Pravila za odvzem, dostavo, sprejem, obdelavo in registracijo biološkega materiala. Splošne klinične laboratorijske študije - Dokument. Zahteve za organizacijo prostorov za PCR laboratorij. Tehnika vzorčenja materiala za PCR preiskavo

trenutno

MU 4.2.2039-05

METODOLOŠKA NAVODILA

4.2. NADZORNE METODE. BIOLOŠKI IN MIKROBIOLOŠKI DEJAVNIKI

Tehnika zbiranja in transporta biomaterialov v mikrobiološko
laboratorijih

Datum uvedbe 2006-07-01

2. PRIPOROČILA ZA ODOBRITEV Komisija za državno sanitarno in higiensko racioniranje pri Zvezni službi za nadzor varstva pravic potrošnikov in blaginje ljudi 6. oktobra 2005 (zapisnik št. 3).

3. ODOBRIL IN PREDSTAVIL vodja Zvezne službe za nadzor varstva pravic potrošnikov in blaginje ljudi, glavni državni sanitarni zdravnik Ruske federacije G. G. Oniščenko 23. decembra 2005.

5. PRVIČ PREDSTAVLJENO.

1 področje uporabe

1 področje uporabe

1.1. Smernice določajo pravila zbiranja in transporta bioloških materialov v mikrobiološke laboratorije z namenom izboljšanja kakovosti rezultatov laboratorijskih raziskav in organiziranja protiepidemičnih in preventivnih ukrepov ter preprečevanja bolnišničnih okužb med zdravstvenim osebjem in bolniki.

1.2. Smernice so namenjene uporabi organov in organizacij Zvezne službe za nadzor varstva pravic potrošnikov in blaginje ljudi, uporabljajo pa jih lahko tudi zdravstveni organi in organizacije.

2. Splošne določbe

2.1. Pridobivanje zanesljivih podatkov o identifikaciji virov okužbe je potrebno za pravočasno in učinkovito organizacijo protiepidemičnih in preventivnih ukrepov, oceno stopnje prizadetosti prebivalstva med epidemiološkim nadzorom.

2.2. Razvita tehnika zbiranja in transporta bioloških materialov v mikrobiološke laboratorije bo omogočila zmanjšanje stopnje predanalitičnih napak in izboljšanje kakovosti dela laboratorijev pri objektivizaciji rezultatov.

2.4. Smernice se lahko uporabljajo pri izvajanju epidemiološkega spremljanja protimikrobne odpornosti laboratorijsko izoliranih in identificiranih povzročiteljev bolezni, optimizaciji uporabe protimikrobnih zdravil in ukrepov na področju preprečevanja, obvladovanja in zajezitve odpornosti na lokalni, regionalni in državni ravni.

3. Splošne zahteve za odvzem vzorcev biološkega materiala za mikrobiološke raziskave

3.1. Da bi preprečili okužbo zdravstvenega osebja in bolnikov med zbiranjem vzorcev biomaterialov in njihovo dostavo v laboratorij, je potrebno:

med zbiranjem in oddajo vzorcev ne kontaminirajte zunanje površine posod;

ne onesnažujte spremnih dokumentov (napotnic);

zmanjšati neposreden stik vzorca biomateriala z rokami zdravstvenega delavca, ki ga zbira in dostavlja v laboratorij;

uporabljajte sterilne posode za enkratno uporabo ali ustrezno odobrene posode (posode) za zbiranje, shranjevanje in dostavo vzorcev za te namene;

transport vzorcev v nosilcih ali skladih z ločenimi gnezdi;

upoštevati aseptične pogoje za preprečevanje okužbe pacienta v procesu izvajanja invazivnih ukrepov;

zbiranje vzorcev v sterilni posodi za enkratno uporabo ali stekleni posodi (neokuženi z biomateriali, nepoškodovani z razpokami, zlomljenimi robovi in ​​drugimi napakami)

3.2. Vzorce biomateriala je treba zbrati na naslednji način:

pred začetkom antibiotične terapije, če ni takšne priložnosti - tik pred ponovnim dajanjem (sprejemom) zdravil;

v količini (teža, prostornina), ki je potrebna za izvedbo analize, ker nezadostna količina biomateriala za raziskave vodi do napačnih rezultatov;

z minimalno kontaminacijo materiala z normalno mikrofloro, tk. njegova prisotnost vodi do napačne interpretacije rezultatov, dobljenih na primer pri študiji sputuma, vzorcev iz nosu, žrela (žrela), genitalij itd.

3.3. Pri odvzemu vzorca se prepričajte, da pri odpiranju posode z biomaterialom v laboratoriju ne nastane aerosol: vzorce krvi in ​​drugih telesnih tekočin previdno prenesete iz brizge brez penjenja v suh in/ali napolnjen medij ( antikoagulantne) jedi.

3.4. V smeri študije navedite: priimek, ime, patronim pacienta; leto rojstva; podružnica, v kateri se nahaja; številka anamneze (ambulantna kartica); diagnoza; gradivo, poslano v raziskave in raziskovalne naloge; datum in ura odvzema materiala (ure); antibakterijska (imunska) zdravila, če se vzorec daje v ozadju antibiotikov in / ali imunoterapije; priimek, ime, patronim lečečega zdravnika (svetovalca), ki pošlje vzorec na pregled. Pri pošiljanju biomaterialov, pridobljenih pri obdukciji, je naveden tudi oddelek, v katerem je bolnik umrl.

3.5. Pred odvzemom vzorca, zlasti pri uporabi invazivnih metod, se oceni verjetnost tveganja za pacienta in koristi ter pomen te vrste biomateriala za objektivizacijo klinične diagnoze in ovrednotenje potekajočih ali načrtovanih terapevtskih ukrepov. upoštevati.

4. Splošne zahteve za dostavo vzorcev biomateriala v mikrobiološki laboratorij

4.1. Vsi zbrani vzorci se pošljejo v mikrobiološki laboratorij takoj po prejemu, razen v primerih, ko se uporabljajo vsebniki s transportnimi mediji, ki so dovoljeni za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način.

To je potrebno za:

ohranjanje sposobnosti preživetja patogenov in možnost izolacije mikroorganizmov, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja (Haemophylus in drugi);

preprečiti čezmerno rast hitro rastočih in aktivnih mikroorganizmov;

vzdrževanje razmerja začetnih koncentracij izolatov ob prisotnosti mikrobnih asociacij v vzorcu;

zmanjšanje kontaktnega časa vzorca z nekaterimi lokalnimi antiseptiki, ki imajo lahko antibakterijsko delovanje;

objektivizacija klinične diagnoze infekcijsko-vnetne bolezni in ocena rezultatov terapije.

4.2. Za povečanje časa dostave biomateriala v laboratorij je dovoljeno uporabljati alternativne metode.

Vzorce je treba hraniti v hladilniku pri 2-8 °C, razen kot je navedeno spodaj.

4.2.1. Ko je vzorec shranjen v posebnem transportnem vsebniku (transportnem sistemu), odobrenem za uporabo v skladu z uveljavljenim postopkom, ki je sterilna epruveta za enkratno uporabo z agarjem ali tekočim transportnim medijem in sondo za bris, vgrajeno v zamašek in sterilno pakirano s cev. Vzorce hranimo v takih posodah pri sobni temperaturi (18-20 °C). Transportna gojišča, posebna gosta z in brez aktivnega oglja, omogočajo ohranjanje sposobnosti preživetja mikroorganizmov, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja 48-72 ur.

Za vzorce za anaerobe in fekalno floro se uporabljajo posebne posode s transportnim gojiščem, epruvete z gojišči za izolacijo Campylobacter in Helicobacter, dovoljene za uporabo na predpisan način. Takšna okolja ustvarjajo anabiotično atmosfero za mikroorganizme, kar pripomore k zmanjšanju njihove presnove, zaviranju rasti ter preprečuje njihovo sušenje in kopičenje odpadnih snovi.

Vsak vzorec, zbran v tekočem mediju, se temeljito premeša z medijem.

4.2.2. Ko se kri goji v bujonu, se vzorec po prejemu hrani v termostatu pri temperaturi 35-37 °C.

Če se vzorci zbirajo v posebnih posodah za naknadno študijo z dvofaznim medijem, jih je treba hraniti pri sobni temperaturi (18-20 ° C).

4.2.3. Kadar so morda prisotni temperaturno odvisni mikroorganizmi (Neisseria sp.), se vzorci pustijo pri sobni temperaturi (18–20 °C).

4.3. Za prevoz vzorcev, pregledanih za prisotnost aerobov in fakultativnih anaerobov, uporabite:

sterilne suhe epruvete za enkratno uporabo z vgrajeno sondo za bris (gomolji) ali posode s transportnim medijem, odobrene za uporabo za te namene v Ruski federaciji na predpisan način; dovoljena je uporaba sterilnih steklenih epruvet, zaprtih s plinoprepustnim zamaškom z vgrajeno sondo za bris, pripravljeno v laboratoriju;

sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom (dovoljeno je steklo s plinoprepustnim zamaškom) - za zbiranje vzorcev urina, sputuma, blata, bronhoalveolarne lavage, biopsijskega (koščkov tkiva) materiala;

sterilne za enkratno uporabo z navojno zaporko ali steklene epruvete - za zbiranje sterilnih tekočin, bronho-alveolarne lavage, ločene od odtokov ali ostankov;

sterilne petrijevke - za zbiranje vzorcev las ali za transport ostankov z oznakami na dnu posode;

posebne sterilne nazofaringealne in urogenitalne sonde za bris z aluminijasto osjo (premer osi - 0,9 mm) in majhno bombažno ali viskozno palčko na konici (premer tampona - 2,5 mm), nameščene v zamašku, ki tesni sterilno stekleno epruveto za enkratno uporabo - za vzorce iz nazofarinksa za B. pertusis in iz sečnice pri moških.

4.4. Za transport vzorcev, pregledanih na prisotnost anaerobov, se uporabljajo posode s posebnimi transportnimi mediji in epruvete s tioglikolnim medijem; epruvete z mediji za izolacijo Campylobacter in Helicobacter, odobrene za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način. Vzorec, zbran v tekočem mediju, se z njim temeljito premeša. Za pridobivanje vzorcev se priporočajo naslednje metode:

izcedek iz odtokov, ki se uporablja za aktivno aspiracijo votlin, se aspirira s sterilno brizgo s tesnim batom v prostornini 2-4 ml; na napolnjeno brizgo nataknemo sterilno iglo, zapremo s sterilno vatirano palčko, iz brizge odstranimo odvečni zrak; vatirano palčko spustimo v razkužilno raztopino; konec igle se vbrizga v sterilni gumijasti zamašek in v tej obliki se brizga z materialom dostavi v laboratorij;

vsebino žarišč okužbe in votlin, pridobljeno z njihovim prebadanjem, zberemo v prostornini 2-4 ml z uporabo 2-, 5-, 10-ml brizg s tesnim batom; odvečni zrak se iz brizge odstrani tako, da se igla pokrije s sterilno vatirano palčko, ki se nato zavrže v raztopino za razkuževanje; igla se razkuži z brisanjem z tamponom, navlaženim s 70% etilnim alkoholom; za tesnjenje se konec igle vbrizga v sterilni gumijasti zamašek in v tej obliki se brizga z materialom dostavi v laboratorij.

Pri zbiranju velike količine materiala (3 ml ali več) lahko anaerobne bakterije ostanejo sposobne preživeti 24 ur pri sobni temperaturi (18-20 °C).

Če je izcedek le nekaj kapljic, ga takoj po prejemu prenesemo iz brizge v majhno posodico ali v epruveto s transportnim medijem (posodico s transportnim medijem prejmemo v laboratorij dan prej).

Koščke tkiv (biopsijski material) v primeru suma na anaerobno okužbo zberemo v sterilne posode za enkratno uporabo z navojnim pokrovom (dovoljeno - v stekleni posodi z brušenim pokrovom) in takoj dostavimo v laboratorij.

4.5. Za transport vzorcev, pregledanih na prisotnost virusov, se uporabljajo posebne posode s tekočim medijem za shranjevanje virusov.

5. Vzorci različnih vrst biomateriala in okolja, ki obdaja bolnika

Tabela 1

Steklenina, ki se uporablja za dostavo vzorcev v laboratorij

Izvor in vrsta kliničnega materiala	Izdelki, ki se uporabljajo za dostavo vzorcev
	Posebni transportni zabojniki z medijem, z nevtralizatorji antibiotikov in reagenti, ki uničujejo krvne celice, ali brez njih, odobreni za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način; dvofazni medij v vialah
centralni živčni sistem
Alkohol	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojno zaporko; sterilne steklene epruvete z zamaškom iz celuloze ali gaze
Material za možganske abscese in biopsijski material za vnetne procese v centralnem živčnem sistemu	Brizga z iglo, vstavljeno v sterilni gumijasti zamašek; epruveta s tioglikolnim medijem, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; transportne posode z medijem za ohranjanje anaerobov
spodnji dihalni trakt
Biopsijski material pljuč in sapnika; naravno izkašljevanje in induciranje izpljunka; strganje iz bronhijev	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko (za zbiranje izpljunka); v laboratoriju pripravljena sterilna steklena posoda
Trahealni aspirat, bronho-alveolarna lavaža, bronhialni izpirki	Sterilna posoda za zbiranje izpljunka za enkratno uporabo z navojno zaporko; tesno zaprta sterilna steklena viala
Aspirirajte transtrahealno in pljuča	Posebni transportni kontejnerji z medijem za anaerobe; brizga z iglo, vstavljeno v sterilni gumijasti zamašek; posoda s tioglikolnim medijem; sterilna plastična posoda za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom; tesno zaprto vialo
zgornjih dihalnih poti
Brisi iz nosu, žrela, nazofarinksa, zunanjega ušesa	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (tubeser) ali transportno posodo z ustreznim medijem; transportna posoda za viruse; sterilna steklena posoda, sestavljena v laboratoriju
Izpiranje nosu, nazofagealni aspirat	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; transportna posoda za viruse
Tekočina iz timpanocenteze, sinusni aspirat iz aspiracije z iglo	Injekcijska brizga z iglo, razkužena po manipulaciji z tamponom, navlaženim s 70% etilnim alkoholom, in vstavljena v sterilni gumijasti zamašek; možno je prenesti material iz brizge v sterilne epruvete za enkratno uporabo ali steklene epruvete ali posebno posodo z medijem za transport anaerobov
Tkivo, pridobljeno med operacijo nosu, žrela, ušesa	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; epruveta s tioglikolom ali drugim transportnim medijem, tesno zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; tesno zaprta sterilna plastična ali steklena viala za enkratno uporabo
Ostružki iz veznice očesnega kota	Brisi na stekelcih brez maščobe; material, ki ga odnesemo v posebno transportno posodo z gojiščem ali cepimo v hranilno gojišče
znotrajočesna tekočina	Brisi na stekelcih brez maščobe; material, ki ga odnesemo v posebno transportno posodo z medijem za anaerobe ali brizgo z iglo, predhodno razkuženo s 70 % etanolom, zataknjeno v sterilni gumijasti zamašek.
Izcedek, vzet s sterilno stekleno paličico ali sterilno vatirano palčko iz sluznice spodnje prehodne gube, z roba veke, z razjedo - z roženice (po anesteziji), z angularnim konjunktivitisom - iz vogalov veke	Sterilna steklena epruveta za enkratno uporabo s sladkorno juho, v katero je nameščena sonda za bris, ali sterilna steklena palčka za odvzem vzorca; poseben ladijski zabojnik z medijem za viruse
Skrivnost iz solznega mešička	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilni suhi epruveti (tubeser) ali v stekleni epruveti
genitourinarni sistem
Povprečni delež prosto tekočega urina; iz ilealnega kanala, ki se uporablja za ustvarjanje umetnega mehurja; katetra pri bolnikih na intenzivni negi. Izpiranje iz mehurja. Vzorec, pridobljen med dvostransko sečnično kateterizacijo	Sterilna posoda za zbiranje urina za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali sterilna epruveta za enkratno uporabo s pokrovčkom; ali posebno epruveto za zbiranje urina za enkratno uporabo. Pri uporabi sterilne steklene epruvete z zamaškom iz celuloze ali vate pazite, da zamaška ne prepojite z materialom (volumen vzorca 10-20 ml)
Vzorec, pridobljen med suprapubično aspiracijo	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; sterilna brizga z iglo, predhodno razkuženo s 70% etilnim alkoholom in zataknjeno v gumijasti zamašek
Material iz ženskih spolnih organov
Tekočine: amnijska, jajcevodna, bartholinova	Posebna transportna posoda z medijem za anaerobe; brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; brizga z iglo, obdelano s 70% alkoholom in vstavljeno v sterilni gumijasti zamašek (volumen vzorca 1-2 ml)
Vzorci iz cervikalnega kanala, sečnice, nožnice	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (gomolj) ali transportno posodo s posebnim medijem; sondo za bris, nameščeno v zamašku iz celuloze ali vate sterilne steklene cevi. Mikroskopsko stekelce s pripravljenim brisom za preiskavo bakterijskih spolno prenosljivih okužb in virusov. Epruveta s transportnim medijem z aktivnim ogljem za ohranitev gonokokov 48 ur ali več
Vzorci materiala iz endometrija	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko ali epruveta ali transportna posoda z anaerobnim medijem; sterilna steklena posoda
Material zunanjih genitalij	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; predmetno stekelce z brisom pokrito s pokrovnim stekelcem za določanje T. pallidum; sonda za bris, nameščena v sterilni cevki za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleni cevki; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za shranjevanje gonokokov in transportnih posod za viruse in klamidijo; brisi na stekelcih za odkrivanje drugih spolno prenosljivih okužb
Material iz moških reproduktivnih organov
brisi iz sečnice	Sonda-tampon na aluminijasti osi (uretralna sonda-tampon), nameščena v sterilne epruvete za enkratno uporabo (tubeser) ali steklene epruvete; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za ohranjanje gonokokov in transportnih posod za viruse in klamidijo; brisi na stekelcih za odkrivanje drugih spolno prenosljivih okužb
ejakulat, sperma	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; sterilna tuba ali tuba, za enkratno uporabo ali steklo
Material epididimisa pri epididimitisu	Posebna transportna posoda z medijem za anaerobe ali posoda s tioglikolnim medijem; sterilni vsebnik za enkratno uporabo z navojno zaporko ali sterilna steklena cev z zamaškom iz celuloze ali gaze
Lezija penisa	Brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; stekelec z brisom na T. pallidum, pokrit s pokrovnim stekelcem; sonda za bris, nameščena v sterilni cevki za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleni cevki; transportni kontejnerji za viruse in klamidijo; brisi za odkrivanje drugih povzročiteljev spolno prenosljivih okužb
Material za sum na gonorejo
Brisi iz anusa, cervikalnega kanala, sečnice, nožnice	Sonda za bris, nameščena v sterilni cevki za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleni cevki; posebna transportna cev z medijem z aktivnim ogljem za ohranitev gonokokov 48 ur ali več
Prebavila
Ustne votline	Sonda za bris, nameščena v sterilni cevki za enkratno uporabo (tubeser) ali stekleni cevki; sterilna posoda za enkratno uporabo ali steklena posoda za zbiranje izpiranja iz ustne votline
Izpiranje želodca ali tekočina za izpiranje; duodenalni aspirat; vzorec, pridobljen med sigmoidoskopijo; material rektalne biopsije	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; posebna sterilna posoda za zbiranje sputuma; sterilna steklena posoda; aspirat - v sterilno brizgo s predhodno razkuženo iglo, zataknjeno v sterilni gumijasti zamašek
Rektalni bris	Sterilna sonda za bris za enkratno uporabo, nameščena v sterilno suho epruveto (gomolj); ali sterilna epruveta s posebnim transportnim medijem; sonda za bris iz nerjavečega materiala, nameščena v celulozni ali gazni zamašek sterilne steklene cevi
Iztrebki za prisotnost črevesnih okužb ("disgroup"), Helicobacter, Campylobacter	Sterilna epruveta z brisom v fiziološki raztopini z glicerinom; transportna posoda z gojiščem za anaerobe v fekalnih vzorcih, s posebnimi gojišči z in brez aktivnega oglja za izolacijo Campylobacter sp. in Helicobacter sp.; sonda za bris v suhi sterilni epruveti za enkratno uporabo (tubeser); sterilna steklena cev, nameščena s sondo za bris na kovinsko žico iz titana, jekla, aluminija. Uporaba tampona z leseno osjo ni dovoljena
Iztrebki za prisotnost disbakterioze glede na generično in vrstno sestavo mikrobov ("za floro")	Posebna transportna posoda z gojiščem za anaerobe v fekalnih vzorcih, z in brez posebnih gojišč z in brez aktivnega oglja, za izolacijo Campylobacter sp. in Helicobacter sp., odobreni za uporabo za te namene v Ruski federaciji na predpisan način; sondo za bris v viali s fiziološko raztopino z glicerinom v sterilni viali za enkratno uporabo ali stekleni viali; posebna sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; laboratorijsko nameščena steklena posoda
Iztrebki za prisotnost disbakterioze s kvantitativnim izračunom izoliranih in identificiranih mikrobov ("za disbakteriozo")	Posebne sterilne posode za enkratno uporabo z navojno zaporko in lopatico za zbiranje materiala in vzorčenje za inokulacijo, ki imajo standardno težo; laboratorijsko nameščena posebna sterilna steklena posoda
Koža in podkožna tkiva
Razjede, vozliči (nodularne zadebelitve), plitve, površinske rane (gnojne; opekline); globoke rane ali abscesi, kosti	Posebne sterilne posode za enkratno uporabo z navojno zaporko; sterilne epruvete z zamaški za enkratno uporabo ali steklene s prostornino 5 ml; posode s posebnimi mediji za anaerobe
Eksudat podkožnih in mehkih tkiv; aspirat mehkega tkiva	Sterilna brizga brez igle, zaprta s sterilnim gumijastim zamaškom; brizga z iglo, ki je bila predhodno razkužena s 70% etilnim alkoholom in zataknjena v gumijasti zamašek
Sterilne telesne tekočine, razen krvi, cerebrospinalne tekočine, urina (glej zgoraj)
Tekočine
Plevralni, peritonealni, ascitični, sklepni, sinovialni	Sterilna posoda za enkratno uporabo z navojno zaporko; zaprta brizga brez igle ali z iglo, predhodno dekontaminirano s 70% etilnim alkoholom in zataknjeno v sterilni gumijasti zamašek
Biomaterial za PCR diagnostiko
kri; druge telesne tekočine	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z zamaškom 1,5 ml z antikoagulantom. Epruveta se 3-5-krat obrne, da se vzorec zmeša z antikoagulantom. Dostava v laboratorij - v stojalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu
material za biopsijo; strganje; sputum in druge vrste biomateriala	Sterilne suhe tube za enkratno uporabo tipa "Eppendorf" in druge podobne. Dostava v laboratorij - v posebnem stojalu iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu
Vzorci okolja, ki obdaja bolnika
zrak	Sterilne petrijevke za enkratno uporabo (=90 mm) ali steklene (=100 mm) z gostim hranilnim medijem. Dostava v laboratorij v posebnih transportnih posodah
Izpiranje iz predmetov okolja, ki obdajajo bolnika
Vzorci za ugotavljanje sterilnosti
Kri in komponente krvi iz oddelka, ki jih zbira	Posode s pripravljenim materialom dostavimo v laboratorij v posebnih transportnih posodah.
Izpiranje iz medicinskih instrumentov, cevi opreme, ki se uporabljajo v oddelkih za oživljanje in anestezijo ter v operacijskih sobah; roke medicinskega osebja; spodnje perilo	Sterilne sonde za brise, nameščene v prozorne epruvete s prozornim brezbarvnim tekočim medijem. Vzorci se dostavijo v laboratorij v stojalih iz materialov, ki jih je treba sterilizirati v avtoklavu.
Kirurški material: tamponi, prtički, turunde, vatirane palčke na leseni osi	Sterilne prozorne epruvete z zamaški, s prozornim brezbarvnim tekočim gojiščem s 3-5 sterilnimi steklenimi kroglicami. Vzorci se dostavijo v laboratorij v stojalih iz materialov, ki jih je treba sterilizirati v avtoklavu.
Šivalni material: katgut, shranjen v operacijski sobi v alkoholni raztopini joda	Sterilna epruveta (steklenica z zamaškom) z raztopino nevtralizatorja (natrijev hiposulfit)
Svilene, kapronske, monomerne sintetične niti, shranjene v operacijski sobi v alkoholni raztopini	Sterilna epruveta z zamaškom s sterilno destilirano vodo kot tekočino za izpiranje. Vzorce šivalnega materiala dostavimo v laboratorij v stojalih za sterilizacijo v avtoklavu.
Izpiranje z operacijskega polja pacienta	Pred obdelavo polja: v prozornih epruvetah, napolnjenih s prozornim tekočim hranilnim medijem. Po obdelavi polja: sterilna epruveta (steklenica z zamaškom) z raztopino nevtralizatorja (natrijev hiposulfit). Dostava materiala v laboratorij poteka v stojalih za sterilizacijo v avtoklavu.
Vzorci za določanje imunoloških dejavnikov protiinfektivnega zaščitnega sistema (sistem protiinfektivne odpornosti telesa - SAIR)
Kri in druge telesne tekočine za določanje humoralnih zaščitnih faktorjev	Brizge za epruvete za enkratno uporabo (vacutainers); sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojno zaporko; sterilne steklene epruvete s sterilnimi zamaški iz gume, celuloze ali gaze. Vzorci se dostavijo v laboratorij v posebnem stojalu, izdelanem iz materialov za sterilizacijo v avtoklavu. Pri uporabi steklenih epruvet z zamaški iz gaze - med transportom jih ne namakajte
Kri in druge telesne tekočine za določanje celičnih zaščitnih faktorjev	Sterilne epruvete za enkratno uporabo z navojno zaporko; sterilne steklene epruvete, tesno zaprte s sterilnim gumijastim zamaškom. Epruvete za enkratno uporabo z antikoagulantom za centrifugiranje. Dostava v laboratorij poteka v posebnem stojalu iz materialov, ki jih je treba sterilizirati v avtoklavu.
Pap bris za bakterijske in virusne antigene (na primer, če sumite na spolno prenosljive okužbe)	Sterilno stekelce brez maščobe; za T. pallidum je treba stekelec pokriti s pokrovnim stekelcem. Dostava v laboratorij se izvaja v posodi za enkratno uporabo ali sterilnih petrijevkah za enkratno uporabo ali steklenih posodah v posebnih posodah.

Opomba. Vzorce gnoja, tekočine in tkiva je treba dostaviti v laboratorij v posebnih sterilnih posodah za enkratno uporabo z navojnimi pokrovčki. Sonde za brise - sušimo v sterilnih epruvetah (gomoljih) za enkratno uporabo ali v posodah s transportnim medijem, če materiala ni mogoče dostaviti v laboratorij takoj po vzorčenju. Za te namene lahko uporabite transportne medije, vklj. v epruvetah za enkratno uporabo, pakiranih skupaj s sterilno sondo za bris, odobreno za uporabo v Ruski federaciji na predpisan način. Sonde za bris se proizvajajo (pripravljajo) iz različnih materialov: za sam tampon (vata, bombaž, viskoza, dacron), za os sonde (les, plastika, nerjavna kovina - titan, jeklo, aluminij) in gosto agarno gojišče: z ogljikom in brez njega za anaerobe.


Številni klinično pomembni anaerobi, kot so Clostridium perfringens, Bacteroides fragilis, so dovolj tolerantni na prisotnost kisika in se dobro ohranijo v veliki količini gnoja, vzorcev tekočine in telesnih tkiv, kot tudi na sondi za bris v posebnem transportu ali tioglikolu. mediji.

Bolj občutljivi na kisik (na primer fuzobakterije) so tudi dobro ohranjeni v vzorcu biološkega materiala in če je material posejan v 2-3 urah od trenutka zbiranja, potem posebna pozornost na način dostave ni potrebna. . Anaerobi, ki zahtevajo posebne pogoje gojenja, ne ostanejo sposobni preživeti na sondi za bris v transportni posodi z gojiščem, ki ni namenjeno za dostavo anaerobov, z izjemo posod s posebnimi transportnimi gojišči ali tioglikolom.

Hkrati pa ti mikroorganizmi rastejo 5-7 dni dlje od časa, v katerem večina praktičnih laboratorijev inkubira posode, inokulirane z materialom za izolacijo in identifikacijo aerobov in fakultativnih anaerobov. Zaradi tega se rutinsko testiranje prisotnosti anaerobov s posebnimi transportnimi anaerobnimi posodami z gojišči zdi neustrezno v običajnih praktičnih laboratorijih in se lahko omejimo na epruvete s tioglikolnim medijem.

Za zbiranje in prevoz vzorcev se uporabljajo mediji, posode, orodja in materiali, ki so odobreni za uporabo v Ruski federaciji na predpisan način.

6. Pravila in tehnike pridobivanja vzorcev različnih vrst biološkega materiala za mikrobiološke raziskave

Vsak vzorec od pacienta, ki zahteva uporabo invazivnih metod, je priporočljivo opraviti zdravnik (razen vzorca krvi, ki ga lahko odvzame proceduralna medicinska sestra).

Če je treba material odvzeti s sondo za bris na odprti delovni površini ali v primeru drugega invazivnega posega, je dovoljeno uporabiti že pripravljene sonde za bris z mednarodno varnostno stopnjo najmanj razreda IIA, ki so odobrene za uporabo pri teh namene v Ruski federaciji na predpisan način.

6.1. vzorci krvi

Vzorce za ugotavljanje prisotnosti bioloških povzročiteljev v krvi (bakteriemija, viremija itd.) dobimo z venepunkcijo perifernih ven (pogosto vene komolca), arterij ali iz petnice pri novorojenčkih.

Odvzem vzorca iz stalnega intravenskega ali intraarterijskega katetra je dovoljen samo v primeru suma na okužbo, povezano s katetrom, ali v primeru nezmožnosti pridobitve vzorca z venepunkcijo.

6.1.1. Pri akutni sepsi, meningitisu, osteomielitisu, artritisu, akutni nezdravljeni bakterijski pljučnici in pielonefritisu pred začetkom antibiotične terapije odvzamemo 2 vzorca iz dveh žil ali dveh delov krvne žile.

6.1.2. Če sumite na prisotnost endokarditisa in počasne sepse z majhno (10-30 CFU / ml) koncentracijo patogena v obtoku:

v prisotnosti akutnega procesa se odvzameta 2 vzorca iz dveh delov žil (različne žile) v prvih 1-2 urah po zvišanju telesne temperature (ne na vrhuncu temperature!) in pred začetkom terapije. ;

pri subakutnem ali počasnem poteku se prvi dan odvzamejo 3 vzorci v presledku 15 minut ali več. Če so vsi vzorci negativni, drugi dan po setvi odvzamemo še 3;

pri bolnikih z endokarditisom, ki prejemajo antibiotike, se vsak od treh dni odvzame 2 ločena vzorca s pozitivno klinično dinamiko terapije;

za potrditev klinične diagnoze "infektivni endokarditis", če ni mogoče pridobiti zahtevanega števila vzorcev krvi bolnika za mikrobiološko analizo ali če so kulture negativne, se vzorci krvi pošljejo za študijo imunoloških dejavnikov obrambnega sistema telesa. (sistem odpornosti proti okužbam - SAIR); dostava v laboratorij se izvaja v sterilnih steklenih ali epruvetah za enkratno uporabo s pokrovom (pluta), pridobljenih dan prej v laboratoriju;

če ima bolnik prirojeno srčno napako (CHD), je treba spomniti, da je CHD prodrom infektivnega endokarditisa, zato je določitev imunoloških dejavnikov CAD vključena v algoritem pregleda za takega bolnika.

6.1.3. Pri bolnikih, katerih terapija vključuje antibiotike, odvzamemo 6 vzorcev v 48 urah; vzorce je treba odvzeti neposredno pred dajanjem (zaužitjem) naslednjega odmerka zdravila.

6.1.4. Če ima bolnik vročino neznanega izvora, se najprej odvzameta 2 vzorca iz različnih krvnih žil (dva dela žile), nato pa po 24-36 urah še 2 vzorca ob povišani telesni temperaturi (ne pri najvišja temperatura!).

6.1.5. Tehnika odvzema vzorca krvi. Odvzem vzorcev krvi za kulturo izvajata 2 osebi ob pacientovi postelji ali v sobi za zdravljenje.

Če želite pridobiti vzorec, naredite naslednje:

razkužite območje kože nad žilo, izbrano za punkcijo: kožo obdelajte z tamponom, navlaženim s 70% etilnim alkoholom, nato z drugim tamponom, navlaženim z 1-2% raztopino joda ali drugim razkužilom, odobrenim za uporabo v te namene na predpisan način, v krožnih gibih, začenši od središča, v 30 s;

počakajte, da se tretirano območje posuši. Po obdelavi kože pred uvedbo igle ni dovoljeno palpirati posode;

pri delu z vialami z dvojnim medijem: s sterilno brizgo odvzamemo 10 ml krvi odraslih, otrok - 5 ml; odprite vialo nad plamenom žgane svetilke; injicirajte kri v vialo iz brizge, potem ko odstranite iglo; grlo in zamašek viale zažgite v plamenu alkoholne svetilke, vialo zaprite z zamaškom; previdno, da ne prepojite zamaška viale, s krožnimi gibi premešajte njeno vsebino.

Pri uporabi že pripravljenih vial z medijem in reagenti, ki nevtralizirajo antibiotike in uničujejo krvne celice, ali brez njih, odobrenih za uporabo v te namene v Ruski federaciji na predpisan način, odrasli prejmejo 10-30 ml krvi, otroci - 0,5 ml. - 3,0 ml.

pri čemer:

vzporedno z dezinfekcijo področja kože za prebadanje se pokrovčki steklenic obdelajo s 70% etilnim alkoholom (raztopine joda ni dovoljeno uporabljati za obdelavo pokrovčkov pri delu s steklenicami, na primer Bactec, Vital in drugi podobni, odobreni za uporabo za te namene v Ruski federaciji po ustaljenem vrstnem redu);

v "aerobne" in "anaerobne" posode vnesemo kri, pridobljeno od odraslih, v enakih količinah, medtem ko prebadamo zamašek posode; kri, prejeta od otrok - v posebni "otroški" steklenici, medtem ko preluknjate pluto posode.

6.1.6. Po venepunkciji in hemokulturi v posodi z gojiščem za preprečevanje morebitnega draženja (opeklin) odstranimo ostanke joda s pacientovega predela kože z blazinico, navlaženo s 70% etilnim alkoholom.

6.2. Testi za infekcijske in vnetne procese centralnega živčnega sistema (CNS)

6.2.1. Alkohol. 4,0-5,5 ml cerebrospinalne tekočine, pridobljene z lumbalno punkcijo iz subarahnoidnega prostora med vretenci L3-L4, L4-L5 ali L5-S1, pa tudi s punkcijo stranskih prekatov možganov, se pošlje v mikrobiološki laboratorij za raziskave. .

Odvzem vzorcev poteka s počasnim polnjenjem treh epruvet s tremi porcijami materiala za raziskave v laboratorijih. Uporabite sterilne epruvete s tesno prilegajočimi pokrovi (za enkratno uporabo z zamaškom ali steklene s sterilnim gumijastim zamaškom).

Od treh lumbalnih punkcijskih epruvet vedno pošljite epruveto z najbolj motno vsebino, običajno drugo epruveto v postopku zbiranja.

Po prejemu materiala s punkcijo stranskih prekatov možganov se sveže vzeta cerebrospinalna tekočina iz brizge, po predhodni odstranitvi igle, vnese v sterilno epruveto nad plamenom alkoholne svetilke, vratu epruvete. in zamašek sežgejo v plamenu alkoholne svetilke (pri delu s stekleno cevjo, zaprto z vatirano gazo ali gumijastimi zamaški), zaprta zamaška.

V vseh primerih, pri katerih obstaja sum na meningitis, se poleg likvorja odvzame material iz domnevnih žarišč okužbe: brisi iz nazofarinksa, srednjega ušesa, vzorci krvi in ​​se skupaj z likvorjem pošljejo v laboratorij. Dober način za ohranitev meningokoka za daljši čas (do 48 ur) je odvzem materiala z brisom in vlaganje v epruveto s transportnim medijem z ali brez aktivnega oglja.

Likvor za mikrobiološke raziskave takoj pošljemo v laboratorij na grelno blazino za vzdrževanje temperature 35-37 °C. Če to ni mogoče, se cerebrospinalna tekočina zbere v posodo s transportnim medijem in pusti v hladilniku (pri temperaturi 4-8 ° C) do jutra, nato pa se dostavi v laboratorij.

Če je potrebno izvesti virološke študije, se vzorci CSF postavijo v hladilnik pri temperaturi 2-8 ° C ali zamrznejo ali shranijo pri sobni temperaturi v posodah s posebnim tekočim medijem.

6.2.2. Material iz možganskih abscesov. Glede na to, da v 90% primerov v vzorcu rastejo anaerobi, se material aspirira iz žarišča in pošlje v laboratorij v posodah z anaerobnim medijem, odobrenim za uporabo za te namene v Ruski federaciji na predpisan način, ali v brizgi. s katerim smo odvzeli vzorec, po odstranitvi igle in zaprite brizgo s sterilnim gumijastim zamaškom.

Vzorec dostavimo takoj po prejemu.

6.2.3. material za biopsijo. Vzorce odvzamemo med operacijo, damo v posodo z anaerobnim gojiščem ali v sterilno epruveto s tioglikolnim gojiščem, zaprto s sterilnim gumijastim zamaškom.

Material se takoj pošlje v laboratorij.

6.3. Testi za infekcijske in vnetne procese oči

Večino očesnih vzorcev odvzame oftalmolog. Te vzorce je treba inokulirati na hranilne gojišča ob bolnikovi postelji ali v sobi za zdravljenje ali v zdravniški ordinaciji ob sprejemu, in inokulirani material je treba prenesti v laboratorij za gojenje, izolacijo, identifikacijo in določanje občutljivosti na antibiotike povzročitelji bolezni. Vzorce, odvzete z invazivnimi in drugimi agresivnimi metodami, odvzamemo vzporedno z brisom veznice, ki v tem primeru služi kot kontrola.

Dan prej, za 6-8 ur (ponoči), prekličite vsa zdravila in postopke.

Ob prisotnosti specifičnih kliničnih manifestacij infekcijsko-vnetnega procesa ali sumov, ki jih ima zdravnik, je nujno, da se pred anestezijo pripravijo brisi za določitev klamidije in virusov, zdravila pa se pošljejo v laboratorij. Za ohranitev klamidije in virusov se material zbira v posodah s transportnimi mediji.

Izcedek se zbira s sterilno stekleno palico ali sterilnim sondo-tamponom: dva ali tri gibe izvedemo vzdolž sluznice spodnje prehodne gube, od roba veke; z razjedo - iz roženice (po anesteziji), z "kotnim konjunktivitisom" - iz vogalov vek.

Izloček iz solznega mešička po nežni masaži odvzamemo s sterilno sondo za bris.

Material, odvzet s paličico in/ali sondo za bris, damo v posodo s transportnim medijem ali v sterilno stekleno epruveto s tekočim medijem in dostavimo v laboratorij, pri čemer pazimo, da ne prepojimo celuloznega ali vato-gaznega zamaška. cev.

Pri uporabi sond za bris je bolje uporabiti posode za enkratno uporabo s transportnim medijem ali sterilne steklene epruvete z vatirano-gaznimi zamaški, napolnjene s sterilnim medijem.

Najbolj pravilne informacije o povzročitelju vnetnega procesa je mogoče dobiti z mikrobiološko analizo strganja.

6.3.1. Konjunktivitis in blefarokonjunktivitis. Dan prej, za 6-8 ur (ponoči), se bolnikom v bolnišnici prekličejo vsa zdravila in postopki.

Vzorce iz veznice odvzamemo s sterilno, predhodno navlaženo sondo-tamponom iz viskoze ali kalcijevega alginata, ki se nahaja v sterilni epruveti ali stekleni epruveti za enkratno uporabo. Vzorce iz vsakega očesa odvzamemo z ločenimi brisi z dvema ali tremi krožnimi gibi po sluznici.

Gomolje z brisi iz vsakega očesa označite "desno" oziroma "levo" in takoj poslali v laboratorij.

Pred strganjem se injicira 1-2 kapljici anestetika, na primer proparakain hidroklorida ali drugega, ki je na voljo in odobren za uporabo v te namene na predpisan način.

Z dvema ali tremi kratkimi ostrimi gibi v eni smeri se strganje iz veznice zbere s posebno sterilno lopatico. Med manipulacijo mora biti oko odprto.

Pazite, da se pri odvzemu vzorca ne dotaknete trepalnic.

Pripravite vsaj 2 razmaza iz vsakega očesa tako, da material s krožnimi gibi nanesete na čisto, razmaščeno predmetno stekelce na površino premera 1 cm.

Brise fiksiramo 5 minut v 95% metilnem alkoholu, ki je v posebni, tesno zaprti posodi.

takoj epruvete s sondami za brise in kozarci z brisi se prenesejo v laboratorij.

6.3.2. bakterijski keratitis. Dan prej, za 6-8 ur (ponoči), se bolnikom v bolnišnici prekličejo vsa zdravila in postopki.

Vzemite 2 vzorca iz veznice, kot je opisano v 6.3.1, ker rezultati kulture so lahko koristni pri določanju vira kontaminacije roženice (en vzorec se uporabi pri sumu na glivično okužbo).

Če sumimo na virusno okužbo, konjunktivni eksudat in material, pridobljen s strganjem, damo v poseben transportni medij za viruse.

Anestezija se izvaja, kot je navedeno v klavzuli 6.3.1.

Zberite 3–5 ostružkov po metodi, opisani v odstavku 6.3.1.

Zbrani material damo v majhno (5 ml) sterilno epruveto za enkratno uporabo z navojno zaporko ali sterilno stekleno epruveto z gumijastim zamaškom, napolnjeno z medijem.

Pripravite 2-3 brise na stekelcu in jih po sušenju fiksirajte, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

takoj ves material se pošlje v laboratorij.

6.3.3. Bakterijski endoftalmitis. Z aspiracijo s tanko iglo se odvzame vzorec steklovine (1-2 ml), vzorec pa se pridobi med vitrektomijo.

Nato naredite naslednje:

Po odstranitvi igle iz brizge vsebino damo v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali epruveto, tesno zaprto z gumijastim zamaškom;

vzorec materiala lahko pustite v brizgi, odstranite zrak in odstranite iglo, zaprite brizgo s sterilnim gumijastim zamaškom;

odvzemite vzorec veznice, kot je opisano v odstavku 6.3.1;

ves material takoj poslali v laboratorij.

6.3.4. Preseptalni celulitis. Kožo obdelamo s 70% etilnim alkoholom in 1-2% raztopino joda ali jodoforma ali drugega razpoložljivega razkužila, odobrenega za uporabo na predpisan način.

Če ni odprte rane, se zgornja ali spodnja veka preluknja, da se zbere material.

V prisotnosti odprte rane se vzorec gnojnega materiala zbere z brizgo z iglo.

Pripravite brise na stekelcu, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

Zbrani material se prenese v transportno posodo z medijem za anaerobe ali pusti v brizgi, ki se po odstranitvi zraka iz nje in odstranitvi igle zapre z zamaškom.

Zbrani material in brisi takoj poslali v laboratorij.

6.3.5. Orbitalni celulitis. Zberite aspirat iz območja v skladu z metodo, opisano prej v odstavku 6.3.2.

Vzemite vzorec iz veznice in pripravite brise na stekelcu, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

Za dostavo v laboratorij uporabite materiale, opisane v klavzuli 6.3.3.

Pacientu odvzemite vzorce krvi v skladu z metodo, opisano v odstavku 6.1. Vzorci krvi, ves zbrani material se prenese v laboratorij.

6.3.6. Vnetje solzne žleze (dakriadenitis).

Gnojna vsebina se zbere s sondo za bris, kot je navedeno v odstavku 6.3.1.

Ne uporabljajte metode aspiracije z iglo, da ne porušite celovitosti solzne žleze.

Sondo za bris in stekelca z brisi prenesemo v laboratorij.

6.3.7. Vnetje solzne vrečke (dakriocistitis). Vzemite vzorec veznice, kot je opisano v odstavku 6.3.1.

Z masažo in pritiskom na solzni mešiček pridobimo vzorec eksudata za kulturo in pripravo brisov ali z drugo metodo odvzamemo eksudat z brizgo in iglo.

Zbrani vzorec eksudata postavite v transportne posode, kot je opisano prej, in jih dostavite v laboratorij.

6.3.8. Kanalikulitis. Pritisnite notranjo stran veke, da dobite gnoj.

Nadaljnje delo se izvaja v skladu z metodami, opisanimi prej v tem razdelku.

Če v zdravstveni in preventivni organizaciji obstaja specializiran oddelek (klinika), se vsi pridelki opravijo ob pacientovi postelji na hranilnih medijih, pridobljenih v laboratoriju. Inokulirani material skupaj s pripravljenimi brisi prenesemo v laboratorij.

6.4. Testi za infekcijske in vnetne procese ušesa

6.4.1. V primeru poškodbe zunanjega ušesa kožo obdelamo s 70% alkoholom, nato pa speremo s sterilno fiziološko raztopino. Izcedek iz žarišča odvzamemo na sterilno sondo za enkratno uporabo gomolja ali epruvet s transportnim gojiščem ali na palčko, nameščeno v sterilno stekleno epruveto, zaprto z zamaškom, s posebnim gojiščem ali brez njega. Bris damo v epruveto in dostavimo v laboratorij.

6.4.2. Pri poškodbah srednjega in notranjega ušesa se odvzamejo pikice in drugi materiali, pridobljeni med operacijo. Točke se dostavijo v laboratorij v zaprti brizgi s predhodno odstranjenim zrakom. Vzorci tkiv - v transportnem vsebniku z anaerobnim medijem, odobrenim za uporabo za te namene v Ruski federaciji v skladu z uveljavljenim postopkom, ali v sterilnem vsebniku za enkratno uporabo z navojno zaporko. Možna je uporaba sterilne steklene epruvete, zaprte s sterilnim gumijastim zamaškom.

6.4.3. Timpanocentezo bobniča izvajamo za mikrobiološko diagnostiko vnetja srednjega ušesa le v primerih, ko se bolnik ne odzove na predhodno zdravljenje ali v primeru torpidnega kataralnega vnetja srednjega ušesa tudi v odsotnosti eksudata v štrleči krvi (setev iz nazofarinksa je pozitiven v manj kot 90 % primerov).

Za pridobitev vzorca se zunanji kanal očisti z tamponom, navlaženim s 70% etanolom, čemur sledi obdelava s sterilno fiziološko raztopino.

Z brizgo se tekočina zbere iz bobnične votline. Vzorec se dostavi v laboratorij v sterilni posodi za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v zaprti brizgi, iz katere je predhodno odstranjen zrak.

Če je bobnič poškodovan, se material odvzame s sondo za bris z ogledalom. Bris damo v sterilno epruveto za enkratno uporabo (gomolj) ali posodo s transportnim medijem (dovoljena je uporaba sterilne steklene epruvete z ali brez gojišča) in v tej obliki dostavimo v laboratorij.

6.5. Testi za infekcijske in vnetne procese dihalnih poti

6.5.1. zgornjih dihalnih poti. Če sumimo na davico, oslovski kašelj, klamidijo, mikoplazmozo, legionelozo, gonorejo, o tem obvestimo laboratorijske delavce pred oddajo vzorca, da se pripravijo na analizo tovrstnega materiala.

6.5.1.1. Vzorec iz sluznice sprednjih delov nosne votline se odvzame z eno sterilno sondo za bris, nameščeno v sterilni epruveti za enkratno uporabo (tubeser) ali posebej nameščeno v sterilno stekleno epruveto:

odstranite bris iz epruvete, vstavite v desno nosnico in zavrtite material iz nosnih kril in zgornjega kota nosne odprtine;

ponovite manipulacijo za levo nosnico;

bris damo v epruveto in dostavimo v laboratorij.

Tako pridobljeni vzorci so uporabni za ugotavljanje nosilnosti Staphylococcus aureus pri zdravstvenih delavcih, prisotnosti povzročiteljev bolnišničnih okužb, pa tudi za karakterizacijo disbiotičnih obolenj sluznice zgornjih dihalnih poti med celovitim kliničnim in imunomikrobiološkim pregledom bolnikov. izvajajo v znanstvenih in praktičnih laboratorijih.

Če so v nosni votlini žarišča vnetja ali razjede, se z ločenim brisom odvzame material iz žarišč (žarišč).

6.5.1.2. Aspirati iz nazofarinksa se zbirajo za določitev prenašanja piogenega streptokoka, meningokoka, povzročiteljev davice in oslovskega kašlja, pa tudi pri izvajanju epidemioloških študij protimikrobne odpornosti S. pneumoniae in H. influenzae:

sesalni material iz nazofarinksa;

material prenesite v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali posebno sterilno epruveto s plinoprepustnim celuloznim ali gaznim zamaškom, pri čemer pazite, da ne prepojite z vzorcem kliničnega materiala.

6.5.1.3. Bris iz nazofarinksa. Material se zbira za določitev prenašanja meningokokov in diagnozo oslovskega kašlja.

Previdno, z rotacijskimi gibi vzdolž spodnjega nosnega prehoda, se bombažna, viskozna ali kalcijeva alginatna sonda-tampon izmenično vstavi v nazofarinks v nazofarinks. Istočasno se krila nosu pritisnejo na bris in nosni septum za tesnejši stik s sluznico.

Bris damo v sterilno epruveto in dostavimo v laboratorij.

6.5.1.4. Izpiranje nosu se uporablja za ugotavljanje prisotnosti ne le bakterijske, temveč tudi pretežno virusne okužbe.

Pacienta opozorite, naj med postopkom ne požira.

Pacientovo glavo položimo v položaj navzgor pod kotom približno 70°, v vsako nosnico vbrizgamo 5 ml sterilne fiziološke raztopine, bolnik naj bo v tem položaju 3-5 sekund.

Za zbiranje materiala se pacientova glava spusti naprej, tako da se tekočina izliva iz nosnic v sterilno posodo za enkratno uporabo, ali pa se tekočina aspirira z uvedbo gumijaste drenaže v vsako nosnico.

Enako količino tekočine za izpiranje postavite v posodo s transportnim medijem za viruse ali pa ta del dostavite v sterilno posodo za enkratno uporabo.

6.5.1.5. Punkcija sinusa. S tehniko aspiracije z brizgo posebej usposobljeni izkušeni zdravnik ali otorinolaringolog pridobi material iz maksilarnih čelnih ali drugih sinusov. Vsebino brizge damo v posodo s transportnim medijem za anaerobe ali v sterilno epruveto s tioglikolnim medijem. Material lahko pustite v brizgi in ga po zaprtju s sterilnim gumijastim zamaškom dostavite v laboratorij.

6.5.1.6. Pridobivanje vzorca iz sluznice žrela (žrela).

Odvzem materiala iz žrela (žrela) z vnetim epiglotisom ni dovoljen, saj lahko postopek povzroči resno obstrukcijo dihal.

Pri jemanju vzorca iz sluznice žrela (žrela) se z brisom ne dotikajte sluznice lic, jezika, dlesni, ustnic in ne zbirajte sline, saj je ta snov značilna za sluznico ustne votline, da je zgornji del gastrointestinalnega trakta.

Bris iz žrela (žrela) se odvzame na prazen želodec ali 3-4 ure po obroku. Pred odvzemom vzorca mora pacient sprati usta s toplo prekuhano vodo.

Za odvzem vzorca uporabimo sterilno spatulo ali palčko: iz sterilne epruvete za enkratno uporabo (tubeser) vzamemo viskozno palčko ali pa uporabimo v laboratoriju pripravljeno palčko, ki jo vstavimo v sterilno stekleno epruveto. Prednostna je uporaba sonde za bris z viskozno glavo, ker viskoza absorbira manj tekočine in več celičnega materiala.

Z eno roko pritisnemo pacientov jezik s sterilno spatulo.

Material zbiramo z drugo roko, izmenično obdelamo desno tonzilo, desni palatinalni lok, levi tonzil, levi palatinalni lok, jezik z brisom, v višini jezika se z brisom dotaknemo zadnje stene žrela.

Tako pridobljeni vzorci so uporabni za ugotavljanje prisotnosti povzročitelja bolnišnične okužbe, pa tudi za karakterizacijo disbiotičnih obolenj sluznice zgornjih dihalnih poti pri celovitem kliničnem in imunomikrobiološkem pregledu bolnikov v znanstvenih in praktičnih laboratorijih. .

Ob prisotnosti žarišč vnetja ali razjede na sluznici so še posebej pozorni na odvzem vzorcev in dodatno zbirajo material iz žarišč (žarišč) z ločenim brisom.

Bris damo v sterilno epruveto za enkratno uporabo ali stekleno epruveto in dostavimo v laboratorij.

6.5.1.7. Ob sumu na davico se obvesti laboratorijske delavce, ki v napotnici navedejo diagnozo.

V primerih respiratornega patološkega procesa se material hkrati zbira iz sluznice nazofarinksa in žrela po prej predstavljenih metodah.

Če obstaja sum na kožno obliko davice, se material odvzame s kože, pa tudi s sluznice žrela (žrela) in nazofarinksa, vsi vzorci pa se dostavijo v laboratorij.

6.5.2. spodnji dihalni trakt. Mikrobiološka diagnoza vnetnih procesov v spodnjih dihalnih poteh predstavlja resne težave, ker. med odvzemom je lahko vzorec kontaminiran z mikroorganizmi, ki kolonizirajo zgornje dihalne poti. Ta ekološka niša je precej posejana z oportunističnimi mikrobi, zlasti v prisotnosti disbakterioze (kvalitativno - vrstna sestava in / ali kvantitativno - koncentracija vrst, prisotnih v CFU / ml pri oslabljenem in / ali imunsko oslabelem kontingentu oseb).

Zato se vzorci materiala iz spodnjih dihalnih poti zbirajo posebej skrbno, da bi dobili pravilne podatke o etiološkem povzročitelju (povzročiteljih). Pri uporabi invazivnih metod odvzema vzorca (če do tega ne pride med operacijo) uporabljeni instrumenti prehajajo skozi zgornja dihala in obstaja realna možnost zasejanja globljih lokusov z mikroorganizmi - prebivalci zgornjih dihal.

6.5.2.1. izpljunek.

Rahlo ločen (izkašljen) sputum- Po možnosti zjutraj.

Pred odvzemom vzorca naj si pacient po možnosti umije zobe ter splakne usta in grlo s toplo prekuhano vodo, če pacient tega ne zmore sam, sanacijo njegove ustne votline opravijo zdravstveni delavci. .

Pacienta opozorite, naj v posodo ne zbira sline ali nazofaringealnega izcedka.

Vzorec izpljunka, ki ga dobimo zaradi močnega kašlja, odvzamemo v posebno sterilno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali v posebej pripravljen sterilni stekleni kozarec.

Vzorec sputuma se pošlje v laboratorij.

Induciran sputum (priporočljivo predvsem pri sumu na Mycobacterium tuberculosis in Pneumocystis yiroveci)- Po možnosti zjutraj.

Pred odvzemom vzorca naj si bolnik, če je le mogoče, umije zobe ter splakne usta in grlo s toplo, prekuhano vodo; če bolnik tega ne zmore sam, sanacijo njegove ustne votline opravi medicinsko osebje.

Pred posegom čisto zobno ščetko navlažite s toplo prekuhano vodo in z njo pojdite po sluznici obeh lic, jezika in dlesni.

Bolnikova usta aktivno sperite s toplo kuhano vodo.

Z inhalatorjem dajte bolniku, da pogoltne 20-30 ml 3-10% sterilne fiziološke raztopine.

Inducirani sputum zberite v posebno sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v sterilni stekleni kozarec, ki je ustrezno pripravljen.

Pošljite vzorec v laboratorij.

Hkrati z vzorcem sputuma je treba v laboratorij poslati faringealni (faringealni) vzorec, ki ga odvzamemo po toaleti ustne votline in tik pred odvzemom prosto izločenega (izkašljenega) ali induciranega sputuma.

6.5.2.2. Traheostomija in endotrahealni aspirati. Traheostomo kolonizirajo mikroorganizmi že 24 ur po pacientovi intubaciji, zaradi česar so rezultati študije kulture majhnega kliničnega pomena. Glede na zgoraj navedeno je treba rezultate kulture intubiranih bolnikov stalno primerjati s kliničnimi izvidi (npr. vročina ali rentgenski infiltrati).

Vzorce bronhialnih izpiranj ali bronhoalveolarne lavaže zberemo, če je mogoče, preden pridobimo vzorce strganja ali biopsije. Pravilo narekuje potreba po izogibanju odvečne krvi v nastali tekočini, ker. krvi lahko spremeni koncentracijo celičnih in neceličnih komponent vzorca in vpliva na rezultat mikrobiološke analize.

Vzorec aspirata odvzamemo v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali v ustrezno nameščeno sterilno stekleno posodo ali v sterilno stekleno epruveto za enkratno uporabo z zamaškom ali dostavimo v laboratorij v zaprti brizgi z odvzetim zrakom.

6.5.2.3. Vzorci, pridobljeni z bronhoskopom. Bronhoalveolarni izpirki (izbrani vzorec), bronhialni izpirki (nizka občutljivost pri diagnosticiranju pljučnice), bronhialni ostružki (pomembnejši od izpirkov), vzorci transtrahealne biopsije se pridobijo z vstavitvijo bronhoskopa transnazalno ali transoralno pri neintubiranem bolniku ali skozi endotrahealni tubus. pri intubiranem bolniku.

Za pridobitev vzorca bronhialnega izpiranja ali bronhoalveolarnega izpiranja:

injiciramo z brizgo skozi biopsijski kanal bronhoskopa v ločenih delih sterilne nebakteriostatske (uradne) fiziološke raztopine (skupni volumen od 5-20 do 100 ml);

pred vnosom naslednjega dela fiziološke raztopine previdno aspirirajte z vstavljenim delom brizge v sterilno embalažo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali v sterilno epruveto za enkratno uporabo ali stekleno cevko z zamaškom ali jo pustite v zaprti brizgi, pri čemer ste predhodno odstranili zrak iz njega (običajno je 50-70% vbrizgane fiziološke raztopine v izpiranju);

vsak odsesani del se zbere v ločeni posodi;

na koncu postopka se vzorci, pridobljeni z istega območja, združijo. Vzorce z različnih mest (npr. desnega zgornjega režnja pljuč in desnega spodnjega režnja) je treba združiti le po posvetu z lečečim zdravnikom;

v smeri navedite skupni volumen vbrizgane fiziološke raztopine.

Za pridobitev vzorca bronhialnega strganja:

skozi biopsijski kanal bronhoskopa vstavimo teleskopski dvojni kateter z distalnim koncem, obdelanim s polietilen glikolom (ali drugim ustreznim reagentom), da preprečimo kontaminacijo vzorca;

material zberemo v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v transportno posodo z anaerobnim gojiščem ali v sterilno epruveto z gojiščem tioglikola, tesno zaprto s sterilnim gumijastim zamaškom;

dostavite material v laboratorij.

Za transbronhialno biopsijo se vzorec zbere skozi biopsijski kanal bronhoskopa in ga da v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko z majhno količino (1-2 ml) nebakteriostatske (uradne) fiziološke raztopine ali v test epruveta z medijem tioglikola, tesno zaprta z gumijastim zamaškom, prenesena v laboratorije

6.5.2.4. Vzorci pljučnega aspirata. Za odvzem vzorca se igla vstavi skozi prsnico v pljučni infiltrat pod nadzorom CT skenerja. Material se aspirira iz žarišča vnetja. Če je infiltrat velik ali jih je več, je potrebno pridobiti več vzorcev iz ustreznih žarišč ali več vzorcev iz ene velike lezije. Material prenesemo v laboratorij v transportni posodi z gojiščem za anaerobi ali v stekleni epruveti s tioglikolnim gojiščem ali v navojni posodi za enkratno uporabo.

6.5.2.5. Vzorci biopsije pljuč. Če je mogoče, dobimo koščke tkiva velikosti 1-3 cm, če je lezija velika ali jih je več, odvzamemo več vzorcev. Vzorec damo v sterilno posodo za enkratno uporabo z navojno zaporko ali v transportno posodo z anaerobnim gojiščem ali v posodo (epruveto) z gojiščem tioglikola, zaprto s sterilnim gumijastim zamaškom.

6.6. Testi za infekcijske in vnetne procese genitourinarnega sistema

6.6.1. Vzorci urina.

6.6.1.1. Splošna pravila za vzorčenje:

ni dovoljeno zbiranje urina iz posteljnega perila ali iz pisoarja;

za analizo urina med naravnim uriniranjem uporabite povprečni jutranji del;

pred zbiranjem vzorca je potrebno temeljito sprati zunanje spolne organe in anus s toplo vrelo vodo; posebno pozornost je treba nameniti obdelavi odprtine sečnice pri moških (preddverju nožnice - pri ženskah), da zagotovimo, da med postopkom vzorec ne bo dodatno kontaminiran z mikrobi;

predelavi ni dovoljeno uporabljati razkužil, saj. če pridejo v vzorec, lahko zavirajo rast mikroorganizmov;

vzorec se prenese v laboratorij najpozneje 2 uri od trenutka odvzema;

za odvzem in dostavo vzorcev v laboratorij uporabljamo sterilne posode za enkratno uporabo z navojno zaporko ali epruvete (lahko uporabimo sterilne, posebej nameščene steklene epruvete s plinoprepustnim celuloznim ali gaznim zamaškom, pri čemer je treba posebno paziti, da namočite zamašek);

dostava vzorcev aspirata, dobljenih s tehniko suprapubične punkcije mehurja, v laboratorij poteka v transportni posodi s posebnim medijem za anaerobe ali v zaprti brizgi brez igle;

če sumite na virusno okužbo, se vzorci dostavijo v laboratorij v sterilni posodi za enkratno uporabo, položeni na stopljeni led (suh led ni dovoljen!);

vsak postopek za pridobivanje vzorca z uporabo katetra (zlasti pri ženskah) se izvaja ob natančnem upoštevanju pravil asepse, da se prepreči dodatna kontaminacija pacienta med uvedbo katetra;

za mikrobiološke raziskave ni dovoljeno uporabljati vzorca iz dnevne m

6.6.1.2. Odvzem vzorcev urina pri ženskah med naravnim uriniranjem.

Uporabite srednji del, ker. pri prvem prehodu urina je treba odstraniti komenzale, po možnosti v sečnici. Vzorec, zbran pri naslednjih prehodih, ne sme biti kontaminiran. Zanesljivost pozitivnih rezultatov takega materiala je 80 % pri odvzemu enega vzorca, 90 % pri odvzemu dveh zaporednih vzorcev in 100 % pri treh, če vsi vzorci dajejo enak rezultat.

Zdravstveni delavec, ki zbira vzorec, si mora umiti roke z milom in vodo, jih sprati z vodo in posušiti. Če vzorec odvzame pacient sam, se mu podrobno pojasni, kako to poteka, upoštevajoč zgoraj opisano pripravo, in ga opozori, kaj se lahko zgodi, če krši pravila:

temeljito sperite odprtino sečnice in območje preddverja nožnice, kot tudi perineum in anus z milnico ali tekočim milom, sperite s toplo vrelo vodo, posušite s sterilno gazo;

odprtino nožnice je treba zapreti s sterilno vatirano palčko;

med uriniranjem držite zunanje sramne ustnice na razdalji drug od drugega;

izpraznite majhno količino urina v posebno posodo za odlaganje brez prekinitve uriniranja;

zbrati povprečno količino urina (10-20 ml) v posebno posodo za enkratno uporabo z navojnim pokrovčkom ali sterilno stekleno posodo, ki je posebej sestavljena v laboratoriju.

6.6.1.3. Odvzem vzorcev urina pri moških med naravnim uriniranjem.

Pri moških je za mikrobiološko preiskavo potreben en obrok urina, ker. je bistveno manj verjetno, da bodo okuženi kot ženske.

Oseba, ki zbira vzorec, si mora umiti roke z milom, sprati z vodo in posušiti. Če pacient sam odvzema vzorce, mu je treba podrobno razložiti, kako to poteka, ob upoštevanju naslednje priprave, in ga opozoriti, kaj se lahko zgodi v primeru kršitve pravil:
[e-pošta zaščitena], bomo že ugotovili.

Izbor kliničnega materiala izvaja medicinsko osebje v skladu s pravili protiepidemijskega režima, samo s sterilnimi instrumenti za enkratno uporabo (brizge, ustrezne sonde, citoščetke itd.), V rokavicah za enkratno uporabo.

Čim bolj popolno odvzamemo material z izbranega lokusa z ustreznimi aplikatorji – sondami, citoščetkami (za zagotovitev ustreznosti kliničnega vzorca).

Dobljeni material (DNA/RNA mikroorganizmov) ohranite z uporabo zanesljivih transportnih medijev in konzervansov, ki jih zagotovi PCR laboratorij. Medij za transport in shranjevanje kliničnega materiala zagotavlja stabilnost RNA in DNA pri sobni temperaturi do 28 dni.

Odvzeti material damo v vakuete z EDTA (kri), v kemično čiste Eppendorfove epruvete za enkratno uporabo (brisi, likvor, biopsija itd.). Glavni pogoj za zbiranje materiala je preprečiti vstop DNaz in ribonukleaz v vzorec, saj ribonukleaze in DNAze so encimi za razgradnjo RNK in DNK. So izjemno stabilni v okolju, prenesejo dolgotrajno vrenje. Glavni vir nukleaz je koža, prašni delci. Plastične epruvete in konice morajo imeti oznako "DNase, RNase-free" (brez nukleaze).

Takoj po vzorčenju tesno zaprite epruvete, viale s kliničnim materialom, ne da bi se dotaknili njihove notranje površine in notranje površine pokrovov.

Pri delu s kliničnim materialom, pri odpiranju epruvet, vial, ne delajte nenadnih gibov in se izogibajte škropljenju in škropljenju, ki lahko povzroči kontaminacijo vzorcev in delovnih površin.

Da bi preprečili navzkrižno kontaminacijo, vzorce shranjujte in prevažajte v ločeni plastični vrečki ali stojalih. Če je potreben prenos vzorca, uporabite avtomatske mikropipete z zamenljivimi konicami za enkratno uporabo z aerosolnimi pregradami.

Pred transportom v laboratorij za PCR je treba izbrani biomaterial hraniti pri temperaturi 2–4 °C največ 48 ur. Potrebno je čim bolj skrajšati čas od odvzema vzorca do analize PCR. Prevoz vzorcev poteka v hladilnih torbah, termo posodah, termovkah s termo vrečkami, ledu ali suhem ledu.

Kri, plazma, serum

Vzorčenje krvi je priporočljivo z uporabo vakuumskih sistemov. Uvedba tovrstnih sistemov omogoča poenotenje manipulacij s krvjo, pozitivno vpliva na vse faze laboratorijskih raziskav in na splošno delo laboratorija prestavi na drugo, višjo raven kakovosti. Njihova uporaba zagotavlja zaščito osebja pred okužbo, skrajša čas, porabljen za postopek odvzema krvi, veliko manj spremlja hemoliza, omogoča ohranjanje sterilnosti vzorcev krvi in ​​​​njihov hermetični transport.

Venepunkcijo priporočamo na prazen želodec iz kubitalne vene v posebno vakuumsko cevko z antikoagulantom, nato pa cevko večkrat obrnemo za mešanje. Epruvete s krvjo hranimo v hladilniku pri +4 °С - +8 °С. Najdaljši rok uporabnosti krvi je 1 dan (ne zamrzujte!). Če je potrebno dolgoročno shranjevanje, je treba vzeti 1 ml seruma ali krvne plazme in ga hraniti pri temperaturi -16 o -20 o C največ 2 tedna.

Značilnosti vakuumskih sistemov, ki se uporabljajo za PCR diagnostiko:

Vakuete z EDTA (6%) - uporabljajo se za kvalitativne in kvantitativne raziskave. EDTA-antikoagulant dobro veže celične nukleinske kisline.

Vacuettes z natrijevim citratom (3,8%) se uporabljajo za kvalitativne in kvantitativne raziskave. Ni primeren za dolgotrajen prevoz, ker citrat je dober hranilni medij za tujo mikrofloro.

Vakuete brez antikoagulantov (krvni serum) - uporabljajo se za kvalitativne raziskave. Uporaba krvnega seruma za kvantitativne študije je nezaželena, ker. del kužnega povzročitelja se naseli v krvnem strdku, medtem ko je možnost določanja njegove količinske vsebnosti v krvi zmanjšana.

Vakuete s heparinom kategorično niso primerne za reakcije PCR. Heparin je polianion, tako kot DNK, zato tekmuje z DNK v reakciji PCR.

Primer standardnega operativnega postopka za sprejem biomateriala v medicinski laboratorij.

IME USTANOVE
Vrsta dokumenta	Standardni operativni postopek (SOP)
	Vpis v Enotni register laboratorijske dokumentacije	SOP-PA-01-2014
	primerek
	Skupno število strani
	spraviti v akcijo
	Veljavnost
Ime dokumenta	Pravila za sprejem in registracijo biomateriala v laboratoriju.

		Naziv delovnega mesta
Oblikovano od:
Preverjeno:
Dogovorjeno:

Tekoči naslov:

	Ime
	Področje uporabe
	Organizacija procesa prevoza biomateriala s kurirjem
	Sprejem biomateriala v laboratoriju
	Prenos biomateriala in napotitve na ustrezne oddelke laboratorijih
	Registracija naročilnic s strani operaterjev.
	Dodatek #1 Diagram poteka
	Priloga št. 2 Vrste neskladnosti in njihova odprava
	Dodatek št. 3 Stroj s senzorjem temperature hladilnika
	Dodatek št. 4 Obrazec-smer
	Priloga št. 5 List za seznanitev zaposlenih s SOP

1 področje uporabe

Ta standardni operativni postopek (v nadaljevanju SOP) določa postopek sprejema, evidentiranja biomateriala, ki vstopa v laboratorij iz posegne sobe IME USTANOVE in drugih institucij, ki jih laboratorij oskrbuje, ter ugotavljanje neskladnosti in njihovo odpravo.

Ta SOP je namenjen laborantom in laborantom.

1. Metodološka priporočila "Organizacija predanalitične faze pri centralizaciji laboratorijskih preiskav krvi" (Odobreno na vseruski znanstveni in praktični konferenci "Prave klinične diagnostične laboratorijske storitve: stopnja skladnosti s standardi laboratorijske medicine, kakovost, stroški in cena" « (Moskva, 2.–4. oktober 2012)
2. GOST R 53079.4─2008. “Tehnologije medicinskega laboratorija. Zagotavljanje kakovosti kliničnih laboratorijskih raziskav. Del 4. Pravila za izvajanje predanalitične stopnje. Veljati je začel 1. januarja 2010.
3. ISO 15189:2012 Medicinski laboratoriji. Zahteve za kakovost in usposobljenost"

3. Organizacija procesa prevoza biomateriala s kurirjem in odgovornost kurirja.

3.1. Temperaturo v hladilniku, ki je prikazana na zaslonu v potniškem prostoru avtomobila, zabeleži kurir v dnevniku "Dnevnik obračunavanja temperaturnega režima v hladilnikih avtomobilov" in tudi v tem dnevniku kurir navede svoje polno ime, registrsko tablico avtomobila in čas odhoda avtomobila za biomaterial neposredno pred odhodom v ustanove. Ta revija se nahaja v pisarni številka ___. (Fotografija temperaturnega senzorja in fotografija obrazca dnevnika sta v prilogi št. 3).

3.2. Kurir, ko prispe v zdravstveno ustanovo, gre v register te ustanove, kjer prevzame posode z različnimi biomateriali. Vsaka posoda je označena z imenom ustanove in vrsto biomateriala (kri, urin, iztrebki, stekelca z brisi, ostružki). Kurir postavi posode v vodoravni položaj v hladilnik stroja, kot je prikazano na fotografiji.

3.3. Kurir je odgovoren za celovitost posod, njihovo varnost, za zagotavljanje ustrezne temperature v hladilniku avtomobila (+4 - +8 ° C), pa tudi za varnost biomateriala, dostavljenega iz institucij v laboratorij. . Med potjo kurir spremlja temperaturo v hladilniku avtomobila, ki se prikazuje na zaslonu, nameščenem v avtomobilu.

4. Sprejem biomateriala v laboratoriju.

4.1 Temperaturo, ki je prikazana na zaslonu v hladilniku avtomobila v času odstranitve posod, kurir zabeleži v dnevniku "Dnevnik temperaturnega režima v hladilnikih avtomobilov" v stolpcu, ki ustreza na državno številko avtomobila. In tudi v istem dnevniku voznik navede čas prihoda avtomobila z biomaterialom iz institucij.

4.2. Kurir odda označene posode z vzorci krvi, brisi in ostanki bolničarju-laboratorju v sobi št. ___.

4.3. Kurir preda označene posode z urinom in iztrebki bolničarju-laboratorju v pisarni št. ___.

4.4. V pisarni št. ___ bolničar odpre pokrov posode in vzame epruvete s krvjo, stekelca z brisi in ostanki, mape z navodili za raziskave.

4.5. Bolničar razvršča epruvete ločeno v stojala, glede na vrsto epruvet (biokemične, hematološke in koagulološke) in nazive institucij, ki so navedene na regalih.

4.6. V sobi št.____ laborant odvzema vzorce iz posode z urinom, blatom in napotnico.

5. Prenos biomateriala in napotitve na ustrezne oddelke laboratorija.

5.1 V pisarni št. ____ bolničar-laboratorij postavi stojala z epruvetami za biokemične, imunološke, koagulološke študije v posode z oznako "za prenos biomateriala" in jih odnese v sobo št. ___ za centrifugiranje.

5.2 Paramedicinski laborant pokliče oddelke za hematologijo in PCR, da bolniški laboranti ustreznih oddelkov odvzamejo biomaterial iz sobe št. ___.

5.3. Bolničar-laboratorij pošlje navodila za raziskave iz sobe št. ___ operaterjem v sobi št. ____ za registracijo.

5.4 V kabinetu št. ___ bolničar-laboratorij posreduje navodila operaterjem, ki registrirajo obrazce v isti pisarni.

6. Registracija naročilnic s strani operaterjev.

6.1. Izvajalci v kabinetu št. ___ po prejemu napotnic od laborantke iz kabineta št. ___ le-te evidentirajo v laboratorijskem informacijskem sistemu.

Postopek registracije:

Operater prebere črtno kodo s skenerjem, nalepljenim na obrazec - smer;

Nato operater vnese podatke o pacientovem potnem listu v LIS: polno ime, datum rojstva, naslov prebivališča in druge podatke: vir naročila (obvezno zdravstveno zavarovanje, VHI, gotovina, zdravniški pregled), številka ustanove, oddelek, polno ime zdravnika. zdravnik, ki je naročil študijo, diagnoza, koda MES (medicinsko - ekonomski standard).

Nato operater vnese v LIS tiste kazalnike, ki jih je predpisal lečeči zdravnik, in generirano naročilo shrani v LIS. Smer obrazca je predstavljena v prilogi št. 4.

Vloga št. 2

AT vrste neskladnosti in njihovo odpravljanje

Vrsta neskladnosti	Opis dejanj	Izvršitelj	Odgovorno
Kršitev celovitosti posode	O tem obvestite višjega laboratorijskega asistenta	laboratorijski asistent	Višji asist
Pomanjkanje napotnic za raziskave v zabojniku	Bolničar-laborant o tem sporoči višjemu laborantu, ki mora po telefonu kontaktirati višjega zdravstvenega delavca. Sestra te ustanove	laboratorijski asistent	Višji asist
Razlitje biološkega materiala v posodi	1. O tem obvestite višjega laboratorijskega asistenta laboratorija 2. Previdno odstranite vso vsebino iz posode 3. Dezinficirajte samo posodo in celotno vsebino posode, ki je prišla v stik z razlitim biomaterialom.	laboratorijski asistent	Višji asist
Poškodovana smer oblike (raztrgana, razlita vsebina posode itd.)	1. Bolničar-laboratorij, če je smer berljiva, vse podatke prenese v nov obrazec. 2. V primeru nečitljivih navodil bolničar - laborant obvesti višjega laboranta, ki stopi v stik s starešinami med. Sestra zavoda.	laboratorijski asistent	Višji asist
Zlomljena stekelca v posodi	Bolničar-laborant o tem sporoči višjemu laborantu, ki mora po telefonu kontaktirati višjega zdravstvenega delavca. Sestra te ustanove in sporočite to neskladje	laboratorijski asistent	Višji asist

Brez črtne kode na cevi	1. Bolničar-laboratorij o tem obvesti višjega laboratorijskega asistenta laboratorija, ki se mora po telefonu obrniti na višjega zdravnika. Sestra te ustanove in prijavi to nedoslednost. 2. To neskladje vpiše bolničar-laboratorij v register "Registracija zakonske zveze"	laboratorijski asistent	Višji asist
Obrazec-smer, izdan v napačni obliki	1. Bolničar-laboratorij o tem poroča višjemu laboratorijskemu asistentu laboratorija, ki se mora po telefonu obrniti na višjega zdravnika. Sestra te ustanove 2. Bolničar-laboratorij vnese to neskladje v register "Registracija zakonske zveze" 3. Naslednji dan pošlje asistent-laborant to napotnico v ustanovo, od koder je prišla, da zdravnik prepiše napotnico v berljivo obliko.	laboratorijski asistent	Višji asist

Vloga št. 3

temperaturni senzor strojnega hladilnika

V tej prilogi je koristno zagotoviti tudi obrazec za dnevnik, ki ga mora voznik izpolniti.

V naslednjih prilogah je podana oblika napotnice ipd.

Pravila za odvzem krvi za določanje mutacij v človeških genih PCR diagnostika

Kri za PCR diagnostiko. Kri se odvzame na prazen želodec iz kubitalne vene z iglo za enkratno uporabo (premera 0,8-1,1 mm) v brizgo za enkratno uporabo s prostornino 2-5 ml in prenese v epruveto z EDTA ali posebnim vakuumskim sistemom " tipa Veccuette (z EDTA z lila pokrovčkom), je tuba zaprta z zamaškom in obrne večkrat (za mešanje z antikoagulantom).

Epruveto s krvjo do študije hranimo v hladilniku pri +4 °C. — +8°С. Najdaljši rok uporabnosti: Kri, zbrana v epruveti EDTA za ugotavljanje mutacij v genihBRCA1/2, lahko shranite na+4°С — +8°С 2 dneva.

Pravila za odvzem krvi za določanje PCR - študije okužb

Za pridobitev plazme se kri odvzame na prazen želodec ali 3 ure po obroku iz kubitalne vene z iglo za enkratno uporabo (premer 0,8-1,1 mm) v poseben vakuumski sistem (lila kape - 6% EDTA). Epruveto zapremo s pokrovom in večkrat nežno obrnemo na glavo, da se kri v epruveti temeljito premeša z antikoagulantom (sicer se kri strdi in izolacija DNA/RNA postane nemogoča).

Heparin se ne sme uporabljati kot antikoagulant!

Pogoji za shranjevanje in transport materiala in predhodno obdelanih vzorcev

Vzorci polne krvi: - pri temperaturi 20-25ºС - v 2 urah; - pri temperaturi 2-8ºС - v 6 urah od trenutka odvzema materiala za kvantitativno določanje nukleinskih kislin; v 12 urah - za kvalitativno določanje nukleinskih kislin;

Ne zamrzujte vzorcev polne krvi!

Vzorčenje materiala za PCR okužbe s HPV

Za raziskave HPV je potrebno zadostno število epitelijskih celic, saj. virus je znotrajcelični agent. Sprejemljiva je zmerna prisotnost nečistoč v obliki cervikalne sluzi in krvi. V nekaterih primerih je možno vzeti material z univerzalno ginekološko sondo, vendar bo v tem primeru količina izcedka iz strganja manjša, število celic pa morda nezadostno.

Sluz in izcedek iz nožnice odstranimo s površine materničnega vratu s sterilno gazo, delovni del citoščetke vstavimo v cervikalni kanal in naredimo dva ali tri polne obrate v smeri urinega kazalca. Citoščetko odstranimo in njen delovni del z odvzetim materialom postavimo v epruveto s transportnim medijem. Delovni del citoščetke se odlomi za največ 1 cm plastične podlage citoščetke in pusti v epruveti s transportnim medijem.

Če delovnega dela citoščetke ali univerzalne sonde ni mogoče odlomiti, klinični material je treba čim bolj sprati iz njihovega delovnega dela v epruveto s transportnim medijem, ga pritisnemo ob notranjo stran epruvete in zavrtimo 5-10 krat v smeri in nasprotni smeri urnega kazalca.

Za rezanje delovnega dela citoščetke ali univerzalne sonde je nesprejemljivo uporabljati škarje za večkratno uporabo - to lahko povzroči navzkrižno kontaminacijo s kliničnim materialom in posledično lažno pozitivne rezultate.

Epruvete z biološkim materialom do študije hranimo v zamrzovalniku pri -16°C.

Vzorčenje materiala za PCR diagnostiko pri moških

strganje (razmazati). Material vzamemo z univerzalno sondo iz sečnice. Po potrebi se material za raziskave vzame iz genitalnih razjed (študija za HSV-II). Delovni del sonde, ki vsebuje testni material, odrežemo ali odlomimo in damo v epruveto tipa Eppendorf za enkratno uporabo z raztopino konzervansa ali temeljito premešamo z rotacijskim gibanjem, preostalo tekočino na sondi stisnemo ob stene epruvete, odstranite sondo (vrzite jo v posodo z razkužilno raztopino).

Epruvete z biološkim materialom do študije hranimo v zamrzovalniku pri -18°C.

sperma. Zbrano v suhi tubi za enkratno uporabo tipa "Eppendorf". Najdaljši rok uporabnosti je 1 dan v hladilniku pri temperaturi +4°C - +8°C; pri -18°С - -20°С ne več kot 2 tedna.

sok prostate . Po masaži prostate se sok v količini 0,5-1 ml zbere v suho epruveto za enkratno uporabo tipa Eppendorf. Če soka ni mogoče dobiti, takoj po masaži zberemo prvi del urina (ki vsebuje sok prostate) v količini 10 ml.

Najdaljši rok uporabnosti je 1 dan v hladilniku pri temperaturi +4°C - +8°C; pri -18°С - -20°С ne več kot 2 tedna.

Izvajanje študij PCR je dovoljeno na podlagi obstoječih laboratorijev, pod pogojem, da so v laboratoriju organizirana neodvisna ali dodeljena delovna območja kot del drugih funkcionalnih prostorov, ki ustrezajo stopnjam analize PCR.

Laboratorij za PCR mora vsebovati naslednji minimalni nabor delovnih področij:

• sprejem, evidentiranje, analiza in primarna obdelava gradiva;
• izolacija DNA/RNA;
• priprava reakcijskih mešanic in PCR;
• detekcija produktov pomnoževanja z elektroforezo ali HyFA.

Pomembno je omeniti, da v primeru uporabe metode ni potrebe po detekciji produktov ojačanja z elektroforezo. Zato delovnega prostora v laboratoriju za elektroforezo ni mogoče dodeliti.

V laboratorijih PCR je treba zagotoviti tudi pomožne prostore: arhiv (za knjigovodske dokumente), sobo za osebje, pisarno vodje, garderobe za zaposlene, jedilnico, sanitarne prostore (WC), pomožne prostore. (skladišče).

V idealnem primeru mora biti na voljo prostor za avtoklav za dekontaminacijo preskusnega materiala. Lahko se deli z drugimi oddelki ustanove, v skladu z zahtevami biološke varnosti.

Prostori za opravljanje dela na stopnjah analize PCR morajo biti zaprti (škatle s predboksi). Na področju sprejema, registracije, analize in primarne obdelave gradiva sprejem materiala, priprava vzorcev (sortiranje, označevanje, centrifugiranje ipd.), shranjevanje in primarna inaktivacija ostankov biomateriala z razkužili. Prostor za sprejem, registracijo, analizo in primarno obdelavo gradiva se nahaja v sprejemnici gradiva ali v ločenem boksiranem prostoru. Tukaj lahko tudi sprejemate in obdelujete vzorce za raziskave z drugimi metodami (na primer imunologija), pod pogojem, da je dodeljeno ločeno opremljeno delovno mesto za analizo PCR.

Ekstrakcijska cona DNA/RNA postavljeno v ločen prostor. Pri organizaciji PCR laboratorija na podlagi obstoječega laboratorija je dovoljeno izolirati DNA / RNA v prostorih, kjer se izvajajo druge vrste raziskav, razen dela z genskim inženiringom. V tem primeru je v prostoru organiziran delovni prostor za ekstrakcijo DNA/RNA, v katerem se nahaja škatla za PCR ali biološka varnostna škatla. V škatli PCR za izolacijo DNA/RNA ni dovoljeno nobeno drugo delo!

Na področju priprave reakcijskih mešanic in PCR priprava mešanice PCR, dodajanje izoliranih pripravkov DNA/RNA ali cDNA v epruveto za PCR, reverzna transkripcija RNA in pomnoževanje DNA ali cDNA. Prostor za pripravo reakcijskih mešanic in PCR mora biti ločen. Priprava reakcijskih PCR mešanic poteka v PCR škatli.

Po potrebi lahko fazo ekstrakcije DNA/RNA združimo v enem prostoru s fazo priprave reakcijskih mešanic in PCR, če ima ločene PCR bokse - za pripravo reakcijskih PCR mešanic in za izolacijo DNA/RNA.

Cona za detekcijo produktov ojačanja postavite v ločen prostor, po možnosti opremljen s škatlo za PCR. Če je za detekcijo produktov pomnoževanja potrebno sočasno uporabiti metodo elektroforeze in metodo hibridizacijske analize, je treba v detekcijski sobi za hibridizacijsko analizo dodeliti ločen delovni prostor. V tem primeru so oprema in pripomočki za vsako vrsto detekcije označeni za vsako cono. Za hibridizacijsko analizo ni dovoljeno uporabljati pipet in posod, namenjenih elektroforezi.

Načrtovalske odločitve in postavitev opreme morajo zagotoviti pretok gibanja proučevanega materiala. Izmenjava zraka med prostorom za detekcijo produktov ojačanja in drugimi prostori mora biti popolnoma izključena.

PCR laboratorij bo opremljen z vodovodom, kanalizacijo, elektriko in ogrevanjem. Vsi prostori PCR laboratorija imajo zadostno naravno in umetno osvetlitev.

Med gradnjo novih ali rekonstrukcijo obstoječih PCR laboratorijev so prostori opremljeni z dovodnim in izpušnim ali izpušnim prezračevanjem. Razlika v zračnem tlaku v prostorih PCR laboratorija je dosežena zaradi razlik v stopnji izmenjave zraka v njih. Stopnja izmenjave zraka mora ustrezati vrednostim, navedenim v tabeli:

Po potrebi lahko v PCR laboratoriju namestimo klimatske naprave.

Notranja dekoracija prostorov se izvaja v skladu z njihovim funkcionalnim namenom. Površine sten, tal in stropov v laboratorijih morajo biti gladke, brez razpok, zlahka obdelane, odporne na detergente in razkužila. Tla ne smejo biti spolzka. Laboratorijsko pohištvo mora imeti premaz, ki je odporen na detergente in razkužila. Površina miz ne sme imeti razpok in šivov. Laboratorijski prostori morajo biti neprepustni za glodavce in insekte. PCR laboratorij je opremljen z gasilno opremo.