi za bris u transportnom kontejneru sa podlogom koja nije namijenjena za isporuku anaerobnih tvari, izuzev kontejnera sa posebnim transportnim medijem ili tioglikolom.

Istovremeno, ovi mikroorganizmi rastu 5-7 dana duže od vremena tokom kojeg većina praktičnih laboratorija inkubira posude inokulirane materijalom za izolaciju i identifikaciju aerobnih i fakultativnih anaeroba. Iz tog razloga, rutinsko ispitivanje prisutnosti anaerobnih tvari korištenjem posebnih transportnih anaerobnih kontejnera sa podlogom izgleda neprikladno u običnim praktičnim laboratorijama, te se može ograničiti na epruvete s tioglikolnom podlogom.

Za prikupljanje i transport uzoraka koriste se mediji, kontejneri, alati i materijali koji su odobreni za upotrebu u Ruskoj Federaciji na propisan način.

6. Pravila i tehnike za dobijanje uzoraka različitih vrsta biološkog materijala za mikrobiološka istraživanja

Uzimanje bilo kojeg uzorka od pacijenta koji zahtijeva korištenje invazivnih metoda preporučuje se da obavi ljekar (osim uzorka krvi koji može uzeti proceduralna medicinska sestra).

Ako je potrebno sakupiti materijal pomoću sonde za bris na otvorenoj operativnoj površini ili u slučaju druge invazivne intervencije, dozvoljeno je koristiti gotove sonde za bris sa međunarodnim sigurnosnim nivoom najmanje klase IIA, odobrene za upotrebu za ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način.

6.1. uzorci krvi

Uzorci za utvrđivanje prisustva bioloških agenasa u krvi (bakteremija, viremija i dr.) dobijaju se venepunkcijom perifernih vena (često vena lakta), arterija ili iz pete kod novorođenčadi.

Uzimanje uzoraka iz stalnih intravenskih ili intraarterijskih katetera dozvoljeno je samo u slučajevima sumnje na infekciju povezanu sa kateterom ili nemogućnost da se dobije venepunkcijom.

6.1.1. Kod akutne sepse, meningitisa, osteomijelitisa, artritisa, akutne neliječene bakterijske pneumonije i pijelonefritisa uzimaju se 2 uzorka iz dvije žile ili dva dijela krvnog suda prije početka terapije antibioticima.

6.1.2. Ako sumnjate na prisustvo endokarditisa i trome sepse s malom (10-30 CFU/ml) koncentracijom patogena u cirkulaciji:

u prisustvu akutnog procesa, uzimaju se 2 uzorka iz dva dijela krvnih žila (različitih krvnih žila) tokom prvih 1-2 sata porasta tjelesne temperature (ne na vrhuncu temperature!) i prije početka terapije. ;

u subakutnom ili sporom toku, prvog dana se uzimaju 3 uzorka u intervalu od 15 minuta ili više. Ako su svi uzorci negativni, drugog dana nakon sjetve sakupljaju se još 3 uzorka;

kod pacijenata sa endokarditisom koji primaju antibiotike, uzimaju se 2 odvojena uzorka svaki od tri dana sa pozitivnom kliničkom dinamikom terapije;

radi potvrde kliničke dijagnoze „infektivnog endokarditisa“, ukoliko je nemoguće dobiti potreban broj uzoraka krvi od pacijenta za mikrobiološku analizu ili ako su kulture negativne, uzorci krvi se šalju na ispitivanje imunoloških faktora odbrambenog sistema organizma (sistem otpornosti na infekcije - SAIR); dostava u laboratoriju se vrši u sterilnim staklenim ili jednokratnim epruvetama sa poklopcem (plutenim), dobijenim dan ranije u laboratoriji;

ako pacijent pati od urođene srčane bolesti (CHD), treba imati na umu da je CHD prodrom infektivnog endokarditisa, a određivanje imunoloških faktora CAD uključeno je u algoritam pregleda kod takvog pacijenta.

6.1.3. Kod pacijenata čija terapija uključuje antibiotike, u roku od 48 sati uzima se 6 uzoraka; uzorci se moraju uzeti neposredno prije primjene (uzimanja) sljedeće doze lijeka.

6.1.4. Ako pacijent ima groznicu nepoznatog porijekla, prvo se uzimaju 2 uzorka iz različitih krvnih žila (dva dijela žile), a zatim nakon 24-36 sati još 2 uzorka na pozadini povećanja tjelesne temperature (ne na vrhunac temperature!).

6.1.5. Tehnika uzimanja uzorka krvi. Uzimanje uzoraka krvi za kulturu obavljaju 2 osobe uz krevet ili u prostoriji za tretman.

Da biste dobili uzorak, uradite sljedeće:

dezinficirati područje kože iznad posude odabrane za punkciju: kožu tretirati štapićem navlaženim u 70% etil alkoholu, zatim drugim tamponom navlaženim 1-2% otopinom joda ili drugim dezinfekcijskim sredstvom odobrenim za ovu namjenu na propisani način, kružnim pokretima, počevši od centra, unutar 30 s;

sačekajte da se tretirano područje osuši. Nije dozvoljeno palpirati žilu nakon tretmana kože prije uvođenja igle;

kada radite s bočicama s dvostrukim medijem: sterilnom štrcaljkom prikupite 10 ml krvi od odraslih, od djece - 5 ml; otvorite bočicu iznad plamena lampe; ubrizgajte krv u bočicu iz šprica, nakon uklanjanja igle; spaliti vrat i čep bočice u plamenu alkoholne lampe, zatvoriti bočicu čepom; pažljivo, da ne natopite čep bočice, kružnim pokretima miješajte njen sadržaj.

Kada se koriste gotove bočice sa medijumom i reagensima koji neutrališu antibiotike i uništavaju krvna zrnca, ili bez njih, odobrenih za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način, odrasli dobijaju 10-30 ml krvi, deca - 0,5 - 3,0 ml.

pri čemu:

Paralelno s dezinfekcijom područja kože za ubod, čepovi boca tretiraju se 70% etil alkoholom (nije dozvoljeno koristiti otopinu joda za tretiranje čepova pri radu s bocama, na primjer, Bactec, Vital i drugi slični odobreni za upotrebu za ove svrhe u Ruskoj Federaciji prema utvrđenom redoslijedu);

krv dobijena od odraslih, u jednakim količinama, prilikom probijanja čepa posude, unosi se u "aerobne" i "anaerobne" posude; krv primljena od djece - u posebnoj "baby" boci, dok se buši čep posude.

6.1.6. Nakon venepunkcije i hemokulture u posudi sa podlogom za sprečavanje moguće iritacije (opekotine), ostaci joda se uklanjaju sa područja kože pacijenta tamponom navlaženim 70% etil alkoholom.

6.2. Testovi na infektivne i upalne procese centralnog nervnog sistema (CNS)

6.2.1. Liquor. 4,0-5,5 ml likvora dobijenog lumbalnom punkcijom iz subarahnoidalnog prostora između pršljenova L3-L4, L4-L5 ili L5-S1, kao i punkcijom bočnih ventrikula mozga, šalje se u mikrobiološku laboratoriju na istraživanje .

Uzimanje uzoraka vrši se polaganim punjenjem tri epruvete sa tri porcije materijala za istraživanje u laboratorijima. Koristite sterilne epruvete sa čvrstim poklopcima (za jednokratnu upotrebu sa čepom ili staklo sa sterilnim gumenim čepom).

Od tri epruvete za lumbalnu punkciju, uvijek šaljite epruvetu s najzamućenijim sadržajem, obično drugu epruvetu u procesu prikupljanja.

Po prijemu materijala punkcijom bočnih ventrikula mozga, svježe uzeta cerebrospinalna tekućina iz šprica, nakon što je prethodno uklonjena igla, unosi se u sterilnu epruvetu preko plamena alkoholne lampe, vrata epruvete. a pluta se spaljuje u plamenu alkoholne lampe (prilikom rada sa staklenom epruvetom zatvorenom pamučno-gazom ili gumenim čepovima), zatvorena čep epruvete.

U svim slučajevima za koje se sumnja na meningitis, osim likvora, uzima se i materijal iz navodnih žarišta infekcije: brisevi iz nazofarinksa, srednjeg uha, uzorci krvi, koji se zajedno sa likvorom šalju u laboratoriju. Dobar način za dugotrajno očuvanje meningokoka (do 48 sati) je da se materijal uzme brisom i stavi u epruvetu sa transportnim medijumom sa ili bez aktivnog uglja.

Tekućina za mikrobiološka istraživanja odmah se šalje u laboratoriju na podlogu za grijanje kako bi se održala temperatura od 35-37 °C. Ako to nije moguće, cerebrospinalna tečnost se sakuplja u posudu sa transportnim medijumom i ostavlja u frižideru (na temperaturi od 4-8°C) do jutra, a zatim se dostavlja u laboratoriju.

Ako je potrebno provesti virološke studije, uzorci likvora se stavljaju u hladnjak na temperaturi od 2-8 °C ili zamrzavaju, ili čuvaju na sobnoj temperaturi u posudama sa posebnim tekućim medijem.

6.2.2. Materijal iz moždanih apscesa. S obzirom na to da u uzorku u 90% slučajeva rastu anaerobi, materijal se aspirira iz žarišta i šalje u laboratoriju u posudama s anaerobnim medijem odobrenim za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji na propisan način, ili u špricu. sa kojim je uzet uzorak, nakon uklanjanja igle i zatvorite špric sterilnim gumenim čepom.

Uzorak se dostavlja odmah po prijemu.

6.2.3. biopsijski materijal. Uzorci se uzimaju tokom operacije, stavljaju u posudu sa anaerobnom podlogom ili u sterilnu epruvetu sa tioglikolnom podlogom, zatvorenu sterilnim gumenim čepom.

Materijal se odmah šalje u laboratoriju.

6.3. Testovi na infektivne i upalne procese očiju

Većinu uzoraka oka uzima oftalmolog. Ove uzorke treba inokulirati na hranljive podloge pored pacijentovog kreveta ili u sobi za tretman ili u ordinaciji u trenutku prijema, a inokulisani materijal treba preneti u laboratoriju za uzgoj, izolaciju, identifikaciju i određivanje osetljivosti na antibiotike. patogeni. Uzorci uzeti invazivnim i drugim agresivnim metodama uzimaju se paralelno sa brisom konjunktive, koji u takvim slučajevima služi kao kontrola.

Dan ranije, na 6-8 sati (noć), otkazati sve lijekove i procedure.

U prisustvu specifičnih kliničkih manifestacija infektivno-upalnog procesa ili sumnji koje liječnik ima, neophodno je prije anestezije pripremiti brisove za utvrđivanje klamidije i virusa, a lijekove poslati u laboratoriju. Za očuvanje klamidije i virusa materijal se sakuplja u kontejnere s transportnim medijima.

Iscjedak se sakuplja sterilnom staklenom šipkom ili sterilnom sondom-tamponom: dva ili tri pokreta se provode duž sluznice donjeg prijelaznog nabora, od ruba očnih kapaka; s ulkusom - iz rožnice (nakon anestezije), s "kutnim konjunktivitisom" - iz uglova očnih kapaka.

Tajna iz suzne vrećice se sakuplja sterilnom sondom za bris nakon nježne masaže.

Materijal uzet štapićem i/ili sondom za štapiće stavlja se u posudu sa transportnim medijumom ili u sterilnu staklenu epruvetu sa tečnim medijumom i dostavlja u laboratorij, vodeći računa da se čep od celuloze ili pamučne gaze ne natopi. tube.

Kada koristite sonde za bris, poželjno je koristiti kontejnere za jednokratnu upotrebu sa transportnim medijumom ili sterilne staklene epruvete sa čepovima od pamučne gaze napunjene sterilnim medijumom.

Najtačniji podatak o uzročniku upalnog procesa može se dobiti mikrobiološkom analizom struganja.

6.3.1. Konjunktivitis i blefarokonjunktivitis. Dan ranije, u trajanju od 6-8 sati (noć), pacijentima u bolnici se otkazuju svi lijekovi i zahvati.

Uzorci iz konjunktive se prikupljaju pomoću sterilnog, prethodno navlaženog viskoznog ili kalcijum alginatnog tampona, koji se nalazi u sterilnoj ili staklenoj epruveti za jednokratnu upotrebu. Uzorci iz svakog oka se uzimaju zasebnim brisevima sa dva ili tri kružna pokreta preko sluzokože.

Gomolji sa brisevima iz svakog oka označavaju "desno", odnosno "lijevo", i odmah poslati u laboratoriju.

Prije struganja ubrizgavaju se 1-2 kapi anestetika, na primjer, proparakain hidroklorida ili drugog koji je dostupan i odobren za upotrebu u ove svrhe na propisan način.

Uz dva ili tri kratka oštra pokreta u jednom smjeru, struganje iz konjunktive se sakuplja posebnom sterilnom lopaticom. Tokom manipulacije, oko mora biti otvoreno.

Prilikom uzimanja uzorka treba paziti da ne dodirnete trepavice.

Pripremite najmanje 2 razmaza iz svakog oka nanošenjem materijala na čisto, odmašćeno staklo kružnim pokretima na površini od 1 cm u prečniku.

Razmazi se fiksiraju 5 minuta u 95% metil alkoholu, koji se nalazi u posebnoj, dobro zatvorenoj posudi.

Odmah epruvete sa sondama za bris i čaše sa brisevima se prenose u laboratoriju.

6.3.2. bakterijski keratitis. Dan ranije, u trajanju od 6-8 sati (noć), pacijentima u bolnici se otkazuju svi lijekovi i zahvati.

Uzmite 2 uzorka iz konjunktive kao što je opisano u 6.3.1, jer rezultati kulture mogu biti korisni u određivanju izvora kontaminacije rožnjače (jedan uzorak se koristi ako se sumnja na gljivičnu infekciju).

Ako se sumnja na virusnu infekciju, eksudat konjunktive i materijal dobiven struganjem stavljaju se u poseban transportni medij za viruse.

Anestezija se izvodi, kako je naznačeno u tački 6.3.1.

Sakupite 3-5 struganja metodom opisanom u paragrafu 6.3.1.

Sakupljeni materijal se stavlja u malu (5 ml) sterilnu jednokratnu epruvetu sa poklopcem na navoj ili sterilnu staklenu epruvetu sa gumenim čepom, napunjenu medijumom.

Pripremite 2-3 razmaza na stakalcu i nakon sušenja popravite ih kako je opisano u paragrafu 6.3.1.

Odmah sav materijal se šalje u laboratoriju.

6.3.3. Bakterijski endoftalmitis. Uzorak staklaste tečnosti (1-2 ml) se uzima aspiracijom finom iglom i uzorak se uzima tokom vitrektomije.

Zatim uradite sljedeće:

Nakon vađenja igle iz šprica, sadržaj se stavlja u jednokratnu sterilnu posudu sa poklopcem na navoj ili epruvetu čvrsto zatvorenu gumenim čepom;

uzorak materijala se može ostaviti u špricu, uklanjajući vazduh i uklanjajući iglu, zatvorite špric sterilnim gumenim čepom;

uzeti uzorak iz konjunktive, kao što je opisano u paragrafu 6.3.1;

sav materijal odmah poslati u laboratoriju.

6.3.4. Preseptalni celulitis. Koža se tretira 70% etil alkoholom i 1-2% rastvorom joda ili jodoformom ili drugim raspoloživim dezinfekcionim sredstvom odobrenim za upotrebu na propisan način.

U nedostatku otvorene rane, gornji ili donji kapak se probuši kako bi se prikupio materijal.

U prisustvu otvorene rane, štrcaljkom sa iglom uzima se uzorak gnojnog materijala.

Pripremite razmazove na predmetnom predmetu kao što je opisano u paragrafu 6.3.1.

Sakupljeni materijal se prenosi u transportni kontejner sa podlogom za anaerobe ili se ostavlja u špricu, koji se nakon uklanjanja vazduha iz njega i vađenja igle zatvara čepom.

Prikupljeni materijal i brisevi odmah poslati u laboratoriju.

6.3.5. Orbitalni celulitis. Sakupite aspirat iz zone prema metodi opisanoj ranije u paragrafu 6.3.2.

Uzmite uzorak iz konjunktive i pripremite razmaze na stakalcu, kao u paragrafu 6.3.1.

Za isporuku u laboratoriju koristite materijale opisane u tački 6.3.3.

Uzmite uzorke krvi od pacijenta prema metodi opisanoj u paragrafu 6.1. Uzorci krvi, sav prikupljeni materijal se prenosi u laboratoriju.

6.3.6. Upala suzne žlijezde (dakriadenitis).

Purulentni sadržaj se prikuplja sondom za bris, kao u paragrafu 6.3.1.

Nemojte koristiti metodu aspiracije iglom, kako ne biste narušili integritet suzne žlijezde.

Sonda za bris i stakalce sa razmazima se prenose u laboratoriju.

6.3.7. Upala suzne vrećice (dakriocistitis). Uzmite uzorak iz konjuktive, kao u paragrafu 6.3.1.

Masirajte i pritiskajte suznu vrećicu kako biste dobili uzorak eksudata za kulturu i pripremu razmaza, ili, drugom metodom, sakupite eksudat špricom i iglom.

Stavite prikupljeni uzorak eksudata u transportne kontejnere kao što je ranije opisano i dostavite u laboratorij.

6.3.8. Kanalikulitis. Pritisnite unutrašnju stranu kapka da dobijete gnoj.

Dalji rad se izvodi prema metodama opisanim ranije u ovom odjeljku.

Ako u zdravstveno-preventivnoj organizaciji postoji specijalizovano odeljenje (ambulanta), svi usevi se rade uz krevet pacijenta na hranljivim podlogama dobijenim u laboratoriji. Inokulirani materijal se zajedno sa pripremljenim razmazima prenosi u laboratoriju.

6.4. Testovi na infektivne i upalne procese uha

6.4.1. U slučaju oštećenja vanjskog uha, koža se tretira 70% alkoholom, nakon čega slijedi ispiranje sterilnom fiziološkom otopinom. Iscjedak iz žarišta se sakuplja na sterilnom jednokratnom tamponu sonde gomolja ili epruvetama sa transportnim medijem, ili na štapiću ugrađenom u sterilnu staklenu epruvetu, zatvorenu čepom, sa ili bez posebnog medija. Bris se stavlja u epruvetu i dostavlja u laboratoriju.

6.4.2. U slučaju oštećenja srednjeg i unutrašnjeg uha sakupljaju se punktati i drugi materijal dobijen tokom operacije. Punktati se dostavljaju u laboratoriju u zatvorenom špricu sa prethodno uklonjenim vazduhom. Uzorci tkiva - u transportnom kontejneru sa anaerobnim medijumom odobrenim za upotrebu u ove svrhe u Ruskoj Federaciji u skladu sa utvrđenom procedurom, ili u sterilnom kontejneru za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj. Moguća je upotreba sterilne staklene epruvete zatvorene sterilnim gumenim čepom.

6.4.3. Timpanocenteza bubne opne radi se za mikrobiološku dijagnostiku infekcija srednjeg uha samo u slučajevima kada bolesnik ne reaguje na prethodnu terapiju ili ima torpidni kataralni otitis srednjeg uha čak i u odsustvu eksudata u izbočenoj krvi (izlaz iz nazofarinksa je pozitivan u manje od 90% slučajeva).

Da bi se dobio uzorak, vanjski kanal se čisti tamponom navlaženim u 70% etanolu, nakon čega slijedi tretman sterilnom fiziološkom otopinom.

Pomoću šprica tečnost se sakuplja iz bubne šupljine. Uzorak se dostavlja u laboratoriju u sterilnom kontejneru za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili u zatvorenom špricu sa prethodno uklonjenim vazduhom.

Ako je bubna opna oštećena, materijal se skuplja bris sondom pomoću ogledala. Bris se stavlja u sterilnu jednokratnu epruvetu (tuber) ili posudu sa transportnim medijumom (dozvoljena je upotreba sterilne staklene epruvete sa ili bez medijuma) i u tom obliku se dostavlja u laboratoriju.

6.5. Testovi na infektivne i upalne procese respiratornog trakta

6.5.1. gornjih disajnih puteva. Ukoliko se sumnja na difteriju, veliki kašalj, klamidiju, mikoplazmozu, legionelozu, gonoreju, obavještavaju se laboratorijski radnici prije predaje uzorka kako bi se pripremili za analizu ove vrste materijala.

6.5.1.1. Uzorak iz sluzokože prednjih dijelova nosne šupljine uzima se jednom sterilnom sondom za bris postavljenom u sterilnu jednokratnu epruvetu (tubeser) ili posebno postavljenom u sterilnu staklenu epruvetu:

izvadite bris iz epruvete, umetnite u desnu nozdrvu i rotirajte materijal sa krila nosa i gornjeg ugla nosnog otvora;

ponovite manipulaciju za lijevu nozdrvu;

bris se stavlja u epruvetu i dostavlja u laboratoriju.

Ovako dobijeni uzorci korisni su za određivanje nosivosti Staphylococcus aureus kod medicinskih radnika, prisutnosti uzročnika bolničkih infekcija, kao i za karakterizaciju disbiotskih poremećaja sluznice gornjih disajnih puteva tokom sveobuhvatnog kliničkog i imunomikrobiološkog pregleda pacijenata. provode se u naučnim i praktičnim laboratorijama.

Ako postoje žarišta upale ili ulceracije u nosnoj šupljini, koristi se poseban bris za prikupljanje materijala iz žarišta (žarišta).

6.5.1.2. Aspirati iz nazofarinksa prikupljaju se radi utvrđivanja prijenosa piogenih streptokoka, meningokoka, uzročnika difterije i velikog kašlja, kao i prilikom provođenja epidemioloških studija antimikrobne rezistencije S. pneumoniae i H. influenzae:

usisni materijal iz nazofarinksa;

materijal prenijeti u sterilnu jednokratnu posudu s poklopcem na navoj ili specijalnu sterilnu epruvetu s čepom od celuloze ili pamučne gaze koji propušta plin, pazeći da se ne natopi uzorkom kliničkog materijala.

6.5.1.3. Bris iz nazofarinksa. Materijal se prikuplja radi utvrđivanja prijenosa meningokoka i dijagnoze velikog kašlja.

Pažljivo rotacijskim pokretima duž donjeg nosnog prolaza, naizmjenično se u nazofarinks u nazofarinks ubacuje sonda-tampon od pamuka, viskoze ili kalcijum alginata. Istovremeno, krila nosa se pritiskaju na bris i nosni septum radi bližeg kontakta sa sluzokožom.

Bris se stavlja u sterilnu epruvetu i dostavlja u laboratoriju.

6.5.1.4. Ispiranje nosa se koristi za određivanje prisutnosti ne samo bakterijske, već i pretežno virusne infekcije.

Upozorite pacijenta da ne guta tokom postupka.

Glava pacijenta je postavljena gore-nazad pod uglom od približno 70°, u svaku nozdrvu se ubrizgava 5 ml sterilnog fiziološkog rastvora, pacijent treba da bude u tom položaju 3-5 sekundi.

Za prikupljanje materijala pacijentova glava se spušta naprijed tako da se tekućina izlije iz nozdrva u sterilnu jednokratnu posudu ili se tekućina aspirira uvođenjem gumene drenaže u svaku nozdrvu.

Stavite jednaku količinu sredstva za pranje u posudu sa medijumom za transport virusa ili dostavite ovaj deo u sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu.

6.5.1.5. Punkcija sinusa. Koristeći tehniku aspiracije štrcaljkom, posebno obučeni iskusni ljekar ili otorinolaringolog uzima materijal iz čeljusnih frontalnih ili drugih sinusa. Sadržaj šprica se stavlja u posudu sa transportnim medijumom za anaerobe ili u sterilnu epruvetu sa tioglikolnom podlogom. Materijal možete ostaviti u špricu i, nakon što ga zatvorite sterilnim gumenim čepom, isporučiti ga u laboratoriju.

6.5.1.6. Uzimanje uzorka iz sluznice ždrijela (farinksa).

Nije dozvoljeno prikupljanje materijala iz ždrijela (ždrijela) sa upaljenim epiglotisom, jer postupak može dovesti do ozbiljne respiratorne opstrukcije.

Prilikom uzimanja uzoraka sa sluzokože ždrijela (ždrijela), ne dirajte sluzokožu obraza, jezika, desni, usana i ne sakupljajte pljuvačku, jer ovaj materijal karakteriše sluzokožu usne šupljine, tj. , gornji gastrointestinalni trakt.

Bris ždrijela (farinksa) se uzima na prazan želudac ili 3-4 sata nakon obroka. Prije uzimanja uzorka, pacijent treba isprati usta toplom prokuhanom vodom.

Za dobivanje uzorka koristi se sterilna lopatica ili bris: iz sterilne jednokratne epruvete (tubeser) se vadi viskozni štapić ili se koristi bris pripremljen u laboratoriji, montiran u sterilnu staklenu epruvetu. Upotreba bris sonde sa viskoznom glavom je poželjnija jer viskoza upija manje tečnosti i više ćelijskog materijala.

Jednom rukom pacijentov jezik se pritisne sterilnom lopaticom.

Materijal se sakuplja drugom rukom, naizmjenično se tamponom tretira desni krajnik, desni palatinski luk, lijevi krajnik, lijevi nepčani luk, uvula, u nivou uvule se dodiruje stražnji zid ždrijela tampon.

Ovako dobijeni uzorci korisni su za određivanje prisustva uzročnika bolničke infekcije, kao i za karakterizaciju disbiotskih poremećaja sluzokože gornjih disajnih puteva tokom sveobuhvatnog kliničkog i imunomikrobiološkog pregleda pacijenata koji se obavlja u naučnim i praktičnim laboratorijama. .

U prisustvu žarišta upale ili ulceracije na sluznici, posebno paze na uzimanje uzoraka i dodatno prikupljaju materijal iz žarišta (žarišta) posebnim brisom.

Bris se stavlja u sterilnu jednokratnu ili staklenu epruvetu i dostavlja u laboratoriju.

6.5.1.7. Ako se sumnja na difteriju, obavještavaju se laboratorijski radnici, navodeći dijagnozu u uputu.

U slučajevima respiratornog patološkog procesa, materijal se istovremeno prikuplja sa sluznice nazofarinksa i ždrijela prema ranije predstavljenim metodama.

Ako se sumnja na kožni oblik difterije, uzima se materijal sa kože, kao i sa sluznice ždrijela (ždrijela) i nazofarinksa i svi uzorci se dostavljaju u laboratorij.

6.5.2. donji respiratorni trakt. Mikrobiološka dijagnostika upalnih procesa u donjim respiratornim putevima predstavlja ozbiljne poteškoće, jer. tokom sakupljanja, uzorak može biti kontaminiran mikroorganizmima koji koloniziraju gornje respiratorne puteve. Ova ekološka niša je prilično obilno zasijana oportunističkim mikrobima, posebno u prisustvu disbakterioze (kvalitativno – sastav vrsta i/ili kvantitativno – koncentracija vrsta prisutnih u CFU/ml kod oslabljenog i/ili imunokompromitovanog kontingenta ispitanika).

Zbog toga se uzorci materijala iz donjih respiratornih puteva prikupljaju posebno pažljivo kako bi se dobila tačna informacija o etiološkom agensu (uzročnicima). Kod invazivnih metoda za prikupljanje uzorka (ako do toga ne dođe tokom operacije), instrumenti koji se koriste prolaze kroz gornje disajne puteve, a postoji realna mogućnost zasijavanja dubljih lokusa mikroorganizmima - stanovnicima gornjih disajnih puteva.

6.5.2.1. Sputum.

Labavo odvojen (ekspektorirani) sputum- Po mogućnosti ujutro.

Prije uzimanja uzorka pacijent, ako je moguće, treba oprati zube i isprati usta i grlo toplom prokuhanom vodom, a ako pacijent to nije u mogućnosti sam, onda toalet njegove usne šupljine obavljaju medicinski radnici. .

Upozorite pacijenta da ne skuplja pljuvačku ili nazofaringealni iscjedak u posudu.

Uzorak sputuma dobijen kao rezultat dubokog kašlja prikuplja se u posebnu sterilnu jednokratnu posudu sa poklopcem na navoj ili u posebno pripremljenu sterilnu staklenu teglu.

Uzorak sputuma se šalje u laboratoriju.

Inducirani sputum (preporučuje se prvenstveno za sumnju na Mycobacterium tuberculosis i Pneumocystis yiroveci)- Po mogućnosti ujutro.

Prije uzimanja uzorka, pacijent, ako je moguće, treba oprati zube i isprati usta i grlo toplom, prokuhanom vodom; ako pacijent nije u mogućnosti to sam učiniti, toalet njegove usne šupljine obavlja medicinsko osoblje.

Prije zahvata navlažite čistu četkicu za zube toplom prokuhanom vodom i pređite njome preko sluzokože oba obraza, jezika i desni.

Aktivno isperite pacijentova usta toplom prokuhanom vodom.

Koristeći inhalator, dajte pacijentu da proguta 20-30 ml 3-10% sterilnog fiziološkog rastvora.

Sakupite inducirani sputum u poseban sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili u odgovarajuće pripremljenu sterilnu staklenu teglu.

Pošaljite uzorak u laboratoriju.

Istovremeno sa uzorkom sputuma, u laboratoriju treba poslati i faringealni (faringealni) uzorak koji se uzima nakon toaleta usne šupljine i neposredno prije uzimanja slobodno izdvojenog (ekspektorisanog) ili induciranog sputuma.

6.5.2.2. Traheostomija i endotrahealni aspirati. Traheostoma je kolonizirana mikroorganizmima već 24 sata nakon pacijentove intubacije, zbog čega su rezultati studije kulture od malog kliničkog značaja. S obzirom na gore navedeno, rezultate kulture intubiranih pacijenata treba stalno upoređivati sa kliničkim nalazima (npr. groznica ili infiltrati na rendgenskom snimku).

Uzorci ispiranja bronha ili bronhoalveolarnog ispiranja prikupljaju se, ako je moguće, prije uzimanja uzoraka za struganje ili biopsiju. Pravilo je diktirano potrebom da se izbjegne višak krvi u nastaloj tekućini, jer. krv može promijeniti koncentraciju ćelijskih i nećelijskih komponenti uzorka i utjecati na rezultat mikrobiološke analize.

Uzorak aspirata se sakuplja u sterilni kontejner za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili u sterilnu staklenu posudu koja je pravilno montirana, ili u sterilnu jednokratnu staklenu epruvetu sa čepom, ili se dostavlja u laboratoriju u zatvorenom špricu sa uklonjenim vazduhom.

6.5.2.3. Uzorci uzeti bronhoskopom. Bronhoalveolarno ispiranje (uzorak po izboru), ispiranje bronha (niska osjetljivost u dijagnostici pneumonije), struganje bronha (značajnije od ispiranja), uzorci transtrahealne biopsije se uzimaju umetanjem bronhoskopa transnazalno ili transoralno kod neintubiranog pacijenta ili kroz endotrahealnu cijev kod intubiranog pacijenta.

Da biste dobili uzorak za ispiranje bronhija ili bronhoalveolarnu lavažu:

ubrizgava se štrcaljkom kroz biopsijski kanal bronhoskopa u odvojenim porcijama sterilne nebakteriostatske (zvanične) fiziološke otopine (ukupni volumen od 5-20 do 100 ml);

prije unošenja sljedeće porcije fiziološkog rastvora, pažljivo aspirirajte umetnutim dijelom šprica u sterilnu jednokratnu posudu sa poklopcem na navoj ili u sterilnu jednokratnu ili staklenu epruvetu sa čepom, ili ostavite u zatvorenoj špricu, nakon uklanjanja vazduha iz to (obično je 50-70% ubrizganog fiziološkog rastvora u lavažu);

svaki usisani dio sakuplja se u posebnu posudu;

na kraju postupka, uzorci dobijeni iz istog područja se kombinuju. Uzorke sa različitih lokacija (npr. desni gornji režanj pluća i desni donji režanj) treba združiti samo nakon konsultacije sa lekarom koji prisustvuje;

u smjeru označavaju ukupni volumen ubrizganog fiziološkog rastvora.

Da biste dobili uzorak bronhijalnog struganja:

kroz biopsijski kanal bronhoskopa, teleskopski dvostruki kateter sa distalnim krajem tretiranim polietilen glikolom (ili drugim odgovarajućim reagensom) se ubacuje kako bi se spriječila kontaminacija uzorka;

prikupiti materijal u sterilnu jednokratnu posudu sa poklopcem na navoj ili u transportnu posudu sa anaerobnim medijumom ili u sterilnu epruvetu sa tioglikolnom podlogom, dobro zatvorenu sterilnim gumenim čepom;

dostaviti materijal u laboratoriju.

Da bi se dobila transbronhijalna biopsija, uzorak se uzima kroz kanal za biopsiju bronhoskopa i stavlja ga u sterilnu jednokratnu posudu sa poklopcem na navoj sa malom količinom (1-2 ml) nebakteriostatske (zvanične) fiziološke otopine ili u epruveti sa tioglikolnim medijumom dobro zatvorenom gumenim čepom, prenosi se u laboratorije

6.5.2.4. Uzorci plućnog aspirata. Za uzimanje uzorka igla se uvodi kroz sternum u plućni infiltrat pod kontrolom CT skenera. Materijal se aspirira iz žarišta upale. Ukoliko postoji veliki infiltrat ili ga ima više, potrebno je uzeti nekoliko uzoraka iz odgovarajućih žarišta ili više uzoraka iz jedne velike lezije. Materijal se prenosi u laboratoriju u transportnom kontejneru sa medijumom za anaerobe ili u staklenoj tubi sa tioglikolnim medijumom, ili u kontejneru za jednokratnu upotrebu na vijak.

6.5.2.5. Biopsijski uzorci pluća. Ako je moguće, dobijaju se komadići tkiva veličine 1-3 cm.Ako je lezija velika ili ih ima više, uzima se nekoliko uzoraka. Uzorak se stavlja u sterilnu jednokratnu posudu sa poklopcem na navoj ili u transportnu posudu sa anaerobnom podlogom, ili u posudu (epruvetu) sa tioglikolnom podlogom, zatvorenu sterilnim gumenim čepom.

6.6. Testovi na infektivne i upalne procese genitourinarnog sistema

6.6.1. Uzorci urina.

6.6.1.1. Opća pravila za uzorkovanje:

nije dozvoljeno sakupljanje urina iz posteljine ili iz pisoara;

za analizu urina tokom prirodnog mokrenja koristite prosječnu jutarnju porciju;

prije uzimanja uzorka potrebno je temeljito isprati vanjske genitalne organe i anus toplom prokuhanom vodom; posebnu pažnju treba obratiti na obradu otvora uretre kod muškaraca (predvorje vagine - kod žena) kako bi se osiguralo da tokom postupka uzorak neće biti dalje kontaminiran mikrobima;

nije dozvoljeno koristiti dezinfekciona sredstva za obradu, jer. ako uđu u uzorak, mogu inhibirati rast mikroorganizama;

uzorak se prenosi u laboratoriju najkasnije 2 sata od trenutka uzimanja;

za prikupljanje i dostavu uzoraka u laboratoriju koriste se sterilne posude za jednokratnu upotrebu sa zatvaračem ili epruvete (mogu se koristiti sterilne posebno montirane staklene epruvete sa čepom od celuloze ili pamučno-gaze koji propušta gas, ali se posebno vodi računa da se natopiti čep);

dostava u laboratorij uzoraka aspirata dobivenih tehnikom suprapubične punkcije mjehura vrši se u transportnoj posudi sa posebnim podlogom za anaerobe ili u zatvorenom špricu bez igle;

ako se sumnja na virusnu infekciju, uzorci se dostavljaju u laboratoriju u sterilnom kontejneru za jednokratnu upotrebu postavljenom na otopljeni led (suhi led nije dozvoljen!);

svaki postupak za uzimanje uzorka pomoću katetera (posebno kod žena) provodi se uz pažljivo poštovanje pravila asepse kako bi se spriječila dodatna kontaminacija pacijenta tijekom uvođenja katetera;

za mikrobiološka istraživanja nije dozvoljeno koristiti uzorak iz dnevnog m

6.6.1.2. Prikupljanje uzoraka urina od žena tokom prirodnog mokrenja.

Koristite srednji dio, jer. prvi prolaz mokraće bi trebao ukloniti komensale eventualno u uretri. Uzorak prikupljen na sljedećim pasusima ne bi trebao biti kontaminiran. Pouzdanost pozitivnih rezultata takvog materijala je 80% kada se uzima jedan uzorak, 90% kada se uzimaju dva uzastopna uzorka i 100% kada se uzimaju tri, ako svi uzorci daju iste rezultate.

Zdravstveni radnik koji uzima uzorak treba da opere ruke sapunom i vodom, isprati vodom i osušiti. Ako uzorak uzima sam pacijent, detaljno mu se objašnjava kako se to radi, uzimajući u obzir gore navedene pripreme, te upozorava šta se može dogoditi ako prekrši pravila:

temeljito oprati otvor uretre i područje predvorja vagine, kao i perineum i anus sapunom ili tekućim sapunom, isprati toplom prokuhanom vodom, osušiti sterilnom krpom od gaze;

otvor vagine se mora zatvoriti sterilnim pamučnim štapićem;

držite vanjske usne na udaljenosti jedna od druge tokom mokrenja;

ispraznite malu količinu urina u posebnu posudu za odlaganje bez zaustavljanja mokrenja;

prikupiti prosječnu porciju urina (10-20 ml) u posebnu posudu za jednokratnu upotrebu sa poklopcem na navoj ili sterilnu staklenu posudu posebno sastavljenu u laboratoriji.

6.6.1.3. Sakupljanje uzoraka urina od muškaraca tokom prirodnog mokrenja.

Kod muškaraca je potrebna jedna porcija urina za mikrobiološki pregled, jer. znatno je manje vjerovatno da će biti kontaminirane od žena.

Osoba koja uzima uzorak treba oprati ruke sapunom, isprati vodom i osušiti. Ako pacijent sam uzima uzorke, mora mu se detaljno objasniti kako se to radi, uzimajući u obzir sljedeću pripremu, te upozoriti šta se može dogoditi ako se prekrše pravila:
[email protected], shvatićemo.

Odabir kliničkog materijala vrši medicinsko osoblje u skladu sa pravilima protivepidemijskog režima, samo sa sterilnim instrumentima za jednokratnu upotrebu (špricevi, odgovarajuće sonde, citočetkice i sl.), u rukavicama za jednokratnu upotrebu.

Sakupite materijal sa odabranog lokusa što je moguće potpunije koristeći odgovarajuće aplikatore - sonde, citočetkice (kako bi se osigurala adekvatnost kliničkog uzorka).

Sačuvajte dobijeni materijal (DNK/RNA mikroorganizama) koristeći pouzdane transportne medije i konzervanse koje obezbeđuje PCR laboratorija. Medij za transport i skladištenje kliničkog materijala osigurava stabilnost RNK i DNK na sobnoj temperaturi do 28 dana.

Uzeti materijal staviti u vakuete sa EDTA (krv), u hemijski čiste Eppendorf epruvete za jednokratnu upotrebu (bris, likvor, biopsija, itd.). Glavni uslov za sakupljanje materijala je da se spreči ulazak DNaza i ribonukleaza u uzorak, jer ribonukleaze i DNaze su enzimi za razgradnju RNK i DNK. Izuzetno su stabilni u okolini, izdržavaju dugotrajno ključanje. Glavni izvor nukleaza je koža, čestice prašine. Plastične epruvete i vrhovi treba da budu označeni sa "DNase, RNase-free" (bez nukleaza).

Odmah nakon uzorkovanja, dobro zatvorite epruvete, bočice sa kliničkim materijalom, ne dodirujući njihovu unutrašnju površinu i unutrašnju površinu poklopca.

Prilikom rada s kliničkim materijalom, prilikom otvaranja epruveta, bočica, nemojte praviti nagle pokrete i izbjegavati prskanje i prskanje, što može dovesti do kontaminacije uzoraka i radnih površina.

Da biste izbjegli unakrsnu kontaminaciju, pohranite i transportirajte uzorke u posebnoj plastičnoj vrećici ili policama. Ako je potreban prijenos uzorka, koristite automatske mikropipete sa zamjenjivim vrhovima za jednokratnu upotrebu sa aerosolnim barijerama.

Prije transporta u PCR laboratoriju odabrani biomaterijal treba čuvati na temperaturi od 2-4 °C ne duže od 48 sati. Potrebno je minimizirati vrijeme od uzimanja uzorka do PCR analize. Transport uzoraka se vrši u rashladnim vrećama, termo kontejnerima, termosama sa termo vrećama, ledom ili suvim ledom.

Krv, plazma, serum

Uzimanje krvi se preporučuje korišćenjem vakuum sistema. Uvođenje ovakvih sistema omogućava standardizaciju manipulacija krvlju, pozitivno utiče na sve faze laboratorijskih istraživanja i generalno prenosi rad laboratorije na drugačiji, viši nivo kvaliteta. Njihova upotreba jamči zaštitu osoblja od infekcije, smanjuje vrijeme provedeno na proceduri uzimanja krvi, znatno je manje praćena hemolizom, omogućava održavanje sterilnosti uzoraka krvi i hermetički transport.

Venepunktura se preporučuje na prazan želudac iz kubitalne vene u specijalnu vakuumsku epruvetu sa antikoagulansom, nakon čega se epruveta nekoliko puta okreće radi miješanja. Epruvete sa krvlju se čuvaju u frižideru na temperaturi od +4 °S - +8 °S. Maksimalni rok trajanja krvi je 1 dan (ne zamrzavati!). Ako je potrebno dugotrajno skladištenje, potrebno je uzeti 1 ml seruma ili krvne plazme i čuvati na temperaturi od -16o -20oC ne duže od 2 sedmice.

Karakteristike vakuumskih sistema koji se koriste za PCR dijagnostiku:

Vakuete sa EDTA (6%) - koriste se za kvalitativna i kvantitativna istraživanja. EDTA-antikoagulant dobro fiksira ćelijske nukleinske kiseline.

Vakuete sa natrijum citratom (3,8%) koriste se za kvalitativna i kvantitativna istraživanja. Nije pogodan za dugotrajan transport, jer citrat je dobar hranljivi medij za stranu mikrofloru.

Vakuete bez antikoagulansa (krvni serum) - koriste se za kvalitativno istraživanje. Upotreba krvnog seruma za kvantitativne studije je nepoželjna, jer. dio infektivnog agensa se taloži u krvnom ugrušku, dok je mogućnost određivanja njegovog kvantitativnog sadržaja u krvi smanjena.

Vakuete s heparinom kategorički nisu prikladne za PCR reakcije. Heparin je polianion, poput DNK, pa se takmiči s DNK u PCR reakciji.

Primjer standardne operativne procedure za prijem biomaterijala u medicinski laboratorij.

NAZIV INSTITUCIJE
Vrsta dokumenta	Standardna operativna procedura (SOP)

	Upis u Jedinstveni registar laboratorijske dokumentacije	SOP-PA-01-2014
	instance
	Ukupan broj stranica
	staviti u akciju
	Validnost
Ime dokumenta	Pravila za prijem i registraciju biomaterijala u laboratoriji.

		Naziv posla
Kreirao:
Provjereno:
Dogovoreno:

Radni naslov:

	Ime
	Područje primjene

	Organizacija procesa transporta biomaterijala kurirskom službom
	Prijem biomaterijala u laboratoriju
	Transfer biomaterijala i upućivanja u relevantna odjeljenja laboratorije
	Registracija narudžbenica od strane operatera.
	Dodatak #1 Dijagram toka
	Prilog br. 2 Vrste neusaglašenosti i njihovo otklanjanje
	Dodatak br. 3 Mašina sa senzorom temperature frižidera
	Prilog br. 4 Obrazac-smjer
	Prilog br. 5. Obrazac za upoznavanje zaposlenih sa SOP-om

1 područje upotrebe

Ovim standardnim operativnim postupkom (u daljem tekstu SOP) utvrđuje se postupak prijema, registracije biomaterijala koji ulazi u laboratoriju iz proceduralne prostorije NAZIV USTANOVE i drugih institucija koje laboratorija opslužuje, kao i utvrđivanje nedosljednosti i njihovo otklanjanje.

Ovaj SOP je namijenjen laboratorijskom asistentu i operateru laboratorije.

Smjernice "Organizacija preanalitičke faze u centralizaciji laboratorijskih testova krvi" (Odobreno na Sveruskoj naučnoj i praktičnoj konferenciji "Prave kliničko-dijagnostičke laboratorijske usluge: stepen usklađenosti sa standardima laboratorijske medicine, kvaliteta, cijena i cijena" (Moskva , 2-4. oktobar 2012.)
GOST R 53079.4─2008. “Tehnologije medicinske laboratorije. Osiguravanje kvaliteta kliničkih laboratorijskih istraživanja. Dio 4. Pravila izvođenja preanalitičke faze. Stupio je na snagu 1. januara 2010. godine.
ISO 15189:2012 Medicinske laboratorije. Uslovi za kvalitet i kompetentnost"

3. Organizacija procesa transporta biomaterijala kurirskom službom i odgovornost kurira.

3.1. Temperaturu u frižideru, koja je prikazana na displeju u putničkom prostoru automobila, kurir beleži u časopisu „Dnevnik obračuna temperaturnog režima u hladnjačama automobila“, a takođe u ovom dnevniku kurir navodi njegovo puno ime, registarsku tablicu automobila i vrijeme polaska automobila na biomaterijal neposredno prije odlaska u ustanove. Ovaj časopis se nalazi u kancelariji broj ___. (Fotografija senzora temperature i fotografija obrasca dnevnika date su u Dodatku br. 3).

3.2. Kurir, po dolasku u zdravstvenu ustanovu, odlazi u registar ove ustanove, gdje preuzima kontejnere sa raznim biomaterijalima. Svaka posuda je označena nazivom ustanove i vrstom biomaterijala (krv, urin, izmet, staklena stakalca sa brisevima, struganje). Kurir postavlja kontejnere u vodoravni položaj u frižideru mašine, kao što je prikazano na fotografiji.

3.3. Kurir je odgovoran za integritet kontejnera, njihovu sigurnost, za osiguranje odgovarajuće temperature u frižideru automobila (+4 - +8°C), kao i za sigurnost biomaterijala koji se dostavlja iz ustanova u laboratoriju. . Tokom putovanja, kurir prati temperaturu u frižideru automobila, koja se prikazuje na displeju instaliranom u automobilu.

4. Prijem biomaterijala u laboratoriju.

4.1 Temperatura, koja je prikazana na displeju u frižideru automobila u trenutku uklanjanja kontejnera, kurir beleži u časopisu "Dnevnik temperaturnog režima u hladnjačama automobila" u odgovarajućoj koloni na državni broj automobila. I također u istom dnevniku vozač označava vrijeme dolaska automobila sa biomaterijalom iz institucija.

4.2. Označene posude sa uzorcima krvi, brisevima i struganjima kurir predaje medicinskom laboratorijskom pomoćniku u sobu br. ___.

4.3. Kurir prosljeđuje označene posude sa urinom i izmetom do bolničara-laboranta u ordinaciji br. ___.

4.4. U ordinaciji broj ___, bolničar otvara poklopac posude i vadi epruvete sa krvlju, stakalca sa razmazima i struganjima, fascikle sa uputstvima za istraživanje.

4.5. Bolničar razvrstava epruvete odvojeno u police, prema vrsti epruveta (biohemijske, hematološke i koagulološke) i nazivima ustanova koje su naznačene na policama.

4.6. U prostoriji #____, laboratorijski asistent vadi uzorke iz posude sa urinom, izmetom i uputnicama.

5. Transfer biomaterijala i upućivanje u relevantna odjeljenja laboratorije.

5.1 U ordinaciji broj ____, bolničar-laborant stavlja police sa epruvetama za biohemijske, imunološke, koagulološke studije u kontejnere sa oznakom „za prenošenje biomaterijala“ i odnosi ih u prostoriju br. ___ na centrifugiranje.

5.2 Laborant paramedicine poziva odjeljenja za hematologiju i PCR kako bi paramedicinski laboratorijski asistenti sa odgovarajućih odjeljenja uzeli biomaterijal iz sobe br. ___

5.3. Bolničar-laborant šalje upute za istraživanje iz sobe br. ___ operaterima u sobi br. ____ radi registracije.

5.4 U kabinetu broj ___, bolničar-laborant predaje upute operaterima, koji prijavljuju obrasce u istoj ordinaciji.

6. Registracija narudžbenica od strane operatera.

6.1. Operateri u ordinaciji broj ___, nakon što su dobili uputnice od laboratorijskog asistenta iz kabineta broj ___, registruju ih u laboratorijskom informacionom sistemu.

Procedura registracije:

Operater čita bar kod skenerom nalijepljenim na formular - smjer;

Zatim operater u LIS unosi podatke o putovnici pacijenta: puno ime, datum rođenja, adresu stanovanja i druge podatke: izvor naloga (obavezno zdravstveno osiguranje, VHI, gotovina, ljekarski pregled), broj ustanove, odjel, puni naziv ljekar koji je naručio studiju, dijagnozu, MES šifru (medicinsko-ekonomski standard).

Nakon toga, operater u LIS unosi one indikatore koje je liječnik propisao, a generirani nalog pohranjuje u LIS. Obrazac-smjer je dat u Dodatku br. 4.

Aplikacija br. 2

AT vrste neusaglašenosti i njihovo otklanjanje

Vrsta neusklađenosti	Opis radnji	Izvršitelj	Odgovorno
Povreda integriteta kontejnera	Prijavite to višem laboratorijskom asistentu	laboratorijski asistent	Senior Assistant
Nedostatak uputnica za istraživanje u kontejneru	Bolničar-laborant o tome izvještava višeg laboratorijskog asistenta, koji mora kontaktirati višeg medicinskog referenta putem telefona. Sestra ove institucije	laboratorijski asistent	Senior Assistant
Prolivanje biološkog materijala u kontejner	1. Prijavite ovo višem laboratorijskom asistentu u laboratoriji 2. Pažljivo uklonite sav sadržaj iz posude 3. Dezinfikujte samu posudu i ceo sadržaj kontejnera koji je došao u kontakt sa prosutim biomaterijalom.	laboratorijski asistent	Senior Assistant
Oštećen smjer forme (pocijepan, sadržaj kontejnera prosut, itd.)	1. Laborant, ako je smjernica čitljiva, sve podatke prenosi u novi obrazac. 2. U slučaju nečitljivih uputstava, bolničar-laborant obavještava višeg laboratorijskog asistenta, koji kontaktira starešina med. Sestra ustanove.	laboratorijski asistent	Senior Assistant
Slomljeni tobogan(i) u kontejneru	Bolničar-laborant o tome izvještava višeg laboratorijskog asistenta, koji mora kontaktirati višeg medicinskog referenta putem telefona. Sestra ove institucije i prijavi ovu neslaganje	laboratorijski asistent	Senior Assistant

Nema bar koda na tubi

1. O tome bolničar-laborant obavještava višeg laboratorijskog asistenta, koji se mora obratiti višem medicinskom referentu putem telefona. Sestra ove institucije i prijavi ovu nedosljednost.

2. Ovu neusklađenost upisuje bolničar-laborant u upisnik "Matične knjige braka"

laboratorijski asistent

Senior Assistant

Obrazac-smjer, izdat u pogrešnom obliku

1. Medicinsko-laborantski asistent o tome izvještava višeg laboratorijskog asistenta, koji mora kontaktirati višeg medicinskog referenta putem telefona. Sestra ove institucije

2. Paramedicinsko-laborant upisuje ovu neusklađenost u upisnik "Izjava braka"

3. Sledećeg dana, lekar-laborant šalje ovu uputnicu u ustanovu iz koje je došao, da lekar prepiše uputnicu u čitljivom obliku.

laboratorijski asistent

Senior Assistant

Aplikacija br. 3

senzor temperature frižidera mašine

U ovom aneksu je također korisno dati obrazac dnevnika koji vozač mora popuniti.

U narednim aneksima dat je obrazac obrasca uputnice, itd.

Pravila za uzimanje uzoraka krvi za određivanje mutacija u ljudskim genima PCR dijagnostika

Krv za PCR dijagnostiku. Krv se na prazan želudac uzima iglom za jednokratnu upotrebu (prečnika 0,8-1,1 mm) iz kubitalne vene u špric za jednokratnu upotrebu zapremine 2-5 ml i prenosi u epruvetu sa EDTA-om ili specijalnim vakuum sistemom “ Veccuette” (sa EDTA sa lila čepom), epruveta se zatvara čepom i okreće se nekoliko puta (za mešanje sa antikoagulansom).

Epruveta sa krvlju čuva se u frižideru na +4°C do ispitivanja. — +8°S. Maksimalni rok trajanja: Krv prikupljena u EDTA epruveti za utvrđivanje mutacija u genimaBRCA1/2, može se pohraniti na+4°S — +8°S 2 dana.

Pravila za vađenje krvi za određivanje PCR - studije infekcija

Za dobijanje plazme krv se uzima na prazan želudac ili 3 sata nakon obroka iz kubitalne vene iglom za jednokratnu upotrebu (prečnika 0,8-1,1 mm) u poseban vakuum sistem (lila kapice - 6% EDTA). Epruveta se zatvori poklopcem i nekoliko puta lagano okrene naopako kako bi se krv u epruveti temeljito pomiješala s antikoagulansom (inače će se krv zgrušati i izolacija DNK/RNA će postati nemoguća).

Heparin se ne smije koristiti kao antikoagulant!

Uslovi skladištenja i transporta materijala i prethodno obrađenih uzoraka

Uzorci pune krvi: - na temperaturi od 20-25ºS - u roku od 2 sata; - na temperaturi od 2-8ºS - u roku od 6 sati od trenutka uzimanja materijala za kvantitativno određivanje nukleinskih kiselina; u roku od 12 sati - za kvalitativno određivanje nukleinskih kiselina;

Nemojte zamrzavati uzorke pune krvi!

Uzorkovanje materijala za PCR HPV infekcije

Za istraživanje HPV-a neophodan je dovoljan broj epitelnih ćelija, jer. virus je intracelularni agens. Umjereno prisustvo nečistoća u obliku cervikalne sluzi i krvi je prihvatljivo. U nekim slučajevima moguće je uzeti materijal pomoću univerzalne ginekološke sonde, međutim, u ovom slučaju volumen iscjetka za struganje bit će manji, a broj ćelija može biti nedovoljan.

Sluz i vaginalni iscjedak uklanjaju se sa površine cerviksa sterilnim gazom, radni dio citočetkice se ubacuje u cervikalni kanal i dva ili tri puna okreta u smjeru kazaljke na satu. Citočetkica se uklanja i njen radni dio koji sadrži uzeti materijal stavlja se u epruvetu sa transportnim medijem. Radni dio citočetkice se odlomi za najviše 1 cm plastične osnove citočetkice i ostavi u epruveti sa transportnim medijem.

Ako je nemoguće odlomiti radni dio citočetkice ili univerzalne sonde, klinički materijal treba isprati što je moguće potpunije iz njihovog radnog dijela u epruvetu sa transportnim medijem, pritiskajući je na unutrašnju stranu epruvete i rotirajući je 5-10 puta u smjeru kazaljke na satu i suprotno od kazaljke na satu.

Neprihvatljivo je koristiti višekratne škare za rezanje radnog dijela citočetke ili univerzalne sonde - to može dovesti do unakrsne kontaminacije kliničkim materijalom i, kao rezultat, lažno pozitivnih rezultata.

Epruvete sa biološkim materijalom čuvaju se u zamrzivaču na -16°C do ispitivanja.

Uzorkovanje materijala za PCR dijagnostiku kod muškaraca

struganje (razmazati). Materijal se uzima univerzalnom sondom iz uretre. Po potrebi se uzima materijal za istraživanje genitalnih ulkusa (studija za HSV-II). Radni dio sonde koji sadrži ispitni materijal se odsiječe ili odlomi i stavi u jednokratnu Eppendorf epruvetu s otopinom konzervansa ili se temeljito promiješa rotacijskim pokretom, istisne preostalu tekućinu na sondi uz stijenke epruvete. , izvadite sondu (bacite je u posudu sa rastvorom za dezinfekciju).

Epruvete sa biološkim materijalom čuvaju se u zamrzivaču na -18°C do ispitivanja.

Sperma. Sakupljeno u suhu tubu za jednokratnu upotrebu tipa "Eppendorf". Maksimalni rok trajanja je 1 dan u frižideru na temperaturi od +4°C - +8°C; na -18°S - -20°S ne duže od 2 sedmice.

sok od prostate . Nakon masaže prostate, sok u količini od 0,5-1 ml skuplja se u jednokratnu suhu epruvetu tipa Eppendorf. Ako je nemoguće doći do soka, odmah nakon masaže sakupi se prva porcija urina (koja sadrži sok prostate) u količini od 10 ml.

Maksimalni rok trajanja je 1 dan u frižideru na temperaturi od +4°C - +8°C; na -18°S - -20°S ne duže od 2 sedmice.

Sprovođenje PCR studija je dozvoljeno na osnovu postojećih laboratorija, uz organizaciju u laboratoriji samostalnih ili odvojenih radnih prostora u sklopu drugih funkcionalnih prostorija, koje odgovaraju fazama PCR analize.

PCR laboratorija treba da sadrži sljedeći minimalni skup radnih područja:

prijem, registracija, analiza i primarna obrada materijala;
izolacija DNK/RNA;
priprema reakcionih smjesa i PCR;
detekcija produkata amplifikacije elektroforezom ili HyFA.

Važno je napomenuti da u slučaju korištenja metode nema potrebe za detekcijom produkata amplifikacije elektroforezom. Stoga se radni prostor u laboratoriji za elektroforezu ne može dodijeliti.

U PCR laboratorijama također je potrebno osigurati prisustvo pomoćnih prostorija: arhiva (za računovodstvene dokumente), prostorija za osoblje, kancelarija direktora, svlačionice za zaposlene, trpezarija, sanitarne prostorije (wc), pomoćne prostorije (skladište).

U idealnom slučaju, prostorija za autoklav bi trebala biti dostupna za dekontaminaciju ispitnog materijala. Može se dijeliti sa drugim odjelima ustanove, u skladu sa zahtjevima biosigurnosti.

Prostorije za obavljanje poslova u fazama PCR analize treba da budu zatvorene (kutije sa preboksovima). U oblasti prijema, evidentiranja, analize i primarne obrade materijala vrši prijem materijala, pripremu uzoraka (sortiranje, označavanje, centrifugiranje itd.), skladištenje i primarnu inaktivaciju ostataka biomaterijala dezinficijensima. Prostor za prijem, registraciju, analizu i primarnu obradu materijala nalazi se u prostoriji za prijem materijala ili u posebnoj boksovanoj prostoriji. Ovdje također možete primati i obraditi uzorke za istraživanje drugim metodama (imunološki, na primjer), pod uslovom da je odvojeno opremljeno radno mjesto za PCR analizu.

Zona ekstrakcije DNK/RNA smeštene u posebnu prostoriju. Prilikom organizovanja PCR laboratorije na bazi postojeće laboratorije, dozvoljeno je izolovati DNK/RNA u prostorijama u kojima se provode druge vrste istraživanja, osim za poslove genetskog inženjeringa. U ovom slučaju, u prostoriji je organizovan radni prostor za ekstrakciju DNK/RNA u kojem se nalazi PCR boks ili biološki sigurnosni boks. U PCR kutiji za ekstrakciju DNK/RNA nije dozvoljen nikakav drugi rad!

U oblasti pripreme reakcionih smeša i PCR pripremiti PCR smjesu, dodati izolovane DNK/RNA ili cDNK preparate u PCR epruvetu, reverznu transkripciju RNK i amplifikaciju DNK ili cDNK. Prostorija za pripremu reakcionih smjesa i PCR treba biti odvojena. Priprema reakcionih PCR smeša se vrši u PCR kutiji.

Po potrebi se faza izolacije DNK/RNA može kombinovati u istoj prostoriji sa fazom pripreme reakcionih smjesa i PCR-a, ako ima odvojene PCR kutije - za pripremu reakcijskih PCR smjesa i za izolaciju DNK/RNA.

Zona za detekciju produkata pojačanja smješteni u posebnu prostoriju, ako je moguće opremljenu PCR kutijom. Ako je potrebno istovremeno koristiti metodu elektroforeze i metodu analize hibridizacije za detekciju produkata amplifikacije, u prostoriji za detekciju treba izdvojiti poseban radni prostor za analizu hibridizacije. U ovom slučaju, oprema i pribor za svaku vrstu detekcije su označeni za svaku zonu. Za analizu hibridizacije nije dozvoljeno koristiti pipete i posude namijenjene za elektroforezu.

Planske odluke i postavljanje opreme treba da obezbede tok kretanja materijala koji se proučava. Izmjena zraka između prostorije za detekciju produkata pojačanja i drugih prostorija treba biti potpuno isključena.

PCR laboratorija će biti opremljena vodovodom, kanalizacijom, strujom i grijanjem. Sve prostorije PCR laboratorije imaju dovoljno prirodnog i vještačkog osvjetljenja.

Prilikom izgradnje novih ili rekonstrukcije postojećih PCR laboratorija, prostorije su opremljene dovodno-ispušnom ili ispušnom ventilacijom. Razlika u pritisku vazduha u prostorijama PCR laboratorije postiže se zbog razlike u razmeni vazduha u njima. Brzina izmjene zraka mora odgovarati vrijednostima navedenim u tabeli:

Po potrebi se mogu ugraditi klima uređaji u PCR laboratoriju.

Unutrašnje uređenje prostorija izvodi se u skladu s njihovom funkcionalnom namjenom. Površine zidova, podova i plafona u laboratorijskim prostorijama treba da budu glatke, bez pukotina, lako se obrađuju, otporne na deterdžente i dezinfekciona sredstva. Podovi ne smiju biti klizavi. Laboratorijski namještaj treba imati premaz koji je otporan na deterdžente i dezinficijense. Površina stolova ne bi trebala imati pukotine i šavove. Laboratorijski prostori moraju biti nepropusni za glodare i insekte. PCR laboratorija je opremljena opremom za gašenje požara.