વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ. એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા, અવક્ષેપ પ્રતિક્રિયા રોગપ્રતિકારક ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી

ઇમ્યુનોડાયગ્નોસ્ટિક પ્રતિક્રિયાઓ. એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાઓ અને લેબલવાળા ઘટકો સાથે પ્રતિક્રિયાઓ. સુક્ષ્મસજીવોની ઓળખ અને ચેપી રોગોના નિદાન માટે ઉપયોગ કરો.

રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ દર્દીઓમાં નિદાન અને રોગપ્રતિકારક અભ્યાસમાં થાય છે અને સ્વસ્થ લોકો. આ હેતુ માટે તેઓ ઉપયોગ કરે છે સેરોલોજીકલ પદ્ધતિઓ (lat માંથી. સીરમ - છાશ અને લોગો - શિક્ષણ), એટલે કે લોહીના સીરમ અને અન્ય પ્રવાહી તેમજ શરીરના પેશીઓમાં નિર્ધારિત એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ કરવાની પદ્ધતિઓ.

દર્દીના લોહીના સીરમમાં પેથોજેન એન્ટિજેન્સ સામે એન્ટિબોડીઝની શોધ રોગનું નિદાન કરવાની મંજૂરી આપે છે. સેરોલોજીકલ અભ્યાસનો ઉપયોગ માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સ, વિવિધ જૈવિક રીતે સક્રિય પદાર્થો, રક્ત જૂથો, પેશી અને ગાંઠના એન્ટિજેન્સ, રોગપ્રતિકારક સંકુલ, સેલ રીસેપ્ટર્સ વગેરેને ઓળખવા માટે પણ થાય છે.

દર્દીમાંથી સૂક્ષ્મજીવાણુને અલગ કરતી વખતે, રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સેરાનો ઉપયોગ કરીને તેના એન્ટિજેનિક ગુણધર્મોનો અભ્યાસ કરીને પેથોજેનને ઓળખવામાં આવે છે, એટલે કે ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ ધરાવતા હાયપરઇમ્યુનાઇઝ્ડ પ્રાણીઓના બ્લડ સેરા. આ કહેવાતા છે સેરોલોજીકલ ઓળખસુક્ષ્મસજીવો

માઇક્રોબાયોલોજી અને ઇમ્યુનોલોજીમાં, એગ્ગ્લુટિનેશન, વરસાદ, નિષ્ક્રિયકરણ પ્રતિક્રિયાઓ, પૂરક સાથે સંકળાયેલી પ્રતિક્રિયાઓ, લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સ (રેડિયોઇમ્યુનોલોજિકલ, એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે, ઇમ્યુનોફ્લોરોસન્ટ પદ્ધતિઓ) નો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. સૂચિબદ્ધ પ્રતિક્રિયાઓ નોંધાયેલ અસર અને ઉત્પાદન તકનીકમાં અલગ પડે છે, જો કે, તે બધી મૂળભૂત છે. એન્ટિબોડી સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની પ્રતિક્રિયા પર આધારિત છે અને તેનો ઉપયોગ એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સ બંનેને શોધવા માટે થાય છે. રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે.

નીચે મુખ્ય ઇમ્યુનોડાયગ્નોસ્ટિક પ્રતિક્રિયાઓના સિદ્ધાંતો અને આકૃતિઓ છે. વિગતવાર તકનીકપ્રતિક્રિયાઓની રચના આપવામાં આવે છે. ઇમ્યુનોડાયગ્નોસ્ટિક્સ માટે વ્યવહારુ માર્ગદર્શિકા.

એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા - આરએ(lat માંથી. અગ્લુટી- રાષ્ટ્ર- સંલગ્નતા) એ એક સરળ પ્રતિક્રિયા છે જેમાં એન્ટિબોડીઝ કોર્પસ્ક્યુલર એન્ટિજેન્સ (બેક્ટેરિયા, એરિથ્રોસાઇટ્સ અથવા અન્ય કોષો, તેમના પર શોષાયેલા એન્ટિજેન્સ સાથે અદ્રાવ્ય કણો, તેમજ મેક્રોમોલેક્યુલર એગ્રીગેટ્સ) સાથે જોડાય છે. તે ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સની હાજરીમાં થાય છે, ઉદાહરણ તરીકે, જ્યારે આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન ઉમેરવામાં આવે છે.

અરજી કરો વિવિધ વિકલ્પોએકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયાઓ: વ્યાપક, સૂચક, પરોક્ષ, વગેરે. એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ફ્લેક્સ અથવા કાંપની રચના દ્વારા પ્રગટ થાય છે

RA નો ઉપયોગ આ માટે થાય છે:

દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝનું નિર્ધારણ, ઉદાહરણ તરીકે, બ્રુસેલોસિસ સાથે (રાઈટ, હેડેલસન પ્રતિક્રિયાઓ), ટાઇફોઈડ નો તાવઅને પેરાટાઇફોઇડ તાવ (વિડલ પ્રતિક્રિયા) અને અન્ય ચેપી રોગો;

દર્દીથી અલગ પેથોજેનનું નિર્ધારણ;

એરિથ્રોસાઇટ એલોએન્ટીજેન્સ સામે મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ કરીને રક્ત જૂથોનું નિર્ધારણ.

દર્દીમાં એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા મૂકોવિગતવાર એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા:દર્દીના લોહીના સીરમના મંદનમાં ઉમેરો નિદાન(મૃત સુક્ષ્મજીવાણુઓનું સસ્પેન્શન) અને 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર કેટલાક કલાકોના સેવન પછી, સૌથી વધુ સીરમ ડિલ્યુશન (સીરમ ટાઇટર) નોંધવામાં આવે છે, જેમાં એગ્ગ્લુટિનેશન થયું હતું, એટલે કે, એક અવક્ષેપ રચાય છે.

એગ્લુટિનેશનની પ્રકૃતિ અને ઝડપ એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીઝના પ્રકાર પર આધારિત છે. ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ સાથે ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સ (ઓ- અને આર-એન્ટિજેન્સ) ની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતાઓનું ઉદાહરણ છે. સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ઓ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ(બેક્ટેરિયા ગરમીથી મરી જાય છે, ગરમી-સ્થિર જાળવી રાખે છે ઓ-એન્ટિજન)ફાઇન-ગ્રેઇન્ડ એગ્ગ્લુટિનેશનના સ્વરૂપમાં થાય છે. એચ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ (ફોર્માલ્ડિહાઇડ દ્વારા માર્યા ગયેલા બેક્ટેરિયા, થર્મોલાબિલ ફ્લેગેલર એચ-એન્ટિજનને જાળવી રાખતા) સાથે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા બરછટ છે અને તે ઝડપથી આગળ વધે છે.

જો દર્દીથી અલગ પેથોજેન નક્કી કરવું જરૂરી હોય, તો મૂકો સૂચક એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા,ડાયગ્નોસ્ટિક એન્ટિબોડીઝ (એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ) નો ઉપયોગ કરીને, એટલે કે, પેથોજેનનું સેરોટાઇપિંગ હાથ ધરવામાં આવે છે. અંદાજિત પ્રતિક્રિયાકાચની સ્લાઇડ પર હાથ ધરવામાં આવે છે. દર્દીમાંથી પેથોજેનની શુદ્ધ સંસ્કૃતિ 1:10 અથવા 1:20 ના મંદન પર ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સીરમના ડ્રોપમાં ઉમેરવામાં આવે છે. નજીકમાં એક નિયંત્રણ મૂકવામાં આવે છે: સીરમને બદલે, સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશનનું એક ટીપું લાગુ પડે છે. જ્યારે સીરમ અને સૂક્ષ્મજીવાણુઓ ધરાવતા ડ્રોપમાં ફ્લોક્યુલન્ટ કાંપ દેખાય છે, એ વ્યાપક એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયાટેસ્ટ ટ્યુબમાં એગ્લુટિનેટિંગ સીરમના વધતા મંદન સાથે, જેમાં પેથોજેન સસ્પેન્શનના 2-3 ટીપાં ઉમેરવામાં આવે છે. એગ્ગ્લુટિનેશનને કાંપની માત્રા અને પ્રવાહીની સ્પષ્ટતાની ડિગ્રી દ્વારા ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. જો ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમના ટાઇટરની નજીકના મંદનમાં એગ્ગ્લુટિનેશન જોવામાં આવે તો પ્રતિક્રિયા હકારાત્મક માનવામાં આવે છે. તે જ સમયે, નિયંત્રણો ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે: આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશનથી પાતળું સીરમ પારદર્શક હોવું જોઈએ, સમાન દ્રાવણમાં સૂક્ષ્મજીવાણુઓનું સસ્પેન્શન કાંપ વિના, સમાનરૂપે વાદળછાયું હોવું જોઈએ.

વિવિધ સંબંધિત બેક્ટેરિયા એક જ ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સીરમ દ્વારા એકત્ર થઈ શકે છે, જે તેમની ઓળખ મુશ્કેલ બનાવે છે. તેથી તેઓ ઉપયોગ કરે છે શોષિત એગ્લુટિનેટિંગ સેરા,જેમાંથી ક્રોસ-પ્રતિક્રિયા કરતી એન્ટિબોડીઝને સંબંધિત બેક્ટેરિયાના શોષણ દ્વારા દૂર કરવામાં આવી છે. આવા સેરા એન્ટિબોડીઝ જાળવી રાખે છે જે ફક્ત આપેલ બેક્ટેરિયમ માટે વિશિષ્ટ છે. સ્પેશિયલ મોનોરેસેપ્ટર ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સેરાનું ઉત્પાદન એ. કેસ્ટેલાની (1902) દ્વારા પ્રસ્તાવિત કરવામાં આવ્યું હતું.

પરોક્ષ (નિષ્ક્રિય) હેમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (RNGA, RPGA) એરિથ્રોસાઇટ્સના ઉપયોગ પર આધારિત છે જેમાં એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝ તેમની સપાટી પર શોષાય છે, જેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા લોહીના સીરમના અનુરૂપ એન્ટિબોડીઝ અથવા એન્ટિજેન્સ સાથેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને કારણે એરિથ્રોસાઇટ્સ એકસાથે વળગી રહે છે અને પરીક્ષણના તળિયે પડી જાય છે. ટ્યુબ અથવા કોષ વીસ્કૉલોપ્ડ સેડિમેન્ટના સ્વરૂપમાં (ફિગ. 13.2). મુ નકારાત્મક પ્રતિક્રિયાલાલ રક્ત કોશિકાઓ ■ "બટન" ના સ્વરૂપમાં સ્થાયી થાય છે. સામાન્ય રીતે, એન્ટિજેનિક એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિકમનો ઉપયોગ કરીને આરએનજીએમાં એન્ટિબોડીઝ શોધવામાં આવે છે, જે શોષિત એરિથ્રોસાઇટ્સ છે. પરતેમને એન્ટિજેન્સ સાથે. કેટલીકવાર એન્ટિબોડી એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિક્સનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, જેના પર એન્ટિબોડીઝ શોષાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, બોટ્યુલિનમ ટોક્સિન તેમાં એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડી બોટ્યુલિનમ ટોક્સિન ઉમેરીને શોધી શકાય છે (આ પ્રતિક્રિયા કહેવામાં આવે છે રિવર્સ પરોક્ષ હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા- રોંગ). RNGA નો ઉપયોગ ચેપી રોગોનું નિદાન કરવા અને ગોનાડોટ્રોપિક હોર્મોન નક્કી કરવા માટે થાય છે વીગર્ભાવસ્થા સ્થાપિત કરતી વખતે પેશાબ, શોધવા માટે અતિસંવેદનશીલતાપ્રતિ દવાઓ, હોર્મોન્સ અને કેટલાક અન્ય કિસ્સાઓમાં.

કોગગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા . રોગકારક કોષો સ્ટેફાયલોકોસીનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવે છે જે રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ સાથે પૂર્વ-સારવાર કરવામાં આવે છે. સ્ટેફાયલોકોસી જેમાં પ્રોટીન હોય છે એ,માટે લગાવ છે Fc - ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનનો ટુકડો, બિન-વિશિષ્ટ રીતે એન્ટિમાઇક્રોબાયલ એન્ટિબોડીઝને શોષી લે છે, જે પછી દર્દીઓથી અલગ પડેલા સંબંધિત સૂક્ષ્મજીવાણુઓ સાથે સક્રિય કેન્દ્રો સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે. કોગગ્લુટિનેશનના પરિણામે, સ્ટેફાયલોકોસી, ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ એન્ટિબોડીઝ અને શોધાયેલ સૂક્ષ્મજીવાણુઓનો સમાવેશ કરીને ફ્લેક્સ રચાય છે.

હેમાગ્ગ્લુટિનેશન અવરોધક પ્રતિક્રિયા (RTGA) નાકાબંધી પર આધારિત છે, રોગપ્રતિકારક સીરમ એન્ટિબોડીઝ દ્વારા વાયરલ એન્ટિજેન્સનું દમન, જેના પરિણામે વાયરસ લાલ રક્ત કોશિકાઓ (ફિગ. 13.3) એકત્ર કરવાની તેમની ક્ષમતા ગુમાવે છે. આરટીજીએ (RTGA) નો ઉપયોગ ઘણા વાયરલ રોગોના નિદાન માટે થાય છે, જેના કારણભૂત એજન્ટો (ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ, ઓરી, રૂબેલા, ટિક-બોર્ન એન્સેફાલીટીસ, વગેરે) વિવિધ પ્રાણીઓના લાલ રક્ત કોશિકાઓને એકીકૃત કરી શકે છે.

રક્ત જૂથો નક્કી કરવા માટે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા રક્ત જૂથ એન્ટિજેન્સ A (II), B (III) સામે રોગપ્રતિકારક સીરમ એન્ટિબોડીઝ સાથે લાલ રક્ત કોશિકાઓના એકત્રીકરણનો ઉપયોગ કરીને ABO સિસ્ટમ (વિભાગ 10.1.4.1 જુઓ) સ્થાપિત કરવા માટે વપરાય છે. નિયંત્રણ છે: સીરમ જેમાં એન્ટિબોડીઝ નથી, એટલે કે સીરમ AB (GU)રક્ત પ્રકારો; A (II), B (III) જૂથોના લાલ રક્ત કોશિકાઓમાં સમાયેલ એન્ટિજેન્સ. નકારાત્મક નિયંત્રણમાં એન્ટિજેન્સ નથી, એટલે કે, જૂથ 0 (I) એરિથ્રોસાઇટ્સનો ઉપયોગ થાય છે.

IN આરએચ પરિબળ નક્કી કરવા માટે એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયાઓ(વિભાગ 10.1.4.1 જુઓ) એન્ટી-રીસસ સેરા (ઓછામાં ઓછી બે અલગ શ્રેણી) નો ઉપયોગ કરો. જો અભ્યાસ હેઠળ એરિથ્રોસાઇટ્સના પટલ પર આરએચ એન્ટિજેન હોય, તો આ કોષોનું એકત્રીકરણ થાય છે. તમામ રક્ત જૂથોના પ્રમાણભૂત આરએચ-પોઝિટિવ અને આરએચ-નેગેટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સ નિયંત્રણ તરીકે સેવા આપે છે.

એન્ટિ-રીસસ એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ( પરોક્ષ પ્રતિક્રિયાકોમ્બ્સ)સાથેના દર્દીઓમાં વપરાય છે ઇન્ટ્રાવાસ્ક્યુલર હેમોલિસિસ. આમાંના કેટલાક દર્દીઓમાં, એન્ટિ-રીસસ એન્ટિબોડીઝ મળી આવે છે, જે અપૂર્ણ અને મોનોવેલેન્ટ છે. તેઓ ખાસ કરીને આરએચ-પોઝિટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે, પરંતુ તેમના એકત્રીકરણનું કારણ નથી. આવા અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝની હાજરી પરોક્ષ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. આ કરવા માટે, એન્ટિ-આરએચ એન્ટિબોડીઝ + આરએચ-પોઝિટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સની સિસ્ટમમાં એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ (માનવ ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન સામે એન્ટિબોડીઝ) ઉમેરવામાં આવે છે, જે એરિથ્રોસાઇટ્સ (ફિગ. 13.4) ના એકત્રીકરણનું કારણ બને છે. કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરીને, રોગપ્રતિકારક મૂળના એરિથ્રોસાઇટ્સના ઇન્ટ્રાવાસ્ક્યુલર લિસિસ સાથે સંકળાયેલ પેથોલોજીકલ પરિસ્થિતિઓનું નિદાન કરવામાં આવે છે, ઉદાહરણ તરીકે, નવજાત શિશુના હેમોલિટીક રોગ: આરએચ-પોઝિટિવ ગર્ભના એરિથ્રોસાઇટ્સ રક્તમાં ફરતા આરએચ પરિબળ સાથે અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાય છે, જેમાં આરએચ-નેગેટિવ માતામાંથી પ્લેસેન્ટામાંથી પસાર થાય છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ

વરસાદની પ્રતિક્રિયા - આરપી (માંથીlat praecipito- અવક્ષેપ) - આ વાદળછાયું સ્વરૂપમાં એન્ટિબોડીઝ સાથે દ્રાવ્ય મોલેક્યુલર એન્ટિજેનના સંકુલની રચના અને અવક્ષેપ છે, જેને કહેવામાં આવે છે. અવક્ષેપતે એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝને સમકક્ષ જથ્થામાં મિશ્રણ કરીને રચાય છે; તેમાંથી એકની વધુ માત્રા રોગપ્રતિકારક જટિલ રચનાનું સ્તર ઘટાડે છે.

ટેસ્ટ ટ્યુબમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ કરવામાં આવે છે (રિંગ વરસાદ પ્રતિક્રિયા),જેલ્સ, પોષક માધ્યમો, વગેરેમાં. અગર અથવા એગ્રોઝના અર્ધ-પ્રવાહી જેલમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓની વિવિધતા વ્યાપક બની છે: Ouchterlony અનુસાર ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન. રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન, ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસિસઅને વગેરે

રિંગ વરસાદની પ્રતિક્રિયા . પ્રતિક્રિયા રોગપ્રતિકારક સીરમ સાથે સાંકડી વરસાદની નળીઓમાં કરવામાં આવે છે, જેના પર દ્રાવ્ય એન્ટિજેન સ્તરવાળી હોય છે. એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીઝના શ્રેષ્ઠ ગુણોત્તર સાથે, આ બે ઉકેલોની સરહદ પર અવક્ષેપની અપારદર્શક રિંગ રચાય છે (ફિગ. 13.5). પ્રવાહીની સીમામાં રીએજન્ટના ક્રમશઃ પ્રસારને કારણે રિંગની અવક્ષેપની પ્રતિક્રિયાના પરિણામ પર એન્ટિજેનની વધુ અસર થતી નથી. જો ઉકાળીને ગાળી લો જલીય અર્કઅંગો અથવા પેશીઓ, આ પ્રતિક્રિયા કહેવાય છે થર્મોપ્રિસિપિટેશન પ્રતિક્રિયા (એસ્કોલી પ્રતિક્રિયા,એન્થ્રેક્સ સાથે/

Ouchteruny અનુસાર ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પ્રતિક્રિયા . પ્રતિક્રિયા સુયોજિત કરવા માટે, ઓગળેલા અગર જેલને કાચની પ્લેટ પર પાતળા સ્તરમાં રેડવામાં આવે છે અને, તે સખત થઈ જાય પછી, 2-3 મીમી કદના કુવાઓ કાપી નાખવામાં આવે છે. આ કુવાઓમાં એન્ટિજેન્સ અને રોગપ્રતિકારક સેરા અલગથી મૂકવામાં આવે છે, જે એકબીજા તરફ ફેલાય છે. મીટિંગ પોઇન્ટ પર, સમાન પ્રમાણમાં, તેઓ સફેદ પટ્ટાના રૂપમાં અવક્ષેપ બનાવે છે. મલ્ટિકમ્પોનન્ટ સિસ્ટમ્સમાં, વિવિધ એન્ટિજેન્સ અને સીરમ એન્ટિબોડીઝવાળા કુવાઓ વચ્ચે અવક્ષેપની કેટલીક રેખાઓ દેખાય છે; સમાન એન્ટિજેન્સ માટે, અવક્ષેપ રેખાઓ મર્જ થાય છે; બિન-સમાન રાશિઓ માટે, તેઓ છેદે છે (ફિગ. 13.6).

રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પ્રતિક્રિયા . પીગળેલા અગર જેલ સાથે ઇમ્યુન સીરમ કાચ પર સમાનરૂપે રેડવામાં આવે છે. જેલમાં નક્કરતા પછી, કુવાઓ બનાવવામાં આવે છે જેમાં એન્ટિજેનને વિવિધ ડિલ્યુશન્સમાં મૂકવામાં આવે છે. એન્ટિજેન, જેલમાં ફેલાય છે, એન્ટિબોડીઝ (ફિગ. 13.7) સાથે કુવાઓની આસપાસ રિંગ-આકારના વરસાદના ક્ષેત્રો બનાવે છે. વરસાદની રીંગનો વ્યાસ એન્ટિજેન સાંદ્રતાના પ્રમાણસર છે. પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ રક્તમાં વિવિધ વર્ગોના ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન, પૂરક પ્રણાલીના ઘટકો વગેરેની સામગ્રી નક્કી કરવા માટે થાય છે.

ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસ- ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ અને ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશનનું સંયોજન: એન્ટિજેન્સનું મિશ્રણ જેલના કુવાઓમાં દાખલ કરવામાં આવે છે અને ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસનો ઉપયોગ કરીને જેલમાં અલગ કરવામાં આવે છે. પછી, રોગપ્રતિકારક સીરમને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ઝોનની સમાંતર ખાંચમાં દાખલ કરવામાં આવે છે, જેમાંથી એન્ટિબોડીઝ, જેલમાં ફેલાય છે, એન્ટિજેન સાથે મીટિંગ પોઇન્ટ પર વરસાદની રેખાઓ બનાવે છે.

ફ્લોક્યુલેશન પ્રતિક્રિયા(રેમન મુજબ) (lat માંથી. ફ્લોકસ -વૂલ ફ્લેક્સ) - ઝેર-એન્ટીટોક્સિન અથવા ટોક્સોઇડ-એન્ટીટોક્સિન પ્રતિક્રિયા દરમિયાન ટેસ્ટ ટ્યુબમાં અપારદર્શકતા અથવા ફ્લોક્યુલન્ટ માસ (ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન) નો દેખાવ. તેનો ઉપયોગ એન્ટિટોક્સિક સીરમ અથવા ટોક્સોઇડની પ્રવૃત્તિ નક્કી કરવા માટે થાય છે.

રોગપ્રતિકારક ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી- સૂક્ષ્મજીવાણુઓની ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપી, ઘણીવાર વાયરસ, યોગ્ય એન્ટિબોડીઝ સાથે સારવાર. રોગપ્રતિકારક સીરમ સાથે સારવાર કરાયેલા વાઈરસ રોગપ્રતિકારક એકંદર (માઈક્રોપ્રિસિપેટ્સ) બનાવે છે. એન્ટિબોડીઝનો "કોરોલા" વીરિયનની આસપાસ રચાય છે, જે ફોસ્ફોટંગસ્ટિક એસિડ અથવા અન્ય ઇલેક્ટ્રોન-ઓપ્ટિકલી ગાઢ તૈયારીઓ સાથે વિરોધાભાસી છે.

પૂરક સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓ

પૂરક સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓએન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ (પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા, રેડિયલ હેમોલિસિસ, વગેરે) દ્વારા પૂરકના સક્રિયકરણ પર આધારિત છે.

પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા (આરએસકે) એ છે કે જ્યારે એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝ એકબીજાને અનુરૂપ હોય છે, ત્યારે તેઓ રોગપ્રતિકારક સંકુલ બનાવે છે, જેના દ્વારા, Fc -એન્ટિબોડી ટુકડો પૂરક (C) સાથે જોડાયેલ છે, એટલે કે, પૂરક એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ દ્વારા બંધાયેલ છે. જો એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ રચાયું નથી, તો પૂરક મુક્ત રહે છે (ફિગ. 13.8). RSK બે તબક્કામાં હાથ ધરવામાં આવે છે: પ્રથમ તબક્કો - ત્રણ ઘટકો એન્ટિજેન + એન્ટિબોડી + પૂરક ધરાવતા મિશ્રણનું સેવન; 2જી તબક્કો (સૂચક) - ઘેટાં એરિથ્રોસાઇટ્સ અને તેમાં એન્ટિબોડીઝ ધરાવતા હેમોલિટીક સીરમનો સમાવેશ કરતી હેમોલિટીક સિસ્ટમ ઉમેરીને મિશ્રણમાં મુક્ત પૂરકની શોધ. પ્રતિક્રિયાના 1લા તબક્કામાં, જ્યારે એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ રચાય છે, પૂરક જોડાય છે, અને પછી 2જી તબક્કામાં, એન્ટિબોડીઝ દ્વારા સંવેદનશીલ એરિથ્રોસાઇટ્સનું હેમોલિસિસ થશે નહીં; પ્રતિક્રિયા હકારાત્મક છે. જો એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી એકબીજા સાથે મેળ ખાતા નથી (પરીક્ષણ નમૂનામાં કોઈ એન્ટિજેન અથવા એન્ટિબોડી નથી), તો પૂરક મુક્ત રહે છે અને 2જી તબક્કામાં એરિથ્રોસાઇટ - એન્ટિ-એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડી સંકુલમાં જોડાશે, જે હેમોલિસિસનું કારણ બને છે; પ્રતિક્રિયા નકારાત્મક છે.

RSC નો ઉપયોગ ઘણા ચેપી રોગોના નિદાન માટે થાય છે, ખાસ કરીને સિફિલિસ (વાસરમેન પ્રતિક્રિયા).

રેડિયલ હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા (RRH) ) ઘેટાંના લાલ રક્તકણો અને પૂરક ધરાવતા અગર જેલના કુવાઓમાં મૂકવામાં આવે છે. જેલના કુવાઓમાં હેમોલિટીક સીરમ (ઘેટાંના લાલ રક્ત કોશિકાઓ સામે એન્ટિબોડીઝ) દાખલ કર્યા પછી, તેમની આસપાસ હેમોલિસિસ ઝોન રચાય છે (એન્ટિબોડીઝના રેડિયલ પ્રસારના પરિણામે). આ રીતે, ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, રૂબેલા, વાળા દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં પૂરક અને હેમોલિટીક સીરમની પ્રવૃત્તિ તેમજ એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવાનું શક્ય છે. ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ. આ કરવા માટે, વાયરસના અનુરૂપ એન્ટિજેન્સ એરિથ્રોસાઇટ્સ પર શોષાય છે, અને દર્દીના લોહીના સીરમને આ એરિથ્રોસાઇટ્સ ધરાવતા જેલના કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે. એન્ટિવાયરલ એન્ટિબોડીઝ એરિથ્રોસાઇટ્સ પર શોષાયેલા વાયરલ એન્ટિજેન્સ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે, જે પછી

પછી પૂરક ઘટકો આ સંકુલમાં જોડાય છે, જે હેમોલિસિસનું કારણ બને છે.

રોગપ્રતિકારક પાલન પ્રતિક્રિયા (IAR) ) રોગપ્રતિકારક સીરમ સાથે સારવાર કરાયેલ કોર્પસ્ક્યુલર એન્ટિજેન્સ (બેક્ટેરિયા, વાયરસ) દ્વારા પૂરક સિસ્ટમના સક્રિયકરણ પર આધારિત છે. પરિણામે, પૂરક (C3b) ના સક્રિય ત્રીજા ઘટકની રચના થાય છે, જે રોગપ્રતિકારક સંકુલના ભાગ રૂપે કોર્પસ્ક્યુલર એન્ટિજેન સાથે જોડાય છે. એરિથ્રોસાઇટ્સ, પ્લેટલેટ્સ અને મેક્રોફેજમાં C3b માટે રીસેપ્ટર્સ હોય છે, જેના કારણે, જ્યારે આ કોષો C3b વહન કરતા રોગપ્રતિકારક સંકુલ સાથે મિશ્રિત થાય છે, ત્યારે તેમનું સંયોજન અને એકત્રીકરણ થાય છે.

તટસ્થતા પ્રતિક્રિયા

રોગપ્રતિકારક સીરમના એન્ટિબોડીઝ સંવેદનશીલ કોષો અને પેશીઓ પર સૂક્ષ્મજીવાણુઓ અથવા તેમના ઝેરની નુકસાનકારક અસરને તટસ્થ કરવામાં સક્ષમ છે, જે એન્ટિબોડીઝ દ્વારા માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સના નાકાબંધી સાથે સંકળાયેલ છે, એટલે કે. તટસ્થીકરણ તટસ્થતા પ્રતિક્રિયા(RN) પ્રાણીઓમાં અથવા સંવેદનશીલ પરીક્ષણ પદાર્થો (સેલ કલ્ચર, એમ્બ્રોયો) માં એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી મિશ્રણ દાખલ કરીને હાથ ધરવામાં આવે છે. પ્રાણીઓ અને પરીક્ષણ પદાર્થોમાં સુક્ષ્મસજીવો અથવા તેમના એન્ટિજેન્સ અથવા ઝેરની નુકસાનકારક અસરોની ગેરહાજરીમાં, તેઓ રોગપ્રતિકારક સીરમની તટસ્થ અસરની વાત કરે છે અને તેથી, એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતા (ફિગ. 13.9).

ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા - RIF (કુન્સ પદ્ધતિ)

પદ્ધતિના ત્રણ મુખ્ય પ્રકારો છે: પ્રત્યક્ષ, પરોક્ષ (ફિગ. 13.10), પૂરક સાથે. કુન્સ પ્રતિક્રિયા એ માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સને ઓળખવા અથવા એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટે ઝડપી નિદાન પદ્ધતિ છે.

ડાયરેક્ટ RIF પદ્ધતિ એ હકીકત પર આધારિત છે કે ફ્લોરોક્રોમ્સ સાથે લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ સાથે રોગપ્રતિકારક સેરા સાથે સારવાર કરાયેલ પેશી એન્ટિજેન્સ અથવા સૂક્ષ્મજીવાણુઓ ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપના યુવી કિરણોમાં ચમકવા સક્ષમ છે.

લીલી કિનારીના સ્વરૂપમાં કોષની પરિઘ સાથે આવા લ્યુમિનેસન્ટ સીરમ ગ્લો સાથે સારવાર કરાયેલ સ્મીયરમાં બેક્ટેરિયા.

પરોક્ષ RIF પદ્ધતિ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલને એન્ટિગ્લોબ્યુલિન (એન્ટી-એન્ટિબોડી) સીરમનો ઉપયોગ કરીને ઓળખવાનો સમાવેશ થાય છે જે ફ્લોરોક્રોમ સાથે લેબલ કરે છે. આ કરવા માટે, સૂક્ષ્મજીવાણુઓના સસ્પેન્શનમાંથી સ્મીયર્સને એન્ટિમાઇક્રોબાયલ રેબિટ ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમમાંથી એન્ટિબોડીઝ સાથે સારવાર આપવામાં આવે છે. પછી એન્ટિબોડીઝ કે જે માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સ દ્વારા બંધાયેલા નથી તે ધોવાઇ જાય છે, અને સૂક્ષ્મજીવાણુઓ પર બાકી રહેલા એન્ટિબોડીઝને ફ્લોરોક્રોમ્સ સાથે લેબલવાળા એન્ટિગ્લોબ્યુલિન (એન્ટિ-રેબિટ) સીરમ સાથે સ્મીયરની સારવાર દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવે છે. પરિણામે, માઇક્રોબ + એન્ટિમાઇક્રોબાયલ રેબિટ એન્ટિબોડીઝ + એન્ટિરેબિટ એન્ટિબોડીઝનું એક સંકુલ રચાય છે જે ફ્લોરોક્રોમ લેબલ કરે છે. આ સંકુલ સીધી પદ્ધતિની જેમ ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપમાં જોવા મળે છે.

એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ પદ્ધતિ, અથવા વિશ્લેષણ (ELISA)

એલિસા -ટેગ એન્ઝાઇમ (હોર્સરાડિશ પેરોક્સિડેઝ, બીટા-ગેલેક્ટોસીડેઝ અથવા આલ્કલાઇન ફોસ્ફેટસ). એન્ઝાઇમ-લેબલવાળા રોગપ્રતિકારક સીરમ સાથે એન્ટિજેનનું સંયોજન કર્યા પછી, મિશ્રણમાં સબસ્ટ્રેટ/ક્રોમોજન ઉમેરવામાં આવે છે. સબસ્ટ્રેટને એન્ઝાઇમ દ્વારા ક્લીવ કરવામાં આવે છે, અને પ્રતિક્રિયા ઉત્પાદનનો રંગ બદલાય છે - રંગની તીવ્રતા બાઉન્ડ એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી પરમાણુઓની સંખ્યાના સીધા પ્રમાણસર છે.

ઘન તબક્કો ELISA - રોગપ્રતિકારક પરીક્ષણનો સૌથી સામાન્ય પ્રકાર, જ્યારે રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાના ઘટકોમાંથી એક (એન્ટિજેન અથવા એન્ટિબોડીઝ) ઘન વાહક પર સોર્બ કરવામાં આવે છે, ઉદાહરણ તરીકે, પોલિસ્ટરીન પ્લેટોના કૂવામાં

એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરતી વખતે, દર્દીના રક્ત સીરમ, એન્ઝાઇમ સાથે લેબલ થયેલ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ અને એન્ઝાઇમ માટે સબસ્ટ્રેટ (ક્રોમોજેન) ક્રમિક રીતે સોર્બ્ડ એન્ટિજેન સાથે પ્લેટોના કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે.

દર વખતે અન્ય ઘટક ઉમેર્યા પછી, અનબાઉન્ડ રીએજન્ટને સારી રીતે ધોઈને કુવાઓમાંથી દૂર કરવામાં આવે છે. મુ હકારાત્મક પરિણામક્રોમોજન સોલ્યુશનનો રંગ બદલાય છે. ઘન-તબક્કાના વાહકને માત્ર એન્ટિજેન સાથે જ નહીં, પણ એન્ટિબોડીઝ સાથે પણ સંવેદનશીલ કરી શકાય છે. પછી ઇચ્છિત એન્ટિજેન સોર્બ્ડ એન્ટિબોડીઝ સાથે કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે, એન્ઝાઇમ સાથે લેબલવાળા એન્ટિજેન સામે રોગપ્રતિકારક સીરમ ઉમેરવામાં આવે છે, અને પછી એન્ઝાઇમ માટે સબસ્ટ્રેટ ઉમેરવામાં આવે છે.

સ્પર્ધાત્મક ELISA વિકલ્પ . લક્ષ્ય એન્ટિજેન અને એન્ઝાઇમ-લેબલવાળા એન્ટિજેન મર્યાદિત માત્રામાં રોગપ્રતિકારક સીરમ એન્ટિબોડીઝને બાંધવા માટે એકબીજા સાથે સ્પર્ધા કરે છે. અન્ય પરીક્ષણ - તમે શોધી રહ્યાં છો તે એન્ટિબોડીઝ

અને લેબલવાળી એન્ટિબોડીઝ એન્ટિજેન્સ માટે એકબીજા સાથે સ્પર્ધા કરે છે.

રેડિયોઈમ્યુનોલોજીકલ પદ્ધતિ, અથવા વિશ્લેષણ (RIA)

રેડિયોન્યુક્લાઇડ (125 J, 14 C, 3 H, 51 Cr, વગેરે) સાથે લેબલ કરાયેલ એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયા પર આધારિત અત્યંત સંવેદનશીલ પદ્ધતિ. તેમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા પછી, પરિણામી કિરણોત્સર્ગી રોગપ્રતિકારક સંકુલને અલગ કરવામાં આવે છે અને તેની કિરણોત્સર્ગીતાને યોગ્ય કાઉન્ટર (બીટા અથવા ગામા રેડિયેશન) માં નક્કી કરવામાં આવે છે:

કિરણોત્સર્ગની તીવ્રતા બાઉન્ડ એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી પરમાણુઓની સંખ્યાના સીધા પ્રમાણસર છે.

મુ સોલિડ-ફેઝ RIA સંસ્કરણ પ્રતિક્રિયા ઘટકોમાંથી એક (એન્ટિજેન અથવા એન્ટિબોડીઝ) નક્કર આધાર પર સોર્બ કરવામાં આવે છે, ઉદાહરણ તરીકે, પોલિસ્ટરીન માઇક્રોપેનલ્સના કૂવામાં. અન્ય પદ્ધતિ વિકલ્પ છે સ્પર્ધાત્મક RIA.ઇચ્છિત એન્ટિજેન અને રેડિઓન્યુક્લાઇડ-લેબલવાળા એન્ટિજેન મર્યાદિત માત્રામાં રોગપ્રતિકારક સીરમ એન્ટિબોડીઝને બાંધવા માટે એકબીજા સાથે સ્પર્ધા કરે છે. આ વિકલ્પનો ઉપયોગ પરીક્ષણ સામગ્રીમાં એન્ટિજેનની માત્રા નક્કી કરવા માટે થાય છે.

RIA નો ઉપયોગ માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સને ઓળખવા, હોર્મોન્સ, ઉત્સેચકો નક્કી કરવા માટે થાય છે. ઔષધીય પદાર્થોઅને ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન, તેમજ પરીક્ષણ સામગ્રીમાં સમાયેલ અન્ય પદાર્થો નાની સાંદ્રતામાં - 10~ |0 -I0~ 12 g/l. પદ્ધતિ ચોક્કસ પર્યાવરણીય જોખમ ઊભું કરે છે.

ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ

ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ (IB)- ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ અને ELISA અથવા RIA ના સંયોજન પર આધારિત અત્યંત સંવેદનશીલ પદ્ધતિ.

પોલિએક્રિલામાઇડ જેલમાં ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિજેનને અલગ કરવામાં આવે છે, પછી ટ્રાન્સફર કરવામાં આવે છે (બ્લોટિંગ - અંગ્રેજીમાંથી. ડાઘ, ડાઘ) જેલમાંથી સક્રિય કાગળ અથવા નાઇટ્રોસેલ્યુલોઝ પટલ પર અને ELISA નો ઉપયોગ કરીને વિકસાવવામાં આવે છે. કંપનીઓ "બ્લોટ્સ" સાથે આવી સ્ટ્રીપ્સ બનાવે છે

એન્ટિજેન્સ દર્દીના સીરમને આ સ્ટ્રીપ્સ પર લાગુ કરવામાં આવે છે. પછી, ઇન્ક્યુબેશન પછી, દર્દીને અનબાઉન્ડ એન્ટિબોડીઝથી ધોવાઇ જાય છે અને એન્ઝાઇમ સાથે લેબલ કરાયેલ માનવ ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન સામે સીરમ લાગુ કરવામાં આવે છે. સ્ટ્રીપ પર રચાયેલ જટિલ એન્ટિજેન + દર્દી એન્ટિબોડી + માનવ Ig સામે એન્ટિબોડી એક સબસ્ટ્રેટ/ક્રોમોજન ઉમેરીને શોધી કાઢવામાં આવે છે જે એન્ઝાઇમની ક્રિયા હેઠળ રંગ બદલે છે (ફિગ. 13.12).

IB નો ઉપયોગ HIV ચેપ વગેરે માટે નિદાન પદ્ધતિ તરીકે થાય છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયાએક અવક્ષેપની રચના પર આધારિત છે - એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી રોગપ્રતિકારક સંકુલનો વરસાદ. ઉકેલોમાં તેઓ અવક્ષેપ કરે છે, અને જેલમાં તેઓ પટ્ટાઓના રૂપમાં જમા થાય છે. પરીક્ષણ સામગ્રીમાં એન્ટિબોડીઝની સાંદ્રતા નક્કી કરવા માટે, શુદ્ધ એન્ટિજેન્સનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, અને વરસાદની પ્રતિક્રિયા હાથ ધરવાની ઘણી રીતો છે.

દ્રાવણમાં વરસાદ

ઉકેલોમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયા એક વિશિષ્ટતા ધરાવે છે: અવક્ષેપની માત્રા રીએજન્ટ (એન્ટિબોડીઝ) ની માત્રા પર આધારિત છે. જો એન્ટિબોડીઝની માત્રા એન્ટિજેનની માત્રા કરતા ઓછી હોય, તો પછીની માત્રામાં વધારો થવાથી અવક્ષેપની વધુ રચના થાય છે. સૌથી મોટો જથ્થોજ્યારે એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝ પ્રમાણમાં સમાન પ્રમાણમાં હોય ત્યારે અવક્ષેપ રચાય છે. જો એન્ટિજેન એન્ટિબોડીઝની તુલનામાં વધુ માત્રામાં હોય, તો પછી જેમ જેમ તેની સાંદ્રતા વધે છે તેમ, અવક્ષેપનું પ્રમાણ ઘટે છે.

ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન

વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ હાથ ધરવાની સૌથી સામાન્ય રીત ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન સાથે સંકળાયેલી છે - જેલમાં પ્રવેશવાની એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સની ક્ષમતા.
સરળ રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન માટે, એન્ટિબોડીઝ ધરાવતી જેલનો ઉપયોગ થાય છે. રાઉન્ડ સ્લિટ્સ જેલના પાતળા સ્તરમાં બનાવવામાં આવે છે અને તેમાં એન્ટિજેન્સ સાથે પરીક્ષણ સામગ્રી મૂકવામાં આવે છે, જે જેલમાં ઊંડે સુધી પ્રવેશ કરે છે, એન્ટિબોડીઝ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે અને કુવાઓની આસપાસ અવક્ષેપના રિંગ્સ બનાવે છે. આ રીતે, રક્તમાં ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનની સામગ્રી નક્કી કરવામાં આવે છે.
માટે ઘણા રીએજન્ટ્સ બાયોકેમિકલ પરીક્ષણોટેબ્લેટ પર નિશ્ચિતપણે પ્રકાશિત. ટેબ્લેટના દરેક કોષમાં સખત રીતે માપેલ રીએજન્ટની માત્રા હોય છે, જેથી તમે પરિણામોની ઉચ્ચ ચોકસાઈ સાથે એક સાથે અનેક વિશ્લેષણ કરી શકો.
ડબલ રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન સાથે, બે રાઉન્ડ છિદ્રો એકબીજાથી ચોક્કસ અંતરે જેલના પાતળા સ્તરમાં કાપવામાં આવે છે. રીએજન્ટ એકમાં મૂકવામાં આવે છે, અને પરીક્ષણ સામગ્રી બીજામાં મૂકવામાં આવે છે. એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સ એકબીજા તરફ જેલમાં પ્રવેશ કરે છે. તેમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના સ્થળે એક અવક્ષેપ રચાય છે.
પરીક્ષણ સામગ્રીમાં એન્ટિજેનની સાંદ્રતા નક્કી કરવા માટે, તેની સાથે કૂવામાંથી અવક્ષેપ રેખા સુધીનું અંતર માપો.

એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાથી વિપરીત, વરસાદની પ્રતિક્રિયા માટે એન્ટિજેન દ્રાવ્ય સંયોજનો છે, જેના કણોનું કદ પરમાણુઓના કદની નજીક આવે છે. આ પ્રોટીન, કાર્બોહાઇડ્રેટ્સ અને લિપિડ્સ સાથેના પ્રોટીનના સંકુલ, બેક્ટેરિયલ અર્ક, વિવિધ ડિસેટ્સ અથવા સૂક્ષ્મજીવાણુઓના બ્રોથ સંસ્કૃતિના ફિલ્ટ્રેટ્સ હોઈ શકે છે. વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં સામેલ એન્ટિબોડીઝને પ્રિસિપિટિન કહેવામાં આવે છે. પરિણામી ઉડી વિખેરાયેલ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલને અવક્ષેપની પ્રતિક્રિયાના સ્ટેજીંગની ચોક્કસ પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને શોધી કાઢવામાં આવે છે.

રીંગ રેસીપીટેશન રિએક્શન સૌપ્રથમ એસ્કોલી દ્વારા પ્રસ્તાવિત કરવામાં આવ્યું હતું. તેનો ઉપયોગ એન્થ્રેક્સ, પ્લેગ, તુલેરેમિયા અને મેનિન્જાઇટિસના નિદાનમાં થાય છે. પદ્ધતિ સરળ અને સુલભ છે.

ચોક્કસ રોગપ્રતિકારક અવક્ષેપ કરતું સીરમ સાંકડી અવક્ષેપ નળીઓમાં રેડવામાં આવે છે અને એન્ટિજેન તેના પર ખૂબ જ કાળજીપૂર્વક સ્તરવાળી હોય છે. ઉદાહરણ તરીકે, એન્થ્રેક્સનું નિદાન કરતી વખતે, ચામડીના ટુકડા, ઊન, મૃત પ્રાણીની ચામડી વગેરેને એન્ટિજેન તરીકે લેવામાં આવે છે. તેને ઉકાળવામાં આવે છે, પ્રવાહીને ફિલ્ટર કરવામાં આવે છે અને એન્ટિજેન તરીકે ઉપયોગમાં લેવાય છે. બે પ્રવાહીના ઇન્ટરફેસ પર રિંગ-અવક્ષેપ-નો દેખાવ અનુરૂપ એન્ટિજેનની હાજરી સૂચવે છે.

અગર જેલ વરસાદની પ્રતિક્રિયા, અથવા પ્રસરણ અવક્ષેપ પદ્ધતિ, જટિલ પાણીમાં દ્રાવ્ય એન્ટિજેનિક મિશ્રણોની રચનાનો વિગતવાર અભ્યાસ કરવાનું શક્ય બનાવે છે. પ્રતિક્રિયા સેટ કરવા માટે, જેલ (અર્ધ-પ્રવાહી અથવા ગાઢ અગર) નો ઉપયોગ કરો. દરેક ઘટક જે એન્ટિજેન બનાવે છે તે સંબંધિત એન્ટિબોડી તરફ જુદી જુદી ઝડપે ફેલાય છે. તેથી, વિવિધ એન્ટિજેન્સ અને અનુરૂપ એન્ટિબોડીઝના સંકુલમાં સ્થિત છે વિવિધ વિસ્તારોજેલ, જ્યાં વરસાદની રેખાઓ રચાય છે. દરેક લાઇન માત્ર એક એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલને અનુલક્ષે છે. વરસાદની પ્રતિક્રિયા સામાન્ય રીતે ઓરડાના તાપમાને કરવામાં આવે છે.

માં ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસની પદ્ધતિ વ્યાપક બની છે છેલ્લા વર્ષોસૂક્ષ્મજીવાણુઓની એન્ટિજેનિક રચનાનો અભ્યાસ કરતી વખતે. એન્ટિજેન કોમ્પ્લેક્સ કૂવામાં મૂકવામાં આવે છે, જે પ્લેટ પર રેડવામાં આવેલી અગર જેલની મધ્યમાં સ્થિત છે. ત્યારબાદ અગર જેલમાંથી વિદ્યુત પ્રવાહ પસાર કરવામાં આવે છે, જેના કારણે સંકુલમાં સમાવિષ્ટ વિવિધ એન્ટિજેન્સ ક્ષેત્ર તરફ જાય છે. વીજ પ્રવાહતેમની ઇલેક્ટ્રોફોરેટિક ગતિશીલતા પર આધાર રાખીને. ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ પૂર્ણ થયા પછી, ચોક્કસ રોગપ્રતિકારક સીરમ પ્લેટની કિનારે સ્થિત ખાઈમાં ઉમેરવામાં આવે છે અને તેને ભેજવાળી ચેમ્બરમાં મૂકવામાં આવે છે. જ્યાં એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ રચાય છે ત્યાં વરસાદની રેખાઓ દેખાય છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયા એ ખૂબ જ સંવેદનશીલ પદ્ધતિ છે અને તેનો ઉપયોગ ફોરેન્સિકમાં વિવિધ પ્રોટીન અને પોલિસેકરાઇડ એન્ટિજેન્સના અભ્યાસમાં થાય છે. તબીબી પ્રેક્ટિસલિનન અને વિવિધ વસ્તુઓ પર જોવા મળતા લોહી, વીર્ય, સીરમના ડાઘનો પ્રકાર નક્કી કરવા. આ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ દૂધ, માછલી અને માંસ ઉત્પાદનોમાં વિવિધ અશુદ્ધિઓને ઓળખવા અને પેઇન્ટિંગના પ્રાચીન માસ્ટર્સના પેઇન્ટમાં સમાવિષ્ટ પ્રોટીનની પ્રકૃતિ નક્કી કરવા માટે પણ થઈ શકે છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં, ચોક્કસ રોગપ્રતિકારક સંકુલનો અવક્ષેપ થાય છે, જેમાં દ્રાવ્ય એન્ટિજેન (લાઇસેટ, અર્ક, હેપ્ટેન) અને ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સની હાજરીમાં ચોક્કસ એન્ટિબોડી હોય છે.

આ પ્રતિક્રિયાના પરિણામે બનેલા વાદળછાયું રિંગ અથવા અવક્ષેપને અવક્ષેપ કહેવાય છે. આ પ્રતિક્રિયા મુખ્યત્વે એન્ટિજેન કણોના કદમાં એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાથી અલગ પડે છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે સંખ્યાબંધ ચેપ (એન્થ્રેક્સ, મેનિન્જાઇટિસ, વગેરે) ના નિદાનમાં એન્ટિજેન નક્કી કરવા માટે થાય છે; ફોરેન્સિક દવામાં - રક્ત, શુક્રાણુ, વગેરેની પ્રજાતિઓ નક્કી કરવા માટે; સેનિટરી અને આરોગ્યપ્રદ અભ્યાસમાં - જ્યારે ઉત્પાદનોના ખોટાકરણની સ્થાપના કરવામાં આવે છે; તેની મદદથી, પ્રાણીઓ અને છોડનો ફાયલોજેનેટિક સંબંધ નક્કી થાય છે. પ્રતિક્રિયા માટે તમને જરૂર છે:

1. એન્ટિબોડીઝ (પ્રીસિપીટીન્સ) - એન્ટિબોડીઝના ઉચ્ચ ટાઇટર સાથે રોગપ્રતિકારક સીરમ (1:100,000 થી ઓછું નહીં). પ્રીસિપીટેટિંગ સીરમનું ટાઇટર એ એન્ટિજેનના ઉચ્ચતમ મંદન દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે જેની સાથે તે પ્રતિક્રિયા આપે છે. સીરમનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે 1:5 - 1:10 ના મંદન અથવા મંદન સાથે થાય છે.

2. એન્ટિજેન - પ્રોટીન અથવા લિપોઇડ પોલિસેકરાઇડ પ્રકૃતિના ઓગળેલા પદાર્થો (સંપૂર્ણ એન્ટિજેન્સ અને હેપ્ટન્સ).

3. આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.

વરસાદની પ્રતિક્રિયા હાથ ધરવા માટેની મુખ્ય પદ્ધતિઓ છે: અગર (જેલ) માં વરસાદની પ્રતિક્રિયા અને વરસાદની પ્રતિક્રિયા.

ધ્યાન આપો! વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં સામેલ તમામ ઘટકો સંપૂર્ણપણે પારદર્શક હોવા જોઈએ.

રિંગ વરસાદની પ્રતિક્રિયા. પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને, 0.2-0.3 મિલી (5-6 ટીપાં) સીરમને વરસાદની નળીમાં ઉમેરો (સીરમ ટ્યુબની દિવાલો પર ન આવવું જોઈએ). સમાન જથ્થામાં એન્ટિજેન કાળજીપૂર્વક સીરમ પર સ્તરવાળી હોય છે, તેને ટેસ્ટ ટ્યુબની દિવાલ સાથે પાતળા પાશ્ચર પીપેટ સાથે રેડવામાં આવે છે. ટેસ્ટ ટ્યુબને નમેલી સ્થિતિમાં રાખવામાં આવે છે. જ્યારે યોગ્ય રીતે સ્તરવાળી હોય, ત્યારે સીરમ અને એન્ટિજેન વચ્ચે સ્પષ્ટ સીમા હોવી જોઈએ. કાળજીપૂર્વક, જેથી પ્રવાહી મિશ્રણ ન થાય, ટેસ્ટ ટ્યુબને સ્ટેન્ડમાં મૂકો. જો પ્રતિક્રિયા હકારાત્મક હોય, તો એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીના ઇન્ટરફેસ પર વાદળછાયું "રિંગ" રચાય છે - એક અવક્ષેપ (જુઓ. ફિગ. 48).

પ્રતિક્રિયા સંખ્યાબંધ નિયંત્રણો સાથે છે (કોષ્ટક 18). ટેસ્ટ ટ્યુબમાં પ્રતિક્રિયા ઘટકો ઉમેરવાનો ક્રમ ખૂબ જ મહત્વપૂર્ણ છે. તમે સીરમને એન્ટિજેન પર સ્તર આપી શકતા નથી (નિયંત્રણમાં - આઇસોટોનિક સોલ્યુશન પર), ત્યારથી સંબંધિત ઘનતાજો ત્યાં વધુ સીરમ હોય, તો તે ટેસ્ટ ટ્યુબના તળિયે ડૂબી જશે, અને પ્રવાહી વચ્ચેની સીમા શોધી શકાશે નહીં.

કોષ્ટક 18. રિંગ રેસિપિટેશન રિએક્શન સેટ કરવા માટેની સ્કીમ

નૉૅધ. + "રિંગ" ની હાજરી; - "રિંગ" ની ગેરહાજરી.

પરિણામો 5-30 મિનિટ પછી રેકોર્ડ કરવામાં આવે છે, કેટલાક કિસ્સાઓમાં એક કલાક પછી, હંમેશા નિયંત્રણોથી શરૂ થાય છે. 2જી ટેસ્ટ ટ્યુબમાં "રિંગ" એ રોગપ્રતિકારક સીરમની અનુરૂપ એન્ટિજેન સાથે ચોક્કસ પ્રતિક્રિયામાં પ્રવેશવાની ક્ષમતા સૂચવે છે. 3-5 ટેસ્ટ ટ્યુબમાં કોઈ "રિંગ્સ" ન હોવી જોઈએ - ત્યાં કોઈ એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સ એકબીજાને અનુરૂપ નથી. 1લી ટ્યુબમાં "રિંગ" - સકારાત્મક પ્રતિક્રિયા પરિણામ - સૂચવે છે કે પરીક્ષણ એન્ટિજેન લેવામાં આવેલ રોગપ્રતિકારક સીરમને અનુરૂપ છે, "રિંગ" (ફક્ત 2 જી ટ્યુબમાં "રિંગ") ની ગેરહાજરી તેમની અસંગતતા સૂચવે છે - નકારાત્મક પ્રતિક્રિયા પરિણામ.

અગર (જેલ) માં વરસાદની પ્રતિક્રિયા. પ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતા એ છે કે એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા ગાઢ માધ્યમમાં થાય છે, એટલે કે, જેલમાં. પરિણામી અવક્ષેપ માધ્યમની જાડાઈમાં અસ્પષ્ટ દોર આપે છે. બેન્ડની ગેરહાજરી પ્રતિક્રિયાના ઘટકો વચ્ચેની વિસંગતતા દર્શાવે છે. આ પ્રતિક્રિયા બાયોમેડિકલ સંશોધનમાં વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે, ખાસ કરીને ડિપ્થેરિયાના કારક એજન્ટમાં ઝેરની રચનાના અભ્યાસમાં.

નિયંત્રણ પ્રશ્નો

1. એગ્ગ્લુટિનેશન અને વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓ વચ્ચે મુખ્ય તફાવત શું છે?

2. વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં શા માટે વાદળછાયું ઘટકોનો ઉપયોગ કરી શકાતો નથી?

કસરત

1. રિંગ વરસાદની પ્રતિક્રિયા સેટ કરો અને પરિણામનું સ્કેચ બનાવો.

2. અગરમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં એન્ટિબોડી સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની પ્રકૃતિનો અભ્યાસ કરો, પરિણામ સ્કેચ કરો (તમારા શિક્ષક પાસેથી કપ મેળવો).

લિસિસ પ્રતિક્રિયા (રોગપ્રતિકારક સાયટોલિસિસ)

ઇમ્યુન લિસિસ એ પૂરકની ફરજિયાત ભાગીદારી સાથે એન્ટિબોડીઝના પ્રભાવ હેઠળ કોષોનું વિસર્જન છે. પ્રતિક્રિયા માટે તમને જરૂર છે:

1. એન્ટિજેન - સૂક્ષ્મજીવાણુઓ, લાલ રક્ત કોશિકાઓ અથવા અન્ય કોષો.

2. એન્ટિબોડી (લાઇસિન) - રોગપ્રતિકારક સીરમ, ઓછી વાર દર્દી સીરમ. બેક્ટેરિઓલિટીક સીરમમાં બેક્ટેરિયાના લિસિસમાં સામેલ એન્ટિબોડીઝ હોય છે; હેમોલિટીક - હેમોલિસિન જે લાલ રક્ત કોશિકાઓના લિસિસને પ્રોત્સાહન આપે છે; સ્પિરોચેટ્સના લિસિસ માટે, સ્પિરોચેટોલિસિન્સ, કોષો - ઇટોલિસિન્સ, વગેરેની જરૂર છે.

3. પૂરક. સીરમમાં સૌથી વધુ પૂરક ગિનિ પિગ. આ સીરમ (ઘણા પ્રાણીઓનું મિશ્રણ) સામાન્ય રીતે પૂરક તરીકે વપરાય છે. તાજા (મૂળ) પૂરક અસ્થિર છે અને ગરમ, ધ્રુજારી અથવા સંગ્રહ દ્વારા સરળતાથી નાશ પામે છે, તેથી તેનો ઉપયોગ પ્રાપ્ત થયાના બે દિવસ કરતાં વધુ સમય સુધી થઈ શકશે નહીં. પૂરકને સાચવવા માટે, તેમાં 2% ઉમેરવામાં આવે છે બોરિક એસિડઅને 3% સોડિયમ સલ્ફેટ. આ પૂરકને 4°C તાપમાને બે અઠવાડિયા સુધી સંગ્રહિત કરી શકાય છે. સુકા પૂરકનો ઉપયોગ મોટેભાગે થાય છે. ઉપયોગ કરતા પહેલા, તે મૂળ વોલ્યુમ (લેબલ પર દર્શાવેલ) માં આઇસોટોનિક સોલ્યુશનમાં ઓગળવામાં આવે છે.

4. આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.

હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા(કોષ્ટક 19). પ્રતિક્રિયા માટે તમને જરૂર છે:

1. એન્ટિજેન - એરિથ્રોસાઇટ કાંપના 0.3 મિલી અને 9.7 મિલીના દરે ધોવાઇ ઘેટાં એરિથ્રોસાઇટ્સનું 3% સસ્પેન્શન આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.

2. એન્ટિબોડી - ઘેટાં એરિથ્રોસાઇટ્સ સામે હેમોલિટીક સીરમ (હેમોલીસિન); સામાન્ય રીતે ઉત્પાદનમાં તૈયાર કરવામાં આવે છે, લ્યોફિલાઇઝ્ડ અને લેબલ પર દર્શાવેલ ટાઇટર.

હેમોલિસિન ટાઇટર એ સીરમનું સૌથી વધુ મંદન છે જેમાં પૂરકની હાજરીમાં લાલ રક્ત કોશિકાઓના 3% સસ્પેન્શનનું સંપૂર્ણ હેમોલિસિસ થાય છે. હેમોલિસીસ પ્રતિક્રિયા માટે, હેમોલીસીનને ટ્રિપલ ટાઇટરમાં લેવામાં આવે છે, એટલે કે ટાઇટર કરતાં 3 ગણું ઓછું પાતળું. ઉદાહરણ તરીકે, 1:1200 ના સીરમ ટાઇટર સાથે, સીરમ 1:400 (0.1 મિલી સીરમ * અને 39.9 મિલી આઇસોટોનિક સોલ્યુશન) પાતળું થાય છે. અતિશય હેમોલિસિન જરૂરી છે, કારણ કે તેમાંથી કેટલાક અન્ય પ્રતિક્રિયા ઘટકો દ્વારા શોષી શકાય છે.

* (તમારે 0.1 મિલી કરતા ઓછું સીરમ ન લેવું જોઈએ - માપનની ચોકસાઈને નુકસાન થશે.)

3. પૂરક 1:10 (0.2 મિલી પૂરક અને 1.8 મિલી આઇસોટોનિક દ્રાવણ) પાતળું કરવામાં આવે છે.

4. આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.

કોષ્ટક 19. હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા યોજના

પરિણામો માટે એકાઉન્ટિંગ. જો પ્રતિક્રિયા યોગ્ય રીતે હાથ ધરવામાં આવે છે, તો 1 લી ટેસ્ટ ટ્યુબમાં હેમોલિસિસ થશે - તેની સામગ્રી પારદર્શક બનશે. નિયંત્રણોમાં, પ્રવાહી વાદળછાયું રહે છે: 2જી ટ્યુબમાં હેમોલિસિસ થવા માટે પૂરતા પૂરક નથી, 3જી ટ્યુબમાં કોઈ હેમોલિસિન નથી, 4થી ટ્યુબમાં ન તો હેમોલિસિન છે કે ન તો પૂરક છે, 5મી ટ્યુબમાં એન્ટિજેન નથી. એન્ટિબોડી સાથે મેળ ખાતી નથી,

જો જરૂરી હોય તો, હેમોલિટીક સીરમ નીચેની યોજના (કોષ્ટક 20) અનુસાર ટાઇટ્રેટેડ છે.

ટાઇટ્રેશન પહેલાં, 1:100 (0.1 મિલી સીરમ અને 9.9 મિલી આઇસોટોનિક સોલ્યુશન) નું પ્રારંભિક સીરમ મંદન તૈયાર કરો, જેમાંથી જરૂરી મંદન કરવામાં આવે છે, ઉદાહરણ તરીકે:

આ મંદનમાંથી, કોષ્ટકમાં બતાવ્યા પ્રમાણે, ટાઇટ્રેશન ટેસ્ટ ટ્યુબમાં 0.5 મિલી સીરમ ઉમેરો. 20.

કોષ્ટક 20. હેમોલિટીક સીરમ (હેમોલીસીન) માટે ટાઇટ્રેશન સ્કીમ

કોષ્ટકમાં આપેલ ઉદાહરણમાં. 20, હેમોલિટીક સીરમનું ટાઇટર 1:1200 છે.

તાજા હેમોલિટીક સીરમનો ઉપયોગ કરતી વખતે, તેમાં હાજર પૂરકનો નાશ કરવા માટે તેને નિષ્ક્રિય કરવું આવશ્યક છે. આ કરવા માટે, તેને પાણીના સ્નાનમાં અથવા થર્મોસ્ટેટ સાથે નિષ્ક્રિય કરનારમાં 56 ° સે તાપમાને 30 મિનિટ માટે ગરમ કરવામાં આવે છે. પછીની પદ્ધતિ વધુ સારી છે: તે છાશને વધુ ગરમ કરવાની શક્યતાને દૂર કરે છે, એટલે કે, તેનું વિકૃતિકરણ. વિકૃત સેરા પરીક્ષણ માટે અયોગ્ય છે.

બેક્ટેરિઓલિસિસ પ્રતિક્રિયા. આ પ્રતિક્રિયામાં, યોગ્ય (હોમોલોગસ) સીરમની હાજરીમાં બેક્ટેરિયાને પૂરક બનાવે છે. પ્રતિક્રિયા યોજના મૂળભૂત રીતે હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા યોજના જેવી જ છે. તફાવત એ છે કે બે કલાકના ઉકાળો પછી, તમામ ટેસ્ટ ટ્યુબને પેટ્રી ડીશ પર સીડ કરવામાં આવે છે, જે પ્રયોગમાં લેવાયેલા સુક્ષ્મસજીવો માટે અનુકૂળ હોય છે કે કેમ તે શોધવા માટે. જો પ્રયોગ યોગ્ય રીતે હાથ ધરવામાં આવે તો, 2-5 ટેસ્ટ ટ્યુબ (નિયંત્રણો) ની સંસ્કૃતિઓ પુષ્કળ વૃદ્ધિ દર્શાવે છે. 1લી ટેસ્ટ ટ્યુબ (પ્રયોગ) માંથી ઇનોક્યુલેશનમાં વૃદ્ધિનો અભાવ અથવા નબળી વૃદ્ધિ સૂક્ષ્મજીવાણુઓના મૃત્યુને સૂચવે છે, એટલે કે, તેઓ એન્ટિબોડી માટે સમાન છે.

ધ્યાન આપો! બેક્ટેરિઓલિસિસ પ્રતિક્રિયા એસેપ્ટિક પરિસ્થિતિઓ હેઠળ હાથ ધરવામાં આવશ્યક છે.

નિયંત્રણ પ્રશ્નો

1. જો આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડના દ્રાવણને બદલે નિસ્યંદિત પાણીનો ઉપયોગ કરવામાં આવે તો લાલ રક્તકણોનું શું થશે? આ ઘટનાનો આધાર શું છે?

2. પૂરકની ગેરહાજરીમાં એરિથ્રોસાઇટ્સ હોમોલોગસ ઇમ્યુન સીરમ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે ત્યારે શું પ્રતિક્રિયા થશે?

કસરત

હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા સેટ કરો. પરિણામ રેકોર્ડ કરો અને સ્કેચ કરો.

વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં, ચોક્કસ રોગપ્રતિકારક સંકુલનો અવક્ષેપ થાય છે, જેમાં દ્રાવ્ય એન્ટિજેન (લાઇસેટ, અર્ક, હેપ્ટેન) અને ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સની હાજરીમાં ચોક્કસ એન્ટિબોડી હોય છે.

આ પ્રતિક્રિયાના પરિણામે રચાયેલી વાદળછાયું રિંગ અથવા અવક્ષેપ કહેવાય છે અવક્ષેપ. આ પ્રતિક્રિયા મુખ્યત્વે એન્ટિજેન કણોના કદમાં એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાથી અલગ પડે છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે સંખ્યાબંધ ચેપ (એન્થ્રેક્સ, મેનિન્જાઇટિસ, વગેરે) ના નિદાનમાં એન્ટિજેન નક્કી કરવા માટે થાય છે; ફોરેન્સિક દવામાં - રક્ત, શુક્રાણુ, વગેરેની પ્રજાતિઓ નક્કી કરવા માટે; સેનિટરી અને આરોગ્યપ્રદ અભ્યાસમાં - જ્યારે ઉત્પાદનોના ખોટાકરણની સ્થાપના કરવામાં આવે છે; તેની મદદથી, પ્રાણીઓ અને છોડનો ફાયલોજેનેટિક સંબંધ નક્કી થાય છે. પ્રતિક્રિયા માટે તમને જરૂર છે:

1. એન્ટિબોડીઝ (પ્રીસિપીટીન્સ) - એન્ટિબોડીઝના ઉચ્ચ ટાઇટર સાથે રોગપ્રતિકારક સીરમ (1:100,000 થી ઓછું નહીં). પ્રીસિપીટેટિંગ સીરમનું ટાઇટર એ એન્ટિજેનના ઉચ્ચતમ મંદન દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે જેની સાથે તે પ્રતિક્રિયા આપે છે. સીરમ સામાન્ય રીતે અનડિલુટેડ અથવા પાતળું વપરાય છે 1:5 -1:10.

2. એન્ટિજેન - પ્રોટીન અથવા લિપોઇડ પોલિસેકરાઇડ પ્રકૃતિના ઓગળેલા પદાર્થો (સંપૂર્ણ એન્ટિજેન્સ અને હેપ્ટન્સ).

3. આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.

વરસાદની પ્રતિક્રિયા હાથ ધરવા માટેની મુખ્ય પદ્ધતિઓ છે: અગર (જેલ) માં વરસાદની પ્રતિક્રિયા અને વરસાદની પ્રતિક્રિયા.

ધ્યાન આપો! વરસાદની પ્રતિક્રિયામાં સામેલ તમામ ઘટકો સંપૂર્ણપણે પારદર્શક હોવા જોઈએ.

રિંગ વરસાદની પ્રતિક્રિયા.પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને, 0.2 - 0.3 મિલી (5-6 ટીપાં) સીરમને વરસાદની નળીમાં ઉમેરો (સીરમ ટ્યુબની દિવાલો પર ન આવવું જોઈએ). સમાન જથ્થામાં એન્ટિજેન કાળજીપૂર્વક સીરમ પર સ્તરવાળી હોય છે, તેને ટેસ્ટ ટ્યુબની દિવાલ સાથે પાતળા પાશ્ચર પીપેટ સાથે રેડવામાં આવે છે. ટેસ્ટ ટ્યુબને નમેલી સ્થિતિમાં રાખવામાં આવે છે. જ્યારે યોગ્ય રીતે સ્તરવાળી હોય, ત્યારે સીરમ અને એન્ટિજેન વચ્ચે સ્પષ્ટ સીમા હોવી જોઈએ. કાળજીપૂર્વક, જેથી પ્રવાહી મિશ્રણ ન થાય, ટેસ્ટ ટ્યુબને સ્ટેન્ડમાં મૂકો. જો પ્રતિક્રિયા હકારાત્મક હોય, તો વાદળછાયું "રિંગ" - એક અવક્ષેપ - એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીના ઇન્ટરફેસ પર રચાય છે.

અગરમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયા(ગેલે).પ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતા એ છે કે એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા ગાઢ વાતાવરણમાં થાય છે, એટલે કે. જેલપરિણામી અવક્ષેપ માધ્યમની જાડાઈમાં અસ્પષ્ટ દોર આપે છે. બેન્ડની ગેરહાજરી પ્રતિક્રિયાના ઘટકો વચ્ચેની વિસંગતતા દર્શાવે છે. આ પ્રતિક્રિયા બાયોમેડિકલ સંશોધનમાં વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે, ખાસ કરીને ડિપ્થેરિયાના કારક એજન્ટમાં ઝેરની રચનાના અભ્યાસમાં.

લિસિસ પ્રતિક્રિયા (રોગપ્રતિકારક સાયટોલિસિસ)

રોગપ્રતિકારક લિસિસ- આ પૂરકની ફરજિયાત ભાગીદારી સાથે એન્ટિબોડીઝના પ્રભાવ હેઠળ કોષોનું વિસર્જન છે. પ્રતિક્રિયા માટે તમને જરૂર છે:

1. એન્ટિજેન- સૂક્ષ્મજીવાણુઓ, લાલ રક્ત કોશિકાઓ અથવા અન્ય કોષો.

2. એન્ટિબોડી(લાઇસિન) - રોગપ્રતિકારક સીરમ, ઓછી વાર દર્દી સીરમ. બેક્ટેરિઓલિટીક સીરમમાં બેક્ટેરિયાના લિસિસમાં સામેલ એન્ટિબોડીઝ હોય છે; હેમોલિટીક - હેમોલિસિન જે લાલ રક્ત કોશિકાઓના લિસિસને પ્રોત્સાહન આપે છે; સ્પિરોચેટ્સના લિસિસ માટે, સ્પિરોચેટોલિસિન, સેલ-ઇટોલિસિન, વગેરેની જરૂર છે.

3. પૂરક.ગિનિ પિગના સીરમમાં સૌથી વધુ પૂરક હોય છે. આ સીરમ (ઘણા પ્રાણીઓનું મિશ્રણ) સામાન્ય રીતે પૂરક તરીકે વપરાય છે.

4. આઇસોટોનિક સોલ્યુશન.