эсийн өсгөвөр

Амьтад

Дараах үзэгдлүүдээр вирусыг илтгэнэ

хөгжлийн саатал,

үхэл, өөрчлөлт

үр хөврөлийн бүрхүүл, RGA

CPP, товруу үүсэх, RIF, RGads, хөндлөнгийн оролцоо

өвчин, үхэл,

гистологийн өөрчлөлтүүд

эдэд, оруулгад

Тусгаарлагдсан вирусын титрлэлт; ажлын тунгийн сонголт.

Вирусын титр- хүлээгдэж буй үр нөлөө нь хэвээр байгаа вирус агуулсан материалын хамгийн их шингэрүүлэлт (CPE, RHA, амьтны үхэл).

Тусгаарлагдсан вирусыг тодорхойлохсаармагжуулах урвалд, RTGads, RSK, товруу үүсэхийг дарах гэх мэт оношлогооны ийлдэстэй. Вирусын төрөл (төрөл).харгалзах дархлааны ийлдэс нь вирусын өвөрмөц нөлөөг саармагжуулах замаар тодорхойлогддог.

Анхаарна уу: титрлэлт болон вирусыг тодорхойлох нь ижил үзэгдлийг ашиглан хийгддэг.

Вирусын тариалалт

Курсын ажил

"Эмнэлзүйн вирус судлалын аргууд"

Оршил

Вирусын халдварын лабораторийн оношлогоог голчлон электрон микроскоп, мэдрэмтгий эсийн өсгөвөр, дархлаа судлалын аргуудыг ашиглан хийдэг. Дүрмээр бол вирусын халдварын үе шатаас хамааран оношлох аль нэг аргыг сонгоно. Тиймээс, жишээлбэл, салхин цэцэг өвчнийг оношлоход бүх гурван арга нь ашигтай байж болох ч микроскоп болон эсийн өсгөвөрлөх аргыг амжилттай ашиглах нь өвчний харьцангуй эрт үе шатанд хангалттай дээж цуглуулах чадвараас хамаарна.

Их хэмжээгээр амжилт вирусын оношлогооавсан дээжийн чанараас хамаарна. Ийм учраас лабораторийн ажилтнууд өөрсдөө шаардлагатай дээжийг цуглуулахад шууд оролцох ёстой. Дээжийн шинж чанар, тэдгээрийг лабораторид хүргэх аргуудыг Леннетт, Шмидт, Крист нар тайлбарлав.

Лабораторийн оношлогоонд ашигладаг ихэнх урвалж, багаж хэрэгслийг янз бүрийн компаниудаас авах боломжтой. Ихэнх тохиолдолд ижил урвалжийг хэд хэдэн компани нэгэн зэрэг үйлдвэрлэдэг. Энэ шалтгааны улмаас урвалжийг зөвхөн нэг фирмээс нийлүүлэхээс бусад тохиолдолд бид бие даасан пүүсүүдийг жагсаагаагүй. Бусад бүх тохиолдолд та Хүснэгтэд заасан ханган нийлүүлэгчдийн ерөнхий жагсаалтыг үзэх хэрэгтэй. нэг.

Бид хүний ​​вирүсийн халдварыг оношлох боломжтой бүх аргуудын талаар дэлгэрэнгүй тайлбарлахыг зорьсонгүй. Юуны өмнө бид үндсэн аргуудыг тодорхойлсон. Та туршлага хуримтлуулахын хэрээр бие даасан ажилЭдгээр үндсэн аргуудыг илүү төвөгтэй асуудлыг шийдвэрлэхэд ашиглаж болно.

1. Электрон микроскоп

Вирусын халдварыг электрон микроскопоор оношлохын тулд өртсөн эд эсийн нимгэн хэсгийг ашиглаж болно. Электрон микроскопийн хамгийн түгээмэл материал бол ялгадас эсвэл шингэн юм.

Хүснэгт 1. Урвалж, тоног төхөөрөмж нийлүүлэх компаниудын жагсаалт

зарим өвчний шинж тэмдэг бүхий цэврүүтүүд, жишээлбэл тахианы цэцэг. Ийм материалын шинжилгээнд сөрөг будалт ашиглан вирусыг илрүүлж болох бөгөөд энэ нь вирионын бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг электрон нягт материалаар ялгахад хүргэдэг. Энэ арга нь ялгадас, цэврүүт шингэн зэрэг шинжилгээний сорьцонд вирусын өндөр концентрацид үр дүнтэй байдаг. Дээж дэх вирүсийн тоосонцрын агууламж бага байгаа тохиолдолд вирусыг хэт центрифугаар баяжуулах эсвэл тусгай эсрэгбиемүүдээр нэгтгэх замаар вирусыг илрүүлэх магадлалыг нэмэгдүүлэх боломжтой. Сүүлчийн арга нь вирусыг тодорхойлоход тохиромжтой. Энд бид оношлох электрон микроскопийн аргыг тайлбарлав ротавирусын халдварпарвовирусын эсрэг биетүүдийг илрүүлэх жишээн дээр иммуноэлектрон микроскопийн арга. Электрон микроскопийн аргуудыг талбар илүү дэлгэрэнгүй тайлбарлав.

2.1 Өтгөний шууд электрон микроскоп

1. Пастерийн пипеткийн төгсгөлийг баасанд дүрж, 1 см-ийн т рхэц авахын тулд хангалттай материал цуглуулна.

2. Тунгалаг суспенз авах хүртэл өтгөний түрхэцийг сөрөг электрон микроскопоор дахин түрхэнэ. Сөрөг тодосгогч толбо нь нэрмэл усан дахь фосфотунгсти хүчлийн 2% уусмал юм.

3. Электрон микроскопийн бэлдмэлийг авахын тулд суспензийн дуслыг нүүрстөрөгч-формвар хальсаар бүрсэн электрон микроскопийн торонд хийнэ. Энэ үйл ажиллагааны явцад торыг нарийн хясаагаар барьдаг.

4. Мансууруулах бодисыг 30 секундын турш агаарт байлгана.

5. Шилний ирмэгийг шүүлтүүрийн цаасаар шүргэж илүүдэл шингэнийг арилгана.

6. Эмийг агаарт хатаана.

7. Шаардлагатай тохиолдолд 440,000 мкВт-с/см 2 эрчимтэй хэт ягаан туяагаар торны хоёр талд цацаж амьдрах чадвартай вирус идэвхгүй болно. Энэ нь богино долгионыг ашигладаг хэт ягаан туяашүүлтүүртэй. Дэнлүү нь сүлжээнээс 15 см зайд байх ёстой; тал бүрийн цацрагийн хугацаа - 5 мин.

8. Ротавирусын вирионууд нь дамжих шинж чанартай байдаг электрон микроскоп 30,000-аас 50,000 болж өссөн.

2.2 Дархлаа электрон микроскоп

Доор тайлбарласан иммуноэлектрон микроскопийн арга нь ижил төстэй дархлаа судлалын аргуудын зөвхөн нэг нь юм. Вирусын өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг судлахын тулд үүнээс гадна А уургийн микроскопийн сүлжээнд холбогдох аргыг ашигладаг. Вирусын эсрэг эсрэгбиеийн ажлын концентрацийг 1/10-аас 1/1000 хүртэлх туршилт, алдаагаар тодорхойлно. . Бидний заасан концентрацийг ихэвчлэн ердийн ажилд ашигладаг. Вирусын эсрэгбиемүүдийн харилцан үйлчлэлийн оновчтой үр дүнд хүрэхийн тулд парвовирус агуулсан ийлдэсийг ижил аргаар титрлэнэ.

1. 10 мкл хүний ​​парвовирусын эсрэг ийлдсийг PBS-ээр 100 дахин шингэлнэ. Уусмалыг усан ваннд 56 хэм хүртэл халаана.

2. 10 мл 2%-ийн агарозыг PBS-д ердийн аргаар хайлуулж, усан ваннд 56°С хүртэл хөргөнө.

3. 56°С температурт 1 мл шингэрүүлсэн антисерумыг 1 мл 2%-ийн агарозтой холино.

4. Үүссэн хольцоос 200 мкл-ийг 96 цооногтой микротитр хавтангийн хоёр нүхэнд хийнэ.

5. Агарозыг тасалгааны температурт хатууруулахыг зөвшөөрнө. Наалдамхай туузаар битүүмжилсэн тохиолдолд хавтанг 40С-ийн температурт хэдэн долоо хоног хадгалж болно.

6. Агароз ба антисерумын холимог агуулсан нүхэнд 10 мкл парвовирус агуулсан ийлдэс нэмнэ.

7. Урьдчилан бэлтгэсэн нүүрстөрөгч-формвар бүрээстэй электрон микроскопийн торыг бага гялалзсан талтай ийлдсийн дусал дээр байрлуулна.

8. Сүлжээг 2 цагийн турш 37 ° C температурт чийгтэй өрөөнд хадгална.

9. Нимгэн хясаагаар торыг гаргаж аваад ийлдэстэй шүргэлцсэн торны гадаргуу дээр 2%-ийн фосфотунгсти хүчил дусаана.

10. 30 секундын дараа илүүдэл будгийг угааж, бэлдмэлийг хатааж, вирус идэвхгүй болно.

Нэгдсэн вирусын тоосонцорыг дамжуулагч электрон микроскопоор 30,000-аас 50,000 хүртэл томруулж шинжилдэг.

3. Вирусын эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох

Эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн урвалыг ашиглан эд эс эсвэл эдийн шингэн дэх вирусыг вирусын өвөрмөц уургаар тодорхойлж болно. Эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн урвалын бүтээгдэхүүнийг шошгон дээр туршиж үздэг бөгөөд үүнийг вирусын эсрэг эсрэгбиемүүдэд шууд нэвтрүүлдэг эсвэл вирусын өвөрмөц эсрэгбиемүүдийн эсрэг чиглэсэн эсрэгбиемүүдэд оруулдаг. Эсрэгбиемүүдийг флюресцин, цацраг идэвхт иод эсвэл өнгөний өөрчлөлтөөр субстратыг задалдаг ферментээр тэмдэглэж болно. Үүнээс гадна гемагглютинацийн урвалыг вирусыг тодорхойлоход ашигладаг. Өдөр тутмын практикт тайлбарласан аргуудыг голчлон цусан дахь гепатит В вирусын эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх, амьсгалын замын янз бүрийн өвчин үүсгэдэг янз бүрийн вирусын эсрэгтөрөгчийг хайхад ашигладаг.

Одоогийн байдлаар олон компани эритроцит, цацраг идэвхт, ферментийн оношлогоо, түүний дотор гепатит В вирусыг илрүүлэх зорилгоор үйлдвэрлэдэг.Бид эдгээр оношилгоотой ажиллах аргуудыг тайлбарлах нь зохисгүй гэж үзэж байна: хавсаргасан зааврыг дагаж мөрдөхөд хангалттай. Доор бид хамар залгиурын шүүрэл дэх амьсгалын замын синцитиал вирусыг тодорхойлох иммунофлуоресцент аргыг анхаарч үзэх болно.

3.1 Хамар залгиурын шүүрэл дэх амьсгалын замын синцитиал вирусыг иммунофлуоресценцийн аргаар тодорхойлох

Хамар залгиурын шүүрлийн бэлдмэлийг олж авах аргыг Гарднер, Маккуилин нар тайлбарлав. Лабораторийн нөхцөлд энэ ажиллагааг хоёр үе шаттайгаар гүйцэтгэдэг. Эхлээд шилэн слайд дээр хамар залгиурын салстаас түрхэц бэлтгэдэг. Олж авсан арчдасыг -20°С-т тогтсон нөхцөлд олон сар хадгалах боломжтой. Хоёр дахь шатанд амьсгалын замын синцитиал вирусын эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхийн тулд т рхэцийг будна. Энэ зорилгоор шууд бус иммунофлуоресценцийн аргыг хэрэглэдэг.

3.1.1 Хамар залгиурын шүүрэл бэлтгэх

1. Тусгай хямсаанаас гарсан салстыг 1-2 мл PBS-ээр угааж, центрифугийн хоолой руу шилжүүлнэ.

2. Ширээний центрифугт 1500 эрг/мин-д 10 минут центрифуг хийнэ.

3. Илүүдэл шингэнийг устгана.

4. Нэг төрлийн суспензийг авах хүртэл эсийн үрэлийг 2-3 мл PBS-д зөөлөн түрхэнэ. Үүнийг хийхийн тулд өргөн амтай Пастерийн пипеткийг ашиглана.

5. Үүссэн суспензийг туршилтын хоолойд хийнэ.

6. Дахин 2-4 мл PBS-ийг суспензэнд нэмж, соруулж холино. Том бөөгнөрөл салиа арилдаг.

7. Ширээний центрифугт 1500 эрг/мин-д 10 минут центрифуг хийнэ.

8. Үүссэн суспензийг туршилтын хоолойн хананаас хялбархан салгах тул тунадасыг PBS-ийн хэмжээгээр дахин түдгэлзүүлнэ.

9. Үүссэн суспензийг тэмдэглэсэн шилэн слайд дээр хэрэглэнэ.

10. Шилийг агаарт хатаана.

4°С-т 10 минутын турш ацетоноор бэхлэнэ.

12. Шилийг зассаны дараа дахин агаарт хатаана.

13. Үүссэн бэлдмэлийг нэн даруй будсан эсвэл -20 ° C-д хадгална.

3.1.2. Будах техник

1. PBS дахь RSV-ийн эсрэг арилжааны эсрэг ийлдсийг санал болгож буй ажлын концентрацид хэвлэж шингэлнэ.

2. Пастерийн пипеткээр бэлтгэсэн бэлдмэлдээ нэг дусал антисерум хийнэ.

3. Мансууруулах бодисыг чийгтэй өрөөнд байрлуулна.

4. Бэлдмэлийг 37 0С-т 30 минутын турш өсгөвөрлөнө.

5. Дээжийг PBS-ээр сайтар угааж, тусгай саванд илүүдэл эсрэгбиемүүдийг зайлуулна.

6. Дээжийг тус бүр 10 минутын турш PBS-ийн гурван ээлжээр угаана.

7. Дээжийг хатааж, илүүдэл PBS-ийг шүүлтүүрийн цаасаар зайлуулж, агаарт хатаана.

Вирус судлалын судалгааны аргууд- вирусын биологийг судлах арга, тэдгээрийг тодорхойлох. Вирус судлалд молекул биологийн аргуудыг өргөн ашигладаг бөгөөд үүний тусламжтайгаар вирусын тоосонцрын молекулын бүтэц, эсэд хэрхэн нэвтэрч, вирусын нөхөн үржихүйн онцлог, вирусын нуклейн хүчлийн анхдагч бүтцийг тогтоох боломжтой болсон. болон уураг. Вирусын нуклейн хүчил ба уургийн амин хүчлүүдийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн дарааллыг тодорхойлох аргуудыг боловсруулж байна. Нуклейн хүчлүүд болон тэдгээрийн кодлодог уургийн функцийг нуклеотидын дараалалтай холбож, эсийн доторх үйл явцын шалтгааныг тогтоох боломжтой болно. чухал үүрэгвируст халдварын эмгэг жам.

Вирус судлалын судалгааны аргууд нь дархлаа судлалын үйл явц (эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиетэй харилцан үйлчлэлцэх), вирусын биологийн шинж чанар (гемагглютинжуулах чадвар, гемолиз, ферментийн үйл ажиллагаа), вирусын эзэн эстэй харилцах онцлог (цитопатик шинж чанар) дээр суурилдаг. нөлөө, эсийн доторх орц үүсэх гэх мэт).

Вирусын халдварыг оношлох, вирүс тариалах, тусгаарлах, тодорхойлох, түүнчлэн вакцины бэлдмэл бэлтгэхэд эд, эсийн өсгөвөрлөх аргыг өргөн ашигладаг. Анхдагч, хоёрдогч, тогтвортой тасралтгүй, диплоид эсийн өсгөвөрийг ашигладаг. Анхдагч өсгөвөрийг уураг задлах фермент (трипсин, коллагеназа) бүхий эдийг тараах замаар олж авдаг. Эсийн эх үүсвэр нь хүн, амьтны үр хөврөлийн эд, эрхтэн (ихэвчлэн бөөр) байж болно. Шим тэжээлийн орчинд эсийн суспензийг гудас, лонх эсвэл Петрийн аяга гэж нэрлэдэг саванд хийж, савны гадаргуу дээр наалдсаны дараа эсүүд үржиж эхэлдэг. Вирусын халдварын хувьд эсийн нэг давхаргыг ихэвчлэн ашигладаг. Шим тэжээлийн шингэнийг шавхаж, вирусын суспензийг тодорхой шингэрүүлэлтээр нэвтрүүлж, эсүүдтэй харьцсаны дараа шинэ тэжээллэг орчинг ихэвчлэн ийлдэсгүйгээр нэмнэ.

Ихэнх анхдагч өсгөвөрийн эсийг дэд өсгөвөрлөх боломжтой бөгөөд тэдгээрийг хоёрдогч өсгөвөр гэж нэрлэдэг. Цаашид эсүүд дамжин өнгөрөх тусам хурдан нөхөн үржих чадвартай фибробласттай төстэй эсийн популяци үүсдэг бөгөөд ихэнх нь хромосомын анхны багцыг хадгалдаг. Эдгээр нь диплоид эсүүд юм. Эсийн цуваа тариалалтанд тогтвортой тасралтгүй эсийн өсгөвөрийг олж авдаг. Шилжилтийн үед гетероплоид хромосомын багц бүхий хурдан хуваагддаг нэгэн төрлийн эсүүд гарч ирдэг. Тогтвортой эсийн шугам нь нэг давхарга, суспенз байж болно. Нэг давхаргат өсгөвөр нь шилэн гадаргуу дээр тасралтгүй давхарга хэлбэрээр ургадаг, суспензийн өсгөвөр нь хутгагч ашиглан янз бүрийн саванд суспенз хэлбэрээр ургадаг. 40-өөс гаралтай 400 гаруй эсийн шугам байдаг төрөл бүрийнамьтад (примат, шувууд, хэвлээр явагчид, хоёр нутагтан, загас, шавьж гэх мэт) болон хүмүүс.

Хэсэг нь хиймэл тэжээллэг орчинд тариалж болно бие даасан байгууллагаба эд (эрхтэн өсгөвөр). Эдгээр төрлийн өсгөвөр нь эд эсийн бүтцийг хадгалдаг бөгөөд энэ нь ялгагдаагүй эдийн өсгөвөрт (жишээлбэл, коронавирус) үрждэггүй вирусыг тусгаарлах, нэвтрүүлэхэд онцгой ач холбогдолтой юм.

Халдвар авсан эсийн өсгөвөрт вирусыг эсийн морфологийн өөрчлөлт, цитопатик үйлдэл, өвөрмөц шинж чанартай байж болох, орцын харагдах байдал, эс болон өсгөвөрийн шингэн дэх вирусын эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох замаар илрүүлж болно; өсгөвөрийн шингэн дэх вирүсийн үр хөврөлийн биологийн шинж чанарыг тодорхойлох, эдийн өсгөвөр, дэгдээхэйний үр хөврөл эсвэл мэдрэмтгий амьтдын вирусын титрлэлт; флюресцент микроскоп ашиглан цитохимийн аргаар молекулын эрлийзжүүлэлт эсвэл нуклейн хүчлүүдийн бөөгнөрөлөөр эс дэх бие даасан вирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэх замаар.

Вирусыг тусгаарлах нь маш их хөдөлмөр, урт процесс юм. Энэ нь хүн амын дунд эргэлдэж буй вирусын төрөл, хувилбарыг тодорхойлох зорилгоор хийгддэг (жишээлбэл, томуугийн вирүсийн серовариант, полиомиелит вирусын зэрлэг эсвэл вакцины омог гэх мэт); эпидемиологийн яаралтай арга хэмжээ авах шаардлагатай тохиолдолд; вирусын шинэ төрөл буюу хувилбарууд гарч ирэх үед; шаардлагатай бол урьдчилсан оношийг баталгаажуулах; объект дахь вирусыг заах орчин. Вирусыг тусгаарлахдаа хүний ​​​​биед оршин тогтнох, хоёр ба түүнээс дээш вирусын улмаас үүссэн холимог халдварын магадлалыг харгалзан үздэг. Ганц вирионоос гаргаж авсан вирусын генетикийн хувьд нэгэн төрлийн популяцийг вирусийн клон гэж нэрлэдэг ба түүнийг олж авах үйл явцыг клонжуулалт гэж нэрлэдэг.

Вирусыг тусгаарлах, мэдрэмтгий лабораторийн амьтдын халдвар, тахианы үр хөврөлийг ашигладаг боловч эдийн өсгөвөрийг ихэвчлэн ашигладаг. Вирус байгаа эсэхийг ихэвчлэн эсийн тодорхой доройтол (цитопатик нөлөө), симпласт ба синцит үүсэх, эсийн доторх орцыг илрүүлэх, түүнчлэн иммунофлуоресценц, гемадсорбци, гемагглютинаци (гемагглютинаци вирусын үед) илрүүлсэн тодорхой антиген гэх мэтээр тодорхойлогддог. . Эдгээр шинж тэмдгүүд нь вирусын 2-3 дамжуулалтын дараа л илэрч болно.

Томуугийн вирүс зэрэг хэд хэдэн вирусыг тусгаарлахад тахианы үр хөврөл, зарим Коксаки вирус, олон тооны арбовирусыг тусгаарлахад шинэ төрсөн хулганыг ашигладаг. Тусгаарлагдсан вирусыг тодорхойлох нь ашиглан хийгддэг серологийн урвалболон бусад аргууд.

Вирустай ажиллахдаа тэдгээрийн титрийг тодорхойлно. Вирусын титрлэлтийг ихэвчлэн эд эсийн өсгөвөрт хийж, вирус агуулсан шингэний хамгийн их шингэрүүлэлтийг тодорхойлдог бөгөөд энэ үед эд эсийн доройтол, нэгдэл, вирусын өвөрмөц эсрэгтөрөгч үүсдэг. Товрууны аргыг хэд хэдэн вирусыг титрлэхэд ашиглаж болно. Товруу буюу вирусын сөрөг колони нь агар бүрхүүлийн дор нэг давхаргат эдийн өсгөвөрийн вирус устгасан эсийн голомт юм. Колони тоолох нь нэг халдварт вирусын тоосонцор нэг товруу үүсгэдэг гэсэн үндсэн дээр вирусын халдварын идэвхжилд тоон дүн шинжилгээ хийх боломжийг олгодог. Өсгөвөрийг амин чухал будагч бодисоор будаж, ихэвчлэн төвийг сахисан улаан өнгөөр ​​товруу тодорхойлогддог; товруу нь будгийг шингээдэггүй тул будсан амьд эсийн дэвсгэр дээр цайвар толбо хэлбэрээр харагдана. Вирусын титрийг 1 дэх товруу үүсгэгч нэгжийн тоогоор илэрхийлнэ мл.

Вирусыг цэвэршүүлэх, баяжуулах ажлыг ихэвчлэн дифференциал хэт центрифуг хийж, дараа нь концентраци эсвэл нягтралын градиентээр центрифуг хийдэг. Вирусыг цэвэрлэхийн тулд дархлаа судлалын аргууд, ион солилцооны хроматографи, иммуносорбент гэх мэтийг ашигладаг.

Вируст халдварын лабораторийн оношлогоо нь эмгэг төрүүлэгч эсвэл түүний бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг эмнэлзүйн материалд илрүүлэх; энэ материалаас вирус тусгаарлах; серодиагностик. Тухайн тохиолдол бүрт лабораторийн оношлогооны аргыг сонгох нь өвчний шинж чанар, өвчний хугацаа, лабораторийн боломжоос хамаарна. Орчин үеийн оношлогооВирусын халдвар нь эмнэлзүйн материалыг хүлээн авснаас хойш хэдхэн цагийн дараа хариулт авах боломжийг олгодог экспресс аргууд дээр суурилдаг эрт огнооөвчний дараа, Эдгээрт электрон ба дархлааны электрон микроскоп, түүнчлэн иммунофлуоресценц, молекулын гибридизацийн арга, lgM ангиллын эсрэгбие илрүүлэх гэх мэт орно.

Сөрөг будсан вирусын электрон микроскоп нь вирусыг ялгах, тэдгээрийн концентрацийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Вирусын халдварыг оношлоход электрон микроскопийг ашиглах нь эмнэлзүйн материал дахь вирусын тоосонцрын агууламж хангалттай өндөр (10 5) тохиолдолд л хязгаарлагддаг. млба түүнээс дээш). Аргын сул тал нь нэг ангилал зүйн бүлэгт хамаарах вирусыг ялгах чадваргүй байдаг. Энэ сул талыг дархлааны электрон микроскоп ашиглан арилгадаг. Энэ арга нь вирусын тоосонцор дээр тодорхой ийлдэс нэмэх үед дархлааны цогцолбор үүсэхэд суурилдаг бөгөөд вирусын тоосонцор нэгэн зэрэг хуримтлагддаг бөгөөд энэ нь тэдгээрийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Энэ аргыг мөн эсрэгбие илрүүлэхэд ашигладаг. Экспресс оношилгооны зорилгоор эд эсийн ханд, ялгадас, цэврүүтэх шингэн, хамар залгиурын нууцын электрон микроскопийн шинжилгээг хийдэг. электрон микроскопвирусын морфогенезийг судлахад өргөн хэрэглэгддэг бөгөөд шошготой эсрэгбиеийн тусламжтайгаар түүний чадварыг өргөжүүлдэг.

Вирусын өвөрмөц нуклейн хүчлийг илрүүлэхэд үндэслэсэн молекулын эрлийзжүүлэх арга нь генийн нэг хуулбарыг илрүүлэх боломжийг олгодог бөгөөд мэдрэмжийн хувьд ижил төстэй байдаггүй. Урвал нь ДНХ эсвэл РНХ-ийн нэмэлт хэлхээг эрлийзжүүлэх, давхар судалтай бүтэц үүсэхэд суурилдаг. Хамгийн хямд датчик бол клонжуулсан рекомбинант ДНХ юм. Уг датчик нь цацраг идэвхт прекурсорууд (ихэвчлэн цацраг идэвхт фосфор) гэсэн шошготой байдаг. Колориметрийн урвалыг ашиглах нь ирээдүйтэй. Молекулын эрлийзжүүлэлтийн хэд хэдэн хувилбар байдаг: цэгийн эрлийзжилт, толбоны эрлийзжилт, сэндвичний эрлийзжилт, in situ эрлийзжилт гэх мэт.

lgM ангиллын эсрэгбиемүүд нь G ангиллын эсрэгбиемүүдээс эрт (өвчний 3-5 дахь өдөр) гарч ирдэг бөгөөд хэдэн долоо хоногийн дараа алга болдог тул тэдгээрийн илрүүлэлт нь шинэ халдварыг илтгэнэ. IgM ангиллын эсрэгбие нь анти-м-антисера (anti-IgM хүнд гинжний ийлдэс) ашиглан иммунофлуоресценц эсвэл ферментийн дархлааны шинжилгээгээр илрүүлдэг.

Вирус судлалын ийлдэс судлалын аргууд нь сонгодог дархлаа судлалын урвал дээр суурилдаг (үзнэ үү. Дархлаа судлалын судалгааны аргууд ): комплемент бэхлэх урвал, гемагглютинацийг дарангуйлах, биологийн саармагжуулах, дархлаажуулалт, шууд бус гемагглютинаци, радиаль цус задрал, иммунофлуоресценц, ферментийн дархлаа, радиоиммун шинжилгээ. Олон тооны урвалын микро аргыг боловсруулсан бөгөөд тэдгээрийн техникийг тасралтгүй сайжруулж байна. Эдгээр аргууд нь мэдэгдэж буй ийлдсүүдийн багцыг ашиглан вирусыг тодорхойлох, хоёр дахь ийлдэс дэх эсрэгбиеийн өсөлтийг эхнийхтэй харьцуулахад (эхний ийлдэсийг өвчний дараах эхний өдрүүдэд, хоёр дахь нь - дараа нь) тодорхойлохын тулд вирусыг тодорхойлоход ашигладаг. 2-3 долоо хоног). Оношилгооны үнэ цэнэ нь хоёр дахь ийлдэс дэх эсрэгбиеийн хэмжээ дөрөв дахин ихэссэнээс багагүй байна. Хэрэв lgM ангиллын эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх нь саяхан халдвар авсан болохыг харуулж байгаа бол lgC ангийн эсрэгбие нь хэдэн жил, заримдаа насан туршдаа үлддэг.

Урьдчилан уураг цэвэршүүлэхгүйгээр нарийн төвөгтэй хольц дахь вирусын бие даасан антиген ба тэдгээрийн эсрэгбиемүүдийг тодорхойлохын тулд иммуноблотинг ашигладаг. Энэ арга нь полиакриламидын гель электрофорез ашиглан уургийн фракцийг ферментийн дархлааны шинжилгээгээр уургийн дараагийн дархлааны шинжилгээг хослуулдаг. Уургийг ялгах нь хэрэгцээг бууруулдаг химийн цэвэр байдалэсрэгтөрөгч ба бие даасан эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн хосыг тодорхойлох боломжийг танд олгоно. Энэ даалгавар нь жишээлбэл, ХДХВ-ийн халдварыг оношлоход хамаатай бөгөөд вирусын уураг хангалтгүй цэвэршүүлсний үр дүнд эсийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемүүд байгаатай холбоотой хуурамч эерэг ферментийн дархлааны урвал үүсдэг. Өвчтөний цусны ийлдэс дэхь эсрэгбиемийг дотоод болон гадаад вирусын эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох нь өвчний үе шатыг тодорхойлох, популяцид дүн шинжилгээ хийхдээ вирусын уургийн хэлбэлзлийг тодорхойлох боломжийг олгодог. ХДХВ-ийн халдварын үед дархлаажуулалтыг бие даасан вирусын эсрэгтөрөгч ба тэдгээрийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх баталгаажуулах тест болгон ашигладаг. Популяцид дүн шинжилгээ хийхдээ энэ аргыг вирусын уургийн хэлбэлзлийг тодорхойлоход ашигладаг. Аргын агуу үнэ цэнэ нь рекомбинант ДНХ технологийг ашиглан нийлэгжүүлсэн антигенийг шинжлэх, тэдгээрийн хэмжээ, антиген тодорхойлогч бодис байгаа эсэхийг тодорхойлох боломж юм.

Вирус судлалын судалгаа нь хоёр үндсэн үе шатыг агуулдаг: вирусыг тусгаарлах, тэдгээрийг тодорхойлох. Вирус судлалын судалгааны материал нь цус, бусад биологийн болон эмгэг судлалын шингэн, эрхтэн, эд эсийн биопси байж болно.

Арбовирусын халдварыг оношлохын тулд ихэвчлэн вирус судлалын цусны шинжилгээ хийдэг. Галзуу өвчний вирус нь шүлсэнд агуулагддаг. гахайн хавдар, энгийн герпес, Хамар залгиурын арчдасыг томуу болон бусад амьсгалын замын цочмог вируст халдвар, улаанбурхан өвчний үүсгэгч бодисыг тусгаарлахад ашигладаг. Нүдний салст бүрхэвчийг угаах үед аденовирусууд илэрдэг. Янз бүрийн энтеро-, адсно-, псо-, нора-, ротавирусууд нь ялгадасаас тусгаарлагддаг.

Вирусыг тусгаарлахын тулд эсийн өсгөвөр, тахианы үр хөврөл, заримдаа лабораторийн амьтдыг ашигладаг.

Ихэнх эмгэг төрүүлэгч вирусууд нь эд, хэлбэрийн өвөрмөц шинж чанартай байдаг, жишээлбэл, полиовирус нь зөвхөн примат эсүүдэд үрждэг тул тодорхой вирусыг тусгаарлахад тохиромжтой эдийн өсгөвөр ашигладаг. Үл мэдэгдэх эмгэг төрүүлэгчийг тусгаарлахын тулд тэдгээрийн аль нэг нь мэдрэмтгий байж болзошгүй гэж үзвэл 3-4 эсийн өсгөвөрийг нэгэн зэрэг халдварлахыг зөвлөж байна. Халдвар авсан эсийн өсгөвөрт вирус байгаа эсэх нь тодорхой эсийн доройтлын хөгжлөөр тодорхойлогддог, i.e. цитопатоген нөлөө, эсийн доторх орцыг илрүүлэх, түүнчлэн тодорхой эсрэгтөрөгчийг иммунофлуоресценцээр илрүүлэх, эерэг гемадсорбци ба гемагглютинацийн урвалын үндсэн дээр.

Шувууны үр хөврөл нь муу ялгаатай эдүүдтэй олон төрлийн вирусыг тариалахад тохиромжтой. Тахианы үр хөврөлийг л ашиглана уу. Үр хөврөлд үржихэд вирус нь үхэлд хүргэдэг (арбовирус), хорион-аллантоик мембран (цэцэг вирус) эсвэл үр хөврөлийн биед өөрчлөлт гарч, үр хөврөлийн шингэнд глютинино (томуу, гахайн хавдар) хуримтлагддаг. ) болон холбох вирусын эсрэгтөрөгчийн нэмэлт .

Вирусыг тодорхойлох нь дархлаа судлалын аргуудыг ашиглан хийгддэг: гемагглютинацийг дарангуйлах урвал, нэмэлт бэхэлгээ, саармагжуулах, гель тунадасжуулах, иммунофлуоресцент.

Вирус судлалын арга сэдвийн талаар дэлгэрэнгүй:

1. Антропометрийн үндсэн өгөгдлийг параметрийн аргаар үнэлэх (сигма арга)
2. Нөхцөлтэй устах эмчилгээ ба албадан сургалтын арга
3. 2. Харьцуулсан эрх зүйн арга - Хууль зүйн шинжлэх ухааны хувийн шинжлэх ухааны арга
4. Умайн доорхи миома өвчнийг оношлох орчин үеийн АРГА, ЭМЧИЛГЭЭНИЙ АРГЫН СОНГОЛТ
5. 5.4. Практик үйл ажиллагааны арга болох мөрдөн байцаалтын ерөнхий аргын тухай ойлголт, бүтэц
6. Сэдэв 8. УДШИЙН МЭДЭЭЛЭЛ ШИЛЖҮҮЛЭХ МЕХАНИЗМ, ХУВЬСДАГЧИЙГ СУДАЛАХ МИКРОБИОЛОГИЙН АРГА. ШИНЭ ЭМ БИЙ БОЛГОХ ГЕНЕТИЙН АРГА ХЭРЭГЛЭЭ
7. Сэдэв 15. БИЧЛЭГ ОРГАНИЗМЫН ӨВГӨГДӨГЧДӨГ БА ВИРУЛЕНТ. ВИРУЛЕНЦИЙН ХҮЧИН ЗҮЙЛҮҮД. ЛАБОРАТОРИЙН АМЬТАНД ХАЛДВАХ АРГА. ЭСРЭГ ТЭДНИЙГ АВАХ АРГА. ЭСРЭГ БИЕ. ДАРХЛАГЫН РЕАКЦИЯ БА ТҮҮНИЙ ПРАКТИК ХЭРЭГЛЭЭ. ФАГОЦИТОЗ

Вирус судлалын судалгааны аргууд- вирусын биологийг судлах арга, тэдгээрийг тодорхойлох. Вирус судлалд молекул биологийн аргуудыг өргөн ашигладаг бөгөөд үүний тусламжтайгаар вирусын тоосонцрын молекулын бүтэц, эсэд хэрхэн нэвтэрч, вирусын нөхөн үржихүйн онцлог, вирусын нуклейн хүчлийн анхдагч бүтцийг тогтоох боломжтой болсон. болон уураг. Вирусын нуклейн хүчил ба уургийн амин хүчлүүдийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн дарааллыг тодорхойлох аргуудыг боловсруулж байна. Нуклейн хүчлүүд болон тэдгээрийн кодлосон уургийн функцийг нуклеотидын дараалалтай холбож, вирусын халдварын эмгэг жамд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг эсийн доторх үйл явцын шалтгааныг тогтоох боломжтой болно.

Вирус судлалын судалгааны аргууд нь дархлаа судлалын үйл явц (эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиетэй харилцан үйлчлэлцэх), вирусын биологийн шинж чанар (гемагглютинжуулах чадвар, гемолиз, ферментийн үйл ажиллагаа), вирусын эзэн эстэй харилцах онцлог (цитопатик шинж чанар) дээр суурилдаг. нөлөө, эсийн доторх орц үүсэх гэх мэт).

Вирусын халдварыг оношлох, вирүс тариалах, тусгаарлах, тодорхойлох, түүнчлэн вакцины бэлдмэл бэлтгэхэд эд, эсийн өсгөвөрлөх аргыг өргөн ашигладаг. Анхдагч, хоёрдогч, тогтвортой тасралтгүй, диплоид эсийн өсгөвөрийг ашигладаг. Анхдагч өсгөвөрийг уураг задлах фермент (трипсин, коллагеназа) бүхий эдийг тараах замаар олж авдаг. Эсийн эх үүсвэр нь хүн, амьтны үр хөврөлийн эд, эрхтэн (ихэвчлэн бөөр) байж болно. Шим тэжээлийн орчинд эсийн суспензийг гудас, лонх эсвэл Петрийн аяга гэж нэрлэдэг саванд хийж, савны гадаргуу дээр наалдсаны дараа эсүүд үржиж эхэлдэг. Вирусын халдварын хувьд эсийн нэг давхаргыг ихэвчлэн ашигладаг. Шим тэжээлийн шингэнийг шавхаж, вирусын суспензийг тодорхой шингэрүүлэлтээр нэвтрүүлж, эсүүдтэй харьцсаны дараа шинэ тэжээллэг орчинг ихэвчлэн ийлдэсгүйгээр нэмнэ.

Ихэнх анхдагч өсгөвөрийн эсийг дэд өсгөвөрлөх боломжтой бөгөөд тэдгээрийг хоёрдогч өсгөвөр гэж нэрлэдэг. Цаашид эсүүд дамжин өнгөрөх тусам хурдан нөхөн үржих чадвартай фибробласттай төстэй эсийн популяци үүсдэг бөгөөд ихэнх нь хромосомын анхны багцыг хадгалдаг. Эдгээр нь диплоид эсүүд юм. Эсийн цуваа тариалалтанд тогтвортой тасралтгүй эсийн өсгөвөрийг олж авдаг. Шилжилтийн үед гетероплоид хромосомын багц бүхий хурдан хуваагддаг нэгэн төрлийн эсүүд гарч ирдэг. Тогтвортой эсийн шугам нь нэг давхарга, суспенз байж болно. Нэг давхаргат өсгөвөр нь шилэн гадаргуу дээр тасралтгүй давхарга хэлбэрээр ургадаг, суспензийн өсгөвөр нь хутгагч ашиглан янз бүрийн саванд суспенз хэлбэрээр ургадаг. 40 гаруй төрлийн амьтдын (примат, шувууд, хэвлээр явагчид, хоёр нутагтан, загас, шавьж гэх мэт) болон хүнээс гаралтай 400 гаруй эсийн шугам байдаг.

Бие даасан эрхтэн, эд эсийн хэсгүүдийг (эрхтэн өсгөвөр) хиймэл тэжээллэг орчинд тариалж болно. Эдгээр төрлийн өсгөвөр нь эд эсийн бүтцийг хадгалдаг бөгөөд энэ нь ялгагдаагүй эдийн өсгөвөрт (жишээлбэл, коронавирус) үрждэггүй вирусыг тусгаарлах, нэвтрүүлэхэд онцгой ач холбогдолтой юм.

Халдвар авсан эсийн өсгөвөрт вирусыг эсийн морфологийн өөрчлөлт, цитопатик үйлдэл, өвөрмөц шинж чанартай байж болох, орцын харагдах байдал, эс болон өсгөвөрийн шингэн дэх вирусын эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох замаар илрүүлж болно; өсгөвөрийн шингэн дэх вирүсийн үр хөврөлийн биологийн шинж чанарыг тодорхойлох, эдийн өсгөвөр, дэгдээхэйний үр хөврөл эсвэл мэдрэмтгий амьтдын вирусын титрлэлт; флюресцент микроскоп ашиглан цитохимийн аргаар молекулын эрлийзжүүлэлт эсвэл нуклейн хүчлүүдийн бөөгнөрөлөөр эс дэх бие даасан вирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэх замаар.

Вирусыг тусгаарлах нь маш их хөдөлмөр, урт процесс юм. Энэ нь хүн амын дунд эргэлдэж буй вирусын төрөл, хувилбарыг тодорхойлох зорилгоор хийгддэг (жишээлбэл, томуугийн вирүсийн серовариант, полиомиелит вирусын зэрлэг эсвэл вакцины омог гэх мэт); эпидемиологийн яаралтай арга хэмжээ авах шаардлагатай тохиолдолд; вирусын шинэ төрөл буюу хувилбарууд гарч ирэх үед; шаардлагатай бол урьдчилсан оношийг баталгаажуулах; хүрээлэн буй орчны объектууд дахь вирусыг тодорхойлох зорилгоор. Вирусыг тусгаарлахдаа хүний ​​​​биед оршин тогтнох, хоёр ба түүнээс дээш вирусын улмаас үүссэн холимог халдварын магадлалыг харгалзан үздэг. Ганц вирионоос гаргаж авсан вирусын генетикийн хувьд нэгэн төрлийн популяцийг вирусийн клон гэж нэрлэдэг ба түүнийг олж авах үйл явцыг клонжуулалт гэж нэрлэдэг.

Вирусыг тусгаарлах, мэдрэмтгий лабораторийн амьтдын халдвар, тахианы үр хөврөлийг ашигладаг боловч эдийн өсгөвөрийг ихэвчлэн ашигладаг. Вирус байгаа эсэхийг ихэвчлэн эсийн тодорхой доройтол (цитопатик нөлөө), симпласт ба синцит үүсэх, эсийн доторх орцыг илрүүлэх, түүнчлэн иммунофлуоресценц, гемадсорбци, гемагглютинаци (гемагглютинаци вирусын үед) илрүүлсэн тодорхой антиген гэх мэтээр тодорхойлогддог. . Эдгээр шинж тэмдгүүд нь вирусын 2-3 дамжуулалтын дараа л илэрч болно.

Томуугийн вирүс зэрэг хэд хэдэн вирусыг тусгаарлахад тахианы үр хөврөл, зарим Коксаки вирус, олон тооны арбовирусыг тусгаарлахад шинэ төрсөн хулганыг ашигладаг. Тусгаарлагдсан вирусыг тодорхойлох нь ийлдэс судлалын шинжилгээ болон бусад аргуудыг ашиглан хийгддэг.

Вирустай ажиллахдаа тэдгээрийн титрийг тодорхойлно. Вирусын титрлэлтийг ихэвчлэн эд эсийн өсгөвөрт хийж, вирус агуулсан шингэний хамгийн их шингэрүүлэлтийг тодорхойлдог бөгөөд энэ үед эд эсийн доройтол, нэгдэл, вирусын өвөрмөц эсрэгтөрөгч үүсдэг. Товрууны аргыг хэд хэдэн вирусыг титрлэхэд ашиглаж болно. Товруу буюу вирусын сөрөг колони нь агар бүрхүүлийн дор нэг давхаргат эдийн өсгөвөрийн вирус устгасан эсийн голомт юм. Колони тоолох нь нэг халдварт вирусын тоосонцор нэг товруу үүсгэдэг гэсэн үндсэн дээр вирусын халдварын идэвхжилд тоон дүн шинжилгээ хийх боломжийг олгодог. Өсгөвөрийг амин чухал будагч бодисоор будаж, ихэвчлэн төвийг сахисан улаан өнгөөр ​​товруу тодорхойлогддог; товруу нь будгийг шингээдэггүй тул будсан амьд эсийн дэвсгэр дээр цайвар толбо хэлбэрээр харагдана. Вирусын титрийг 1 дэх товруу үүсгэгч нэгжийн тоогоор илэрхийлнэ мл.

Вирусыг цэвэршүүлэх, баяжуулах ажлыг ихэвчлэн дифференциал хэт центрифуг хийж, дараа нь концентраци эсвэл нягтралын градиентээр центрифуг хийдэг. Вирусыг цэвэрлэхийн тулд дархлаа судлалын аргууд, ион солилцооны хроматографи, иммуносорбент гэх мэтийг ашигладаг.

Вируст халдварын лабораторийн оношлогоо нь эмгэг төрүүлэгч эсвэл түүний бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг эмнэлзүйн материалд илрүүлэх; энэ материалаас вирус тусгаарлах; серодиагностик. Тухайн тохиолдол бүрт лабораторийн оношлогооны аргыг сонгох нь өвчний шинж чанар, өвчний хугацаа, лабораторийн боломжоос хамаарна. Вирусын халдварын орчин үеийн оношлогоо нь өвчний дараах эхний үе шатанд эмнэлзүйн материалыг авснаас хойш хэдхэн цагийн дараа хариу өгөх боломжийг олгодог экспресс аргууд дээр суурилдаг.Үүнд электрон болон дархлааны электрон микроскоп, мөн иммунофлуоресценц буюу молекулын эрлийзжүүлэх арга орно. , IgM ангиллын эсрэгбие илрүүлэх гэх мэт.

Сөрөг будсан вирусын электрон микроскоп нь вирусыг ялгах, тэдгээрийн концентрацийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Вирусын халдварыг оношлоход электрон микроскопийг ашиглах нь эмнэлзүйн материал дахь вирусын тоосонцрын агууламж хангалттай өндөр (10 5) тохиолдолд л хязгаарлагддаг. млба түүнээс дээш). Аргын сул тал нь нэг ангилал зүйн бүлэгт хамаарах вирусыг ялгах чадваргүй байдаг. Энэ сул талыг дархлааны электрон микроскоп ашиглан арилгадаг. Энэ арга нь вирусын тоосонцор дээр тодорхой ийлдэс нэмэх үед дархлааны цогцолбор үүсэхэд суурилдаг бөгөөд вирусын тоосонцор нэгэн зэрэг хуримтлагддаг бөгөөд энэ нь тэдгээрийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Энэ аргыг мөн эсрэгбие илрүүлэхэд ашигладаг. Экспресс оношилгооны зорилгоор эд эсийн ханд, ялгадас, цэврүүтэх шингэн, хамар залгиурын нууцын электрон микроскопийн шинжилгээг хийдэг. Вирусын морфогенезийг судлахын тулд электрон микроскопийг өргөн ашигладаг бөгөөд шошготой эсрэгбиемүүдийг ашиглан түүний чадварыг өргөжүүлдэг.

Вирусын өвөрмөц нуклейн хүчлийг илрүүлэхэд үндэслэсэн молекулын эрлийзжүүлэх арга нь генийн нэг хуулбарыг илрүүлэх боломжийг олгодог бөгөөд мэдрэмжийн хувьд ижил төстэй байдаггүй. Урвал нь ДНХ эсвэл РНХ-ийн нэмэлт хэлхээг эрлийзжүүлэх, давхар судалтай бүтэц үүсэхэд суурилдаг. Хамгийн хямд датчик бол клонжуулсан рекомбинант ДНХ юм. Уг датчик нь цацраг идэвхт прекурсорууд (ихэвчлэн цацраг идэвхт фосфор) гэсэн шошготой байдаг. Колориметрийн урвалыг ашиглах нь ирээдүйтэй. Молекулын эрлийзжүүлэлтийн хэд хэдэн хувилбар байдаг: цэгийн эрлийзжилт, толбоны эрлийзжилт, сэндвичний эрлийзжилт, in situ эрлийзжилт гэх мэт.

lgM ангиллын эсрэгбие нь G ангиллын эсрэгбиемүүдээс эрт (өвчний 3-5 дахь өдөр) гарч ирдэг бөгөөд хэдэн долоо хоногийн дараа алга болдог тул тэдний илрүүлэлт нь саяхан халдвар авсан болохыг харуулж байна. IgM ангиллын эсрэгбие нь анти-м-антисера (anti-IgM хүнд гинжний ийлдэс) ашиглан иммунофлуоресценц эсвэл ферментийн дархлааны шинжилгээгээр илрүүлдэг.

Вирус судлалын ийлдэс судлалын аргууд нь сонгодог дархлаа судлалын урвал дээр суурилдаг (үзнэ үү. Дархлаа судлалын судалгааны аргууд ): нэмэлт бэхэлгээний урвал, гемагглютинацийг дарангуйлах, биологийн саармагжуулах, дархлаажуулалт, шууд бус гемагглютинаци, радиаль цус задрал, иммунофлуоресценц, ферментийн дархлаа, радиоиммун шинжилгээ. Олон тооны урвалын микро аргыг боловсруулсан бөгөөд тэдгээрийн техникийг тасралтгүй сайжруулж байна. Эдгээр аргууд нь мэдэгдэж буй ийлдсүүдийн багцыг ашиглан вирусыг тодорхойлох, хоёр дахь ийлдэс дэх эсрэгбиеийн өсөлтийг эхнийхтэй харьцуулахад (эхний ийлдэсийг өвчний дараах эхний өдрүүдэд, хоёр дахь нь - дараа нь) тодорхойлохын тулд вирусыг тодорхойлоход ашигладаг. 2-3 долоо хоног). Оношилгооны үнэ цэнэ нь хоёр дахь ийлдэс дэх эсрэгбиеийн хэмжээ дөрөв дахин ихэссэнээс багагүй байна. Хэрэв lgM ангиллын эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх нь саяхан халдвар авсан болохыг харуулж байгаа бол lgC ангийн эсрэгбие нь хэдэн жил, заримдаа насан туршдаа үлддэг.

Урьдчилан уураг цэвэршүүлэхгүйгээр нарийн төвөгтэй хольц дахь вирусын бие даасан антиген ба тэдгээрийн эсрэгбиемүүдийг тодорхойлохын тулд иммуноблотинг ашигладаг. Энэ арга нь полиакриламидын гель электрофорез ашиглан уургийн фракцийг ферментийн дархлааны шинжилгээгээр уургийн дараагийн дархлааны шинжилгээг хослуулдаг. Уургийг салгах нь эсрэгтөрөгчийн химийн цэвэр байдалд тавигдах шаардлагыг бууруулж, бие даасан эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн хосыг тодорхойлох боломжийг олгодог. Энэ даалгавар нь жишээлбэл, ХДХВ-ийн халдварыг оношлоход хамаатай бөгөөд вирусын уураг хангалтгүй цэвэршүүлсний үр дүнд эсийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемүүд байгаатай холбоотой хуурамч эерэг ферментийн дархлааны урвал үүсдэг. Өвчтөний цусны ийлдэс дэх эсрэгбиемийг дотоод болон гадаад вирусын эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох нь өвчний үе шатыг тодорхойлох боломжийг олгодог бөгөөд популяцид дүн шинжилгээ хийхдээ вирусын уургийн хэлбэлзлийг тодорхойлох боломжийг олгодог. ХДХВ-ийн халдварын үед дархлаажуулалтыг бие даасан вирусын эсрэгтөрөгч ба тэдгээрийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх баталгаажуулах тест болгон ашигладаг. Популяцид дүн шинжилгээ хийхдээ энэ аргыг вирусын уургийн хэлбэлзлийг тодорхойлоход ашигладаг. Аргын агуу үнэ цэнэ нь рекомбинант ДНХ технологийг ашиглан нийлэгжүүлсэн антигенийг шинжлэх, тэдгээрийн хэмжээ, антиген тодорхойлогч бодис байгаа эсэхийг тодорхойлох боломж юм.

Ном зүй:Букринская А.Г. Вирус судлал, М., 1986; Вирус судлал, арга зүй, хэвлэл. Б.Мейхи, транс. Англи хэлнээс, М., 1988; Микробиологи, вирус судлалын судалгааны аргуудын гарын авлага, хэвлэл. М.О. Биргер, М., 1982.