Ang mga stellate cells ng atay ay nabuo mula sa. Maaari bang ang mga perisinusoidal cells ay mga regional liver stem cell? Pag-aaral sa epekto ng liver Ito cells sa stem cells


1

Ang isang ultrastructural, immunohistochemical at morphometric na pagsusuri ng populasyon ng stellate cell ng atay sa dinamika ng pag-unlad ng fibrosis at cirrhosis ng nakakahawang viral na pinagmulan ay isinagawa. Ang fibrogenic activation ng mga stellate cell ng atay ay ipinahayag, na kung saan ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagbawas ng mga patak ng lipid at kasabay na pagpapahayag ng mga katangian na tulad ng fibroblast - isang positibong immunohistochemical reaksyon sa makinis na kalamnan α-actin, hyperplasia ng butil na cytoplasmic reticulum, at pericellular formation ng maraming collagen fibrils. Ipinakita na, sa kabila ng progresibong pagbaba sa bilang ng density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid sa panahon ng pag-unlad ng fibrosis, ang pangangailangan na mapanatili ang pag-andar ng pag-aalis ng mga retinoid ay nananatili - sa cirrhosis ng atay, ang mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay natagpuan sa fibrous septa at sa loob ng lobules. Napagpasyahan na ang mga stellate cell ng atay ay isang polymorphic heterogenous na populasyon na may malawak na spectrum ng functional na aktibidad.

fibroogenesis

stellate cells ng atay

ultrastructure

immunohistochemistry

1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Ang papel ng hepatic stellate cells sa pagbabagong-buhay ng atay // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 1023–1026.

2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Liver cirrhosis at hepatic stellate cells // Acta Cirúrgica Brasileira. - 2006. - Vol. 21. – P. 54–57.

3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Pag-uuri ng talamak na hepatitis: Diagnosis, grading at staging // Hepatology. - 1994. - Vol. 19. - P. 1523-1520.

4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Liver fibrosis: Mga senyales na humahantong sa pagpapalakas ng fibrogenic hepatic stellate cell // Front. Biosc. - 2003. - Vol. 8. – P. 69–77.

5. Geerts A. Sa pinagmulan ng mga stellate cells: mesodermal, endodermal o neuro-ectodermal? // J. Hepatol. - 2004. - Vol. 40. – P. 331–334.

6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Liver fibrosis: paghahanap ng mga sagot sa modelo ng cell // Liver Intern. - 2007. - Vol. 10. – P. 434–439.

7. Kisseleva T., Brenner D.A. Ang papel ng hepatic stellate cells sa fibrogenesis at ang pagbabalik ng fibrosis // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2007. - Vol. 22.–P. S73–S78.

8. Ryder S.D. Pag-unlad ng hepatic fibrosis sa mga pasyente na may hepatitis C: isang prospective na pag-aaral ng biopsy sa atay // Gut. - 2004. - Vol. 53. – P. 451–455.

9. Schuppan D., Afdhal N.H. Cirrhosis ng atay // Lancet. - 2008. - Vol. 371. - P. 838-851.

10. Senoo H. Istraktura at pag-andar ng hepatic stellate cells // Med. elektron. microsc. - 2004. - Vol. 37. – P. 3–15.

Ang mga stellate cell ng atay (lipocytes, Ito cells, fat-accumulating liver cells) ay naisalokal sa mga puwang ng Disse sa pagitan ng mga hepatocytes at ng endothelial lining ng sinusoid at gumaganap ng isang nangungunang papel sa regulasyon ng retinoid homeostasis, na nagdedeposito ng hanggang 80% ng bitamina A . Ang espasyo ng Disse ay ang lugar ng pinakamalaking responsibilidad sa pagganap, na nagbibigay ng transsinusoidal exchange. Gamit ang mga pang-eksperimentong modelo at sa kultura ng cell, ipinakita na ang mga hepatic stellate cells ay naiba sa malalaking cytoplasmic lipid droplet na naglalaman ng bitamina A; ang phenotype na ito ay binibigyang kahulugan bilang "pagpapahinga".

Ang pagtaas ng kahalagahan ay nakakabit sa papel ng mga stellate cells sa pagbuo ng fibrosis at cirrhosis ng atay. Sa pagtanggap ng fibrogenic stimuli, "nagpapahinga" ang mga stellate cells na "transdifferentiate", nakakakuha ng myofibroblast-like phenotype, at nagsimulang gumawa ng collagen, proteoglycans, at iba pang bahagi ng extracellular matrix. Fibrosis sa antas ng gitnang veins, sinusoids o portal vessels nililimitahan ang normal na hemodynamics ng atay, na humahantong sa isang pagbawas sa metabolically mahusay na parenkayma, karagdagang - portal hypertension at porto-systemic shunting. Ang akumulasyon ng connective tissue sa mga puwang ng Disse ay nakakagambala sa normal na metabolic na trapiko sa pagitan ng dugo at mga hepatocytes sa pamamagitan ng pag-abala sa clearance ng circulating macromolecules, pagbabago ng intercellular interaction, at humahantong sa liver cell dysfunction.

May mga magkasalungat na opinyon kung ang mga naka-activate na stellate cell ay makakabalik sa isang resting phenotype. May nakuhang ebidensya na ang liver fibrogenic stellate cells ay maaaring bahagyang i-level ang proseso ng pag-activate, halimbawa, kapag nalantad sa mga retinoid o kapag nakikipag-ugnayan sa mga bahagi ng extracellular matrix, kabilang ang type I fibrillar collagen o mga bahagi ng basement membrane. Ang solusyon sa isyung ito ay sumasailalim sa problema ng reversibility ng fibrosis at ang pagbuo ng mga therapeutic approach sa paggamot ng liver cirrhosis.

Layunin ng pag-aaral- upang magsagawa ng isang komprehensibong pag-aaral ng mga istruktura at functional na mga tampok ng mga stellate cell ng atay sa dinamika ng mga fibrotic na pagbabago sa isang modelo ng talamak na impeksyon sa HCV.

Mga pamamaraan ng materyal at pananaliksik

Ang isang komprehensibong light-optical, electron-microscopic at morphometric na pag-aaral ng liver biopsy specimens sa talamak na impeksyon sa HCV sa iba't ibang yugto ng fibrotic na pagbabago ay isinagawa (100 sample na hinati sa 4 na pantay na grupo ayon sa kalubhaan ng fibrosis). Mahalagang tandaan na ang mga lipid-containing stellate cells ay pinakamahusay na nakikita sa mga semi-thin na seksyon, fibrogenic stellate cells - sa mga ultra-manipis na seksyon lamang o gumagamit ng immunohistochemical imaging.

Ang mga sample ng atay ay naayos sa isang 4% na solusyon ng paraformaldehyde na pinalamig sa 4°C, na inihanda sa phosphate buffer ng Millonig (pH 7.2-7.4); Ang mga seksyon ng paraffin ay nabahiran ng hematoxylin at eosin kasama ang reaksyon ng Perls, ayon kay van Gieson na may karagdagang paglamlam ng nababanat na mga hibla na may Weigert's resorcinol fuchsin, at isang reaksyon ng PAS ang isinagawa. Ang mga semi-manipis na seksyon ay nabahiran ng Schiff's reagent at azure II. Ang pag-aaral ay isinagawa sa isang Leica DM 4000B universal microscope (Germany). Ang mga micrograph ay kinuha gamit ang isang Leica DFC 320 digital camera at Leica QWin software. Ang mga ultrathin na seksyon na na-counterstain ng uranyl acetate at lead citrate ay sinuri sa isang JEM 1010 electron microscope sa isang accelerating na boltahe na 80 kW.

Ang yugto ng fibrosis ng atay ay tinutukoy sa isang 4-point scale, mula sa portal fibrosis (yugto I) hanggang sa cirrhosis na may pagbuo ng porto-central vascularized septa at nodular transformation ng parenchyma. Ang mga selula ng stellate ng atay at iba pang mga elemento ng cellular na gumagawa ng matrix ay nakita sa dinamika ng fibrosis sa pamamagitan ng pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin.

Ang pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin sa mga selula ng atay na gumagawa ng matrix ay nasubok gamit ang isang dalawang-hakbang na hindi direktang paraan ng immunoperoxidase na may negatibong kontrol na streptavidin-biotin imaging system para sa mga produkto ng reaksyon. Ang mga pangunahing antibodies na ginamit ay ang mouse monoclonal antibodies sa makinis na kalamnan na α-actin (NovoCastra Lab. Ltd, UK) na diluted 1:25; bilang pangalawang antibodies - unibersal na biotinylated antibodies. Ang mga produkto ng immunohistochemical reaction ay na-visualize gamit ang diaminobenzidine, pagkatapos ay ang mga seksyon ay na-counterstain ng Mayer's hematoxylin. Ang bilang ng density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay nasuri sa mga semi-manipis na seksyon sa isang visual field unit na 38,000 µm2. Para sa pagpoproseso ng istatistikal na datos, ginamit ang t-test ng Mag-aaral; ang mga pagkakaiba sa inihambing na mga parameter ay itinuturing na makabuluhan kung ang posibilidad ng error P ay mas mababa sa 0.05.

Mga resulta ng pananaliksik at talakayan

Sa kaunting mga pagbabago sa fibrotic sa atay ng mga pasyente na may talamak na hepatitis C, bilang isang panuntunan, ang isang medyo malaking bilang ng mga stellate cell ay matatagpuan, na malinaw na nakikita lamang sa mga semi-manipis at ultra-manipis na mga seksyon at naiiba sa mga puwang ng Disse sa pamamagitan ng pagkakaroon ng malalaking patak ng lipid sa cytoplasm. Ang pagbabagong-anyo ng mga stellate cell mula sa "resting", na naglalaman ng mga retinoid, sa mga fibrogenic ay sinamahan ng isang unti-unting pagbaba sa bilang ng mga lipid droplet. Kaugnay nito, ang tunay na bilang ng mga stellate cells ay maaaring matukoy gamit ang isang komprehensibong electron microscopic at immunohistochemical study.

Sa mga unang yugto ng fibrosis (0, I) sa talamak na hepatitis C, kapag nag-aaral ng mga semi-manipis na seksyon, ang populasyon ng mga stellate cell ng atay ay nakikilala sa pamamagitan ng binibigkas na polymorphism - ang laki, hugis, bilang ng mga patak ng lipid at ang kanilang mga katangian ng tinctorial ay iba-iba nang husto. : pagkakaiba sa osmiophilicity ng materyal na naglalaman ng lipid sa iba't ibang mga cell. Ang bilang ng density ng mga stellate cells ng atay, na nakikita sa paghahanda sa pamamagitan ng pagkakaroon ng cytoplasmic lipid droplets, ay 5.01 ± 0.18 bawat yunit ng visual field.

Ang mga tampok ng ultrastructure ng stellate cells ay nauugnay sa heterogeneity ng electron density ng lipid droplets hindi lamang sa loob ng parehong cell, kundi pati na rin sa pagitan ng iba't ibang lipocytes: ang isang mas osmiophilic marginal rim ay nakatayo laban sa background ng isang electron-transparent lipid substrate; bilang karagdagan, ang nuclei ay mahigpit na polymorphic, at ang haba ng mga proseso ng cytoplasmic ay iba-iba. Kabilang sa mga ultrastructural na tampok ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid, kasama ang pagkakaroon ng mga patak ng lipid, mapapansin ng isang tao ang isang napakaliit na halaga ng cytoplasmic matrix, mahirap sa mga organelle ng lamad, kabilang ang mitochondria, at samakatuwid, tila, ang phenotype ng lipocytes na ito ay tinatawag na " nagpapahinga" o "passive" .

Sa mga yugto ng fibrosis II at III, ang ultrastructure ng karamihan sa mga stellate cells ay nakakuha ng tinatawag na mixed o transitional phenotype - ang sabay-sabay na pagkakaroon ng morphological features ng parehong lipid-containing at fibroblast-like cells. Sa gayong mga lipocytes, ang nuclei ay nagkaroon ng malalim na invaginations ng nucleolemma, isang mas malaking nucleolus, at isang pagtaas ng dami ng cytoplasm na nagpapanatili ng mga patak ng lipid. Kasabay nito, ang bilang ng mitochondria, libreng ribosomes, polysomes, at tubules ng granular cytoplasmic reticulum ay tumaas nang husto. Bilang isang patakaran, mayroong isang lamad na kontak ng mga patak ng lipid at mitochondria, na nagpapahiwatig ng "paggamit" ng mga lipid. Sa maraming mga cell, ang pagkasira ng mga patak ng lipid ay isinasagawa sa pamamagitan ng pagbuo ng mga autophagosome, na pagkatapos ay tinanggal ng exocytosis. Sa ilang mga kaso, ang paglaganap ng mga stellate cells ng isang halo-halong phenotype ay nabanggit.

Ang mga selulang stellate na gumagawa ng matrix, ang pinakamarami sa yugto ng cirrhosis ng atay, ay nailalarawan sa pamamagitan ng kumpletong kawalan ng mga butil ng lipid, isang anyo na tulad ng fibroblast, isang binuo na kompartimento ng synthesizing ng protina, at ang pagbuo ng mga contractile fibrillar na istruktura sa cytoplasm; pericellularly sa mga puwang ng Disse, maraming mga bundle ng collagen fibrils na may isang tiyak na transverse striation ay naisalokal.

Sa pangkalahatan, sa panahon ng pag-unlad ng talamak na hepatitis C, na sinamahan ng intralobular perisinusoidal fibrogenesis, mayroong mga morphological na palatandaan ng pag-activate ng mga selula ng stellate ng atay, ang kanilang pagbabago mula sa tinatawag na "passive", na nag-iipon ng bitamina A, sa fibrogenic at proliferating na mga cell.

Sa yugto ng pagbabagong-anyo sa cirrhosis ng atay, nagkaroon ng makabuluhang pagbaba sa numerical density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid, na nagpapahiwatig ng kanilang pagbabagong fibrogenic. Gayunpaman, sa kaso ng nabuo na cirrhosis ng atay, sa mga nakahiwalay na kaso, mayroong mga lugar ng parenchyma ng atay na may perisinusoidal lipid-containing stellate cells. Bilang karagdagan, sa isang sample, maraming lipocytes ang natagpuan sa periportal fibrous tissue, na malamang na nagpapahiwatig ng mahalagang papel ng mga stellate cells sa metabolismo ng mga retinoid sa katawan, kahit na sa yugto ng organ cirrhosis. Bilang karagdagan, ang mga stellate cell ay tila may maraming iba pang mga function, sila ay matatagpuan din sa mga extrahepatic na organo tulad ng pancreas, baga, bato at bituka, at mayroong isang opinyon na ang hepatic at extrahepatic stellate cells ay bumubuo ng isang disseminated stellate cell system ng ang katawan, katulad ng APUD system. Halimbawa, sa kabila ng pagkakaugnay ng fibrogenic stellate cells na may liver cirrhosis, ang kanilang activation ay maaaring maglaro ng isang kapaki-pakinabang na papel sa mga kaso ng matinding pinsala, dahil ang resulta ay isang naaangkop na stromal circuit para sa pagbabagong-buhay ng mga parenchymal cells.

Ang kalubhaan ng perihepatocellular fibrosis sa talamak na impeksyon sa HCV, ayon sa morphometric analysis, ay may makabuluhang kabaligtaran na ugnayan sa numerical density ng lipid-containing stellate cells - sa yugto ng fibrosis III at may organ cirrhosis, ito ay 0.20 ± 0.03 bawat visual field yunit, na mas kaunti (p< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).

Ang fibrogenic na aktibidad ng mga selula ng atay na gumagawa ng matrix ay sinubukan namin gamit ang isang immunohistochemical na pag-aaral sa pagpapahayag ng makinis na kalamnan na alpha-actin. Ang mga produkto ng immunohistochemical reactions ng iba't ibang intensity ay natagpuan sa cytoplasm ng activated stellate cells na naisalokal sa loob ng hepatic lobules. Lalo na ang makabuluhang pagpapahayag ng makinis na kalamnan na α-actin ay nabanggit sa cytoplasm ng fibroblast at myofibroblast ng mga portal zone, makinis na mga selula ng kalamnan ng mga sisidlan at myofibroblast sa paligid ng mga gitnang ugat.

Karamihan sa mga data sa mga mekanismo ng cellular ng fibrogenesis ay nagmumula sa mga pag-aaral na isinagawa sa mga hepatic stellate cells, gayunpaman, malinaw na ang iba't ibang mga cell na gumagawa ng matrix (bawat isa ay may isang tiyak na lokalisasyon, immunohistochemical at ultrastructural phenotype) ay nag-aambag sa pagbuo ng hepatic fibrosis. Kasama sa mga ito ang mga fibroblast at myofibroblast ng mga portal tract, mga selula ng makinis na kalamnan ng vascular, at mga myofibroblast sa paligid ng mga sentral na ugat, na naisaaktibo sa setting ng talamak na pinsala sa atay.

Konklusyon

Ang papel na ginagampanan ng mga selula ng stellate ng atay sa pagbuo ng organ fibrosis sa talamak na hepatitis C ay ipinakita. Sa pag-unlad ng fibrosis, ang numerical density ng mga selulang stellate na naglalaman ng lipid ay makabuluhang bumababa, habang ang bahagi ng populasyon ay nagpapanatili ng tinatawag na "resting." "phenotype para sa metabolic function. Ang "Myofibroblast-like" na mga stellate cells sa isang estado ng fibrogenic activation ay nailalarawan sa pamamagitan ng mga sumusunod na istruktura at functional na mga tampok: isang pagbaba sa bilang at kasunod na pagkawala ng mga patak ng lipid, hyperplasia ng granular cytoplasmic reticulum at mitochondria, focal proliferation, immunohistochemical expression ng mga katangiang tulad ng fibroblast, kabilang ang makinis na kalamnan na α-actin, at ang pagbuo ng pericellular collagen fibrils sa mga espasyo ng Disse.

Kaya, ang mga stellate cells ng atay ay hindi isang static, ngunit isang dinamikong populasyon na direktang kasangkot sa remodeling ng intralobular perihepatocellular matrix.

Mga Reviewer:

Vavilin V.A., Doktor ng Medical Sciences, Propesor, Head. Laboratory of Drug Metabolism, Research Institute of Molecular Biology at Biophysics, Siberian Branch ng Russian Academy of Medical Sciences, Novosibirsk;

Kliver E.E., Doctor of Medical Sciences, Nangungunang Mananaliksik, Laboratory of Pathomorphology at Electron Microscopy, Novosibirsk Research Institute of Circulatory Pathology na ipinangalan sa akademikong E.N. Meshalkin ng Ministry of Health at Social Development ng Russian Federation, Novosibirsk.

Ang gawain ay natanggap ng mga editor noong Agosto 15, 2011.

Bibliograpikong link

Postnikova O.A., Nepomnyashchikh D.L., Aidagulova S.V., Vinogradova E.V., Kapustina V.I., Nokhrina Zh.V. STRUCTURAL AT FUNCTIONAL NA KATANGIAN NG STELLATED LIVER CELLS SA DYNAMICS OF FIBROSIS // Pangunahing Pananaliksik. - 2011. - Hindi. 10-2. – P. 359-362;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28817 (petsa ng access: 01/30/2020). Dinadala namin sa iyong pansin ang mga journal na inilathala ng publishing house na "Academy of Natural History"

Nangungunang - Schematic na representasyon ng Ito cell (HSC) sa kapitbahayan ng pinakamalapit na hepatocytes (PC), sa ibaba ng sinusoidal liver epithelial cells (EC). S - atay sinusoid; KC - Kupffer cell. Kaliwa sa ibaba - Ito mga cell sa kultura sa ilalim ng isang light mikroskopyo. Kanan sa ibaba - Ang electron microscopy ay nagpapakita ng maraming fat vacuoles (L) ng Ito cells (HSCs) na nag-iimbak ng mga retinoid.

Ito cell(kasingkahulugan: stellate cell ng atay, cell ng imbakan ng taba, lipocyte, Ingles Hepatic Stellat Cell, HSC, Cell ng Ito, Ito cell) - ang mga pericyte na nakapaloob sa, ay maaaring gumana sa dalawang magkaibang estado - kalmado at activated. Naka-activate na mga cell ng Ito may malaking papel sa pagbuo ng scar tissue sa pinsala sa atay.

Sa isang buo na atay, ang mga stellate cell ay matatagpuan sa kalmadong estado. Sa ganitong estado, ang mga cell ay may ilang mga outgrowth na pumapalibot sa sinusoidal capillary. Ang isa pang natatanging tampok ng mga cell ay ang pagkakaroon sa kanilang cytoplasm ng mga reserba ng bitamina A (retinoid) sa anyo ng mga fat droplet. Ang mga tahimik na Ito na selula ay bumubuo ng 5-8% ng lahat ng mga selula ng atay.

Ang mga outgrowth ng Ito cell ay nahahati sa dalawang uri: perisinusoidal(subendothelial) at interhepatocellular. Ang mga una ay umalis sa cell body at umaabot sa ibabaw ng sinusoidal capillary, na tinatakpan ito ng manipis na mga sanga na hugis daliri. Ang mga perisinusoidal outgrowth ay natatakpan ng maikling villi at may katangiang mahabang microprotrusions na umaabot pa sa ibabaw ng capillary endothelial tube. Ang mga interhepatocellular outgrowth, na nagtagumpay sa plato ng mga hepatocytes at naabot ang kalapit na sinusoid, ay nahahati sa ilang mga perisinusoidal outgrowth. Kaya, ang Ito cell ay sumasaklaw, sa karaniwan, bahagyang higit sa dalawang katabing sinusoid.

Kapag nasira ang atay, nagiging Ito ang mga selula naka-activate na estado. Ang activated phenotype ay nailalarawan sa pamamagitan ng paglaganap, chemotaxis, contractility, pagkawala ng retinoid stores, at produksyon ng myofibroblastic-like na mga cell. Ang mga activated liver stellate cells ay nagpapakita rin ng mas mataas na antas ng mga bagong gene gaya ng ICAM-1, chemokines at cytokine. Ang pag-activate ay nagpapahiwatig ng simula ng isang maagang yugto ng fibrogenesis at nauuna ang pagtaas ng produksyon ng mga protina ng ECM. Ang pangwakas na yugto ng pagpapagaling sa atay ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagtaas ng apoptosis ng mga aktibong selulang Ito, bilang isang resulta kung saan ang kanilang bilang ay nabawasan nang husto.

Ginagamit ang paglamlam ng gintong chloride upang mailarawan ang mga selula ng Ito sa ilalim ng mikroskopya. Naitatag din na ang isang maaasahang marker para sa pagkita ng kaibahan ng mga cell na ito mula sa iba pang myofibroblast ay ang kanilang pagpapahayag ng protina ng reelin.

Kwento [ | ]

Noong 1876, inilarawan ni Karl von Kupfer ang mga cell na pinangalanan niyang "Sternzellen" (stellate cells). Kapag nabahiran ng gintong oksido, ang mga inklusyon ay makikita sa cytoplasm ng mga selula. Maling isinasaalang-alang ang mga ito na mga fragment ng erythrocytes na nakuha ng phagocytosis, binago ni Kupfer noong 1898 ang kanyang mga pananaw sa "stellate cell" bilang isang hiwalay na uri ng cell at inuri ang mga ito bilang mga phagocytes. Gayunpaman, sa mga sumunod na taon, ang mga paglalarawan ng mga cell na katulad ng "stellate cells" ni Kupffer ay regular na lumitaw. Binigyan sila ng iba't ibang pangalan: interstitial cells, parasinusoid cells, lipocytes, pericytes. Ang papel ng mga cell na ito ay nanatiling misteryo sa loob ng 75 taon, hanggang sa natuklasan ng isang propesor (Toshio Ito) ang ilang mga cell na naglalaman ng mga blotches ng taba sa perisinusoidal space ng atay ng tao. Ito ay tinawag silang "shibo-sesshu saibo" - mga selulang sumisipsip ng taba. Napagtatanto na ang mga inklusyon ay taba na ginawa ng mga cell mula sa glycogen, binago niya ang pangalan sa "shibo-chozo saibo" - mga cell na nag-iimbak ng taba. AT

Ang pangunahing pinagmumulan ng endotoxin sa katawanay isang Gram-negative na intestinal flora. Sa kasalukuyan, walang duda na ang atay ang pangunahing organ paglilinis ng endotoxin. Sinabi ni EnAng dotoxin ay unang kinukuha ng cell Kami Kupffer (KK), na nakikipag-ugnayan sa receptor ng lamad CD 14. Maaaring magbigkis sa receptor bilang mismo lipopolysaccharide(LPS), at ang complex nito sa lipid A-binding protein bukol ng plasma. Ang pakikipag-ugnayan ng LPS sa mga macrophage ng atay ay nagpapalitaw ng isang kaskad ng mga reaksyon, na batay sa paggawa at pagpapalabas ng ion ng mga cytokine at iba pang biologically active mga tagapamagitan.

Maraming mga publikasyon tungkol sa papel ng macrong atay (LK) sa uptake at clearance ng bacterial LPS, gayunpaman, ang pakikipag-ugnayan ng endothelium sa iba pang mesenchymal mga cell, lalo na perisinusoidal ng Ito cell, ay halos hindi pinag-aralan.

PARAAN NG PANANALIKSIK

Ang mga puting lalaking daga na tumitimbang ng 200 g ay na-injected intraperitoneally sa 1 ml ng sterile saline napakadalisay lyophilized LPS E. coli strain 0111 sa mga dosis na 0.5,2.5, 10, 25 at 50 mg/kg. Sa mga panahon ng 0.5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 h, at 1 linggo, ang mga panloob na organo ay tinanggal sa ilalim ng kawalan ng pakiramdam at inilagay sa buffered 10% formalin. Ang materyal ay naka-embed sa mga bloke ng paraffin. Ang mga seksyon na 5 µm ang kapal ay nabahiran immunohistochemicalstreptavidin-biotin sa pamamagitan ng paraan ng mga antibodies sa desmin, α - makinis- muscle actin (A-GMA) at nuclear antigen mahusay na lumalagong mga selula ( PCNA," Dako"). Ginamit si Desmin bilang pananda perisinusoidalIto cells, A-GMA - as pananda ve myofibroblast, PCNA - dumarami ang mga selula. Upang makita ang endotoxin sa mga selula ng atay, purified anti-Re-glycolipidantibodies (Institute of General and Clinical Pathology KDO, Moscow).

RESULTA NG PAG-AARAL

Sa isang dosis na 25 mg/kg pataas, ang nakamamatay na pagkabigla ay naobserbahan 6 na oras pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS. Ang talamak na pagkakalantad sa LPS sa tisyu ng atay ay sanhi ng pag-activate ng mga selulang Ito, na ipinakita sa pamamagitan ng pagtaas ng kanilang bilang. Numero desminpositive tumaas ang mga cell mula 6 na oras pagkatapos ng iniksyon ng LPS at umabot sa maximum ma hanggang 48-72 h (Larawan 1, a, b).

kanin. 1. Mga seksyon ng atay ng daga sy, naproseso LSAB -ako- chennymiantibodies sa des akin(isang banda α - makinis cervical actin (c), x400 (a, b) x200 (c).

a - bago ang pagpapakilala ng endotoxinsa, single desminpositiveIto mga cell sa periportal zone; b- 72 oraspagkatapos ng pangangasiwa ng endotoxin sa: marami desminpositive Ito cell; sa- 120 oras pagkatapos ng pagpapakilala ng en dotoxin: α - makinis na kalamnan present lang ang actinco sa makinis na mga selula ng kalamnan kah mga sisidlan.

Sa 1 numero ng linggo desminpositive nabawasan ang mga selula, ngunitay mas mataas kaysa sa mga benchmark. Sa Sa kasong ito, hindi namin naobserbahan ang hitsura ng A-GMA-positive mga selula sa sinus dah liver. panloob na positibo kontrol kapag nabahiran ng antibodies sa A-GMA nagsilbi upang makilala ang makinis na mga selula ng kalamnanvenous vessels ng portal tracts na naglalaman ng A-GMA (Fig. 1, sa). Samakatuwid, sa kabila ng pagtaas ng bilang ng mga Ito cell, isang beses Ang epekto ng LPS ay hindi humahantong sa pagbabago ( transdifferentiation) ang mga ito sa myofibroblast.


kanin. 2. Mga seksyon ng ataydaga, ginagamot LSAB -may label na antibodies sa PCNA. a - bago ang pagpapakilala ng en dotoxin: singlelumalaganap na mga gene mga pathocytes, x200; b - 72 oras pagkatapos ng pagpapakilala ng endotoxin: maraming proliferating hepatocytes, x400.

Pagtaas ng dami desminpositive nagsimula ang mga cell sa loob ng portal zone. Mula 6 h hanggang 24 h pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS perisinusoidal Ang mga cell ay matatagpuan lamang sa paligid ng mga portal tract, i.e. sa 1st aci zone noosa. Sa oras ng 48-72 na oras, kapag naobserbahan ang poppymaximum na dami desminpositive pandikit kasalukuyang, lumitaw din sila sa iba pang mga zone ng acinus; gayunpaman, karamihan sa mga selulang Ito ay matatagpuan pa rin sa periportal.

Marahil ito ay dahil sa katotohanan na periportalmatatagpuan ang mga CC ang unang nakunan endotoxin na nagmumula sa bituka sa pamamagitan ng portal vein o mula sa systemic circulation. Ak ang tivated QC ay gumagawa ng malawak na hanay cytokines, na inaakalang nag-trigger ng activation ng Ito cells at transdifferentiation ang mga ito sa myofibroblast. Malinaw, ito ang dahilan kung bakit ang mga Ito cell na matatagpuan malapit sa mga activated liver macrophage (sa 1st zone ng acinus) ang unang tumugon sa pagpapalabas ng mga cytokine. Gayunpaman, hindi namin sila naobserbahan sa aming pag-aaral. transdifferentiation sa myofibroblast, at ito ay nagmumungkahi na ang mga cytokine na itinago ng CK at hepatocytes ay maaaring magsilbi bilang isang kadahilanan na sumusuporta sa proseso na nagsimula na. transdifferentiation, ngunit malamang na hindi nila ito ma-trigger sa isang solong pagkakalantad ng atay sa LPS.

Ang isang pagtaas sa proliferative na aktibidad ng mga cell ay naobserbahan din pangunahin sa 1st zone ng acinus. Ito ay malamang na nangangahulugan na ang lahat (o halos lahat) na proseso ay naglalayong out tungkol sa- at paracrine regulation ng intercellular interactions, magpatuloy sa periportal zones. Ang isang pagtaas sa bilang ng mga proliferating na mga cell ay naobserbahan mula sa 24 h pagkatapos ng pangangasiwa ng LPS; ang bilang ng mga positibong selula ay tumaas hanggang 72 h (maximum proliferative activity, Fig. 2, a, b). Ang parehong mga hepatocytes at sinusoid cells ay dumami. Gayunpaman, ang pangkulay PCNA hindi nagbibigay kakayahang kilalanin ang uri ng proliferi pagmamaneho ng mga sinusoidal na selula. Ayon sa panitikan, ang pagkilos ng endotoxin ay humahantong sa isang pagtaas sa ang bilang ng QC. Sa tingin nila ito ay tungkol sa nagpapatuloy kapwa dahil sa paglaganap ng mga macrophage ng atay, at dahil sa paglipat ng mga monocytes mula sa ibang mga organo. Ang mga cytokine na inilabas ng CK ay maaaring tumaas ang proliferative capacity ng Ito cells. Samakatuwid, lohikal na ipagpalagay na ang proliferating na mga cell ay kinakatawan ng perisinusoidal Ito cell. Ang pagtaas sa kanilang bilang na nakarehistro sa amin ay tila kinakailangan upang madagdagan ang synthesis ng mga kadahilanan ng paglago at ibalik ang extracellular matrix sa ilalim ng mga kondisyon ng pinsala. Ito ay maaaring isa sa mga link sa mga compensatory-regenerative na reaksyon ng atay, dahil ang mga cell ng Ito ay ang pangunahing pinagmumulan ng mga bahagi ng extracellular matrix, stem cell factor at hepatocyte growth factor, na kasangkot sa pagkumpuni at pagkita ng kaibhan. rovka epithelial cells ng atay. Wala ang parehong pagbabago ng Ito cell sa myofibroblast ay nagpapahiwatig na ang isang yugto ng pagsalakay ng endotoxin ay hindi sapat para sa pagbuo ng fibrosis ng atay.

Kaya, acute exposure sa endotok sina sanhi ng pagtaas ng bilang desminpositive Ito cells, na isang hindi direktang tanda ng pinsala sa atay. Dami perisinusoidal tumataas ang mga selula, tila bilang resulta ng kanilang paglaganap. Ang isang episode ng endotoxin aggression ay nagdudulot ng pagbaliktad ang aking pag-activate perisinusoidal Ito cell at hindi humahantong sa transdifferentiation sa myofibroblast. Sa pagsasaalang-alang na ito, maaari itong ipagpalagay na sa mga mekanismo ng pag-activate at transdifferentiation Sa mga cell ng Ito, hindi lamang endotoxin at cytokine ang kasangkot, kundi pati na rin ang ilang iba pang mga kadahilanan ng intercellular na pakikipag-ugnayan.

PANITIKAN

1. Mayansky D.N., Wisse E., Decker K. // Bagong Frontiers hepatolohiya. Novosibirsk, 1992.

2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Nagtagumpay sa modernong, biol. 1998. Tomo 118, Isyu . 1. S. 33-49.

3. Yakovlev M.Yu. // Kazan . m mga yunit magazine 1988. Bilang 5. S. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [b]. 1992. Vol. 61.P. 343-349.

5. Gressner A. M. // Hepatogastronerology. 1996 Vol. 43. P. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Kalikasan. 1995 Vol. 373, Blg. 6516. P. 699-702.

7. matalino E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, Blg. 1. P. 100-111.

Mga keyword

ATAY / ITO STAR CELLS/ MORPOLOHIYA / KATANGIAN / BITAMIN A / FIBROSIS

anotasyon artikulong pang-agham sa pangunahing gamot, may-akda ng gawaing pang-agham - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Panimula. Ang papel ng Ito stellate cells (ISCs) ay tinukoy bilang isa sa mga nangungunang sa pagbuo ng fibrosis sa atay, gayunpaman, sa vivo visualization ng istraktura ng ITOs sa klinikal na kasanayan ay ginagamit nang minimal. Ang layunin ng trabaho: upang ipakita ang mga istruktura at functional na katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens. Mga materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng biopsy specimens at orihinal na mga diskarte gamit ang mga ultrathin section, fixation at staining ay ginamit. Mga resulta. Ang mga larawan-ilustrasyon ng liwanag at electron microscopy ng mga specimen ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay nagpapakita ng mga katangian ng istruktura ng HSC sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa proseso ng pagbabago sa myofibroblast. Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical morphological identification at pagtatasa ng functional state ng HCI ay mapapabuti ang kalidad ng diagnosis at hula ng fibrosis ng atay.

Mga Kaugnay na Paksa siyentipikong mga gawa sa pangunahing gamot, ang may-akda ng siyentipikong gawain - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

pagpapakilala. Ang papel na ginagampanan ng Ito stellate cells (Hepatic Stellate Cells, HSC) ay nakilala bilang isa sa nangunguna sa pagbuo ng liver fibrosis, ngunit ang paggamit ng intravital visualization ng HSC structures sa klinikal na kasanayan ay minimal. Ang layunin ng gawain ay upang ipakita ang istruktura at functional na katangian ng HSC batay sa mga natuklasan ng cytological identification ng intravital liver biopsy sample. materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng mga sample ng biopsy sa loob ng orihinal na pamamaraan ng paggamit ng mga ultrathin na seksyon, pag-aayos at paglamlam ay inilapat. resulta. Ang mga istrukturang katangian ng HSC ng mga sample ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay ipinakita sa mga larawang ilustrasyon ng light at electron microscopy. Ang mga HSC ay inilalarawan sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa panahon ng proseso ng pagbabago sa myofibroblast. Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical at morphological identification at pagsusuri ng functional status ng HSC ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng diagnosis at pagbabala ng fibrosis ng atay.

Ang teksto ng gawaing siyentipiko sa paksang "Clinical Liver Cytology: Ito stellate cells"

UDK 616.36-076.5

CLINICAL LIVER CYTOLOGY: ITO Stellate Cells

Tsyrkunov V. M. ( [email protected]), Andreev V.P. ( [email protected]), Kravchuk R. I. ( [email protected]), Kondratovich I. A. ( [email protected]) EE "Grodno State Medical University", Grodno, Belarus

Panimula. Ang papel ng Ito stellate cells (ISCs) ay tinukoy bilang isa sa mga nangungunang sa pagbuo ng fibrosis sa atay, gayunpaman, ang intravital visualization ng istraktura ng ITOs sa klinikal na kasanayan ay ginagamit nang minimal.

Layunin ng trabaho: upang ipakita ang mga istruktura at functional na katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens.

Mga materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng biopsy specimens at orihinal na mga diskarte gamit ang mga ultrathin section, fixation at staining ay ginamit.

Mga resulta. Ang mga larawan-ilustrasyon ng liwanag at electron microscopy ng mga specimen ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay nagpapakita ng mga katangian ng istruktura ng HSC sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa proseso ng pagbabago sa myofibroblast.

Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan para sa clinical morphological identification at pagtatasa ng functional state ng HCI ay mapapabuti ang kalidad ng diagnosis at hula ng fibrosis ng atay.

Mga pangunahing salita: atay, Ito stellate cells, morpolohiya, katangian, bitamina A, fibrosis.

Panimula

Ang isang hindi kanais-nais na kinalabasan ng karamihan sa mga talamak na nagkakalat na mga sugat sa atay ng iba't ibang mga etiologies, kabilang ang talamak na hepatitis C (CHC), ay fibrosis ng atay, sa pagbuo kung saan ang mga pangunahing kalahok ay na-activate ang mga fibroblast, ang pangunahing pinagmumulan kung saan ay na-activate ang Ito stellate cells (SSCs) .

HSC, kasingkahulugan - liver stellate cells, fat-storing cells, perisinusoidal lipocytes, stellate cells (English Hepatic Stellate Cell, HSC, Cell of Ito, Ito cell). Ang ZKI ay unang inilarawan noong 1876 ni K. Kupffer at pinangalanan niya ang mga stellate cell ("Stemzellen"). T. Ito, na natagpuan ang mga patak ng taba sa kanila, itinalaga ang mga ito sa una na sumisipsip ng taba ("shibo-sesshusaibo"), at pagkatapos, na itinatag na ang taba ay ginawa ng mga selula mismo mula sa glycogen, mga cell na nag-iimbak ng taba ("shibo -chozosaibo”) . Noong 1971, pinatunayan ni K. Wake ang pagkakakilanlan ng mga Kupffer stellate cell at mga cell na Ito na nag-iimbak ng taba at ang mga cell na ito ay "nag-iimbak" ng bitamina A.

Humigit-kumulang 80% ng bitamina A sa katawan ang naiipon sa atay, at hanggang 80% ng lahat ng liver retinoids ay idineposito sa HKI fatty drops. Ang mga ester ng retinol sa komposisyon ng mga chylomicron ay pumapasok sa mga hepatocytes, kung saan sila ay na-convert sa retinol, na bumubuo ng isang kumplikadong bitamina A na may retinol-binding protein (RBP), na itinago sa perisinusoidal space, mula sa kung saan ito idineposito ng mga cell.

Ang malapit na koneksyon ng HCI na may fibrosis ng atay, na itinatag ni K. Popper, ay nagpakita ng kanilang dynamic kaysa sa static na pag-andar - ang kakayahang direktang lumahok sa remodeling ng intralobular perihepatocellular matrix.

Ang pangunahing paraan ng morphological na pagsusuri ng atay, na isinasagawa upang masuri ang mga pagbabago sa intravital biopsy specimens, ay light microscopy, na sa klinikal na kasanayan ay ginagawang posible upang maitaguyod ang aktibidad ng pagpaparami.

nasusunog at ang yugto ng talamak. Ang kawalan ng pamamaraan ay ang mababang resolution, na hindi pinapayagan ang pagsusuri sa mga tampok na istruktura ng mga cell, intracellular organelles, inclusions, at functional na mga katangian. Ang panghabambuhay na electron microscopic na pagsusuri ng mga ultrastructural na pagbabago sa atay ay ginagawang posible upang madagdagan ang data ng light microscopy at dagdagan ang kanilang diagnostic value.

Kaugnay nito, ang pagkilala sa mga hepatic HSC, ang pag-aaral ng kanilang phenotype sa proseso ng transdifferentiation, at ang pagpapasiya ng intensity ng kanilang paglaganap ay ang pinakamahalagang kontribusyon sa paghula sa mga kinalabasan ng mga sakit sa atay, pati na rin sa pathomorphology at pathophysiology ng fibrogenesis.

Layunin - upang ipakita ang structural at functional na mga katangian ng HCI batay sa mga resulta ng cytological identification ng intravital liver biopsy specimens.

Mga materyales at pamamaraan

Ang isang intravital liver biopsy ay nakuha sa pamamagitan ng aspiration liver biopsy sa mga pasyenteng may CHC (HCV+ RNA), kung saan nakuha ang nakasulat na pahintulot na may kaalaman.

Para sa light microscopy ng semi-thin na mga seksyon, ang mga specimen ng biopsy sa atay ng mga pasyente na may sukat na 0.5 × 2 mm ay naayos sa pamamagitan ng double fixation: una, ayon sa pamamaraang Sato Taizan, pagkatapos ay ang mga sample ng tissue ay karagdagang naayos para sa 1 oras sa isang 1% osmium fixative na inihanda sa 0.1 M phosphate Sorensen's buffer, pH 7.4. Ang potassium dichromate (K2Cr2O7) o chromic anhydride crystals (1 mg/mL) ay idinagdag sa 1% osmium tetroxide upang mas maipakita ang mga intracellular na istruktura at interstitial substance sa mga seksyon ng semithin. Pagkatapos ng dehydration ng mga sample sa isang serye ng mga alkohol na solusyon ng pagtaas ng konsentrasyon at acetone, sila ay inilagay sa isang prepolymerized na pinaghalong butyl methacrylate at styrene at polymerized sa 550C. Ang mga semi-manipis na seksyon (1 µm makapal) ay sunud-sunod na nabahiran

azure II-basic na fuchsin. Ang mga micrograph ay nakuha gamit ang isang digital video camera (Leica FC 320, Germany).

Ang isang electron microscopic study ay isinagawa sa mga sample ng liver biopsy specimens na 0.5x1.0 mm ang laki, na naayos na may 1% na solusyon ng osmium tetroxide sa 0.1 M Millonig's buffer, pH 7.4, sa +40C sa loob ng 2 oras. Pagkatapos ng pag-aalis ng tubig sa pataas na mga alkohol at acetone, ang mga sample ay ibinuhos sa araldite. Ang mga seksyon ng Semithin (400 nm) ay inihanda mula sa nakuha na mga bloke sa isang Leica EM VC7 ultramicrotome (Germany) at nabahiran ng methylene blue. Ang mga paghahanda ay napagmasdan sa ilalim ng isang magaan na mikroskopyo at isang solong uri ng site ang napili para sa karagdagang pag-aaral ng mga pagbabago sa ultrastructural. Ang mga ultrathin na seksyon (35 nm) ay na-counterstain ng 2% uranyl acetate sa 50% methanol at lead citrate ayon kay E. S. Reynolds. Ang mga paghahanda ng mikroskopiko ng elektron ay pinag-aralan gamit ang isang JEM-1011 electron microscope (JEOL, Japan) sa mga magnification na 10,000–60,000 sa isang accelerating na boltahe na 80 kW. Upang makakuha ng mga larawan, ginamit ang isang complex mula sa Olympus MegaViewIII digital camera (Germany) at iTEM image processing software (Olympus, Germany).

resulta at diskusyon

Ang mga HSC ay matatagpuan sa perisinusoidal space (Disse) sa mga bulsa sa pagitan ng mga hepatocytes at endothelial cells; mayroon silang mahabang proseso na tumagos nang malalim sa pagitan ng mga hepatocytes. Sa karamihan ng mga publikasyong nakatuon sa populasyon na ito ng mga HSC, ang kanilang eskematiko na representasyon ay ibinibigay, na nagpapahintulot lamang na italaga ang "teritoryal" na kaakibat ng mga HSC sa atay at may kaugnayan sa kanilang nakapaligid na "mga kapitbahay" (Larawan 1).

Ang mga HSC ay malapit na nakikipag-ugnayan sa mga endothelial cells sa pamamagitan ng mga bahagi ng isang hindi kumpletong basement membrane at mga interstitial collagen fibers. Ang mga dulo ng nerbiyos ay tumagos sa pagitan ng SC at parenchymal cells, kaya naman ang espasyo ng Disse ay tinukoy bilang ang puwang sa pagitan ng mga plate ng parenchymal cells at

isang complex ng HCI at endothelial cells.

Ito ay pinaniniwalaan na ang mga HSC ay nagmula sa mahinang pagkakaiba-iba ng mga mesenchymal cells ng transverse septum ng pagbuo ng atay. Nalaman ng eksperimento na ang mga hematopoietic stem cell ay kasangkot sa pagbuo ng mga HSC at ang prosesong ito ay hindi dahil sa cell fusion.

Ang mga sinusoidal cells (SC), pangunahin ang mga HSC, ay gumaganap ng isang nangungunang papel sa lahat ng uri ng pagbabagong-buhay ng atay. Ang fibrosing regeneration ng atay ay nangyayari bilang resulta ng pagsugpo sa mga stem function ng HSC at bone marrow stem cells. Sa atay ng tao, ang mga HSC ay bumubuo ng 5-15%, na isa sa 4 na uri ng mga SC ng mesenchymal na pinanggalingan: Kupffer cells, endotheliocytes, Pd cells. Ang SC pool ay naglalaman din ng 20-25% ng mga leukocytes.

Sa cytoplasm ng HCI mayroong mga fatty inclusions na may retinol, triglycerides, phospholipids, cholesterol, free fatty acids, a-actin at desmin. Ang ZKI ay nakikita gamit ang gold chloride staining. Natagpuan sa eksperimento na ang marker ng pagkita ng kaibahan ng HKI mula sa iba pang myofibroblast ay ang kanilang pagpapahayag ng protina ng reelin.

Ang mga HSC ay umiiral sa isang quiescent ("hindi aktibong HSC"), lumilipas at pangmatagalang naka-activate na estado, na ang bawat isa ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagpapahayag ng gene at phenotype (α-IgMA, ICAM-1, chemokines at cytokines).

Ang mga HSC sa isang hindi aktibong estado ay may isang bilugan, bahagyang pinahaba o hindi regular na hugis, isang malaking nucleus at isang maliwanag na visual sign - mga pagsasama ng lipid (mga patak) na naglalaman ng retinol (Larawan 2).

Ang bilang ng mga patak ng lipid sa isang hindi aktibong HSC ay umabot sa 30 o higit pa, ang mga ito ay malapit sa laki, katabi ng bawat isa, pagpindot sa nucleus at itulak ito sa paligid (Larawan 2). Ang mga maliliit na pagsasama ay maaaring matatagpuan sa pagitan ng malalaking patak. Ang kulay ng mga patak ay depende sa fixative at ang kulay ng materyal. Sa isang kaso, ang mga ito ay magaan (Larawan 2a), sa kabilang banda ay madilim na berde (Larawan 2b).

Figure 1. Scheme ng lokasyon ng ICH (stellatecell, perisinusoidal lipocyte) sa perisinusoidal space ng Disse (space of Disse), Internet resource

Figure 2. - Mga CCI na nasa hindi aktibong estado

a - bilog na hugis HCI na may mataas na nilalaman ng mga light-colored lipid droplets (white arrow), hepatocytes (Hz) na may wasak na cytoplasm (itim na arrow); b - HCI na may maitim na mga patak ng lipid na malapit sa isang macrophage (Mf); a-b - semi-manipis na mga seksyon. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000; c - HCI na may kasaganaan ng lipid droplets (higit sa 30), pagkakaroon ng hindi regular na hugis (magnitude 6,000); d-ultrastructural na mga bahagi ng HCI: l-lipid drops, mitochondria (orange arrow), GRES (green arrow), Golgi complex (pulang arrow), sw. 15,000; c-d - mga electronogram

Sa electron microscopy, isang mas osmiophilic marginal rim ang nabuo laban sa background ng isang light lipid substrate (Larawan 5a). Sa karamihan ng mga "nagpapahinga" na HSC, kasama ang malalaking lipid inclusions, mayroong isang kapansin-pansing maliit na halaga ng cytoplasmic matrix, mahirap sa mitochondria (Mx) at granular endoplasmic reticulum (GRES). Kasabay nito, ang mga compartment ng isang katamtamang binuo na Golgi complex ay malinaw na nakikita sa anyo ng isang stack ng 3-4 flattened cisterns na may bahagyang pinalawak na mga dulo (Larawan 2d).

Sa ilalim ng ilang mga kundisyon, ang mga aktibong HSC ay nakakakuha ng isang halo-halong o transisyonal na phenotype, na pinagsasama ang mga morphological na tampok ng parehong mga lipid na naglalaman at mga fibroblast na tulad ng mga cell (Larawan 3).

Ang transitional phenotype ng HCI ay mayroon ding sariling mga tampok na morphological. Ang cell ay nakakakuha ng isang pinahabang hugis, ang bilang ng mga lipid inclusions ay bumababa, at ang bilang ng mga nucleolemma invaginations ay bumababa. Ang dami ng cytoplasm ay tumataas, na naglalaman ng maraming GRES cisterns na may mga nakagapos na ribosome at libreng ribosome, Mx. Mayroong hyperplasia ng mga bahagi ng lamellar Golgi complex, na kinakatawan ng ilang mga stack ng 3-8 flattened cisterns, isang pagtaas sa bilang ng mga lysosome na kasangkot sa pagkasira.

Figure 3. - ZKI, na nasa isang transisyonal na estado

a - ZKI (mga puting arrow). Half cut. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrograph. Nadagdagan 1000; b - ZKI ng isang pinahabang hugis at may isang maliit na halaga ng mga patak ng lipid; uv. 8000; c - HCI na nakikipag-ugnayan sa mga selulang Kupffer (CC) at lymphocyte (Lc), SW. 6000. (Hz - hepatocyte, l - patak ng lipid, E - erythrocyte); d - mitochondria (orange na arrow), GRES (green arrow), c. Goldji (pulang arrow), lysosomes (asul na arrow), magn. b, c, d - mga pattern ng electron diffraction

mga patak ng lipid (Larawan 3d). Ang hyperplasia ng mga bahagi ng GRES at ang Golgi complex ay nauugnay sa kakayahan ng mga fibroblast na mag-synthesize ng mga molekula ng collagen, pati na rin ang pag-modelo sa kanila sa pamamagitan ng post-translational hydroxylation at glycosylation sa endoplasmic reticulum at mga elemento ng Golgi complex.

Sa isang buo na atay, ang HCI, na nasa isang kalmadong estado, ay sumasakop sa sinusoidal capillary sa kanilang mga proseso. Ang mga proseso ng HCI ay nahahati sa 2 uri: perisinusoidal (subendothelial) at interhepatocellular (Larawan 4).

Ang dating ay umalis sa cell body at umaabot sa ibabaw ng sinusoidal capillary, na tinatakpan ito ng manipis na mga sanga na parang daliri. Ang mga ito ay natatakpan ng maikling villi at may katangian na mahabang microprotrusions na umaabot pa sa ibabaw ng capillary endothelial tube. Ang mga interhepatocellular outgrowth, na nagtagumpay sa plato ng mga hepatocytes at naabot ang kalapit na sinusoid, ay nahahati sa ilang mga perisinusoidal outgrowth. Kaya, ang FQI ay sumasaklaw sa average ng higit sa dalawang katabing sinusoid.

Sa pinsala sa atay, ang pag-activate ng HSC at ang proseso ng fibrogenesis ay nangyayari, kung saan ang 3 mga yugto ay nakikilala. Ang mga ito ay tinutukoy bilang pagsisimula, pagpapahaba at paglutas (resolution ng fibrous tissue). Ang prosesong ito ng pagbabago ng "nagpapahinga" na mga HSC sa fibrosing myofibroblast ay pinasimulan ng mga cytokine (^-1, ^-6,

Figure 4. - Perisinusoidal (subendothelial) at interhepatocellular na proseso (outgrowths) ng HCI

(a) ang proseso ng ZKI (dilaw na mga arrow) na umuusbong mula sa cell body, uv. 30,000; b - isang proseso ng HCI, na matatagpuan sa kahabaan ng ibabaw ng sinusoidal capillary, na naglalaman ng isang lipid drop, SW. 30,000; (c) mga subendothelially na matatagpuan na mga proseso ng HCI. Mga proseso ng endothelial cells (pink arrow); d - interhepatocellular na proseso ng HCI; lugar ng pagkasira ng mga lamad ng HCI at hepatocyte (itim na arrow), namamaga 10 000. Electronograms

TOT-a), underoxidized metabolic products, reactive oxygen species, nitric oxide, endothelin, platelet activating factor (PDGF), plasminogen activator, transforming growth factor (TGF-1), acetaldehyde, at marami pang iba. Ang mga direktang activator ay mga hepatocyte na nasa estado ng oxidative stress, Kupffer cells, endotheliocytes, leukocytes, platelets na gumagawa ng mga cytokine (paracrine signals) at ang ZKI mismo (autocrine stimulation). Ang pag-activate ay sinamahan ng pagpapahayag (pagsasama sa trabaho) ng mga bagong gene, ang synthesis ng mga cytokine at protina ng extracellular matrix (collagens I, III, Y na mga uri).

Sa yugtong ito, ang proseso ng pag-activate ng mga HSC ay maaaring makumpleto sa pamamagitan ng pagpapasigla sa pagbuo ng mga anti-namumula na cytokine sa mga HSC, na pumipigil sa paggawa ng TOT-a ng mga macrophage sa nasirang lugar. Bilang isang resulta, ang bilang ng mga HSC ay nabawasan nang husto, sumasailalim sila sa apoptosis, at ang mga proseso ng fibrosis sa atay ay hindi nabubuo.

Sa pangalawang yugto (matagal), na may matagal na pare-parehong paracrine at autocrine na pagkakalantad sa pag-activate ng stimuli, ang isang activated phenotype ay "pinananatili" sa HSC, na nailalarawan sa pamamagitan ng pagbabagong-anyo ng HSC sa mga contractile na myofibroblast-like na mga cell na nag-synthesize ng extracellular fibrillar collagen.

Ang activated phenotype ay nailalarawan sa pamamagitan ng paglaganap, chemotaxis, contractility, pagkawala ng retinoid stores, at pagbuo ng mga cell na kahawig ng myofibroblastic cells. Ang mga aktibong HSC ay nagpapakita rin ng mas mataas na antas ng mga bagong gene tulad ng a-SMA, ICAM-1, chemokines at cytokine. Ang pag-activate ng cell ay nagpapahiwatig ng simula ng isang maagang yugto ng fibrogenesis at nauuna ang pagtaas ng produksyon ng mga protina ng ECM. Ang mga nagresultang fibrous tissues ay sumasailalim sa remodeling dahil sa matrix cleavage sa tulong ng matrix metalloproteinases (matrixmetaloproteinases - MMPs). Sa turn, ang matrix breakdown ay kinokontrol ng tissue inhibitors ng MMPs (tissue inhibitors ng matrix metaloproteinases - TIMPs). Ang mga MMP at TIMP ay mga miyembro ng pamilya ng zinc dependent enzyme. Ang mga MMP ay na-synthesize sa mga HSC bilang mga hindi aktibong proenzyme na naisaaktibo sa pag-cleavage ng propeptide ngunit hinahadlangan sa pakikipag-ugnayan sa mga endogenous na TIMP, TIMPs-1 at TIMPs-2. Ang mga HSC ay gumagawa ng 4 na uri ng mga MMP na uri ng lamad na ina-activate ng IL-1 p. Sa mga MMP, MMPs-9, isang neutral na matrix metalloproteinase, ay partikular na kahalagahan, na may aktibidad laban sa type 4 na collagen, na bahagi ng basement membrane, pati na rin laban sa bahagyang denatured type 1 at 5 collagen.

Ang pagtaas sa populasyon ng HCI na may iba't ibang uri ng pinsala sa atay ay hinuhusgahan ng aktibidad ng isang makabuluhang bilang ng mga mitogenic na kadahilanan, mga kaugnay na tyrosine kinase receptor at iba pang natukoy na mitogens na nagdudulot ng pinaka-binibigkas na paglaganap ng HKI: endothelin-1, thrombin, FGF - fibroblast growth factor, PDGF - endothelial growth factor vessels, IGF - insulin-like growth factor. Ang akumulasyon ng mga HSC sa mga lugar ng pinsala sa atay ay nangyayari hindi lamang dahil sa paglaganap ng mga cell na ito, kundi dahil din sa kanilang direktang paglipat sa mga zone na ito sa pamamagitan ng chemotaxis, na may partisipasyon ng mga chemoattractant tulad ng PDGF at leukocyte chemoattractant-MCP (monocyte chemotactic protein- 1) .

Sa mga aktibong HSC, ang bilang ng mga patak ng lipid ay nabawasan sa 1-3 kasama ang kanilang lokasyon sa kabaligtaran ng mga poste ng cell (Larawan 5).

Ang mga aktibong HSC ay nakakakuha ng isang pinahabang hugis, ang mga makabuluhang lugar ng cytoplasm ay inookupahan ng Golgi complex, medyo maraming mga GRES cisterns ang ipinahayag (isang tagapagpahiwatig ng synthesis ng protina para sa pag-export). Ang bilang ng iba pang mga organelles ay nabawasan: ilang mga libreng ribosome at polysomes, solong mitochondria, irregularly - lysosomes ay matatagpuan (Figure 6).

Noong 2007, ang mga HSC ay unang pinangalanang liver stem cells, dahil ipinapahayag nila ang isa sa mga marker ng hematopoietic mesenchymal stem cells, CD133.

Figure 5. - Ang mga CCI ay nasa activated state

a, b - HCI (asul na mga arrow) na may mga solong pagsasama ng lipid na naisalokal sa magkabilang poste ng nucleus. Ang perisinusoidal connective tissue (Fig. 6a) at ang intercellular matrix layer sa paligid ng hepatocyte (Fig. 6b) ay nabahiran ng pula. Cytotoxic lymphocytes (purple arrow). Endothelial cell (puting arrow). Malapit na kontak sa pagitan ng isang plasma cell (pulang arrow) at isang hepatocyte. Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000 ; c, d - mga ultrastructural na bahagi ng HCI: mitochondria (orange na arrow), Golgi complex (pulang arrow), cisterns ng mas osmiophilic cis-side nito na nakaharap sa pinahabang elemento ng granular endoplasmic reticulum (berdeng mga arrow), lysosome (asul na arrow) (magn 10,000 at 20,000, ayon sa pagkakabanggit); c, d - mga pattern ng diffraction ng elektron

Ang mga myofibroblast, na wala sa normal na atay, ay may tatlong potensyal na mapagkukunan: una, sa panahon ng intrauterine development ng atay, sa mga portal tract, ang mga myofibroblast ay pumapalibot sa mga vessel at bile ducts sa panahon ng kanilang pagkahinog, at pagkatapos ng buong pag-unlad ng atay, nawala sila. at pinapalitan sa mga portal tract ng mga portal fibroblast; ang pangalawa - na may pinsala sa atay, sila ay nabuo dahil sa portal mesenchymal cells at resting HSCs, mas madalas dahil sa transitional epithelial-mesenchymal cells. Ang mga ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagkakaroon ng CD45-, CD34-, Desmin+, glial fibrillar protein na nauugnay sa (GFAP)+ at Thy-1+.

Ipinakita ng mga kamakailang pag-aaral na ang mga hepatocytes, cholangiocytes, at endothelial cells ay maaaring maging myofibroblast sa pamamagitan ng epithelial o endothelial-to-mesenchymal transition (EMT). Kasama sa mga cell na ito ang mga marker gaya ng CD45-, albumin+ (ibig sabihin hepatocytes), CD45-, CK19+ (ie cholangiocytes) o Tie-2+ (endothelial cells).

Figure 6. - Mataas na fibrotic activity ng HSC

a, b - myofibroblast (Mfb), ang cell ay naglalaman ng isang malaking nucleus, mga elemento ng GRES (mga pulang arrow), maraming libreng ribosome, polymorphic vesicles at granules, solong mitochondria at isang maliwanag na visualization sign - isang bundle ng actin filament sa cytoplasm (dilaw mga arrow); inakay palayo. 12,000 at 40,000; c, d, e, f - mataas na fibrotic na aktibidad ng HSC na may pagpapanatili ng mga retinoid-containing lipid droplets sa cytoplasm. Maraming mga bundle ng collagen fibrils (white arrow) ang napanatili (a) at nawala (d, e, f) partikular na transverse striation; inakay palayo. 25,000, 15,000, 8,000, 15,000. Electronograms

Bilang karagdagan, ang mga selula ng utak ng buto, na binubuo ng mga fibrocytes at nagpapalipat-lipat na mga selulang mesenchymal, ay maaaring magbago sa mga myofibroblast. Ito ay ang CD45+ (fibrocytes), CD45+/- (circulating mesenchymal cells), collagen type 1+, CD11d+ at MHC class 11+ (Figure 7).

Kinumpirma ng data ng literatura hindi lamang ang malapit na ugnayan sa pagitan ng paglaganap ng mga oval na selula at ng paglaganap ng mga sinusoidal na selula, kundi pati na rin ang data sa posibleng pagkita ng kaibhan ng HSC sa hepatic epithelium, na tinatawag na mesenchymal-epithelial transformation ng perisinusoidal cells.

Sa estado ng fibrogenic activation, ang myofibroblast-like HSCs, kasama ang pagbaba sa bilang at kasunod na pagkawala ng lipid droplets, ay nailalarawan sa pamamagitan ng focal proliferation (Larawan 8), immunohistochemical expression ng fibroblast-like marker, kabilang ang makinis na kalamnan na α-actin. , at ang pagbuo ng pericellular collagen fibrils sa mga puwang ng Disse.

Sa yugto ng pag-unlad ng fibrosis, ang pagtaas ng hypoxia ng tissue ng atay ay nagiging isang kadahilanan sa karagdagang overexpression ng mga pro-inflammatory adhesion molecule sa mga stem cell - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, pro-inflammatory.

Pakikipag-ugnayan ng ductal hepatic progenitor cells na may liver myofibroblasts

Mga HSC na tulad ng Myofibroblast sa isang estado ng fibrogenic activation.

Figure 7. - Mga kalahok ng myofibroblastic activation ng HSC

makapangyarihang chemoattractants - M-CSF, MCP-1 (monocyte chemotactic protein-1) at SGS (cytokine-mediated neutrophil chemoattractant) at iba pa na nagpapasigla sa pagbuo ng mga pro-inflammatory cytokine (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1 ) at mapahusay ang mga proseso ng fibrogenesis sa atay, na lumilikha ng mga kondisyon para sa self-sustained induction ng patuloy na pag-activate ng HSC at mga proseso ng fibrogenesis.

Sa mga mikroskopikong paghahanda, ang pericapillary fibrosis ay nagpapakita ng sarili sa anyo ng matinding pangkulay ng perisinusoidal connective tissue at ang intercellular matrix layer sa paligid ng mga hepatocytes (madalas na namamatay) sa pula. Sa mga paghahandang mikroskopiko ng elektron, ang mga pagbabago sa fibrotic ay makikita sa anyo ng mga nabuong malalaking bundle ng fibrils ng mga collagen fibers na nagpapanatili ng transverse striation, o sa anyo ng isang napakalaking

mga deposito sa espasyo ng Disse fibrous mass, na namamaga na mga hibla ng collagen na nawala ang kanilang panaka-nakang striation (Larawan 9).

Ayon sa mga modernong konsepto, ang fibrosis ay isang dinamikong proseso na maaaring umunlad at bumagsak (Larawan 10).

Kamakailan lamang, ilang partikular na marker ng ICD ang iminungkahi: ang bitamina A (VA) ay namumulaklak sa mga patak ng lipid, GFAP, ang p75 NGF receptor, at synaptophysin. Ang mga pag-aaral ay isinasagawa sa paglahok ng liver HCI sa paglaganap at pagkita ng kaibahan ng mga liver stem cell.

Pinag-aralan namin ang nilalaman ng retinol-binding protein (RBP-4), na bumubuo ng isang kumplikadong may VA, ang konsentrasyon nito sa plasma ng dugo ay karaniwang nauugnay sa pagkakaloob ng katawan na may VA, 80% nito ay nasa HCI.

Ang kaugnayan sa pagitan ng nilalaman

Figure 8. - Focal proliferation ng HSC sa estado ng fibrogenic activation

a - HCI hyperplasia (mga puting arrow) sa lumen ng dilat na sinusoids; b - paglaganap ng transdifferentiated HSCs (white arrow), endothelial cell (pink arrow). Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000

Figure 9. - Ang huling yugto ng myofibroblastic activation ng HSC

a, b - perisinusoidal fibrosis (mga puting arrow). Ang peri-sinusoidal connective tissue at ang intercellular matrix layer sa paligid ng hepatocytes (b) ay nabahiran ng pula ng basic fuchsin. Ang mga HSC ay aktibo at nabago sa mga fibroblast (asul na mga arrow). Hz sa fig. a - hepatocyte na may nawasak na cytoplasm. Mga semi-manipis na hiwa. Pangkulay azure II - pangunahing magenta. Micrographs. Nadagdagan 1000; c, d - perisinusoidal at perihepatocellular fibrosis sa lobule ng atay, nadagdagan ang density ng electron ng collagen fiber fibrils; condensation ng mitochondrial matrix sa hepatocyte (orange na arrow). Boost 8,000 at 15,000, ayon sa pagkakabanggit. mga electronogram

Talahanayan 1. Mga tagapagpahiwatig ng nilalaman ng RBP-4 sa mga pasyenteng may liver cirrhosis (LC) at talamak na hepatitis (CH) ng iba't ibang etiologies, ng/ml (M±m)

Pangkat n M±m p

Cirrhosis ng atay 17 23.6±2.29<0,05

CG, pamantayan ng ASAT 16 36.9±2.05* >0.05

CG, ASAT >2 pamantayan 13 33.0±3.04* >0.05

CG, ALT norm 13 37.5±3.02* >0.05

CG, ALT >2 norms 21 35.9±2.25* >0.05

Kontrol 15 31.2±2.82

Tandaan: p - makabuluhang pagkakaiba sa kontrol (p<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

False lobule na napapalibutan ng fibrous septum na may fibrous septum. Pangkulay ayon kay Masso - isang bilog ng isang maling lobule. Pangkulay ayon sa u.Uv.x50 Masson. Dagdagan ang x200

Figure 10 - Dynamics ng mga kaganapan sa false lobule ng isang pasyente na may viral cirrhosis 6 na buwan pagkatapos ng paglipat ng mga autologous mesenchymal stem cell sa atay

Kumakain ako ng RBP-4 at ang ika-4 na yugto ng fibrosis (cirrhosis), sa kaibahan sa talamak na hepatitis, kung saan ang gayong pag-asa ay hindi naobserbahan, anuman ang mga biochemical marker ng aktibidad ng pamamaga sa atay.

Ang katotohanang ito ay dapat isaalang-alang kapag nagpapatunay ng kapalit na therapy upang maalis ang kakulangan ng VA sa katawan, na maaaring dahil sa pag-ubos ng potensyal ng ICT dahil sa pag-unlad ng fibrosis sa atay.

1. Ang maximum na pagiging epektibo ng pagtatasa ng istruktura at functional na estado ng HCI ay sinisiguro ng isang morphological na pag-aaral ng isang intravital biopsy specimen na may sabay-sabay na paggamit ng isang kumplikadong mga diskarte sa visualization ng cell (light, electron microscopy ng mga ultrathin section at orihinal na pamamaraan ng pag-aayos at paglamlam).

2. Ang mga resulta ng morphological study ng HCI ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng in vivo diagnosis ng fibrosis, upang masubaybayan ito at mahulaan ang mga kinalabasan ng talamak na nagkakalat na mga sugat sa atay sa isang mas mataas na modernong antas.

3. Ang mga resulta ng morphological na konklusyon ay magbibigay-daan sa clinician na magdagdag ng pinong data sa yugto ng chronicity (pagpapanatag, pag-unlad o paglutas ng fibrosis) sa kurso ng therapy sa pagbabalangkas ng panghuling pagsusuri.

Panitikan

1. Ivashkin, V. T. Mga klinikal na sintomas ng pre-fibrotic na pagbabago: isang transcript ng lecture ng All-Russian Internet Congress ng mga espesyalista sa mga panloob na sakit / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNIST: National Internet Society of Internal Medicine Specialists. - 2013. - Access mode: http://internist. ru/publications/detail/6569/. - Petsa ng pag-access: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A.P. Oval cells - putative liver stem cells o hepatoblasts? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Cell transplantology at tissue engineering. - 2006. - V. 2, No. 4. - S. 55-58.

. : Rezhipa 20 do13. - //internist.ru/publications/detail/6569/ - Na-access ang data: 11/21/2016.

2. Kiyasov, A. P. Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki pecheni o gepatoblasty? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2002. - No. T.4. - 58.

3. Sa papel na ginagampanan ng sinusoidal liver cells at bone marrow cells sa pagbibigay ng regenerative na diskarte para sa isang malusog at nasirang atay / A. V. Lundup [et al.] // Bulletin ng transplantology at mga artipisyal na organo. -2010. - T. XII, No. 1. - S. 78-85.

4. Serov, V. V. Morphological na pamantayan para sa pagtatasa ng etiology, antas ng aktibidad at yugto ng proseso sa viral chronic hepatitis B at C / V. V. Serov, L. O. Severgina // Archives of Pathology. - 1996. - Bilang 4. - S. 61-64.

5. Structural at functional na mga katangian ng liver stellate cells sa dynamics ng fibrosis / OA Postnikova [et al.] // Pangunahing pananaliksik. - 2011. - Hindi. 10.

6. Ultrastructural at immunohistochemical na pag-aaral ng liver stellate cells sa dynamics ng fibrosis at cirrhosis ng infectious-viral genesis / G. I. Nepomnyashchikh [et al.] // Bulletin ng experimental biology at medicine. - 2006. - T. 142, No. 12. - S. 681-686.

7. Shcheglev, AI Structural at metabolic na mga katangian ng sinusoidal liver cells / AI Shcheglev, OD Mishnev // Mga tagumpay ng modernong biology. - 1991. - V. 3, No. 1. - S. 73-82.

10. Mga epekto ng dietary retinoid at triglyceride sa lipid composition ng rat liver stellate cells at stellate cell lipid droplets / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Ulat ng Ikatlong AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior Sa panahon ng Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Pagpapahayag ng reelin sa hepatic stellate cells at sa panahon ng pag-aayos ng hepatic tissue: isang nobelang marker para sa pagkita ng kaibahan ng HSC mula sa iba pang myofibroblast sa atay / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Mga myofibroblast sa atay ng tao sa panahon ng pag-unlad at mga sakit na may pagtuon sa portal (myo)

3. O roli sinusoidal "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj at povrezhdennoj pecheni / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii at iskusstvennyh organov. - 2010... 1. HII, No. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti at stadii processa pri virusnyh chrononicheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - Bilang 4. - S. 61-64.

5. Strukturno-funkcional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental" nye issledovaniya. - 2011. - Hindi. 10. - C. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza at cirroza pecheni infekcionno-virusnogo geneza / G. I. Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "nojologii i mediciny. - 20.8 at mediciny. - 201. 686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinusoidal "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, No. 1. - S. 73-82

8. Ang CD34 hepatic stellate cells ay mga progenitor cells / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Karaniwan. - 2007. -Vol. 352(2). - P. 410-417.

9. Pagkasira ng mga protina ng matrix sa fibrosis ng atay / M. J. Arthur // Pathol. Res. Magsanay. - 1994. - Vol. 190(9-10).

10. Mga epekto ng dietary retinoid at triglyceride sa lipid composition ng rat liver stellate cells at stellate cell lipid droplets / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

11. Ang fetal liver ay binubuo ng mga selula sa epithelial-to-mesenchymal transition / J. Chagraoni // Dugo. - 2003. - Vol. 101. - P. 2973-2982.

12. Fixation, dehydration at pag-embed ng biological specimens / A. M. Glauert // Mga Praktikal na Paraan sa Electron Microscopy. - New York: Am. Elsevier, 1975. - Vol. 3, bahagi 1.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Ulat ng Ikatlong AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. Ang mga human at rathepatic stellate cells ay gumagawa ng stem cell factor: isang posibleng mekanismo para sa mast cell recruitment sa liver fibrosis / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Vol. 30, No. 5. - P. 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite bilang medium ng pag-embed para sa electron microscopy / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Cytol. - 1958. - Vol. 4. - P. 409-414.

16. Ang mga hepatic stellate cells at portal fibroblast ay ang mga pangunahing pinagmumulan ng cellular ng mga collagens at lysyl oxidases sa normal na atay at maaga pagkatapos ng pinsala / M. Perepelyuk // Am. J Physiol. gastrointest. Physiol ng Atay. - 2013. - Vol. 304(6). - P. 605614.

17. Hepatitis C virus core at nonstructural proteins induce fibrogenic effects in hepatic stellate cells / R. Bataller // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 126, ay. 2. - P. 529-540.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior Sa panahon ng Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Pagpapahayag ng reelin sa hepatic stellate cells at sa panahon ng pag-aayos ng hepatic tissue: isang nobelang marker para sa pagkita ng kaibahan ng HSC mula sa iba pang myofibroblast sa atay / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Mga myofibroblast sa atay ng tao sa panahon ng pag-unlad at mga sakit na may pagtuon sa mga portal (myo) fibroblast / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblasts / S. Lepreux, A. Desmoulière // Harap. physiol. - 2015. - Mode ng pag-access: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Petsa ng pag-access: 31.10.2016.

22. Mesenchymal Bone Marrow-derived Stem Cells Transplantation sa mga Pasyenteng may HCV Related Liver Cirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, ay. 4. - P. 217-221.

23. Millonig, G. A. Mga kalamangan ng isang phosphate buffer para sa mga solusyon sa osmium tetroxide sa pag-aayos / G. A. Millonig // J. Appl. Physics. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

Vol. 24. - P. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis ng Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - P. 1213-1217.

30. Kamakailang mga pag-unlad sa myofibroblast biology: paradigms para sa connective tissue remodeling / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - P. 1340-1355.

35. Ang Septum transversum-derived mesothelium ay nagdudulot ng hepatic stellate cells at perivascular mesenchymal cells sa pagbuo ng mouse liver / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53.-P. 983-995.

Vol. 50.-P. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatic angiogenesis at sinusoidal remodeling sa talamak na sakit sa atay: mga bagong target para sa paggamot ng portal hypertension? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53. - P. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate cells: Three-dimensional na istraktura, localization, heterogeneity at development / K.

// harap. physiol. - 2015. - Mode ng pag-access: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Petsa ng pag-access: 31.10.2016.

21. Ligands ng peroxisome proliferator-activated receptor gamma mod-ulateprofibrogenic at proinflammatory actions sa hepatic stellate cells / F. Marra // Gastroenterology. -2000. - Vol. 119. - P. 466-478.

22. Mesenchymal Bone Marrow-derived Stem Cells Transplantation sa mga Pasyenteng may HCV Related Liver Cirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, ay. 4.-R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Mga kalamangan ng isang phosphate buffer para sa mga solusyon sa osmium tetroxide sa pag-aayos / G. A. Millonig // J. Appl. Rhysics. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

24. Pinagmulan at structural evolution ng maagang proliferating oval cells sa atay ng daga / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

25. Pinagmulan ng myofibroblast sa liver fibrosis / D. A. Brenner // Pag-aayos ng Tissue ng Fibrogenesis. - 2012. - Vol. 5 suppl. 1. - S. 17.

26. Mga pinagmulan at pag-andar ng myofibroblast sa atay / S. Lemoinne // Biochim. Biophys. acta. - 2013. - Vol. 1832(7). - P. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF at signal transduction sa hepatic stellate cells / M. Pinzani // Front. biosci. - 2002. - Vol. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Pamamahagi ng bitamina A sa tissue gaya ng ipinahayag ng fluorescence microscopy / H. Popper // Physiol. Sinabi ni Rev. - 1944.

Vol. 24.-R. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis ng Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - R. 1213-1217.

30. Kamakailang mga pag-unlad sa myofibroblast biology: paradigms para sa connective tissue remodeling / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Ang paggamit ng lead citrate sa mataas na pH bilang electronopaque stain sa electron microscopy / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - Vol. 17. - P. 208-212.

32. Safadi, R. Immune stimulation ng hepatic fibrogenesis ng CD8 cells at attenuation ng transgenic interleukin-10 mula sa hepatocytes / R. Safadi // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 127(3). - P. 870-882.

33. Sato, T. Isang electron microscopic na pag-aaral ng specimen-fixed para sa mas mahabang panahon sa phosphate buffered formalin / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - Vol. 31, No. 4. - P. 423-428.

34. Senoo, H. Vitamin A-Storing Cells (Stellate Cells) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - Vol. 75.

35. Ang Septum transversum-derived mesothelium ay nagdudulot ng hepatic stellate cells at perivascular mesenchymal cells sa pagbuo ng mouse liver / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53.-R. 983-995.

36. Stanciu, A. Bagong data tungkol sa mga cell ng ITO / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei, Rev. Med. Chir. soc. Med. Nat. Iasi. -2002. - Vol. 107, No. 2. - P. 235-239.

37. Suematsu, M. Propesor Toshio Ito: isang clairvoyant sa pericyte biology / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Vol. 50.-R. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatic angiogenesis at sinusoidal remodeling sa talamak na sakit sa atay: mga bagong target para sa paggamot ng portal hypertension? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53.-R. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate cells: Three-dimensional na istraktura, localization, heterogeneity at development / K. Wake // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. sci. - 2006. - Vol.

Gumising // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. sci. - 2006. - Vol. 82(4). - P. 155-164.

82(4). - P. 155-164.

40. Wake, K. In Cells of the Hepatic Sinusoid / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, The Netherlands). - 1986. - Vol. 1. - P. 215-220.

41. Watson, M. L. Paglamlam ng mga seksyon ng tissue para sa electron micro na may mabibigat na metal / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - Vol. 4. - P. 475-478.

CLINICAL CYTOLOGY NG Atay: ITO STELLATE CELLS (HEPATIC STELLATE CELLS)

Tsyrkunov V. M, Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Educational Establishment "Grodno State Medical University", Grodno, Belarus

pagpapakilala. Ang papel na ginagampanan ng Ito stellate cells (Hepatic Stellate Cells, HSC) ay nakilala bilang isa sa nangunguna sa pagbuo ng fibrosis ng atay, ngunit ang paggamit ng intravital visualization ng mga istruktura ng HSC sa klinikal na kasanayan ay minimal.

Ang layunin ng gawain ay upang ipakita ang istruktura at functional na katangian ng HSC batay sa mga natuklasan ng cytological identification ng intravital liver biopsy sample.

materyales at pamamaraan. Ang mga klasikal na pamamaraan ng light at electron microscopy ng mga sample ng biopsy sa loob ng orihinal na pamamaraan ng paggamit ng mga ultrathin na seksyon, pag-aayos at paglamlam ay inilapat.

resulta. Ang mga istrukturang katangian ng HSC ng mga sample ng biopsy sa atay mula sa mga pasyente na may talamak na hepatitis C ay ipinakita sa mga larawang ilustrasyon ng light at electron microscopy. Ang mga HSC ay inilalarawan sa iba't ibang yugto (pahinga, pag-activate) at sa panahon ng proseso ng pagbabago sa myofibroblast.

Mga konklusyon. Ang paggamit ng mga orihinal na pamamaraan ng clinical at morphological identification at pagsusuri ng functional status ng HSC ay nagbibigay-daan upang mapabuti ang kalidad ng diagnosis at pagbabala ng fibrosis ng atay.

@ 2022 wowway.ru - Mga diyeta at nutrisyon. Mga diagnostic at pagsusuri. Mga gamot. Cholesterol. Atherosclerosis