Normalna crevna mikroflora. Crijevna mikroflora: uzroci poremećaja i načini obnavljanja Koje su 2 glavne funkcije crijevne flore?


Danas se više ne dovodi u pitanje najvažnija uloga normalne mikroflore u održavanju vitalnih funkcija organizma. Zapravo, sveukupnost mikroorganizama koji naseljavaju sluznicu i kožu smatra se dodatnim organom koji obavlja vlastite, nezamjenjive funkcije.

Štaviše, ovaj "organ" teži oko dva kilograma i sadrži oko 10 14 ćelija mikroorganizama. To je deset do dvadeset puta više od broja ćelija u samom ljudskom tijelu.

Ukupnost svih populacija mikroorganizama smještenih u pojedinim organima i sistemima, koji održavaju biohemijsku, metaboličku i imunološku ravnotežu neophodnu za održavanje zdravlja ljudi, naziva se normalna flora.

Značajan dio (više od 60%) mikroflore naseljava različite dijelove gastrointestinalnog trakta. Otprilike 15-16% mikroorganizama nalazi se u orofarinksu. Vagina - 9%, urogenitalni trakt - 2%; ostalo je koža (12%).

Ljudski gastrointestinalni trakt je normalno naseljen velikim brojem mikroorganizama.

Koncentracija mikrobnih ćelija, njihov sastav i odnos varira u zavisnosti od crevnog dela.

Kod zdravih ljudi, broj bakterija u duodenumu nije veći od 10 4 -10 5 CFU (jedinice koje stvaraju kolonije – tj. živi mikroorganizmi) po ml sadržaja. Vrsni sastav bakterija: laktobacili, bifidobakterije, bakteroidi, enterokoki, gljivice slične kvascu itd. Unošenjem hrane broj bakterija se može značajno povećati, ali se za kratko vrijeme njihov broj vraća na prvobitni nivo.
U gornjim dijelovima tankog crijeva mikroorganizmi se otkrivaju u malim količinama, ne više od 10 4 -10 5 CFU/ml sadržaja, u ileumu je ukupan broj mikroorganizama do 10 8 CFU/ml himusa.
U debelom crijevu zdrave osobe broj mikroorganizama je 10 11 -10 12 CFU/g fecesa. Preovlađuju anaerobne vrste bakterija (90-95% ukupnog sastava): bifidobakterije, bakteroidi, laktobacili, veilonele, peptostreptokoke, klostridije. Oko 5-10% mikroflore debelog crijeva predstavljaju aerobi: Escherichia coli, enterobakterije negativne na laktozu (Proteus, Enterobacter, Citrobacter, Serration itd.), enterokoke (fekalni streptokoki), stafilokoke, gljivice slične kvascu.

Celokupna crevna mikroflora se deli na:
- obavezna (glavna mikroflora);
- izborni dio (oportunistička i saprofitna mikroflora);

Obavezna mikroflora.

Bifidobakterije najznačajniji su predstavnici obligatnih bakterija u crijevima djece i odraslih. To su anaerobi, ne stvaraju spore i morfološki su veliki gram-pozitivni štapići ravnog ili blago zakrivljenog oblika. Krajevi štapića kod većine bifidobakterija su račvasti, ali mogu biti istanjivi ili zadebljani u obliku sferičnih otoka.

Većina populacije bifidobakterija nalazi se u debelom crijevu, što je njegova glavna parijetalna i luminalna mikroflora. Bifidobakterije su prisutne u crijevima tokom cijelog života osobe, a kod djece čine 90 do 98% svih crijevnih mikroorganizama, ovisno o dobi.

Bifidoflora počinje zauzimati dominantan položaj u mikrobnom pejzažu crijeva kod zdravih novorođenčadi koja su dojena do 5-20 dana nakon rođenja. Među različitim vrstama bifidobakterija kod dojene djece, prevladava Bifidobacterium bifidum.
Još jedan predstavnik obavezne mikroflore gastrointestinalnog trakta su laktobacili, koji su gram-pozitivni štapići sa izraženim polimorfizmom, raspoređeni u lancima ili pojedinačno, koji ne formiraju spore.
Lactoflora naseljava tijelo novorođenčeta u ranom postnatalnom periodu. Stanište laktobacila su različiti dijelovi gastrointestinalnog trakta, od usne šupljine do debelog crijeva, gdje održavaju pH 5,5-5,6. Laktoflor se može naći u ljudskom i životinjskom mleku. U procesu vitalne aktivnosti, laktobacili ulaze u složenu interakciju s drugim mikroorganizmima, zbog čega se potiskuju truli i piogeni uvjetno patogeni mikroorganizmi, prvenstveno Protea, kao i uzročnici akutnih crijevnih infekcija.

Tokom normalnog metabolizma, oni su u stanju da formiraju mliječnu kiselinu, vodikov peroksid, proizvode lizozim i druge supstance sa antibiotičkim djelovanjem: reuterin, plantaricin, laktocidin, laktolin. U želucu i tankom crijevu, laktobacili su, u saradnji sa organizmom domaćina, glavna mikrobiološka karika u formiranju kolonizatorske rezistencije.
Uz bifidobakterije i laktobacile, grupa normalnih tvoraca kiseline, tj. bakterije koje proizvode organske kiseline su anaerobne propionobakterije. Smanjenjem pH okoline propionobakterije pokazuju antagonistička svojstva prema patogenim i uslovno patogenim bakterijama.
Tu spadaju i predstavnici obavezne crijevne mikroflore Escherichia (Escherichia coli).

Ekološka niša u zdravom tijelu je debelo crijevo i distalni dijelovi tankog crijeva. Otkriveno je da Escherichia potiče hidrolizu laktoze; učestvuju u proizvodnji vitamina, prvenstveno vitamina K, grupe B; proizvode kolicine - supstance slične antibioticima koje inhibiraju rast enteropatogene Escherichia coli; stimulišu stvaranje antitela.
Bacteroides su anaerobni mikroorganizmi koji ne stvaraju spore. Uloga bakteroida nije u potpunosti shvaćena, ali je utvrđeno da učestvuju u probavi, razgrađuju žučne kiseline i učestvuju u metabolizmu lipida.
Peptostreptococcus su nefermentirajući gram-pozitivni anaerobni streptokoki. U procesu života stvaraju vodonik koji se u crijevima pretvara u vodikov peroksid, koji pomaže u održavanju pH vrijednosti od 5,5 i niže, te sudjeluje u proteolizi mliječnih proteina i fermentaciji ugljikohidrata. Nemaju hemolitička svojstva. Econish - debelo crijevo.
Enterokoki normalno ne bi trebalo da prelazi ukupan broj E. coli. Enterokoki provode metabolizam fermentativnog tipa, fermentiraju razne ugljikohidrate uz stvaranje uglavnom mliječne kiseline, ali ne i plina. U nekim slučajevima se smanjuje nitrat, obično se fermentira laktoza.
Fakultativna crijevna mikroflora predstavljaju peptokoke, stafilokoke, streptokoke, bacile, kvasce i gljive slične kvascu.
Peptococci(anaerobne koke) metaboliziraju pepton i aminokiseline u masne kiseline, proizvode sumporovodik, sirćetnu, mliječnu, limunsku, izovalerinsku i druge kiseline.
Staphylococcus- nehemolitičke (epidermalne, saprofitne) - spadaju u grupu saprofitne mikroflore koja ulazi u organizam iz objekata okoline. Nitrati se obično redukuju u nitrit.
Streptococci. Nepatogeni crijevni streptokoki imaju antagonističku aktivnost protiv patogena. Streptokoki proizvode uglavnom laktat, ali ne i plin.
bacili u crijevima mogu biti predstavljeni aerobnim i anaerobnim vrstama mikroorganizama. B.subtilis, B.pumilis, B.cereus - aerobne bakterije koje stvaraju spore; C.perfringens, C.novyi, C.septicum, C.histolyticum, C.tetanus, C.difficile - anaerobni. Najveći interes su anaerobne bakterije koje stvaraju spore C. difficile. Od ugljikohidrata ili peptona formiraju mješavinu organskih kiselina i alkohola.
Kvasac a neke gljive slične kvascu klasifikovane su kao saprofitna mikroflora. Gljive slične kvascu iz roda Candida, najčešće C.albicans i C.steleatoidea, oportunistički su patogeni mikroorganizmi. Mogu se javiti u svim abdominalnim organima probavnog sistema i vulvovaginalnom području.
Uvjetno patogene enterobakterije uključuju predstavnike porodice Enterobacteriacae (crijevne bakterije): Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Serration itd.
Fusobacteria- gram-negativne, polimorfne štapićaste bakterije koje ne stvaraju spore, predstavnici anaerobne mikroflore debelog crijeva. Njihov značaj u mikrobiocenozi nije dovoljno proučavan.
Nefermentirajući gram-negativni štapići najčešće se otkriva kao prolazna mikroflora, jer Bakterije ove grupe slobodno žive i lako ulaze u crijeva iz okoline.

KVALITATIVNI I KVANTITATIVNI SASTAV OSNOVNE
MIKROFLORA DEBLOG CRIJEVA KOD ZDRAVIH LJUDI
(CFU/G IZMET)

Vrste mikroorganizama

Starost, godine

Bifidobakterije

Laktobacili

Bacteroides

Enterokoki

Fusobacteria

< 10 6

Eubacteria

Peptostreptococcus

< 10 5

Clostridia

<= 10 3

<= 10 5

<= 10 6

Tipična E. coli

E. coli negativan na laktozu

< 10 5

< 10 5

< 10 5

E. coli hemolitički

Druge oportunističke enterobakterije< * >

< 10 4

< 10 4

< 10 4

Staphylococcus aureus

Stafilokok (saprofitski epidermalni)

<= 10 4

<= 10 4

<= 10 4

Gljive slične kvascu iz roda Candida

<= 10 3

<= 10 4

<= 10 4

Nefermentativna

bakterije< ** >

<= 10 3

<= 10 4

<= 10 4

<*>- predstavnici rodova Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providecia, Citrobacter itd.
< ** >- Pseudomonas, Acinetobacter, itd.

Kada razmišljamo o svom zdravlju, odvajamo svoje tijelo od naših crijevnih bakterija. Zapravo, može se reći da mnoge funkcije našeg tijela ovise o bakterijama koje se nalaze u našim crijevima. Ove bakterije nas mogu učiniti mršavim ili debelim, zdravim ili bolesnim, sretnim ili depresivnim. Nauka tek počinje da razumije kako crijevna mikroflora utiče na naše živote. U ovom članku ćemo pogledati što se zna o našim crijevnim bakterijama, uključujući kako oblikuju naša tijela i naš um.

Crijevna mikroflora - šta je to?

Velike zajednice mikroba (bakterije, gljivice, virusi) koje žive u našim crijevima nazivaju se crijevna mikroflora. Naša crijeva su naseljena sa 10 13 – 10 14 (do sto triliona) bakterija. U stvari, manje od polovine ćelija u ljudskom telu pripada telu. Više od polovine ćelija u našem telu su bakterije koje naseljavaju creva i kožu.

Ranije se vjerovalo da u tijelu ima deset puta više mikroba nego tjelesnih ćelija, ali novi proračuni pokazuju omjer blizu 1:1. Crijeva odrasle osobe sadrže 0,2-1 kg bakterija.

Crijevne bakterije igraju mnoge korisne uloge u našim tijelima:

  • Pomaže vam da dobijete više energije iz hrane
  • Osigurava proizvodnju važnih vitamina kao što su B i K
  • Jača crijevnu barijeru
  • Poboljšati funkcionisanje imunološkog sistema
  • Štiti crijeva od štetnih i oportunističkih mikroorganizama
  • Podstiče proizvodnju žučnih kiselina
  • Razgrađuje toksine i karcinogene
  • Neophodan su uvjet za normalno funkcioniranje organa, posebno crijeva i mozga.

Neuravnotežena mikroflora čini nas podložnijim infekcijama, imunološkim poremećajima i upalama.

Stoga je poboljšanje crijevne mikroflore obećavajući pristup u borbi protiv brojnih uobičajenih bolesti.

Sastav crijevne mikroflore


Sastav crijevne mikrobiote kod afričke djece koja žive u ruralnim područjima s ishranom bogatom polisaharidima u poređenju s talijanskom gradskom djecom

Nauka vjeruje da naša crijeva naseljava više od 2.000 vrsta bakterija. Većina bakterija u crijevima (80-90%) pripada 2 grupe: Firmicutes i Bacteroides.

Tanko crijevo ima relativno kratko vrijeme tranzita za hranu i obično sadrži visoke razine kiselina, kisika i antimikrobnih agenasa. Sve to ograničava rast bakterija. Samo brzorastuće bakterije koje su otporne na kisik i koje su sposobne snažno prianjati na crijevni zid mogu preživjeti u tankom crijevu.

Nasuprot tome, debelo crijevo ima veliku i raznoliku zajednicu bakterija. Za svoje vitalne funkcije koriste složene ugljikohidrate koji se ne probavljaju u tankom crijevu.

Razvoj i starenje crijevne mikroflore


Razvoj crijevne mikroflore u dojenačkoj dobi i njen utjecaj na zdravlje u kasnijem životu (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1323893017301119)

Ranije su nauka i medicina vjerovale da se crijevna mikroflora formira nakon rođenja. Međutim, neka nedavna istraživanja sugeriraju da posteljica također može imati svoju jedinstvenu mikrofloru. Dakle, ljudi mogu biti kolonizirani bakterijama dok su još u maternici.

Tokom normalnog porođaja, crijeva novorođenčeta primaju mikrobe i od majke i od okoline. Kada navrši godinu dana, svaka osoba dobija jedinstveni, jedinstveni bakterijski profil. [I] Do treće godine, sastav crijevne mikroflore djeteta postaje sličan mikroflori odrasle osobe. [I]

Međutim, kao odgovor na aktivnost hormona tokom puberteta, crijevna mikroflora se još jednom mijenja. Kao rezultat toga, nastaju razlike između muškaraca i žena. Mikroflora se u većoj mjeri kod dječaka mijenja pod utjecajem hormona testosterona, a kod djevojčica bakterije dobijaju sposobnost da mijenjaju svoj kvantitativni sastav kada su izložene menstrualnim ciklusima. [I]

U odrasloj dobi, sastav crijevne mikroflore je relativno stabilan. Međutim, još uvijek se može promijeniti životnim događajima kao što su antibiotici, stres, fizička neaktivnost, gojaznost i, u velikoj mjeri, prehrana. [I]

Kod ljudi starijih od 65 godina mikrobna zajednica se pomjera prema rastućem broju Bacteroides. Općenito, metabolički procesi bakterija kao što je proizvodnja kratkolančanih masnih kiselina (SCFA) su smanjeni dok se razgradnja proteina povećava. [I]

Mikroflora otvara uzbudljivo novo poglavlje u nauci

Nauka tek počinje da razumije mnoge uloge crijevnih mikroba u našim tijelima. Istraživanja crijevnih bakterija rastu eksponencijalno, a većina njih je nedavno.

Međutim, još uvijek postoje mnoga pitanja koja ostaju bez odgovora. Međutim, možemo očekivati ​​mnogo novih uzbudljivih otkrića u narednim godinama.

Kako bakterije u crijevima utiču na vaše zdravlje

Crijevna mikroflora proizvodi esencijalne vitamine

Crijevne bakterije proizvode vitamine, od kojih neke ne možemo sami proizvesti [I]:

  • Vitamin B-12
  • Folna kiselina/Vitamin B-9
  • vitamin K
  • Riboflavin / Vitamin B-2
  • Biotin/Vitamin B-7
  • Nikotinska kiselina / Vitamin B-3
  • Pantotenska kiselina/Vitamin B-5
  • Piridoksin / Vitamin B-6
  • Tiamin / Vitamin B-1

Mikroflora crijeva proizvodi masne kiseline


Ishrana i crevna mikroflora mogu regulisati krvni pritisak (https://www.nature.com/articles/nrcardio.2017.120)

Crevne bakterije proizvode kratkolančane masne kiseline(SCFAs). Ove kiseline uključuju butirat, propionat i acetat. [I]

Ove SCFA (kratkolančane masne kiseline) pokazuju mnoge važne funkcije u našem tijelu:

  • Osigurajte otprilike 10% dnevnog kalorijskog unosa prilikom varenja hrane. [I]
  • Aktiviraj AMF i stimuliše gubitak težine [I]
  • Propionat smanjuje nivo holesterola u krvi, a takođe povećava osećaj sitosti [I]
  • Acetat smanjuje apetit [I]
  • Butirat smanjuje upalu i bori se rak[I]
  • Acetat i propionat povećavaju količinu cirkulacije Treg(regulatorne T ćelije), koje su u stanju da smanje preterane imunološke reakcije [I]

Uticaj kratkolančanih masnih kiselina na organizam i razvoj bolesti (http://www.mdpi.com/2072-6643/3/10/858)

Dijeta sa više vlakana i manje mesa, na primjer, vegetarijanski ili, dovode do povećanja količine SCFA (kratkolančanih masnih kiselina). [I]

Mikroflora crijeva mijenja naš mozak

Crijevne bakterije komuniciraju s našim mozgom, mogu utjecati na naše ponašanje i mentalne sposobnosti. [I] Takva interakcija funkcionira u dva smjera. Mikrobi crijeva i mozak utječu jedni na druge, a nauka tu vezu naziva "osovina crijeva-mozak".

Kako crijeva i mozak komuniciraju?

  • Kroz vagusni nerv i autonomni nervni sistem [I]
  • Bakterije proizvode serotonin, GABA, acetilholin, dopamin i norepinefrin u crijevima. Ove supstance mogu ući u mozak kroz krv. [I]
  • Kratkolančane masne kiseline (SCFA) proizvodi crijevna mikrobiota, koja osigurava energiju za nervne i glijalne ćelije u mozgu. [I]
  • Preko imunih ćelija i upalnih citokina. [I]

Crijevne bakterije mogu poboljšati ili pogoršati raspoloženje i ponašanje

Kada je naša crijevna flora poremećena zbog infekcije ili upale, to može pogoršati naše mentalno zdravlje. Ljudi s upalnom bolešću crijeva često pokazuju simptome ili anksioznost. [I]

U drugoj kontrolisanoj studiji na 40 zdravih odraslih osoba, probiotici su bili u stanju da pomognu u smanjenju nivoa negativnih misli, koje se manifestuju kao tužno raspoloženje. [I]

Studija na 710 ljudi je to otkrila fermentisana hrana(sa visokim sadržajem probiotika) može pomoći u smanjenju anksioznosti kod ljudi. [I]

Zanimljivo je da kada se crijevna mikroflora prenese na pacove od ljudi s depresijom, pacovi brzo razvijaju depresiju. [I] S druge strane, "dobre" bakterije, kao što su lakto i bifidobakterije, smanjuju anksioznost i depresivne sindrome kod istih štakora. [I] Kako se pokazalo, ove bakterije povećavaju nivo triptofana u krvi pacova. Triptofan je neophodan za sintezu serotonina (tzv. “hormon sreće”). [I]

Zanimljivo je da su miševi bez klica (bez crijevnih bakterija) pokazali manje anksioznosti. Utvrđeno je da imaju više serotonina u mozgu (hipokampusu). Ovo smireno ponašanje moglo bi da se promeni kolonizacijom bakterija u njihovim crevima, ali ovaj efekat preko mikroba je postigao rezultate samo kod mladih miševa. Ovo pokazuje da mikrobiota crijeva igra važnu ulogu u razvoju mozga kod djece. [I]

Studija na više od milion ljudi je to otkrila Liječenje pacijenata jednom vrstom antibiotika povećava rizik od depresije. Rizik od razvoja depresije ili anksioznosti povećava se s ponovljenom upotrebom antibiotika i sa sve većim količinama istodobne primjene različitih antibiotika. [I]

Mikroflora crijeva može poboljšati i pogoršati funkciju mozga


Jedna studija je pokazala da su negativne promjene u mikrobioti crijeva dovele do lošije funkcije mozga kod 35 odraslih i 89 djece. [I]

U drugoj studiji, miševi bez klica i miševi s bakterijskim infekcijama pokazali su probleme s pamćenjem. Ali dodavanje probiotika u njihovu prehranu 7 dana prije i za vrijeme zaraznih bolesti dovelo je do smanjenja moždane disfunkcije. [I]

Dugotrajna upotreba antibiotika kod miševa smanjila je proizvodnju novih nervnih ćelija u mozgu (hipokampus). Ali ovo oštećenje je smanjeno ili poništeno dodatnim probioticima ili povećanom fizičkom aktivnošću. [I]

Hrana također može utjecati na kognitivne funkcije mijenjajući crijevnu mikrobiotu. Zapadna dijeta(visok sadržaj zasićenih masti i šećera) doprinosi smanjenju crijeva miševa Bacteroidetes i povećanju Firmicutes zajedno sa Proteobacteria. Takve promjene su povezane s razvojem moždane disfunkcije. [I]

Kada su crijevne bakterije miševa hranjenih zapadnom ishranom prebačene na druge miševe, miševi koji su primali mikrofloru pokazali su povećanu anksioznost i poremećaje u učenju i pamćenju. [I]

S druge strane, "dobre bakterije" pomažu poboljšanju funkcije mozga. Nekoliko vrsta probiotika pokazalo se u studijama za poboljšanje kognitivnih performansi kod eksperimentalnih životinja. [I]

Mikrobiom vas može učiniti manje ili više podložnim stresu


Vaše crijevne bakterije određuju način na koji reagirate na stres. Naša mikroflora programira osovinu hipotalamus-hipofiza-nadbubrežna žlijezda na samom početku našeg života. Ovo, pak, određuje naš odgovor na stres kasnije u životu. [I]

Bakterije crijeva mogu doprinijeti razvoju posttraumatski stresni poremećaj(PTSP). Eksperimenti na životinjama pokazali su da neravnoteža crijevne mikroflore (disbioza) čini ove životinje podložnijim razvoju PTSP-a nakon traumatskog događaja. [I]

Miševi bez klica pokazuju pretjerane odgovore na stres (njihova osovina hipotalamus-hipofiza-nadbubrežna žlijezda je u preaktivnom stanju). Takve životinje pokazuju niže performanse BNDF- faktor koji je neophodan za opstanak nervnih ćelija. Ali ako su ovi miševi primili bifidobakterije rano u životu, osovina hipotalamus-hipofiza-nadbubrežna žlijezda bila je vraćena u svoje normalno stanje. [I]

U studiji na 581 studentu, pokazano je da je uzimanje probiotika bazirano Bifidobakterije dovelo do smanjenja dijareje (ili crijevne nelagode) i smanjenja učestalosti prehlade (gripa) tokom stresnih stanja (pregledi). [I]

Slično, bifidobakterije B.longum smanjen nivo stresa (mjeren kortizolom) i anksioznosti kod 22 zdrava dobrovoljca. [I]

Poznato je da se imuni sistem majke tokom trudnoće pomera ka Th2 imunološkom odgovoru (protuupalno). Ova promjena u imunitetu uzrokuje promjenu imunološke funkcije djeteta prema Th2 odgovoru. [I] Međutim, tokom prvih sedmica i mjeseci života, crijevne bakterije pomažu dojenčadi da postepeno poveća aktivnost Th1 inflamatornog imunološkog odgovora i uspostavi ravnotežu Th1/Th2. [I]

Kod novorođenčadi rođene carskim rezom, Th1 imunitet se aktivira sa zakašnjenjem. Do smanjenja brzine formiranja Th1 imunološkog odgovora dolazi zbog izmijenjene crijevne mikroflore. [I]

Mikroflora crijeva štiti od infekcija

Jedna od glavnih prednosti crijevne mikroflore je da nas štiti od štetnih mikroba. [I]

Crijevne bakterije nas štite od infekcija[I]:

  • Njegova borba za hranjive tvari sa štetnim bakterijama
  • Proizvodnja nusproizvoda koji inhibiraju rast ili aktivnost opasnih bakterija
  • Održavanje zategnutosti crijevne mukozne barijere
  • Stimuliranje našeg urođenog i prilagodljivog imuniteta

Stabilna crijevna mikroflora također sprječava prekomjerni rast oportunističkih mikroba. Na primjer, laktobacili su vrlo važni za sprječavanje snažnog rasta bakterija Candida albicans . [I]

Antibiotici često mijenjaju crijevnu floru i na taj način smanjuju otpornost na štetne bakterije. [I]

Mikroflora suzbija upalu


Šema nastanka hronične upale usled poremećaja crevne mikroflore (https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2017.00942/full)

Bakterije crijeva mogu povećati proizvodnju th17 stanica i proinflamatornih citokina (IL-6, IL-23, IL-1b). Ili crijevna mikroflora može potaknuti proizvodnju cirkulirajućih T-reg imunoloških stanica, na taj način smanjenje upale. [I] Oba ova razvojna puta zavise od toga koja je mikroflora u vašim crijevima.

Kada je mikroflora neuravnotežena (crijevna disbioza), može povećati upalu. Ovo stanje doprinosi nastanku hroničnih upalnih bolesti kao što su koronarna bolest srca, multipla skleroza, astma i reumatoidni artritis. [I]

Kada su miševi liječeni antibioticima, broj protuupalnih T-reg imunoloških stanica u njihovim crijevima je bio ozbiljno smanjen i kod miševa je bila veća vjerovatnoća da će razviti upalu. [I]

“Dobre” bakterije koje mogu zaštititi od upalnih bolesti uključuju A. muciniphila I F. Prausnitzii. [I]

Crijevne bakterije štite od alergija

Povećava se neuravnotežena crijevna mikroflora.

Studija na 1.879 dobrovoljaca otkrila je da ljudi s alergijama imaju manju raznolikost u svojoj crijevnoj mikrobioti. Imali su smanjen broj bakterija Clostridiales (proizvođači butirata) i povećan je broj bakterija Bacteroidales. [I]

Nekoliko faktora, koji ometaju normalno funkcioniranje crijevne mikroflore i doprinose razvoju alergija na hranu[I]:

  • Nedostatak dojenja tokom dojenčadi
  • Upotreba antibiotika i inhibitora želučane kiseline
  • Upotreba antiseptika
  • Ishrana sa malo dijetalnih vlakana (vlakna) i visokim sadržajem masti.

Djeca koja su odrasla na farmama ( ruralnim područjima), ili su tamo došli na dugi odmor, pokazuju, u pravilu, nizak rizik od razvoja alergija. To je vjerovatno zbog drugačije mikroflore kod ove djece nego kod one koja život provode u urbanim sredinama. [I]

Drugi zaštitni faktor protiv alergija na hranu može biti starija braća i sestre ili kućni ljubimci. Ljudi koji žive u domu sa životinjama pokazuju veću raznolikost crijevne mikroflore. [I]

Dvije studije koje su uključivale 220 i 260 djece pokazale su da upotreba probiotika s Lactobacillus rhamnosus (Lactobacillus rhamnosus) dovodi do brzog oslobađanja od različitih vrsta alergija na hranu. Djelovanje probiotika posljedica je povećanja broja bakterija koje proizvode butirat. [I]

Imunoterapija probiotikom iz Lactobacillus rhamnosus dovela do 82% izlječenja alergija kod 62 djece. [I] Konačno, meta-analiza 25 studija (4.031 dijete) otkrila je da Lactobacillus rhamnosus smanjuje rizik od ekcema. [I]

Mikroflora štiti od razvoja astme

Prilikom pregleda 47 djece oboljele od astme, utvrđeno je da imaju mali diverzitet bakterija u svojoj mikroflori. Njihova crijevna mikroflora bila je slična mikroflori dojenčadi. [I]

Slično alergijama na hranu, ljudi mogu zaštitite sebe i svoju djecu od razvoja astme poboljšanjem mikroflore [I]:

  • Dojenje
  • Starija braća i sestre
  • Kontakt sa domaćim životinjama
  • Kontakt sa kućnim ljubimcima
  • Ishrana bogata vlaknima (minimalno 23 grama dnevno)

Na drugoj strani, antibiotici povećavaju rizik od astme. Dva ili više kursa antibiotika tokom trudnoće povećavaju rizik od astme kod potomaka (na osnovu studije na 24.690 djece). [I]

Druga studija na 142 djece otkrila je da rana upotreba antibiotika također povećava rizik od astme. Lijekovi su smanjili raznolikost crijevne mikroflore, smanjili broj Actinobacteria i povećali broj bakterija Bacteroides. Smanjenje raznolikosti crijevnih bakterija trajalo je više od 2 godine nakon uzimanja antibiotika. [I]

Miševi na dijeti bogatoj vlaknima pokazali su povećan omjer Firmicutes i Bacteroides bakterija u crijevnoj mikroflori. Ovaj omjer povećava proizvodnju kratkolančanih masnih kiselina (SCFA) i štiti od upale dišnih puteva. [I]

Miševi bez klica pokazuju povećanu učestalost upale dišnih puteva. Kolonizacija njihovih crijeva bakterijama mladih, ali ne i odraslih miševa, štiti od razvoja ovih upala. Ovo ukazuje da postoji vremenski specifična uloga crijevnih bakterija u razvoju imunološkog sistema. [I]

Mikroflora je uključena u nastanak upalnih bolesti crijeva

Upalna bolest crijeva (IBD) uzrokovana je kombinacijom genetskih, okolišnih i bakterijskih faktora. IBD se manifestuje u obliku ulceroznog kolitisa i. Vjeruje se da ove bolesti mogu biti direktno povezane s promjenama crijevne mikroflore. [I]

Metaanaliza (7 studija sa 706 ljudi) otkrila je da osobe sa IBD imaju niži nivo Bacteroides. [I]

Druga meta-analiza (7 studija sa 252 ispitanika) otkrila je da ljudi s upalnom bolešću crijeva imaju više štetnih bakterija, uključujući E. coli I Shigella . [I]

Bakterija Faecalibacterium prausnitzii koji se nalazi samo kod ljudi, jedan je od proizvođača butirne kiseline (butirata) i može zaštititi od upalnih bolesti crijeva. Broj ove bakterije je smanjen kod osoba sa ulceroznim kolitisom i Crohnovom bolešću. [I, I]

Poremećaji u crijevnoj mikroflori doprinose nastanku autoimunih bolesti


Bebe su sve manje izložene klicama. To može povećati njihov rizik od razvoja autoimunih poremećaja jer nedostatak klica u njihovoj okolini inhibira razvoj njihovog imunološkog sistema. Kao rezultat toga, T-reg imunološke ćelije se ne proizvode u potrebnoj količini, što dovodi do gubitka tolerancije na mikroorganizme. [I]

Kratkolančane masne kiseline (SCFA) koje proizvode crijevne bakterije podstiču toleranciju povećanjem cirkulirajućih T-reg imunoloških stanica. [I]

Crijevna mikroflora kod dijabetesa tipa 1

Studija na 8 djece s dijabetesom tipa 1 pokazala je da imaju manje stabilnu i manje raznoliku crijevnu floru. Imaju manje Firmicutes i više Bacteroides. [I] Sve u svemu, imali su manje proizvođača butirata.

Miševi skloni dijabetesu liječeni antibioticima imali su manju vjerovatnoću da će razviti dijabetes. Kada su miševima davani antibiotici, broj bakterija se povećao A. muciniphila . Ovo su korisne bakterije koje mogu igrati zaštitnu ulogu protiv autoimunog dijabetes melitusa (dijabetes tipa 1) kod dojenčadi. [I]

Druga studija je pokazala da su miševi skloni dijabetesu, ali su hranjeni velikim količinama fermentisano(fermentirano) proizvodi i bogati vlaknima imali su veću vjerovatnoću da razviju dijabetes tipa 1. Ovaj povećani rizik bio je povezan s povećanjem Bacteroides i smanjenjem Firmicutes. [I]

Može se reći da postoje različita mišljenja o učinku izmijenjene mikroflore na razvoj dijabetesa tipa 1. I još se sa sigurnošću ne zna da li već promijenjena crijevna mikroflora stimulira dijabetes tipa 1, ili se ta mikroflora mijenja kao posljedica bolesti. [I]

Crijevna mikroflora kod lupusa

Jedna studija na 40 pacijenata sa lupusom otkrila je da su ove osobe imale više Bacteroidetes i manje Firmicutes u svojoj mikroflori. [I]

Mladi miševi skloni lupusu imali su više Bacteroides u svojoj mikroflori, koja je slična ljudskoj. Miševi su takođe pokazali manje laktobacila. Ali dodavanje retinoične kiseline u ishranu ovih miševa obnovilo je laktobacile i poboljšalo simptome lupusa. [I]

Također Laktobacili uspjeli su poboljšati funkciju bubrega kod ženki miševa s lupusom izazvanim bubrežnom upalom. Ovaj tretman je također produžio njihovo vrijeme preživljavanja. Poznato je da laktobacili smanjuju upalu u crijevima mijenjajući omjer između T-reg/Th17 imunih ćelija prema povećanju T-reg. Ove cirkulirajuće T-reg ćelije smanjuju nivo citokina IL-6 i povećavaju nivo IL-10. Ovo blagotvorno dejstvo nije primećeno kod muškaraca, što ukazuje na hormonsku zavisnost upalnog dejstva. [I]

Miševi skloni lupusu razvijaju promjene u svojoj crijevnoj flori ako im se daje voda sa kiselijim pH. U tom slučaju se povećava broj Firmicutes u crijevima, a smanjuje broj Bacteroides. Ovi miševi su pokazali manje antitijela i imali su sporiju progresiju bolesti. [I]

Crijevna mikroflora kod multiple skleroze

Poznato je da je povezan sa poremećenom mikroflorom. Dijagnostikuje se generalno smanjenje bakterija Bacteroides, Firmicutes i bakterija koje proizvode butirat. [I]

Miševi s eksperimentalnim autoimunim encefalomijelitisom (EAE, mišji ekvivalent multiple skleroze kod ljudi) imali su poremećenu crijevnu mikrofloru. Antibiotici su pomogli da se bolest ublaži i smanji smrtnost. [I] Osim toga, miševi bez klica pokazali su blaži tok EAE, koji je bio povezan sa poremećenom proizvodnjom Th17 imunih ćelija (smanjen broj). [I]

Kada su miševi bez klica kolonizirani bakterijama koje su povećale proizvodnju Th17 imunoloških stanica, miševi su počeli razvijati EAE. S druge strane, kolonizacija ovih miševa Bacteroides (korisnim bakterijama) pomogla je u zaštiti od razvoja EAE povećanjem broja cirkulirajućih T-reg imunoloških stanica. [I]


Intestinalna mikroflora kod reumatoidnog artritisa

Nauka je dokazala da su faktori okoline mnogo važniji u razvoju (RA) od genetske predispozicije. [I] Ovi predisponirajući faktori uključuju zdravlje crijevne mikroflore.

Pacijenti s RA imali su smanjenu raznolikost mikrobiote. U studiji od 72 učesnika, pokazalo se da je poremećaj mikroflore bio veći s povećanjem trajanja bolesti i nivoa proizvodnje autoantitijela. [I]

Poznato je da je nekoliko bakterija direktno povezano s razvojem reumatoidnog artritisa: Collinsella , Prevotellacorpi I Lactobacillussalivarius. [I] Predisponirani miševi kolonizirani bakterijama Collinsella ili Prevotella corpi pokazali su veći rizik od razvoja artritisa, a njihova bolest je bila teža. [I]

S druge strane, bakterije Prevotellahisticola smanjila učestalost i težinu reumatoidnog artritisa kod miševa. Prevotellahisticola smanjena aktivnost bolesti povećanjem broja T-reg imunih ćelija i IL-10 citokina, što je smanjilo aktivaciju upalnih Th17 limfocita. [I]

Pokazalo se da neki probiotici poboljšavaju simptome kod pacijenata sa reumatoidnim artritisom[I, I, I]:

  • casei(studija na 46 pacijenata)
  • acidophilus(studija na 60 pacijenata)
  • Bacillus coagulans(studija na 45 pacijenata)

Mikroflora crijeva pomaže u poboljšanju čvrstoće kostiju

Mikrobi crijeva također stupaju u interakciju s našim kostima. Međutim, do sada je ova povezanost proučavana samo na životinjama.

Koštana masa raste kod miševa bez klica. Ovi miševi se vraćaju u normalu kada im se dobije normalna crijevna flora. [I]

Osim toga, antibiotici su doveli do povećanja gustine kostiju kod miševa. [I]

A probiotici, uglavnom laktobacili, poboljšali su proizvodnju kostiju i snagu kod eksperimentalnih životinja. [I]

Neravnoteža mikroflore doprinosi razvoju autizma


Hronologija pokazuje da se kritični pomaci u sazrijevanju crijeva, hormona i mozga događaju paralelno i da se spolna specifičnost u ovim sistemima pojavljuje u sličnim fazama razvoja. (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4785905/)

Do 70% osoba s autizmom ima probleme sa crijevima. Ovi problemi uključuju bol u trbuhu, povećanu crijevnu propusnost i ozbiljne promjene u crijevnoj flori. Problemi poput ovih znače da postoji direktna veza između problema s crijevima i funkcije mozga kod autizma. [I]

Malo kliničko ispitivanje koje je uključivalo 18 djece s autizmom pokušalo je uključiti promjene u mikrobioti s liječenjem osnovnog poremećaja. Ovaj tretman je uključivao 2-nedeljni kurs antibiotika, čišćenje creva i fekalna transplantacija od zdravih donora. Kao rezultat ovog tretmana, djeca su doživjela 80% smanjenje simptoma crijevnih problema (zatvor, dijareja, dispepsija i bol u trbuhu). Istovremeno, poboljšani su simptomi ponašanja osnovne bolesti. Ovo poboljšanje je održano 8 sedmica nakon završetka liječenja. [I]

Poznato je da miševi bez klica pokazuju smetnje u društvenim vještinama. Oni pokazuju pretjerano samoodržanje (slično kao kod ljudi koji se ponavljaju) i u većini slučajeva će izabrati da budu u praznoj prostoriji umjesto da budu u prisustvu drugog miša. Ako se crijeva ovih miševa koloniziraju crijevnim bakterijama zdravih miševa odmah nakon rođenja, neki, ali ne svi, simptomi se poboljšavaju. To znači da postoji kritični period u djetinjstvu kada crijevne bakterije utiču na razvoj mozga. [I]

Kod ljudi, gojaznost majki može povećati rizik od autizma kod dece. [I] Vjerovatni uzrok je neravnoteža crijevne mikroflore.

Kada su majke miševi hranjene hranom s visokim udjelom masti, njihova crijevna mikroflora je postala neuravnotežena i njihovo potomstvo je imalo problema sa druženjem. Ako su mršave, zdrave životinje živjele sa trudnom ženkom, onda su se takvi društveni poremećaji kod rođenih miševa javljali u vrlo rijetkim slučajevima. Osim toga, jedan od probiotika - Lactobacillus reuteri (Lactobacillus reuteri) također su mogli poboljšati ova socijalna oštećenja. [I]

Poremećena crevna mikroflora može doprineti razvoju Alchajmerove bolesti

Proklijali miševi su djelimično zaštićeni od . Kolonizacija ovih miševa bakterijama oboljelih miševa doprinijela je razvoju Alchajmerove bolesti. [nerecenzirana studija [I])

Protein koji formira amiloidne plakove (b-amiloid) kod Alchajmerove bolesti proizvode crijevne bakterije. Poznate bakterije - Escherichia coli i Salmonella enterica (ili Salmonella intestinalis, lat. Salmonella enterica), nalaze se na listi mnogih bakterija koje proizvode b-amiloidnih proteina i može doprinijeti Alchajmerovoj bolesti. [I]

Ljudi sa oštećenom mikroflorom crijeva imaju povećan rizik od razvoja Alchajmerove bolesti:

  • Hronična gljivična infekcija može povećati rizik od Alchajmerove bolesti [I]
  • Ljudi sa rozecijom pokazuju izmijenjenu crijevnu floru. Imaju povećan rizik od razvoja demencije, posebno Alchajmerove bolesti (studija na 5.591.718 ljudi). [I]
  • Pacijenti sa dijabetesom imaju 2 puta povećan rizik od razvoja Alchajmerove bolesti (studija na 1017 starijih osoba). [I]

Problemi s mikrobiotom crijeva povećavaju rizik od Parkinsonove bolesti

Studija koja je uključivala 144 ispitanika pokazala je da ljudi sa promijenjenom crijevnom mikroflorom. Imali su smanjen broj Prevotellaceae skoro 80%. Istovremeno je povećan broj enterobakterije. [I]

Miševi skloni razvoju Parkinsonove bolesti imaju manje motoričkih abnormalnosti kada se rode bez klica. Ali ako su bili kolonizirani bakterijama ili im date kratkolančane masne kiseline (SCFA), simptomi su se pogoršali. U ovom slučaju, antibiotici su mogli pomoći u poboljšanju stanja. [I]

Kada su miševima bez klica s genetskom predispozicijom za Parkinsonovu bolest date crijevne bakterije od miševa s tom bolešću, njihovi simptomi su postali mnogo gori. [I]

Poremećena crijevna mikroflora može povećati rizik od raka debelog crijeva

Studija na 179 ljudi otkrila je da ljudi s dijagnozom raka debelog crijeva imaju povećan omjer Bacteroides/Prevotella. [I]

Druga studija na 27 ispitanika pokazala je da ljudi s rakom debelog crijeva imaju više acetata u crijevima i manje bakterija koje proizvode butirat. [I]

Crijevne i druge infekcije, kao i štetne bakterije narušavaju crijevnu mikrofloru i povećavaju rizik razvoj raka debelog crijeva i:

  • Infekcija Streptococcus bovis je faktor rizika za razvoj raka debelog crijeva (meta-analiza 24 studije). [I]
  • Bakterija Escherichia coli pojačava rast tumora kod miševa sa intestinalnom upalom. [I]

Promjene u crijevnoj mikrobioti povezane sa sindromom kroničnog umora

U studiji na 100 dobrovoljaca pokazano je da je sindrom kroničnog umora povezan s poremećajima crijevne mikroflore. Osim toga, težina ovih poremećaja može biti povezana s ozbiljnošću bolesti. [I]

Slična studija (87 sudionika) otkrila je da pacijenti sa sindromom kroničnog umora imaju smanjenu bakterijsku raznolikost u crijevima. Posebno je uočeno smanjenje broja Firmicutes. Crijeva je sadržavala više upalnih i manje protuupalnih vrsta bakterija. [I]

Studija na 20 pacijenata otkrila je da vježbanje uzrokuje daljnje poremećaje u crijevnoj mikrobioti kod ljudi sa sindromom kroničnog umora. [I] Ovakvo pogoršanje stanja može se objasniti činjenicom da tokom fizičke aktivnosti dolazi do pojačanog prodora štetnih bakterija i njihovih metabolita kroz crijevnu barijeru, te se krvotokom šire po cijelom tijelu.

Mikroflora pomaže u smanjenju umora tokom fizičke aktivnosti

U eksperimentima na životinjama ustanovljeno je da normalizacija crijevne mikroflore može povećati performanse i smanjiti umor tokom fizičkog treninga. [I] Ali miševi bez klica pokazali su kraće udaljenosti tokom testova plivanja. [I]

Uzimanje probiotika Lactobacillus plantarum Povećana mišićna masa, snaga stiska šape i fizičke performanse kod miševa . [ I]

Crevne bakterije utiču na starenje


Promjene sadržaja bifidobakterija u crijevnoj mikroflori s godinama i rizicima od razvoja bolesti

Starenje je često povezano s poremećajima crijevne mikroflore. [I] Stariji ljudi obično imaju sveukupno nisku raznolikost crijevnih bakterija. Pokazuju vrlo mali broj Firmicutes i snažan porast Bacteroides. [I]

Intestinalna disbioza uzrokuje kroničnu upalu niskog stupnja. Takođe je povezan sa smanjenom funkcijom imunog sistema (imunosenescencija). Oba ova stanja prate mnoge bolesti povezane sa starenjem. [I]

To su pokazale dvije studije koje su uključivale 168 i 69 stanovnika Rusije imala najveću bakterijsku raznolikost. Imali su i veliki broj korisnih bakterija i mikroba koji proizvode butirat. [ja, ja]

Miševi bez klica žive duže. Ali ako su životinje bez klica bile smještene sa starim (ali ne mladim) miševima, miševi bez klica imali su nagli porast proinflamatornih citokina u krvi. [I]

, Prosjek 4.8 Ukupno glasova (5)

Intestinalna disbioza- ovo su uslovi u kojima se normalan mikrobni sastav crijeva.

Predstavnici takozvane normalne mikroflore žive na koži, u urogenitalnom traktu, u pankreasu itd., kao i na sluznicama gornjih disajnih puteva i obavljaju funkcije koje su im jedinstvene, o čemu smo već govorili u detaljnije u prethodnim poglavljima...

Uključujući normalnu mikrofloru, prisutna je u malim količinama u jednjaku (ova mikroflora praktički replicira mikrofloru gornjih dišnih puteva), u želucu (mikrobni sastav želuca je loš i predstavljen je laktobacilima, streptokokama, helikobakterima i kvascima sličnim gljive otporne na želučanu kiselinu), in duodenuma i tankog crijeva mikroflora je mala (predstavljena uglavnom streptokokama, laktobacilima, vejonelom), u ileumu broj mikroba je veći (svim navedenim mikroorganizmima se dodaje E. coli itd.). Ali najveći broj mikroorganizama normalne mikroflore živi u debelom crijevu.

Oko 70% svih mikroorganizama normalne ljudske mikroflore je koncentrisano precizno u debelom crijevu. Ako sastavite svu crijevnu mikrofloru – sve njene bakterije, stavite je na vagu i izmjerite, dobit ćete oko tri kilograma! Možemo reći da je ljudska mikroflora poseban ljudski organ, koji je od najveće važnosti za život čovjeka, kao i srce, pluća, jetra itd.

Sastav crijevne mikroflore zdrave osobe


99% mikroba u crijevima korisni su pomagači ljudima. Ovi mikroorganizmi su stalni stanovnici crijeva, zbog čega su i nazvani stalna mikroflora. To uključuje:

  • Glavna flora su bifidobakterije i bakteroidi, čiji je broj 90-98%;
  • Povezana flora- laktobacili, propionobakterije, Escherichia coli, enterokoki. Njihov broj je 1-9% svih bakterija.

Pod određenim uslovima, svi predstavnici normalne mikroflore, sa izuzetkom bifidobakterija, laktobacila i propionobakterija, imaju sposobnost izazivanja bolesti, tj. Bacteroides, Escherichia coli i enterococci imaju patogena svojstva pod određenim okolnostima (o tome ću govoriti malo kasnije).

  • Bifidobakterije, laktobacili, propionobakterije su apsolutno pozitivni mikroorganizmi i ni pod kojim okolnostima neće vršiti patogenu štetnu funkciju u odnosu na ljudski organizam.

Ali u crijevima postoji i tzv rezidualna mikroflora: stafilokoki, streptokoki, klostridije, Klebsiella, gljivice slične kvascu, Citrobacter, Veillonella, Proteus i još neki „štetni“ patogeni mikroorganizmi... Kao što ste shvatili, ovi mikroorganizmi pod određenim uslovima obavljaju mnogo patogenih funkcija štetnih za čoveka. Ali kod zdrave osobe broj ovih bakterija ne prelazi 1%, odnosno, dok su u manjini, jednostavno nisu sposobne nanijeti nikakvu štetu, već, naprotiv, koriste tijelu, budući da su oportunistička mikroflora. i izvođenje imunogene funkcije(ova funkcija je jedna od glavnih funkcija mikroflore gornjih disajnih puteva, već sam je spomenuo u poglavlju 17).

Neravnoteža mikroflore

Sve ove bifidobakterije, laktobacili i drugi obavljaju ogroman broj različitih funkcija. A ako se normalan sastav crijevne mikroflore uzdrma, bakterije se neće moći nositi sa svojim funkcijama, onda...

— Vitamini iz hrane se jednostavno neće apsorbovati i apsorbovati, otuda milion bolesti.

— Neće se proizvoditi dovoljna količina imunoglobulina, interferona, lizozima, citokina i drugih imunoloških faktora, što će rezultirati smanjenjem imuniteta i beskrajnim prehladama, zaraznim bolestima akutnih respiratornih infekcija, akutnim respiratornim virusnim infekcijama i gripom. Mala količina istih imunoglobulina, interferona, lizozima itd. biće i u sluznim sekretima, usled čega će biti poremećena mikroflora respiratornog trakta i izazvati razne rinitise, faringitise, upale krajnika, bronhitisa itd. biti poremećene - patogene bakterije će nastaviti da povećavaju svoju populaciju.

— Ako je poremećena obnova ćelija u crevnoj sluznici, mnogi različiti otrovi i alergeni koji moraju da ostanu u crevima sada će početi da se apsorbuju u krv, trovajući ceo organizam, pa nastaju razne bolesti, uključujući i mnoge alergijske bolesti (bronhijalna astma, alergijski dermatitis, itd.).

— Probavni poremećaji, apsorpcija produkata raspadanja truležne mikroflore mogu se odraziti na peptički ulkus, kolitis, gastritis itd.

— Ako se disfunkcija crijeva primijeti kod pacijenata s bolestima gastrointestinalnog trakta, na primjer, pankreatitisom, tada je najvjerojatnije kriva disbioza, koja se uspješno razvija u pozadini ove bolesti.

— Ginekološke bolesti (kada se mikroorganizmi prenose na kožu međice, a potom i na genitourinarne organe), gnojno-upalne bolesti (čirevi, apscesi itd.), poremećaji metabolizma (poremećaji menstrualnog ciklusa, ateroskleroza, urolitijaza, giht) itd. .

— Poremećaji nervnog sistema sa raznim manifestacijama itd.

- Kožne bolesti.

Uzrokovane bolesti mogu se nabrajati jako, jako dugo!

Ljudsko telo je veoma fino podešen sistem koji je sposoban za samoregulaciju, ovaj sistem nije lako izbaciti iz ravnoteže... Ali neki faktori ipak utiču na sastav crevne mikroflore. To može uključivati ​​prirodu ishrane, doba godine, starost, međutim, ovi faktori imaju malo uticaja na fluktuacije u sastavu mikroflore i prilično su popravljivi, ravnoteža mikroflore se vrlo brzo obnavlja ili mala neravnoteža ne utiče zdravlje ljudi na bilo koji način. Drugačije se postavlja pitanje kada se zbog ozbiljnih nutritivnih poremećaja ili nekih drugih razloga poremeti biološka ravnoteža crijevne mikroflore i počne dovesti do čitavog lanca reakcija i poremećaja u funkcionisanju drugih organa i sistema u tijelu, uglavnom bolesti nosne šupljine, grla, pluća, česte prehlade itd. Tada trebamo razgovarati o disbiozi.

— Normalna mikroflora i njen poremećaj;
- Začarani krug;
— pH faktor i kiselost...">

Foto: www.medweb.ru

Ljudska evolucija odvijala se uz stalni i neposredni kontakt sa svijetom mikroba, uslijed čega su se formirale bliske veze između makro- i mikroorganizama koje karakterizira određena fiziološka potreba.

Naseljavanje (kolonizacija) tjelesnih šupljina koje komuniciraju sa vanjskim okruženjem također je jedan od vidova interakcije živih bića u prirodi. Mikroflora se nalazi u gastrointestinalnom traktu i genitourinarnom sistemu, na koži, sluzokoži očiju i respiratornom traktu.

Najvažniju ulogu igra crijevna mikroflora, budući da zauzima površinu od oko 200-300 m2 (za poređenje, pluća su 80 m2, a koža tijela 2 m2). Prepoznato je da je ekološki sistem gastrointestinalnog trakta jedan od odbrambenih sistema organizma, a ako je narušen u kvalitativnom i kvantitativnom smislu, postaje izvor (rezervoar) patogena, uključujući i one sa epidemijskom prirodom širenja.

Svi mikroorganizmi sa kojima ljudsko tijelo komunicira mogu se podijeliti u 4 grupe.

■ Prva grupa uključuje mikroorganizme koji nisu sposobni za dugotrajan boravak u tijelu, pa se stoga nazivaju prolaznim.

Njihovo otkrivanje tokom pregleda je nasumično.

■ Druga grupa- bakterije koje su dio obavezne (najtrajnije) crijevne mikroflore i igraju važnu ulogu u aktiviranju metaboličkih procesa makroorganizma i njegovoj zaštiti od infekcije. To uključuje bifidobakterije, bakteroidi, laktobacili, E. coli, enterokoki, katenobakterije . Promjene u stabilnosti ovog sastava imaju tendenciju da dovedu do poremećaja stanja.

Treća grupa- mikroorganizmi koji se takođe sa dovoljnom postojanošću nalaze kod zdravih ljudi i koji su u određenom stanju ravnoteže sa organizmom domaćina. Međutim, sa smanjenjem rezistencije, sa promjenama u sastavu normalnih biocenoza, ovi oportunistički oblici mogu pogoršati tok drugih bolesti ili sami djelovati kao etiološki faktor.

Njihova specifična težina u mikrobiocenozi i njihov odnos sa mikrobima druge grupe su od velikog značaja.

To uključuje stafilokoke, gljivice kvasca, Proteus, streptokoke, Klebsiella, Citrobacter, Pseudomonas i druge mikroorganizme. Njihova specifična težina može biti samo manja od 0,01-0,001% od ukupnog broja mikroorganizama.

Četvrta grupa su uzročnici zaraznih bolesti.

Mikrofloru gastrointestinalnog trakta predstavlja više od 400 vrsta mikroorganizama, od čega više od 98% čine obavezne anaerobne bakterije. Raspodjela mikroba u gastrointestinalnom traktu je neujednačena: svaki odjel ima svoju, relativno konstantnu mikrofloru. Vrsni sastav oralne mikroflore predstavljaju aerobni i anaerobni mikroorganizmi.

Kod zdravih ljudi u pravilu se nalaze iste vrste lactobadillus, kao i mikrokoke, diplokoke, streptokoke, spirilume, protozoe. Saprofitni stanovnici usne šupljine mogu uzrokovati karijes.

Tabela 41 Kriterijumi za normalnu mikrofloru

Želudac i tanko crijevo sadrže relativno malo mikroba, što se objašnjava baktericidnim djelovanjem želučanog soka i žuči. Međutim, u nekim slučajevima se kod zdravih ljudi otkrivaju laktobacili, kvasci otporni na kiseline i streptokoki. U patološkim stanjima probavnih organa (kronični gastritis sa sekretornom insuficijencijom, kronični enterokolitis itd.), uočava se kolonizacija gornjih dijelova tankog crijeva raznim mikroorganizmima. U ovom slučaju dolazi do kršenja apsorpcije masti, razvija se steatoreja i megaloplastična anemija. Prijelaz kroz Bauhinijevu valvulu u debelo crijevo praćen je značajnim kvantitativnim i kvalitativnim promjenama.

Ukupan broj mikroorganizama je 1-5x10n mikroba po 1 g sadržaja.

U mikroflori debelog crijeva, anaerobne bakterije ( bifidobakterije, bakteroidi, različiti oblici spora) čine više od 90% ukupnog broja mikroba. Aerobne bakterije koje predstavljaju E. Coli, laktobacili i druge u prosjeku 1-4%, a stafilokoke, klostridije, Proteus i gljivice slične kvascu ne prelaze 0,01-0,001%. Kvalitativno, mikroflora fecesa slična je mikroflori šupljine debelog crijeva. Njihova količina se određuje u 1 g fecesa (vidi tabelu 41).

Normalna crijevna mikroflora podliježe promjenama u zavisnosti od ishrane, starosti, uslova života i niza drugih faktora. Primarna kolonizacija crijevnog trakta djeteta mikrobima nastaje tokom rođenja Doderlein bacilima, koji pripadaju flori mliječne kiseline. U budućnosti, priroda mikroflore značajno ovisi o prehrani. Kod djece koja se doje od 6-7 dana preovlađuje bifidna flora.

Bifidobakterije se nalaze u količini od 109-1 0 10 po 1 g fecesa i čine do 98% ukupne crijevne mikroflore. Razvoj bifidne flore podržavaju laktoza i bifidus faktor I i II koji se nalaze u majčinom mlijeku. Bifidobakterije i laktobacili su uključeni u sintezu vitamina (grupa B, PP, ) i esencijalnih aminokiselina, pospješuju apsorpciju soli kalcija, vitamina D, željeza, inhibiraju rast i reprodukciju patogenih i truležnih mikroorganizama, regulišu motornu evakuaciju funkciju debelog crijeva, aktiviraju lokalne zaštitne reakcije crijeva. u prvoj godini života, onima na vještačkom hranjenju, sadržaj bifidne flore pada na 106 ili manje; Preovlađuju Escherichia coli, acidofilni bacili i enterokoki. Česta pojava crijevnih smetnji kod takve djece objašnjava se zamjenom bifidne flore drugim bakterijama.

Mikroflora mališana karakterizira visok sadržaj E. coli i enterokoka; u aerobnoj flori dominiraju bifidobakterije.

Kod starije djece, mikroflora njegov sastav je blizak mikroflori odraslih.

Normalna mikroflora je dobro prilagođen uslovima postojanja u crevima i uspešno se takmiči sa drugim bakterijama koje dolaze spolja. Visoka antagonistička aktivnost bifido-, laktoflore i normalne Escherichia coli manifestuje se protiv uzročnika dizenterije, trbušnog tifusa, antraksa, bacila difterije, Vibrio cholerae itd. Intestinalni saprofiti proizvode različite baktericidne i bakteriostatske supstance, uključujući i vrste antibiotika.

Od velikog je značaja za organizam imunizirajuće svojstvo normalne mikroflore. Escherichia, zajedno sa enterokokom i nizom drugih mikroorganizama, izaziva stalnu antigensku iritaciju lokalnog imunog sistema, održavajući ga u fiziološki aktivnom stanju (Hazenson JI. B., 1982), što pospješuje sintezu imunoglobulina koji sprječavaju prodiranje patogene enterobakterije u sluznicu.

Crevne bakterije direktno učestvuju u biohemijskim procesima, razgradnji žučnih kiselina i stvaranju sterkobilina, koprosterola i deoksiholne kiseline u debelom crevu. Sve to ima blagotvoran učinak na metabolizam, peristaltiku, apsorpciju i stvaranje fecesa. Kada se normalna mikroflora promijeni, funkcionalno stanje debelog crijeva je narušeno.

Crijevna mikroflora je u bliskoj vezi sa makroorganizmom, obavlja važnu nespecifičnu zaštitnu funkciju, pomažući u održavanju postojanosti biohemijskog i biološkog okruženja crijevnog trakta. Istovremeno, normalna mikroflora je visoko osjetljiv indikatorski sistem koji reaguje izraženim kvantitativnim i kvalitativnim promjenama na promjene uslova životne sredine u svom staništu, što se manifestuje disbakteriozom.

Razlozi za promjene normalne crijevne mikroflore

Normalna crijevna mikroflora može postojati samo u normalnom fiziološkom stanju organizma. Uz različite štetne učinke na makroorganizam, smanjenje njegovog imunološkog statusa, patološka stanja i procese u crijevima, nastaju promjene u mikroflori gastrointestinalnog trakta. Mogu biti kratkotrajne i spontano nestati nakon eliminacije vanjskog faktora koji uzrokuje štetne posljedice, ili mogu biti izraženije i postojanije.

Normalni crijevni mikroorganizmi su kolonije bakterija koje naseljavaju lumen donjeg probavnog trakta i površinu sluznice. Potrebni su za kvalitetnu probavu himusa (bolus hrane), metabolizam i aktiviranje lokalne odbrane od infektivnih patogena, kao i toksičnih produkata.

Normalna crevna mikroflora- to je ravnoteža različitih mikroba donjih dijelova probavnog sistema, odnosno njihov kvantitativni i kvalitativni odnos neophodan za održavanje biohemijske, metaboličke, imunološke ravnoteže organizma i očuvanje zdravlja ljudi.

  • Zaštitna funkcija. Normalna mikroflora ima izraženu otpornost na patogene i oportunističke mikroorganizme. Korisne bakterije sprječavaju kolonizaciju crijeva drugim infektivnim patogenima koji nisu tipični za njih. Ako se količina normalne mikroflore smanji, potencijalno opasni mikroorganizmi počinju da se razmnožavaju. Razvijaju se gnojno-upalni procesi i dolazi do trovanja krvi bakterijama (septikemija). Stoga je važno spriječiti smanjenje količine normalne mikroflore.
  • Probavna funkcija. Crijevna mikroflora je uključena u fermentaciju proteina, masti i ugljikohidrata visoke molekularne težine. Korisne bakterije uništavaju većinu ostataka vlakana i himusa pod uticajem vode i održavaju potreban nivo kiselosti (pH) u crevima. Mikroflora inaktivira (alkalna fosfataza, enterokinaza), učestvuje u stvaranju proizvoda razgradnje proteina (fenol, indol, skatol) i stimuliše peristaltiku. Mikroorganizmi probavnog trakta također regulišu metabolizam žučnih kiselina. Pospješuju transformaciju bilirubina (žučnog pigmenta) u sterkobilin i urobilin. Korisne bakterije igraju važnu ulogu u završnim fazama konverzije kolesterola. Proizvodi koprosterol, koji se ne apsorbira u debelom crijevu i izlučuje se izmetom. Normoflora može smanjiti proizvodnju žučnih kiselina u jetri i kontrolirati normalne razine kolesterola u tijelu.
  • Sintetička (metabolička) funkcija. Korisne bakterije probavnog trakta proizvode vitamine (C, K, H, PP, E, grupa B) i esencijalne aminokiseline. Crijevna mikroflora pospješuje bolju apsorpciju željeza i kalcija, a samim tim i sprječava razvoj bolesti poput anemije i rahitisa. Zbog djelovanja korisnih bakterija dolazi do aktivne apsorpcije vitamina (D 3, B 12 i folne kiseline) koji regulišu hematopoetski sistem. Metabolička funkcija crijevne mikroflore očituje se i u njihovoj sposobnosti da sintetiziraju supstance slične antibiotiku (acidofil, laktocidin, kolicin i druge) i biološki aktivnih spojeva (histamin, dimetilamin, tiramin i dr.), koji sprječavaju rast i razmnožavanje patogena. mikroorganizmi.
  • Funkcija detoksikacije. Ova funkcija je povezana sa sposobnošću crijevne mikroflore da smanji količinu i ukloni opasne toksične produkte iz fecesa: soli teških metala, nitrite, mutagene, ksenobiotike i druge. Štetna jedinjenja se ne zadržavaju u tjelesnim tkivima. Korisne bakterije sprječavaju njihovo toksično djelovanje.
  • Imunološka funkcija. Normalna crijevna flora stimulira sintezu imunoglobulina - posebnih proteina koji povećavaju obranu tijela od opasnih infekcija. Također, korisne bakterije doprinose sazrijevanju sistema fagocitnih ćelija (nespecifični imunitet), sposobnih da apsorbiraju i unište patogene mikrobe (vidi).

Predstavnici crijevne mikroflore

Celokupna crevna mikroflora se deli na:

  1. normalno (osnovno);
  2. oportunistički;
  3. patogena.

Među svim predstavnicima ima anaerobnih i aerobnih. Njihova razlika jedna od druge leži u posebnostima njihovog postojanja i životne aktivnosti. Aerobi su mikroorganizmi koji mogu živjeti i razmnožavati se samo u uvjetima stalnog pristupa kisiku. Predstavnici druge grupe dijele se u 2 tipa: obvezni (strogi) i fakultativni (uslovni) anaerobi. I jedni i drugi primaju energiju za svoje postojanje u nedostatku kisika. Destruktivno je za obavezne anaerobe, ali ne i za fakultativne, odnosno u njegovom prisustvu mogu postojati mikroorganizmi.

Normalni mikroorganizmi

To uključuje gram-pozitivne (bifidobakterije, laktobacili, eubakterije, peptostreptokoke) i gram-negativne (bakteroide, fuzobakterije, vejonele) anaerobe. Ovo ime je povezano s imenom danskog bakteriologa - Gram. Razvio je posebnu metodu za bojenje razmaza anilinskom bojom, jodom i alkoholom. Pod mikroskopijom, neke bakterije imaju plavo-ljubičastu boju i gram-pozitivne su. Ostali mikroorganizmi postaju bezbojni. Za bolju vizualizaciju ovih bakterija koristi se kontrastna boja (fuksin) koja ih postaje ružičasta. To su gram-negativni mikroorganizmi.

Svi predstavnici ove grupe su strogi anaerobi. Oni čine osnovu cjelokupne crijevne mikroflore (92-95%). Korisne bakterije proizvode supstance slične antibioticima koje pomažu izbacivanju patogena opasnih infekcija iz svog okruženja. Također, normalni mikroorganizmi stvaraju zonu “zakiseljavanja” (pH = 4,0-5,0) unutar crijeva i formiraju zaštitni film na površini njegove sluzokože. Tako se formira barijera koja sprječava kolonizaciju stranih bakterija izvana. Korisni mikroorganizmi regulišu ravnotežu oportunističke flore, sprečavajući njen preterani rast. Učestvuju u sintezi vitamina.

Tu spadaju gram-pozitivni (klostridije, stafilokoki, streptokoki, bacili) i gram-negativni (Escherichia - E. coli i drugi članovi porodice Enterobacteriaceae: Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, itd.) fakultativni anaerobi.

Ovi mikroorganizmi su oportunistički. Odnosno, ako je u tijelu dobro, njihov utjecaj je samo pozitivan, baš kao i normalna mikroflora. Izloženost nepovoljnim faktorima dovodi do njihove pretjerane reprodukcije i transformacije u patogene. Razvija se uz dijareju, promjenu prirode stolice (tečnost s primjesom sluzi, krvi ili gnoja) i pogoršanje općeg zdravlja. Kvantitativni rast oportunističke mikroflore može biti povezan sa oslabljenim imunitetom, upalnim oboljenjima probavnog sistema, lošom ishranom i upotrebom lekova (antibiotika, hormona, citostatika, analgetika i drugih lekova).

Glavni predstavnik enterobakterije je tipičnih bioloških svojstava. U stanju je da aktivira sintezu imunoglobulina. Specifični proteini stupaju u interakciju sa patogenim mikroorganizmima iz porodice Enterobacteriaceae i sprečavaju njihov prodor u mukoznu membranu. Osim toga, E. coli proizvodi tvari - kolicine s antibakterijskim djelovanjem. Odnosno, normalna Escherichia je sposobna da inhibira rast i reprodukciju truležnih i patogenih mikroorganizama iz porodice enterobakterija - Escherichia coli sa izmijenjenim biološkim svojstvima (hemolizirajući sojevi), Klebsiella, Proteus i drugi. Escherichia učestvuje u sintezi vitamina K.

Oportunistička mikroflora uključuje i gljive slične kvascu iz roda Candida. Rijetko se nalaze kod zdrave djece i odraslih. Njihovo otkrivanje u fecesu, čak iu malim količinama, treba da bude praćeno kliničkim pregledom pacijenta kako bi se isključio (prekomerni rast i proliferacija gljivica sličnih kvascu). To se posebno odnosi na malu djecu i pacijente sa smanjenim imunitetom.

Patogeni mikroorganizmi

To su bakterije koje izvana ulaze u probavni trakt i uzrokuju akutne crijevne infekcije. Do infekcije patogenim mikroorganizmima može doći prilikom konzumiranja kontaminirane hrane (povrće, voće i sl.) i vode, kršenja pravila lične higijene i kontakta sa bolesnom osobom. Obično se ne nalaze u crijevima. To uključuje patogene uzročnike opasnih infekcija - pseudotuberkulozu i druge bolesti. Najčešći predstavnici ove grupe su Shigella, Salmonella, Yersinia itd. Neki uzročnici bolesti (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, atipična Escherichia coli) mogu se naći kod medicinskog osoblja (nosioci patogenog soja) iu bolnicama. Oni uzrokuju ozbiljne bolničke infekcije.

Sve patogene bakterije izazivaju razvoj crijevne upale tipa ili s poremećajem stolice (proljev, sluz, krv, gnoj u stolici) i razvoj intoksikacije organizma. Korisna mikroflora je inhibirana.

Normalan nivo bakterija u crevima

Korisne bakterije

Normalni mikroorganizmiDjeca starija od 1 godineOdrasli
Bifidobakterije10 9 –10 10 10 8 –10 10 10 10 –10 11 10 9 –10 10
Laktobacili10 6 –10 7 10 7 –10 8 10 7 –10 8 >10 9
Eubacteria10 6 –10 7 >10 10 10 9 –10 10 10 9 –10 10
Pepto-streptokoki<10 5 >10 9 10 9 –10 10 10 9 –10 10
Bacteroides10 7 –10 8 10 8 –10 9 10 9 –10 10 10 9 –10 10
Fusobacteria<10 6 <10 6 10 8 –10 9 10 8 –10 9
Veillonella<10 5 >10 8 10 5 –10 6 10 5 –10 6

CFU/g je broj jedinica koje formiraju kolonije mikroba u 1 gramu fecesa.

Oportunističke bakterije

Oportunistički mikroorganizmiDjeca mlađa od 1 godine se dojeDjeca mlađa od 1 godine na vještačkom hranjenjuDjeca starija od 1 godineOdrasli
Escherichia coli sa tipičnim svojstvima10 7 –10 8 10 7 –10 8 10 7 –10 8 10 7 –10 8
Clostridia10 5 –10 6 10 7 –10 8 < =10 5 10 6 –10 7
Staphylococcus10 4 –10 5 10 4 –10 5 <=10 4 10 3 –10 4
Streptococci10 6 –10 7 10 8 –10 9 10 7 –10 8 10 7 –10 8
bacili10 2 –10 3 10 8 –10 9 <10 4 <10 4
Gljive iz roda Candidanijedannijedan<10 4 <10 4

Korisne crijevne bakterije

Gram-pozitivni strogi anaerobi:

Gram-negativni strogi anaerobi:

  • Bacteroides– polimorfne (različite veličine i oblika) štapovi. Zajedno s bifidobakterijama koloniziraju crijeva novorođenčadi do 6-7 dana života. Tokom dojenja, bakteroidi se otkrivaju kod 50% djece. Uz umjetnu ishranu, u većini slučajeva se sije. Bakteroidi učestvuju u varenju i razgradnji žučnih kiselina.
  • Fusobacteria– polimorfni štapićasti mikroorganizmi. Karakteristično za crijevnu mikrofloru odraslih osoba. Često se sije iz patološkog materijala tijekom gnojnih komplikacija različitih lokalizacija. Sposoban da luči leukotoksin (biološka supstanca sa toksičnim dejstvom na leukocite) i faktor agregacije trombocita, odgovoran za tromboemboliju kod teške septikemije.
  • Veillonella– kokni mikroorganizmi. Kod dojene djece otkrivaju se u manje od 50% slučajeva. Kod beba na umjetnoj ishrani, formule se sije u visokim koncentracijama. Veillonella su sposobne za veliku proizvodnju plina. Ako se prekomjerno razmnožavaju, ova karakteristična osobina može dovesti do dispeptičkih poremećaja (nadutivanje, podrigivanje i proljev).

Kako provjeriti normalnu mikrofloru?

Bakteriološki pregled stolice treba obaviti inokulacijom na posebne hranljive podloge. Materijal se sakuplja sterilnom lopaticom iz posljednje porcije izmeta. Potrebna količina fecesa je 20 grama. Materijal za istraživanje stavlja se u sterilne posude bez konzervansa. Potrebno je uzeti u obzir činjenicu da anaerobni mikroorganizmi moraju biti pouzdano zaštićeni od djelovanja kisika od trenutka sakupljanja stolice do njene inokulacije. Preporučljivo je koristiti epruvete napunjene specijalnom mješavinom plinova (ugljični dioksid (5%) + vodonik (10%) + dušik (85%) i dobro samljevenim poklopcem. Od trenutka prikupljanja materijala do početka bakteriološkog pregleda ne smije proći više od 2 sata.

Ova analiza stolice omogućava otkrivanje širokog spektra mikroorganizama, izračunavanje njihovog omjera i dijagnosticiranje vidljivih poremećaja - disbioze. Poremećaji u sastavu crijevne mikroflore karakteriziraju smanjenje udjela korisnih bakterija, povećanje količine oportunističke flore s promjenom njenih normalnih bioloških svojstava, kao i pojava patogena.

Nizak sadržaj normalne mikroflore - šta učiniti?

Disbalans mikroorganizama se koriguje posebnim preparatima:

  1. pospješuju kolonizaciju crijeva glavnom mikroflorom zbog selektivne stimulacije rasta i metaboličke aktivnosti jedne ili više grupa bakterija. Ovi lijekovi nisu lijekovi. To uključuje neprobavljene sastojke hrane koji su supstrati za korisne bakterije i na koje ne utiču probavni enzimi. Preparati: "Hilak forte", "Duphalak" ("Normaze"), "Kalcijum pantotenat", "Lizozim" i drugi.
  2. To su živi mikroorganizmi koji normaliziraju ravnotežu crijevnih bakterija i konkuriraju oportunističkoj flori. Blagotvorno utiču na zdravlje ljudi. Sadrže korisne bifidobakterije, laktobacile, streptokok mliječne kiseline itd. Preparati: “Acilact”, “Linex”, “Baktisubtil”, “Enterol”, “Colibacterin”, “Lactobacterin”, “Bifidumbacterin”, “Bifikol”, “Primadofilus” " i drugi.
  3. Imunostimulirajuća sredstva. Koriste se za održavanje normalne crijevne mikrobiocenoze i povećanje obrambenih snaga organizma. Preparati: “KIP”, “Immunal”, “Ehinacea” itd.
  4. Lijekovi koji regulišu tranzit crijevnog sadržaja. Koristi se za poboljšanje probave i evakuacije hrane. Lijekovi: vitamini itd.

Dakle, normalna mikroflora sa svojim specifičnim funkcijama - zaštitnom, metaboličkom i imunostimulirajućom - određuje mikrobnu ekologiju probavnog trakta i sudjeluje u održavanju postojanosti unutrašnjeg okruženja tijela (homeostaza).