સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણ શું બતાવે છે? કોઈપણ રોગની સારવારમાં ડાયગ્નોસ્ટિક પગલાં એ સૌથી મહત્વપૂર્ણ તબક્કો છે. સારવારની સફળતા માત્ર નિયત દવાઓ પર જ નહીં, પરંતુ નિદાન કેવી રીતે યોગ્ય રીતે કરવામાં આવ્યું તેના પર પણ નિર્ભર છે.

વધુમાં, નિદાન જટિલતાઓને રોકવામાં મદદ કરે છે અને સાથેની બીમારીઓ. દર્દીના લોહીના સેરોલોજીકલ પરીક્ષણનો ઉપયોગ કરીને, એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સની હાજરી શોધી કાઢવામાં આવે છે. અભ્યાસ ઘણા રોગો શોધવા, તેમના તબક્કા નક્કી કરવા અને સારવારની પ્રગતિનું નિરીક્ષણ કરવામાં મદદ કરે છે.

સેરોલોજી શું છે?

સેરોલોજી એ ઇમ્યુનોલોજીની શાખા છે જે એન્ટિજેન્સની એન્ટિબોડીઝની પ્રતિક્રિયાઓનો અભ્યાસ કરે છે. દવાની આ શાખા રક્ત પ્લાઝ્મા અને તેની રોગપ્રતિકારક લાક્ષણિકતાઓના અભ્યાસ સાથે વ્યવહાર કરે છે.

આજે, એન્ટિબોડીઝ માટે સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણ એ માનવ ઇમ્યુનોડેફિસિયન્સી વાયરસ, હેપેટાઇટિસ, બ્રુસેલોસિસ, એસટીડી અને અન્ય જીવલેણ રોગોને શોધવાની વિશ્વસનીય રીત છે. ચાલો જોઈએ કે તે કયા કેસોમાં સૂચવવામાં આવે છે.

ઉપયોગ માટે સંકેતો

જો નિદાન કરવું મુશ્કેલ હોય તો રોગના કારક એજન્ટને ઓળખવા માટે સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણ જરૂરી છે.

આ પ્રતિક્રિયા કરવા માટે, પેથોજેન્સના એન્ટિજેન્સને પ્લાઝ્મામાં દાખલ કરવામાં આવે છે, અને પછી ચાલુ પ્રક્રિયાનો પ્રયોગશાળા સહાયક દ્વારા અભ્યાસ કરવામાં આવે છે. અથવા તેઓ વિપરીત પ્રતિક્રિયા કરે છે: રોગકારકની ચોક્કસ ઓળખ નક્કી કરવા માટે ચેપગ્રસ્ત રક્તમાં એન્ટિબોડીઝ ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવે છે.

અરજીનો અવકાશ

આ સંશોધનનો ઉપયોગ દવાની વિવિધ શાખાઓમાં થાય છે. આ પ્રતિક્રિયા ચેપ અને વાયરસ સામે લડવા માટે શરીર દ્વારા ઉત્પાદિત ચોક્કસ કોષો અને એન્ટિબોડીઝને ઓળખે છે.

વધુમાં, વ્યક્તિનું રક્ત પ્રકાર સેરોલોજીકલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવે છે.

સેક્સ્યુઅલી ટ્રાન્સમિટેડ રોગોના નિદાન માટે સ્ત્રીરોગવિજ્ઞાનમાં સમાન સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણનો ઉપયોગ થાય છે. આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ સગર્ભા સ્ત્રીઓની વ્યાપક પરીક્ષાઓ (ટોક્સોપ્લાઝ્મોસીસ, એચઆઈવી, સિફિલિસ, વગેરે) માટે પણ થાય છે. જન્મ પહેલાંના ક્લિનિકમાં નોંધણી કરતી વખતે આ પરીક્ષણ પાસ કરવું ફરજિયાત છે.

બાળકોમાં, કહેવાતા "બાળપણ" રોગો (ચિકનપોક્સ, ઓરી, રુબેલા, વગેરે) ના નિદાનની પુષ્ટિ કરવા માટે સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે જો લક્ષણોમાં ઉચ્ચારણ અભિવ્યક્તિઓ ન હોય અને ક્લિનિકલ સંકેતોનું વિશ્લેષણ કરીને રોગને ઓળખવું અશક્ય છે. .

સેક્સ્યુઅલી ટ્રાન્સમિટેડ રોગોની તપાસ

વેનેરિયોલોજિસ્ટ્સ માટે, આ પરીક્ષણ ખરેખર બદલી ન શકાય તેવું છે અને તમને ખૂબ સચોટ નિદાન કરવા દે છે.

અસ્પષ્ટ ક્લિનિકલ ચિત્ર સાથે, સિફિલિસ, ગિઆર્ડિઆસિસ, યુરેપ્લાસ્મોસિસ, ક્લેમીડિયા, હર્પીસ અને અન્ય રોગો માટે સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણ ઝડપથી એન્ટિબોડીઝની હાજરી શોધી શકે છે.

વાયરલ અને ચેપી રોગો

નિદાન માટે ગેસ્ટ્રોએન્ટેરોલોજિસ્ટ્સ, હેપેટોલોજિસ્ટ્સ અને ચેપી રોગના નિષ્ણાતો દ્વારા સેરોલોજીકલ વિશ્લેષણનો સક્રિયપણે ઉપયોગ થાય છે. વાયરલ હેપેટાઇટિસ.

સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણને સમજવાથી રોગના તબક્કાને નિર્ધારિત કરવાનું શક્ય બને છે અને હોસ્પિટલમાં દાખલ થવું કેટલું જરૂરી છે તે પ્રશ્નનો જવાબ આપે છે. આ ક્ષણ. કેવી રીતે યોગ્ય રીતે તૈયાર કરવા માટે?

ટેસ્ટ માટે તૈયારી કરી રહ્યા છીએ

સેરોલોજિકલ રક્ત પરીક્ષણો જાહેર અને વ્યાપારી ક્લિનિક્સ બંનેમાં કરવામાં આવે છે. આધુનિક સાધનો અને લાયકાત ધરાવતા કર્મચારીઓ સાથે પ્રયોગશાળાને પ્રાધાન્ય આપવું જોઈએ.

પરીક્ષણ માટે જૈવિક નમૂનાઓ લાળ અને મળ હોઈ શકે છે, પરંતુ મોટાભાગના કિસ્સાઓમાં દર્દીના શિરાયુક્ત રક્તનો ઉપયોગ થાય છે. સેરોલોજીકલ ટેસ્ટ માટે લોહી લેબોરેટરીમાં ક્યુબિટલ નસમાંથી લેવામાં આવે છે. પરીક્ષણ લેતા પહેલા, તમારે આ પ્રક્રિયાની તૈયારી વિશે તમારા ડૉક્ટરની સલાહ લેવી જોઈએ.

સેરોલોજિકલ ટેસ્ટની તૈયારી કરવા માટે, તમારે થોડા સરળ નિયમોનું પાલન કરવાની જરૂર છે.

ભોજન પહેલાં, એટલે કે, ખાલી પેટ પર શાંત સ્થિતિમાં રક્તનું દાન કરવામાં આવે છે. આ પહેલાં, તમારે એક્સ-રે, અલ્ટ્રાસાઉન્ડ વગેરે જેવા અન્ય પરીક્ષણોમાંથી પસાર થવું જોઈએ નહીં.

રક્તદાન કરતા કેટલાક અઠવાડિયા પહેલા એન્ટીબેક્ટેરિયલ અને અન્ય કેટલીક દવાઓ લેવાનું ટાળવું જરૂરી છે. આ કિસ્સામાં અમુક ભલામણો એ રોગ પર આધાર રાખે છે કે જેના માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવી રહ્યું છે. ઉદાહરણ તરીકે, હેપેટાઇટિસ માટેના પરીક્ષણમાં પ્રક્રિયાના 48 કલાક પહેલાં ચરબીયુક્ત ખોરાક અને આલ્કોહોલ દૂર કરવાનો સમાવેશ થાય છે.

ફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા

સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓના પ્રકારોમાં ફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા છે. આ તકનીક એક રીએજન્ટનો ઉપયોગ કરે છે જે રક્ત સીરમમાં એન્ટિબોડીઝને પ્રકાશિત કરે છે.

ડાયરેક્ટ સેરોલોજીકલ રિએક્શન સેટ કરવા માટે ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝને ફ્લોરોસન્ટ પદાર્થ સાથે ચિહ્નિત કરવાનો સમાવેશ થાય છે. આ પ્રતિક્રિયા સૌથી ઝડપી છે અને એક તબક્કામાં હાથ ધરવામાં આવે છે.

આવા વિશ્લેષણ કરવા માટેનો બીજો વિકલ્પ પરોક્ષ અથવા RNIF કહેવાય છે. તે બે તબક્કામાં હાથ ધરવામાં આવે છે. પ્રથમ પગલામાં, એન્ટિબોડીઝને ફ્લોરોસન્ટ ટેગ સાથે લેબલ કરવામાં આવતું નથી, અને બીજામાં, યોગ્ય રીતે લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝને ઓળખવા માટે થાય છે. ચોક્કસ એન્ટિબોડી સાથે બંધન થાય તે પછી જ ગ્લો થાય છે.

સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણ શું બતાવે છે? સમગ્ર પ્રક્રિયાના પરિણામનું મૂલ્યાંકન એક વિશિષ્ટ ઉપકરણ દ્વારા કરવામાં આવે છે જે રેડિયેશનની શક્તિનું વિશ્લેષણ કરે છે અને અભ્યાસ હેઠળના પદાર્થના આકાર અને કદને દર્શાવે છે. ચેપી રોગોના કારક એજન્ટો એવા પરિણામ સાથે શોધી કાઢવામાં આવે છે જેની વિશ્વસનીયતા પેથોલોજીના પ્રકાર અને તબક્કાના આધારે 90-95% છે.

લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ પરીક્ષા

આ પ્રકારના સેરોલોજીકલ પરીક્ષણો અનન્ય, સ્થિર રીએજન્ટ્સનો ઉપયોગ કરે છે. ચિહ્નિત પદાર્થો ઇચ્છિત એન્ટિબોડીઝને વળગી રહે છે. પરિણામે, અમને ગુણાત્મક અથવા માત્રાત્મક પરિણામ મળે છે.

જો કોઈ ઉચ્ચારણ માર્કર ન મળે, તો પરિણામ નકારાત્મક ગણવામાં આવશે. જો ગુણાત્મક અભ્યાસ દરમિયાન જૈવિક નમૂનાઓમાં એન્ટિબોડીઝની હાજરી શોધી કાઢવામાં આવે છે, તો પછી પરીક્ષણ પરિણામ હકારાત્મક માનવામાં આવે છે. કોષોની માત્રા નક્કી કરીને, વિશ્લેષણ વધુ સચોટ પરિણામ આપે છે.

વિશ્લેષણ સૂચકાંકોનું વિશ્લેષણ કરીને (ઉદાહરણ તરીકે, શોધાયેલ કોષોનો સરવાળો), નિષ્ણાત નક્કી કરે છે કે રોગ ક્યાં છે પ્રારંભિક તબક્કો, તીવ્ર તબક્કામાં, અથવા તે વધુ ખરાબ થઈ ગયું છે ક્રોનિક સ્વરૂપપેથોલોજી. નિદાન કરવા માટે, ડૉક્ટર માત્ર સેરોલોજીકલ અભ્યાસના ડેટાને જ નહીં, પણ રોગના ક્લિનિકલ ચિત્રને પણ ધ્યાનમાં લે છે.

આ ટેસ્ટની વિશેષતાઓ

આ વિશ્લેષણ હાથ ધરવા હંમેશા 100% વિશ્વાસ પ્રદાન કરવામાં સક્ષમ નથી કે કોઈ ચોક્કસ રોગ મળી આવ્યો છે. એવું બને છે કે પરિણામો અસ્પષ્ટ હોઈ શકે છે અને અન્ય પ્રક્રિયાઓ જરૂરી છે.

ઉદાહરણ તરીકે, બ્રુસેલોસિસ માટેના પરીક્ષણ દરમિયાન, રક્ત સીરમ એન્ટિજેન વિના સ્વ-રીટેન્શન માટે નિયંત્રિત થાય છે. આ પરીક્ષણની વિશ્વસનીયતામાં નોંધપાત્ર વધારો કરે છે. બ્રુસેલોસિસ માટેનું પરીક્ષણ હકારાત્મક હોઈ શકે છે અથવા નકારાત્મક અર્થ, અને શંકા પણ ઊભી કરે છે.

જો તમને શંકાસ્પદ પરિણામો પ્રાપ્ત થાય છે જેમાં અસ્પષ્ટ અર્થઘટન નથી, તો ફરીથી પરીક્ષણ લેવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે. વધુમાં, બ્રુસેલોસિસ રક્ત સંસ્કૃતિઓ, પરીક્ષણ દ્વારા શોધી શકાય છે મજ્જાઅને સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી.

સેરોલોજીકલ રક્ત પરીક્ષણના ફાયદા

આધુનિક તબીબી પ્રેક્ટિસમાં સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને ડાયગ્નોસ્ટિક તકનીકોનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. વાયરલ અને ચેપી પેથોલોજી નક્કી કરતી વખતે આ ખાસ કરીને વારંવાર કરવામાં આવે છે.

ભૌગોલિક સ્ક્રીનીંગ કરતી વખતે સમાન પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે અને તબીબી તપાસચેપના રોગચાળાના ફેલાવાને રોકવા માટે.

પદ્ધતિના ફાયદાઓમાં શામેલ છે:

• આત્મવિશ્વાસનું ઉચ્ચ સ્તર.
• ઝડપી પ્રતિક્રિયા અને પરિણામો. આરએસસીના પરિણામો 24 કલાકની અંદર જાણી શકાય છે. ખાસ પરિસ્થિતિમાં, હોસ્પિટલ સેટિંગમાં, વિશ્લેષણ થોડા કલાકોમાં તૈયાર થઈ જશે.
• રોગના વિકાસ અને ઉપચારની અસરકારકતાનું નિરીક્ષણ કરવું.
• દર્દીઓ માટે ઓછી કિંમત અને સુલભતા.

પદ્ધતિના ગેરફાયદા

જો કે, સેરોલોજીકલ અભ્યાસમાં પણ તેમની ખામીઓ છે.

આમાં એ હકીકતનો સમાવેશ થાય છે કે વિશ્લેષણ કરતી વખતે, વધુ વિશ્વસનીય ચિત્ર મેળવવા માટે રોગના સેવનનો સમયગાળો ધ્યાનમાં લેવો જોઈએ.

ઉદાહરણ તરીકે, વ્યાખ્યા હર્પીસ સિમ્પ્લેક્સપ્રથમ અથવા બીજો પ્રકાર ચેપના ક્ષણથી 14 દિવસ પછી જ શક્ય છે. ઇમ્યુનોડેફિસિયન્સી વાયરસની હાજરી માટેનું વિશ્લેષણ ચેપગ્રસ્ત વ્યક્તિ સાથે સંપર્ક કર્યાના 30 દિવસ, 90 દિવસ અને છ મહિના પછી કરવામાં આવે છે.

અલબત્ત, પરિણામોની વિશ્વસનીયતા માનવ પરિબળ દ્વારા પણ પ્રભાવિત થઈ શકે છે: લોહીના નમૂના લેવાની તૈયારી માટેના નિયમોની અવગણના અથવા પ્રતિક્રિયા કરતી વખતે પ્રયોગશાળા સહાયક દ્વારા કરવામાં આવેલી ભૂલ.

આંકડા અનુસાર, 5% કેસોમાં ભૂલભરેલું પરિણામ મેળવી શકાય છે. એક અનુભવી ડૉક્ટર, દર્દીની તપાસ કરતી વખતે, ક્લિનિકલ ચિત્રનો અભ્યાસ કર્યા પછી, મોટાભાગના કિસ્સાઓમાં કરવામાં આવેલી ભૂલની ગણતરી કરી શકે છે.

સિફિલિસ માટેનું પરીક્ષણ એ સૌથી સામાન્ય પ્રયોગશાળા પરીક્ષણોમાંનું એક છે. નિવારક પરીક્ષાઓ દરમિયાન સિફિલિસ માટેના પરીક્ષણોનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરીને, સિફિલિસના કારક એજન્ટને ઓળખવામાં આવે છે. સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને, સિફિલિસના નિદાનની પુષ્ટિ થાય છે, નિદાન સ્થાપિત થાય છે સુપ્ત સિફિલિસ, સારવારની અસરકારકતાનું નિરીક્ષણ કરવામાં આવે છે, અને દર્દીઓનો ઉપચાર નક્કી કરવામાં આવે છે.

સિફિલિસનું નિદાન ક્લિનિકલ ડેટા, સામગ્રીના નમૂનાઓમાં સિફિલિસ પેથોજેન્સની શોધ અને સેરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓ દ્વારા નિદાનની પુષ્ટિના આધારે સ્થાપિત થાય છે. સિફિલિસના અભિવ્યક્તિઓ અસંખ્ય અને વૈવિધ્યસભર છે, તેથી જ આ રોગનું નિદાન વિવિધ વિશેષતાઓના ડોકટરો દ્વારા કરવામાં આવે છે. પ્રાથમિક સિફિલિસનું વિભેદક નિદાન સંખ્યાબંધ રોગો સાથે કરવામાં આવે છે.

ચોખા. 1. ફોટામાં, સિફિલિસનું પ્રાથમિક અભિવ્યક્તિ ચેન્ક્રે છે.

ટ્રેપોનેમા પેલીડમ અને સેરોલોજીકલ નિદાન માટે એન્ટિબોડીઝ

જ્યારે સિફિલિસથી ચેપ લાગે છે, ત્યારે દર્દીના શરીરમાં એન્ટિબોડીઝ રચાય છે. સેરોલોજિકલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ ડૉક્ટરને સિફિલિસ ધરાવતા દર્દીના શરીરમાં એન્ટિબોડી રચનાની ગતિશીલતાનો અભ્યાસ કરવામાં મદદ કરે છે. પ્રારંભિક તબક્કારોગો, સારવારના સમયગાળા દરમિયાન અને તેની સમાપ્તિ પછી, દર્દીમાં રોગના ફરીથી થવાના અથવા ફરીથી ચેપ (ફરીથી ચેપ) ના મુદ્દાને હલ કરો, સામૂહિક તબીબી પરિસ્થિતિઓમાં સિફિલિસનું નિદાન કરો.

ટ્રેપોનેમા પેલિડમ આઇજીએમ માટે એન્ટિબોડીઝ

IgM એન્ટિબોડીઝ ચેપ પછી ઉત્પન્ન થનાર પ્રથમ છે. તેઓ ચેપ પછી બીજા અઠવાડિયાથી સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને શોધવાનું શરૂ કરે છે. માંદગીના 6-9 અઠવાડિયામાં, તેમની સંખ્યા મહત્તમ બની જાય છે. જો દર્દીની સારવાર કરવામાં આવતી નથી, તો છ મહિના પછી એન્ટિબોડીઝ અદૃશ્ય થઈ જાય છે. IgM એન્ટિબોડીઝ 1 - 2 મહિના પછી અદૃશ્ય થઈ જાય છે. પછી, 3-6 મહિના પછી. - અંતમાં સિફિલિસની સારવાર પછી. જો તેમની વૃદ્ધિ નોંધવામાં આવે છે, તો આ સેવા આપે છે અથવા સૂચવે છે ફરીથી ચેપ. IgM પરમાણુઓ મોટા હોય છે અને પ્લેસેન્ટામાંથી ગર્ભમાં જતા નથી.

ટ્રેપોનેમા પેલિડમ IgG માટે એન્ટિબોડીઝ

એન્ટિબોડીઝ IgG ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનચેપની ક્ષણથી પ્રથમ મહિના (4 થી અઠવાડિયા) ના અંતમાં દેખાય છે. તેમનું ટાઇટર આઇજીએમ ટાઇટર કરતા વધારે છે. IgG સારવાર પછી લાંબા સમય સુધી ચાલુ રહે છે.

બિન-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝ

ત્યાં ઘણી સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ છે. ટ્રેપોનેમા પેલીડમના એન્ટિજેનિક ગુણાકાર દ્વારા આ સમજાવવામાં આવ્યું છે. બીમાર વ્યક્તિના લોહીના સીરમમાં વિવિધ તબક્કાઓસિફિલિસ, ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ ઉપરાંત, ચોક્કસ બિન-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝ રચાય છે - એગ્ગ્લુટીનિન્સ, પૂરક-ફિક્સિંગ એન્ટિબોડીઝ, ઇમ્યુબિલિન્સ, એન્ટિબોડીઝ જે રોગપ્રતિકારક ફ્લોરોસેન્સનું કારણ બને છે, પ્રીસિપિટિન્સ, વગેરે. બિન-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ સંબંધિત વિશિષ્ટતા ધરાવે છે; તેથી, નિદાન ટાળવા માટે ભૂલો, તમારે એક નહીં, પરંતુ સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ (આરએસી) ના સંકુલનો ઉપયોગ કરવો જોઈએ.

સિફિલિસ માટે ખોટા હકારાત્મક પરીક્ષણો

વિશિષ્ટ લક્ષણબિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો ખોટા-સકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓમાં પરિણમે છે. એન્ટિબોડીઝ-રેગિન્સ, જે કાર્ડિયોલિપિન એન્ટિજેન સામે માનવ રક્તમાં ઉત્પન્ન થાય છે, તે માત્ર સિફિલિસ સાથે જ નહીં, પણ અન્ય રોગોમાં પણ નોંધાયેલા છે: કોલેજનોસિસ, હિપેટાઇટિસ, કિડનીના રોગો, થાઇરોટોક્સિકોસિસ, કેન્સર, ચેપી રોગો(રક્તપિત્ત, ક્ષય, બ્રુસેલોસિસ, મેલેરિયા, ટાઇફસ, લાલચટક તાવ), ગર્ભાવસ્થા અને માસિક ચક્ર દરમિયાન, ચરબીયુક્ત ખોરાક અને આલ્કોહોલ લેતી વખતે. તે નોંધવામાં આવ્યું છે કે ખોટી-સકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓની સંખ્યા વય સાથે વધે છે.

ચોખા. 2. ફોટો સ્ત્રીઓમાં પ્રાથમિક સિફિલિસ દર્શાવે છે.

સેરોલોજીકલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને સિફિલિસનું લેબોરેટરી નિદાન

સિફિલિસ માટેના સેરોલોજીકલ પરીક્ષણોને ટ્રેપોનેમલ અને નોનટ્રેપોનેમલમાં વિભાજિત કરવામાં આવે છે.

1. બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો

પરીક્ષણોના આ જૂથમાં વપરાયેલ એન્ટિજેન કાર્ડિયોલિપિન એન્ટિજેન છે. સિફિલિસ પેથોજેન્સના લિપિડ એન્ટિજેન્સ સૌથી વધુ અસંખ્ય છે. તેઓ કોષના શુષ્ક સમૂહનો 1/3 બનાવે છે. બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને, રીગિન એન્ટિબોડીઝ શોધી કાઢવામાં આવે છે જે કાર્ડિયોલિપિન એન્ટિજેન સામે ઉત્પન્ન થાય છે. આ જૂથમાં કોમ્પ્લિમેન્ટ ફિક્સેશન ટેસ્ટ (FFR), માઇક્રોપ્રિસિપિટેશન ટેસ્ટ (MPR), રેપિડ પ્લાઝ્મા રીગિન ટેસ્ટ (RPR), વગેરેનો સમાવેશ થાય છે. બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને, સિફિલિસ માટે પ્રાથમિક તપાસ હાથ ધરવામાં આવે છે (વસ્તી જૂથોનો સર્વે), અને શક્યતા માત્રાત્મક સ્વરૂપમાં પરિણામો મેળવવાથી આ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ સારવારની અસરકારકતા પર દેખરેખ રાખવા માટે થઈ શકે છે. નોનટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોના હકારાત્મક પરિણામોની પુષ્ટિ ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો દ્વારા થવી જોઈએ. બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોની એક વિશિષ્ટ વિશેષતા એ ખોટી-સકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓની પ્રાપ્તિ છે.

2. ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો

ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો ટ્રેપોનેમા પેલિડમની સંસ્કૃતિથી અલગ ટ્રેપોનેમલ મૂળના એન્ટિજેન્સનો ઉપયોગ કરે છે. તેમની સહાયથી, બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોના હકારાત્મક પરિણામોની પુષ્ટિ થાય છે. જૂથમાં નીચેનાનો સમાવેશ થાય છે: RSKtrep - પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા, RIF - ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ પ્રતિક્રિયા અને તેના ફેરફારો, RIT, RIBT - ટ્રેપોનેમા પેલિડમની સ્થિરતા પ્રતિક્રિયા, RPHA - નિષ્ક્રિય હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા, ELISA - એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે.

3. રિકોમ્બિનન્ટ એન્ટિજેન્સનો ઉપયોગ કરીને સિફિલિસ માટે પરીક્ષણો

પરીક્ષણોના આ જૂથ માટેના એન્ટિજેન્સ આનુવંશિક ઇજનેરી દ્વારા મેળવવામાં આવે છે અને તેનો ઉપયોગ પ્રતિક્રિયાઓમાં થાય છે - RPGA અને ELISA, ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ (IB) વિશ્લેષણ અને ઇમ્યુનોક્રોમેટોગ્રાફિક વિશ્લેષણમાં.

ચોખા. 3. સિફિલિસનું નિદાન કરવા માટે સેરોલોજીકલ પરીક્ષણોનો સમૂહ વપરાય છે.

બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને સિફિલિસનું નિદાન

સિફિલિસને શોધવા માટે, બિન-ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો અથવા સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓના સંકુલ (એસએસઆર) નો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. સેરોલોજીકલ નિદાનનો ઉપયોગ ચેપના ક્ષણથી 5 મા અઠવાડિયાથી અથવા શરૂઆતના 2-3 અઠવાડિયા પછી થાય છે. તાજા પ્રાથમિક સાથે લગભગ તમામ દર્દીઓમાં એન્ટિબોડીઝ મળી આવે છે. સિફિલિસના 70 - 80% દર્દીઓમાં, તૃતીય સુપ્ત સિફિલિસવાળા દર્દીઓમાં 50 - 60% કેસોમાં સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ હકારાત્મક હોય છે.

નોનટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને સેરોલોજીકલ પરીક્ષણો ખોટા-સકારાત્મક પરિણામો આપી શકે છે.

ચોખા. 4. સિફિલિસ માટે પરીક્ષણ માટે લોહીના નમૂના લેવા.

પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા (RSK કાર્ડ, KA સાથે KSK, Wasserman પ્રતિક્રિયા)

A. Wasserman દ્વારા 100 વર્ષ પહેલાં શોધાયેલ વાસરમેન પ્રતિક્રિયા (RW, РВ), આજે ઘણા ફેરફારો થયા છે, જો કે, પરંપરાને શ્રદ્ધાંજલિ તરીકે, તેણે તેનું નામ આજ સુધી જાળવી રાખ્યું છે. કાર્ડિયોલિપિન એન્ટિજેનનો ઉપયોગ કરીને પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા માત્ર એન્ટિબોડીઝને શોધવાનો હેતુ નથી, પરંતુ તે માત્રાત્મક રીતે કરવામાં આવે છે - વિવિધ સીરમ ડિલ્યુશન સાથે, જે તેને સારવારની અસરકારકતા પર દેખરેખ રાખવા માટે ઉપયોગમાં લેવાની મંજૂરી આપે છે. ઓછી સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા, પ્રાપ્ત કરવી ખોટા હકારાત્મક પરિણામો- આ પ્રકારના સંશોધનના નકારાત્મક પાસાઓ.

Wasserman પ્રતિક્રિયાનો સાર નીચે મુજબ છે: એન્ટિજેન્સ કે જેનો ઉપયોગ Wasserman પ્રતિક્રિયા કરવા માટે થાય છે, માનવ રક્તમાં સિફિલિસના કારક એજન્ટો માટે એન્ટિબોડીઝની હાજરીના કિસ્સામાં, તેમને ખુશામત અને અવક્ષેપ દ્વારા જોડવામાં આવે છે. પ્રતિક્રિયાની તીવ્રતા ચિહ્ન (+) દ્વારા સૂચવવામાં આવે છે. પ્રતિક્રિયા નકારાત્મક (-) હોઈ શકે છે - કોઈ કાંપ નથી, શંકાસ્પદ (નાનો કાંપ અથવા +), નબળા હકારાત્મક (++), હકારાત્મક (+++) અને મજબૂત હકારાત્મક (++++).

સંશોધિત વાસરમેન પ્રતિક્રિયા, કોલમર પ્રતિક્રિયા, વધુ સંવેદનશીલ છે. તેની મદદથી, સેરામાં એન્ટિબોડીઝ શોધી કાઢવામાં આવે છે જ્યાં વેસરમેન પ્રતિક્રિયાએ નકારાત્મક પરિણામ આપ્યું હતું.

મજબૂત હકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓના કિસ્સામાં, તે હાથ ધરવામાં આવે છે પરિમાણરીગિન્સ, જેના માટે સીરમનો ઉપયોગ 1:10 થી 1:320 સુધીના મંદનમાં થાય છે, જે સારવારની અસરકારકતા પર દેખરેખ રાખવા માટે આ પ્રકારના સંશોધનનો ઉપયોગ કરવાની મંજૂરી આપે છે. ઉદાહરણ તરીકે, એન્ટિબોડી ટાઇટરમાં ઘટાડો અને તેમની અનુગામી સેરોનેગેટિવિટી (નકારાત્મક પરિણામો મેળવવી) રોગનો સફળ ઉપચાર સૂચવે છે.

ચોખા. 5. સિફિલિસ માટે રક્ત પરીક્ષણ - વાસરમેન પ્રતિક્રિયા.

માઇક્રોપ્રિસિપિટેશન રિએક્શન (MPR)

અમુક વસ્તી જૂથોની સામૂહિક પરીક્ષાઓ, સિફિલિસનું નિદાન અને સારવારની અસરકારકતાની દેખરેખ માટે વરસાદના માઇક્રોએક્શનનો ઉપયોગ થાય છે. આ પ્રકારના સંશોધન માટે તે જરૂરી છે નાની માત્રાજે સામગ્રીનો અભ્યાસ કરવામાં આવી રહ્યો છે. વરસાદની માઇક્રોએક્શન ઇમ્યુનોલોજિકલ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયા પર આધારિત છે. જો વિષયના રક્ત સીરમમાં એન્ટિબોડીઝ હાજર હોય, તો એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ ફ્લેક્સ બનાવવા માટે અવક્ષેપ કરે છે. પ્રતિક્રિયા ખાસ ગ્લાસ પ્લેટના કુવાઓમાં કરવામાં આવે છે. તેનું મૂલ્યાંકન વેસરમેન પ્રતિક્રિયા તરીકે (+) માં અવક્ષેપની તીવ્રતા અને ફ્લેક્સના કદ દ્વારા કરવામાં આવે છે. સગર્ભા સ્ત્રીઓ, દાતાઓની તપાસ કરતી વખતે અને સારવારની અસરકારકતાનું નિરીક્ષણ કરતી વખતે તેનો ઉપયોગ થતો નથી. VDRL અને RPR એ સૂક્ષ્મ પ્રતિક્રિયાઓના પ્રકાર છે.

ચોખા. 6. કાચ પરના ડ્રોપમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયાનો પ્રકાર.

ચોખા. 7. સિફિલિસ માટે રક્ત પરીક્ષણ - માઇક્રોપ્રિસિપિટેશન પ્રતિક્રિયા.

ચોખા. 8. પ્લાઝ્મા રીજીન્સના ઝડપી નિર્ધારણ માટેની કીટ (સિફિલિસ માટે RPR ટેસ્ટ).

બિન-વિશિષ્ટ સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ દરમિયાન મેળવેલા તમામ હકારાત્મક પરીક્ષણોને ચોક્કસ પ્રતિક્રિયાઓ દ્વારા પુષ્ટિની જરૂર છે - ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો.

ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરીને સિફિલિસનું નિદાન

ટ્રેપોનેમલ પરીક્ષણો કરતી વખતે, ટ્રેપોનેમલ મૂળના એન્ટિજેન્સનો ઉપયોગ થાય છે. તેમના નકારાત્મક બાજુસારવારની અસરકારકતા પર દેખરેખ રાખવા, સ્પિરોચેટોસિસ અને બિન-વેનેરીયલ ટ્રેપોનેમેટોસિસ માટે સકારાત્મક પરિણામો મેળવવા અને ખોટા હકારાત્મક પરિણામો મેળવવા માટે ઉપયોગ કરવાની અશક્યતા છે. ઓન્કોલોજીકલ રોગો, રક્તપિત્ત, કેટલાક અંતઃસ્ત્રાવી પેથોલોજી. RPGA, ELISA અને RIF જેવા પરીક્ષણો સિફિલિસના ઉપચાર પછી ઘણા વર્ષો સુધી હકારાત્મક રહે છે, અને કેટલાક કિસ્સાઓમાં જીવનભર.

RIBT અને RIF એ સિફિલિસના નિદાન માટે ઉપયોગમાં લેવાતી તમામ સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓમાં સૌથી વિશિષ્ટ છે. તેઓ ખોટી-સકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓ વચ્ચે તફાવત કરવાનું શક્ય બનાવે છે અને સિફિલિસના અંતમાં સ્વરૂપોને ઓળખવાનું શક્ય બનાવે છે જે સાથે થાય છે. નકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓ. RIBT ની મદદથી, સગર્ભા સ્ત્રીઓમાં ખોટી-સકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓ ઓળખવામાં આવે છે જ્યારે બાળકના ચેપના મુદ્દાને ઉકેલવા માટે જરૂરી હોય છે.

ટ્રેપોનેમા પેલિડમ સ્થાવર પ્રતિક્રિયા (RIBT, RIT)

પ્રતિક્રિયાનો સાર એ છે કે દર્દીના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝ ટ્રેપોનેમા પેલિડમને સ્થિર કરે છે. પ્રતિક્રિયા નકારાત્મક માનવામાં આવે છે જ્યારે 20% જેટલા પેથોજેન્સ સ્થિર હોય છે, નબળા હકારાત્મક - 21 - 50%, હકારાત્મક - 50 - 100%. RIBT ક્યારેક ખોટા હકારાત્મક પરિણામો આપે છે. પરીક્ષણ જટિલ અને શ્રમ-સઘન છે, જો કે, તે રોગના સુપ્ત સ્વરૂપોના વિભેદક નિદાનમાં અને સગર્ભા સ્ત્રીઓ સહિત સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓના ખોટા-સકારાત્મક પરિણામો માટે અનિવાર્ય છે. RIBT ગૌણ, પ્રારંભિક અને અંતમાં સિફિલિસ માટે 100% હકારાત્મક પરિણામ આપે છે, 94 - 100% કેસોમાં - સિફિલિસના અન્ય સ્વરૂપો માટે.

ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા (RIF)

પ્રતિક્રિયાનો સાર એ છે કે ટ્રેપોનેમા પેલિડમ (એન્ટિજેન્સ), ફ્લોરોક્રોમ્સ સાથે લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ સાથે મળીને, ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપમાં પીળો-લીલો ગ્લો બહાર કાઢે છે. પરિણામનું મૂલ્યાંકન (+) ચિહ્ન દ્વારા કરવામાં આવે છે. RIF નો ઉપયોગ કરીને, વર્ગ A ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન શોધી કાઢવામાં આવે છે. ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા વાસરમેન પ્રતિક્રિયા કરતા પહેલા હકારાત્મક બને છે. ગૌણ અને સુપ્ત સિફિલિસમાં તે હંમેશા હકારાત્મક હોય છે, 95 - 100% કિસ્સાઓમાં તે તૃતીય અને જન્મજાત સિફિલિસમાં હકારાત્મક હોય છે. આ પ્રકારનું સંશોધન કરવા માટેની તકનીક RIBT કરતાં સરળ છે, પરંતુ RIF ને RIBT સાથે બદલવું અશક્ય છે, કારણ કે આ પ્રતિક્રિયા વિશિષ્ટતામાં RIBT કરતાં હલકી ગુણવત્તાવાળી છે. RIF-10 (RIF માં ફેરફાર) વધુ સંવેદનશીલ છે, RIF-200 અને RIF-abs વધુ ચોક્કસ છે.

ચોખા. 9. સિફિલિસ માટે રક્ત પરીક્ષણ - ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા (RIF).

ટ્રેપોનેમા પેલિડમ રોગપ્રતિકારક સંલગ્નતા પ્રતિક્રિયા (IPAT)

પ્રતિક્રિયાનો સાર એ છે કે ટ્રેપોનેમા પેલિડમ, દર્દીના સીરમ દ્વારા સંવેદનશીલ, પૂરકની હાજરીમાં, લાલ રક્ત કોશિકાઓની સપાટીને વળગી રહે છે. પરિણામી સંકુલ સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દરમિયાન અવક્ષેપ કરે છે. સંવેદનશીલતા આ ટેસ્ટઅને વિશિષ્ટતા RIF અને RIBT ની નજીક છે.

સિફિલિસ (ELISA) માટે એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે

ELISA નો ઉપયોગ કરીને, વર્ગ M અને G ના ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન નક્કી કરવામાં આવે છે. IgM - ELISA ટેકનિકનો ઉપયોગ સ્ક્રીનીંગ અને પુષ્ટિ પરીક્ષણ તરીકે થઈ શકે છે. ELISA ની સંવેદનશીલતા અને તેની વિશિષ્ટતા RIF જેવી જ છે. સિફિલિસ માટે, ELISA ચેપના ત્રીજા મહિનાથી હકારાત્મક પરિણામો આપે છે અને લાંબા સમય સુધી (ક્યારેક જીવનભર) હકારાત્મક રહે છે.

ચોખા. 10. એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે વિશ્લેષક.

નિષ્ક્રિય (પરોક્ષ) હેમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (RPHA)

RPHA એ લાલ રક્ત કોશિકાઓની ક્ષમતા પર આધારિત છે જેના પર ટ્રેપોનેમા પેલિડમ એન્ટિજેન્સ દર્દીના સીરમની હાજરીમાં એકસાથે વળગી રહેવા (હેમેગ્ગ્લુટિનેશન) શોષાય છે. RPGA નો ઉપયોગ સુપ્ત સહિત તમામ પ્રકારના સિફિલિસના નિદાન માટે થાય છે. ઉપયોગ કરતી વખતે ઉચ્ચ ગુણવત્તાએન્ટિજેન, આ પ્રકારની સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયા વિશિષ્ટતા અને સંવેદનશીલતામાં અન્ય તમામ પરીક્ષણો કરતાં વધી જાય છે.

ચોખા. 11. RPGA નો ઉપયોગ તમામ પ્રકારના સિફિલિસના નિદાન માટે થાય છે.

ચોખા. 12. સિફિલિસ માટે પરીક્ષણ - નિષ્ક્રિય (પરોક્ષ) હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (સ્કીમ).

ચોખા. 13. ટેસ્ટ ટ્યુબના સમગ્ર તળિયે કબજો કરતી ઊંધી છત્રીનો દેખાવ હકારાત્મક પ્રતિક્રિયા સૂચવે છે. એવા કિસ્સામાં જ્યારે લાલ રક્ત કોશિકાઓ ટેસ્ટ ટ્યુબના તળિયે મધ્યમાં કૉલમ ("બટન") માં સ્થાયી થાય છે, ત્યારે નકારાત્મક પ્રતિક્રિયા સૂચવવામાં આવે છે.

ચોખા. 14. પ્રયોગશાળા પરિસ્થિતિઓમાં RPGA પરીક્ષણ.

માઇક્રોબાયોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ

સેરોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ સાથે, ટ્રેપોનેમા પેલીડમ (માઈક્રોબાયોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ) શોધવાની પદ્ધતિ ભૂમિકા ભજવે છે. મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા, ખાસ કરીને સેરોનેગેટિવ સિફિલિસના સમયગાળા દરમિયાન, જ્યારે લોહીમાં હજી પણ કોઈ એન્ટિબોડીઝ નથી, પરંતુ તાજા પ્રાથમિક સિફિલિસ (ચેનક્રોઇડ) ના પ્રથમ અભિવ્યક્તિઓ પહેલેથી જ છે.

અભ્યાસ માટે જૈવિક સામગ્રી સખત અલ્સર (ચેન્ક્રેસ), પસ્ટ્યુલર સિફિલાઇડ્સની સામગ્રી, વીપિંગ અને ઇરોઝિવ પેપ્યુલ્સ, ચેપગ્રસ્ત લસિકા ગાંઠોના પંચર, સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી અને એમ્નિઅટિક પ્રવાહી, પીસીઆર માટે - રક્ત.

સિફિલિસ પેથોજેન્સને શોધવા માટેની શ્રેષ્ઠ પદ્ધતિ એ છે કે ડાર્ક ફિલ્ડ માઇક્રોસ્કોપમાં જૈવિક સામગ્રીની તપાસ કરવી. આ તકનીક તમને જીવંત સ્થિતિમાં ટ્રેપોનેમા પેલિડમ જોવા, તેની માળખાકીય સુવિધાઓ અને ચળવળનો અભ્યાસ કરવા અને સેપ્રોફાઇટ્સથી રોગકારક પેથોજેન્સને અલગ પાડવા માટે પરવાનગી આપે છે.

ચોખા. 15. સિફિલિસ માટે વિશ્લેષણ - ડાર્ક-ફીલ્ડ માઇક્રોસ્કોપી.

ચોખા. 16. શુષ્ક સ્મીયર્સનો અભ્યાસ કરતી વખતે, રોમનવોસ્કી-ગિમ્સા સ્ટેનિંગનો ઉપયોગ થાય છે. નિસ્તેજ ટ્રેપોનેમા સાથે ડાઘા પડે છે ગુલાબી રંગ, અન્ય તમામ પ્રકારના સ્પિરોચેટ્સ જાંબલી રંગમાં હોય છે.

ડાર્ક-ફીલ્ડ માઈક્રોસ્કોપી દ્વારા ટ્રેપોનેમા પેલીડમની તપાસ - સંપૂર્ણ માપદંડસિફિલિસનું અંતિમ નિદાન.

ચોખા. 17. બેક્ટેરિયાને ઓળખવા માટે, ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ પ્રતિક્રિયા (RIF) નો ઉપયોગ થાય છે - ટ્રેપોનેમલ ટેસ્ટ. ચોક્કસ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ, જ્યારે ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપના પ્રકાશમાં ફ્લોરોક્રોમ લેબલવાળા ચોક્કસ સીરમ સાથે જોડવામાં આવે છે, ત્યારે બેક્ટેરિયાને લીલોતરી ચમક મળે છે.

ચોખા. 18. સિફિલિસના કારક એજન્ટો લેવડીટી પદ્ધતિ (સિલ્વર ગર્ભાધાન) નો ઉપયોગ કરીને તૈયાર કરવામાં આવેલા સ્મીયર્સમાં સ્પષ્ટપણે દેખાય છે. નિસ્તેજ ટ્રેપોનેમા ચેપગ્રસ્ત પેશીઓના કોષોના પીળા રંગની પૃષ્ઠભૂમિ સામે ઘાટા રંગનો હોય છે.

ચોખા. 20. ફોટો ટ્રેપોનેમા પેલીડમની વસાહત દર્શાવે છે. બેક્ટેરિયલ સંસ્કૃતિ મેળવવી મુશ્કેલ છે. તેઓ વ્યવહારીક કૃત્રિમ પર વધતા નથી પોષક માધ્યમો. ઘોડા અને સસલાના સીરમ ધરાવતા માધ્યમો પર, વસાહતો 3-9 દિવસે દેખાય છે.

સિફિલિસ માટે પીસીઆર

આજે એક અસરકારક અને આશાસ્પદ તકનીક પોલિમરેઝ છે સાંકળ પ્રતિક્રિયા. સિફિલિસ માટે પીસીઆર તમને થોડા કલાકોમાં પરિણામ મેળવવાની મંજૂરી આપે છે, અને નિદાન માટે એકત્રિત કરવામાં આવેલી સામગ્રીમાં ઓછામાં ઓછા કેટલાક પેથોજેન્સ હાજર હોઈ શકે છે.

ચોખા. 21. સિફિલિસ માટે પીસીઆર ટ્રેપોનેમા પેલિડમમાંથી ડીએનએ અથવા તેના ટુકડાઓ શોધી શકે છે.

આ સંશોધન પદ્ધતિની સંવેદનશીલતા જૈવિક સામગ્રીમાં ટ્રેપોનેમા પેલિડમની હાજરી પર આધારિત છે અને 98.6% સુધી પહોંચે છે. આ પરીક્ષણની વિશિષ્ટતા મોટાભાગે તેના પર નિર્ભર છે યોગ્ય પસંદગીડાયગ્નોસ્ટિક્સ દરમિયાન એમ્પ્લીફિકેશન માટે લક્ષ્યો અને 100% સુધી પહોંચે છે.

જો કે, અપૂરતા અભ્યાસને કારણે તુલનાત્મક લાક્ષણિકતાઓસિફિલિસ અને પીસીઆરના નિદાન માટેની સીધી પદ્ધતિઓની સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા, રશિયન ફેડરેશનમાં રોગના નિદાન માટે આ પરીક્ષા પદ્ધતિ હજુ સુધી મંજૂર કરવામાં આવી નથી.

સિફિલિસ માટે પીસીઆર માત્ર અમુક કિસ્સાઓમાં જ હાથ ધરવામાં આવે છે, જેમ કે વધારાની પદ્ધતિડાયગ્નોસ્ટિક્સ જન્મજાત સિફિલિસ, ન્યુરોસિફિલિસ, જો HIV દર્દીઓમાં સેરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને સિફિલિસનું નિદાન કરવામાં મુશ્કેલીઓ હોય.

ચોખા. 22. પીસીઆરનો ઉપયોગ કરીને ટ્રેપોનેમા પેલીડમ ડીએનએની તપાસ કાં તો સધ્ધર બેક્ટેરિયાની હાજરી અથવા મૃત બેક્ટેરિયાના અવશેષો સૂચવે છે, પરંતુ તેમાં વધારાની નકલો બનાવવા માટે સક્ષમ રંગસૂત્ર ડીએનએના વ્યક્તિગત વિભાગો છે.

સેરોલોજીકલ સંશોધન, અથવા, અન્ય શબ્દોમાં, સેરોલોજીકલ વિશ્લેષણ, પ્રયોગશાળામાં જૈવિક સામગ્રીનો અભ્યાસ છે. આ વિશ્લેષણ તમને અભ્યાસ હેઠળના જીવતંત્રમાં અથવા નિયંત્રણ પરીક્ષણમાંથી પસાર થતા ઉત્પાદનોમાં પેથોજેનિક બેક્ટેરિયાની હાજરી નક્કી કરવા દે છે.

સેરોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક પદ્ધતિઓ

સેરા અથવા અન્ય જૈવિક પદાર્થોનો અભ્યાસ (દૂધ, પિત્ત, લાળ, આંતરડાના મ્યુકોસલ વોશિંગ્સ, તેમજ કોપ્રોમેટરિયલ્સ) ચેપી એજન્ટની રજૂઆત માટે શરીરના પ્રતિભાવનો એકદમ વિશ્વસનીય વિચાર પૂરો પાડે છે. એ નોંધવું જોઇએ કે સેરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ માત્ર ડાયગ્નોસ્ટિક મૂલ્ય ધરાવે છે, પરંતુ શરીરના રક્ષણના સ્તર, વસ્તીની પ્રતિરક્ષાની સ્થિતિ, પરિભ્રમણ વિશેની વિશ્વસનીય માહિતી પણ પ્રદાન કરે છે. વિવિધ પ્રકારોસર્વેક્ષણ કરેલ પ્રદેશમાં રોટાવાયરસ. સેરોલોજીકલ સર્વેક્ષણોના પરિણામો પ્રોફીલેક્ટીક દવાઓની એન્ટિજેનિક રચનાને ઑપ્ટિમાઇઝ કરવા અને રસીની રોગપ્રતિકારક અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે ઉપયોગમાં લેવાતી માહિતી પણ પ્રદાન કરી શકે છે.

જો કે, એ નોંધવું જોઇએ કે 1.5-2 અઠવાડિયાના અંતરાલમાં લેવામાં આવેલા જોડીવાળા લોહીના સેરાનો અભ્યાસ કરવાની જરૂરિયાત અને ઝડપી નિદાન પદ્ધતિઓની ઉપલબ્ધતા સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓના નિદાન મૂલ્યને ઘટાડે છે.

તેથી, પરંપરાગત સેરોલોજીકલ પરીક્ષણો - પૂરક ફિક્સેશન ટેસ્ટ (FFR) અને હેમેગ્ગ્લુટિનેશન ઇન્હિબિશન ટેસ્ટ (HAI) - હાલમાં ફક્ત મર્યાદિત ઉપયોગના છે. તેમ છતાં, આ પદ્ધતિઓની સરળતા, રીએજન્ટ્સની ઉપલબ્ધતા અને ઓછી કિંમત તેમને પ્રયોગશાળા પ્રેક્ટિસમાં હજુ પણ લાગુ પડે છે. RSC અને RTGA ની સેટિંગ સામાન્ય રીતે સ્વીકૃત પદ્ધતિઓ અનુસાર હાથ ધરવામાં આવે છે.

રસીકરણ પછીની પ્રતિરક્ષાનો અભ્યાસ કરવા માટે આરએસસીના ઉપયોગનું ઉદાહરણ કે. મિધાન (1989)નું કાર્ય છે. 5 મહિનાની ઉંમરના 116 બાળકોમાંથી સેરાની તપાસ કરતી વખતે, આરએસસી અનુસાર, 44% કેસોમાં વિશ્વસનીય સેરો કન્વર્ઝન નોંધવામાં આવ્યા હતા, અને ન્યુટ્રલાઇઝેશન ટેસ્ટ (PH) અને એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે (ELISA) ના પરિણામો અનુસાર - 83 માં અને અનુક્રમે 96%.

પ્રતિરક્ષા સંશોધન

RSC નો ઉપયોગ કરીને વસ્તી પ્રતિરક્ષાનો અભ્યાસ કરવા માટે, અમે કેટલાક મહિનાઓથી 80 વર્ષ અને તેથી વધુ ઉંમરના ACC ધરાવતા દર્દીઓમાંથી 1,246 સેરાની તપાસ કરી. તે દર્શાવવામાં આવ્યું હતું કે પૂરક-ફિક્સિંગ એન્ટિબોડીઝના ભૌમિતિક સરેરાશ ટાઇટર્સ 2 - 4 અને 60 વર્ષથી વધુ વય જૂથોમાં સૌથી વધુ હતા, જે સૌથી વધુ પ્રચલિતતા પર અમારા અગાઉ મેળવેલા ડેટાની પુષ્ટિ કરે છે. રોટાવાયરસ ચેપઉલ્લેખિત વય જૂથોની વ્યક્તિઓમાં.

રોટાવાયરસ વિશ્લેષણ

RTGA નો ઉપયોગ RSC કરતા વધુ વખત રોટાવાયરસ ચેપના અભ્યાસમાં થાય છે, અને નિયમ પ્રમાણે, અન્ય પ્રયોગશાળા પરીક્ષણો સાથે સંયોજનમાં. આમ, એન્ડ્રેડ જે.આર. એટ અલ. રોટાવાયરસ VP2, VP4, VP6 અને VP7 ના માળખાકીય પ્રોટીન માટે એન્ટિબોડીઝનો અભ્યાસ કરવા માટે RTGA, immunoblot, ELISA બ્લોકનો ઉપયોગ કર્યો. લેખકોના જણાવ્યા મુજબ, રોટાવાયરસ માટે એન્ટિહિમેગ્ગ્લુટિનેટિંગ એન્ટિબોડીઝ 2 થી 4 વર્ષની વયના 70-80% બાળકોમાં મળી આવી હતી.

ચોક્કસ પ્રોટીન માટે એન્ટિબોડીઝના સ્તરના આધારે, RTGA ડેટા અનુસાર, લેખકોએ વ્યક્તિઓના 4 જૂથોને ઓળખ્યા. જૂથ I અને II (60%) માં બાળકોનો સમાવેશ થાય છે ઉચ્ચ સ્તર VP4 અને VP7 માટે એન્ટિબોડીઝ અને "રોગપ્રતિકારક" તરીકે વર્ગીકૃત કરવામાં આવ્યા હતા. ગ્રુપ III (4%) માં વ્યક્તિઓનો સમાવેશ થાય છે નીચું સ્તર VP7 અને VP6 માટે એન્ટિબોડીઝ, કહેવાતા "આંશિક રીતે રોગપ્રતિકારક". જૂથ IV (36%) ના બાળકો, જેમનામાં, RTGA અનુસાર, કોઈ એન્ટિબોડીઝ મળી ન હતી, તેમને "બિન-પ્રતિકારક" તરીકે નિયુક્ત કરવામાં આવ્યા હતા અને જોખમ જૂથની રચના કરવામાં આવી હતી, કારણ કે તેમની વચ્ચે ગંભીર રોટાવાયરસ ચેપનો વિકાસ શક્ય છે. એ નોંધવું જોઈએ કે આ નિરીક્ષણમાં, RTGA અને ELISA બ્લોકના સંવેદનશીલતા સૂચકાંકો તદ્દન તુલનાત્મક હતા.

માળખાકીય પ્રોટીન VP4 નો અભ્યાસ કરવા માટે RTGA નો વારંવાર ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો છે. અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે તેની હેમાગ્ગ્લુટિનેટિંગ પ્રવૃત્તિ ખાસ કરીને એન્ટિસેરમ દ્વારા અટકાવવામાં આવે છે, ત્યાંથી પુષ્ટિ થાય છે કે VP4 એ રોટાવાયરસનું હેમાગ્ગ્લુટિનિન છે. સમાન માહિતી અગાઉ એમ. એઝેકીલ (1995) દ્વારા પ્રકાશિત કરવામાં આવી હતી.

આમ, પ્રસ્તુત કાર્યો દર્શાવે છે કે RSC અને RTGA નો ઉપયોગ હજુ પણ રોટાવાયરસ ચેપના અભ્યાસમાં થાય છે, જો કે, આ પદ્ધતિઓ સહાયક પ્રકૃતિની છે અને અન્ય પરીક્ષણો દ્વારા ડુપ્લિકેટ થવી જોઈએ.

તટસ્થતા પરીક્ષણો

નિષ્ક્રિયકરણ પ્રતિક્રિયા એ માનવ અથવા પ્રાણીની રોગપ્રતિકારક શક્તિની વાયરસ પ્રજનનને નિષ્ક્રિય કરવાની ક્ષમતા પર આધારિત છે અને ત્યાંથી આ ઘટના સાથે સંકળાયેલા અભિવ્યક્તિઓને અટકાવે છે. જૈવિક મોડેલના આધારે, આ અભિવ્યક્તિઓ આ હોઈ શકે છે: ચોક્કસ ક્લિનિક સાથે રોગનો વિકાસ, વાયરસનું પ્રજનન અને પ્રકાશન, ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝનું ઉત્પાદન, તેમજ સાયટોપેથિક અસરનો દેખાવ અથવા ઉપયોગ કરતી વખતે ફોલ્લીઓનું નિર્માણ. કોષ સંસ્કૃતિ.

મેક્રોબાયોલોજીકલ મોડલ્સ હાલમાં મુખ્યત્વે પશુ ચિકિત્સામાં ઉપયોગમાં લેવાય છે; માનવીઓમાં વાયરસની શોધ મોટા ભાગના કિસ્સાઓમાં કોષ સંસ્કૃતિઓ પર કરવામાં આવે છે, પ્રાથમિક અને ટ્રાન્સફ્યુઝ બંને. મૂળભૂત ડિઝાઇન યોજના અનુસાર PH પદ્ધતિઓને બે જૂથોમાં વહેંચવામાં આવે છે. પદ્ધતિઓના એક જૂથમાં, અનડિલ્યુટેડ સીરમને વાયરસના સીરીયલ ડિલ્યુશન સાથે જોડવામાં આવે છે, અન્યમાં, સીરમ ડિલ્યુશનને વાયરસની સતત માત્રા સાથે પરીક્ષણ કરવામાં આવે છે. નિષ્ક્રિયકરણ પ્રતિક્રિયા સ્થાપિત કરવા માટે, એક રોગકારક જે ઉચ્ચારણ સાયટોપેથિક અસરનું કારણ બને છે અથવા જૈવિક મોડેલમાં સઘન રીતે પુનઃઉત્પાદન કરે છે તે વધુ સારું છે.

જો કે, રોટાવાયરસ, કમનસીબે, નબળી સાયટોપેથિક અસર ધરાવે છે, જેમ કે બી. વેબર (1992)ના નેતૃત્વમાં સંશોધકો દ્વારા ખાતરીપૂર્વક દર્શાવવામાં આવ્યું છે. CPD ના નિયંત્રણ હેઠળના MA-104 કોશિકાઓ પર વાયરસ આઇસોલેશનની શાસ્ત્રીય પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને તીવ્ર શ્વાસોચ્છવાસના રોગવાળા બાળકોના 121 સ્ટૂલ નમૂનાઓના અભ્યાસમાં માત્ર 4 સકારાત્મક કેસો (3.3%) બહાર આવ્યા છે, જ્યારે ઉપયોગ આધુનિક પદ્ધતિઓરોટાવાયરસની શોધ (ELISA, PCR, EF in PAGE) આ આંકડો વધારીને 54.4% કરી શકે છે. પરિણામે, PH ની સંવેદનશીલતા વધારવા માટે, વધારાની પદ્ધતિસરની તકનીકોની આવશ્યકતા છે જે વાયરસના ઘટાડાનું વિઝ્યુલાઇઝેશન સરળ બનાવે છે, જેમાં નીચેનાનો સમાવેશ થાય છે: કિરણોત્સર્ગી અથવા ઇમ્યુનોફ્લોરોસન્ટ લેબલ્સ, સ્પોટ રચના, ઇમ્યુનોપેરોક્સિડેઝ સ્ટેનિંગ, વગેરે. એ નોંધવું જોઇએ કે સ્તર નક્કી કરવા માટે ખૂબ જ સિદ્ધાંત. વાયરસ-તટસ્થ એન્ટિબોડીઝ સમાન છે શાસ્ત્રીય પદ્ધતિ PH, ફક્ત રીઝોલ્યુશનની પદ્ધતિમાં તેનાથી અલગ છે, એટલે કે, સીરમની વાયરસ-તટસ્થ પ્રવૃત્તિનું વિઝ્યુલાઇઝેશન. આ કિસ્સામાં, સીરમની પ્રવૃત્તિ વાયરસના ચેપી ગુણધર્મોના અભિવ્યક્તિઓને દબાવવાની તેની ક્ષમતા દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે.

હાલમાં, મોટાભાગના અભ્યાસો રોટાવાયરસ માટે વાયરસ-તટસ્થ એન્ટિબોડીઝની માત્રાને માપવા માટે બે પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરે છે. તેમાંથી એક વ્યક્તિગત વાયરસ-સંક્રમિત કોષોની સંખ્યા (પ્લાયક પદ્ધતિ)ની ગણતરી પર આધારિત છે જે ખાસ કરીને ફ્લોરોસન્ટ-સંયુક્ત એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાય છે. અન્ય પરીક્ષણમાં, એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસે પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને વાયરલ એન્ટિજેનના ઉત્પાદનમાં ઘટાડો દ્વારા વાયરસ તટસ્થતાનું સ્તર નક્કી કરવામાં આવે છે. બંને પદ્ધતિઓના તુલનાત્મક અભ્યાસે ELISA સૂચકાંકો અને રોટાવાયરસ સેરોટાઇપના દરેક પ્રોટોટાઇપ સ્ટ્રેઇન માટે પ્લાય-ફોર્મિંગ એકમોની સંખ્યા વચ્ચે રેખીય સંબંધ દર્શાવ્યો: Wa, DS-1, P, VA-70. પ્રાપ્ત ડેટા સીરમના મંદનને સરળતાથી નિર્ધારિત કરવાનું શક્ય બનાવે છે જે ચેપી વાયરસના 60% નિષ્ક્રિયકરણની ખાતરી કરે છે (એન્ટિબોડી ટાઇટરને તટસ્થ કરવું). તે બહાર આવ્યું છે કે બંને પદ્ધતિઓ દ્વારા સામગ્રીનું પરીક્ષણ કરતી વખતે એન્ટિબોડી ટાઇટર્સ સમાન હોય છે અને બંને પરીક્ષણો પરિણામોની પ્રજનનક્ષમતામાં ભિન્ન નથી. લેખકોના મતે, ફ્લોરોસીન સાથે લેબલવાળી એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ કરવાની પદ્ધતિના કેટલાક ફાયદા પરિણામો (ઓટોમેટેડ રજિસ્ટ્રેશન) રેકોર્ડ કરવામાં વધુ ઉદ્દેશ્યતા અને ઓછી શ્રમ તીવ્રતા છે.

વાયરસ-તટસ્થ એન્ટિબોડીઝના ટાઇટર્સ માપવા માટે, મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ સાથે ELISA ને અવરોધિત કરીને સંશોધિત PH નો ઉપયોગ પણ થાય છે.

• કુદરતી ચેપ અને રસીકરણ દરમિયાન વાયરસ તટસ્થ એન્ટિબોડીઝ (VNA) ના ઉત્પાદનની તીવ્રતાનો અભ્યાસ;
• રોટાવાયરસના વિવિધ માળખાકીય પ્રોટીન માટે VNA ની રચના;
• કુદરતી ચેપ સામે રક્ષણમાં રક્ત સીરમ અને લાળ અને આંતરડાના મ્યુકોસાના સ્ત્રાવના એન્ટિબોડીઝમાં VNA ની ભૂમિકાનું મૂલ્યાંકન (વોર્ડ આર. એટ અલ., 1990, 1992, 1993, 1995, 1997).

નિષ્કર્ષમાં, તેના પર ભાર મૂકવો આવશ્યક છે કે તેના વિવિધ ફેરફારોમાં તટસ્થતા પ્રતિક્રિયા હજુ પણ પ્રાયોગિક અને બંને રીતે વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે. ક્લિનિકલ અભ્યાસઅને, કર્યા ઉચ્ચ સંવેદનશીલતાઅને વિશિષ્ટતા, અન્ય તમામ સેરોલોજીકલ પદ્ધતિઓ માટે માનક તરીકે સેવા આપે છે.

વરસાદનું વિશ્લેષણ

વરસાદના પરીક્ષણો ઓસ્મોટિક પ્રક્રિયાઓ દ્વારા અથવા પ્રભાવ હેઠળ વાયરલ એન્ટિજેન્સ સાથે સીરમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા પર આધારિત છે. ઇલેક્ટ્રિક ક્ષેત્રજેલ માધ્યમ અથવા અન્ય પ્રકારના વાહકમાં. આ પદ્ધતિઓમાંની એક કાઉન્ટર ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસ (CIEF) ની પ્રતિક્રિયા છે. લેખકોએ 4% પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલના ઉમેરા સાથે 7% એગ્રોઝમાં VIEF પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને માનવ રોટાવાયરસ માટે એન્ટિબોડીઝની હાજરી માટે તંદુરસ્ત અને બીમાર પુખ્ત વયના લોકો અને રોટાવાયરસ ઝાડાવાળા બાળકોના લોહીના સેરા તેમજ ચોક્કસ ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન તૈયારીઓની તપાસ કરી. તે બહાર આવ્યું છે કે આરવી માટે એન્ટિબોડીઝ ખૂબ વ્યાપક રીતે ફેલાય છે અને તે માંદા પુખ્ત વયના લોકો અને બાળકોમાં અનુક્રમે 90.2-87.7% અને 78.4% માં જોવા મળે છે. તંદુરસ્ત બાળકો 1 વર્ષથી ઓછી ઉંમરના. ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનની તમામ 32 શ્રેણીમાં 1:4-1:128 ના ટાઇટર્સમાં RV માટે એન્ટિબોડીઝ હોય છે. લેખકો અનુસાર, પદ્ધતિ વસ્તી રોગપ્રતિકારકતાના અભ્યાસ માટે યોગ્ય છે.

રેડિયો ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન

અન્ય વરસાદની તકનીક રેડિયોઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન છે. લેખકોએ આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ પ્રાથમિક રોટાવાયરસ ચેપ દરમિયાન માળખાકીય અને બિન-માળખાકીય પ્રોટીન પ્રત્યેના રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવનો અભ્યાસ કરવા માટે કર્યો હતો અને દર્શાવ્યું હતું કે રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવ VP7 કરતાં VP4 માટે વધુ સ્પષ્ટ હતો.

નવજાત શિશુમાં ટેટ્રાવેલેન્ટ રિસોર્ટન્ટ રસીના ઉપયોગ માટે સીરમ અને સિક્રેટરી ઇમ્યુનોલોજિકલ પ્રતિભાવનો અભ્યાસ કરતી વખતે, ELISA અને PH સાથે રેડિયોઇમ્યુનોલોજિકલ સંશોધન તકનીકોનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. એવું દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે સીરમમાં રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવ સંચાલિત એન્ટિજેનની માત્રા પર આધાર રાખે છે; લાળમાં એન્ટિબોડીઝની શોધ માટે, લેખકો માતાના દૂધના વપરાશ સાથે તેમના દેખાવને સમજાવે છે.

અદ્યતન વૈજ્ઞાનિક સંશોધનમાં પણ રેડિયો ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ થાય છે. આમ, જે. ટોસરે જીનોમ સ્ટ્રક્ચરમાં VP6 પ્રોટીનની ટોપોલોજીનો અભ્યાસ કરવા માટે આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કર્યો અને સૂચવ્યું કે VP 6 આંતરિક કેપ્સિડ ચેનલોની રચનામાં સામેલ છે.

1994 માં અન્ય સંશોધકોએ પણ રોટાવાયરસ ચેપ દરમિયાન રોગપ્રતિકારક ફેરફારોનો અભ્યાસ કરવા માટે રેડિયો ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન પદ્ધતિનો ઉપયોગ કર્યો હતો. લેખકોએ દર્શાવ્યું હતું કે તીવ્ર સમયગાળામાં, મુખ્યત્વે IgA થી VP2 અને VP6 નોંધવામાં આવે છે, જ્યારે સ્વસ્થતાના સમયગાળા દરમિયાન માત્ર VP2 જ નહીં, પરંતુ અન્ય માળખાકીય અને બિન-માળખાકીય પ્રોટીનમાં પણ સિક્રેટરી એન્ટિબોડીઝ (IgA) ના ઉત્પાદનની તીવ્રતામાં ઘટાડો થયો હતો. . પાછળથી, રેડિયો ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને સમાન ડેટા મેળવવામાં આવ્યો હતો. લેખકોએ દર્શાવ્યું હતું કે VP4 અને VP7 ઉપરાંત, VP2, VP6 અને NSP2 પણ રોગપ્રતિકારક પ્રક્રિયામાં સામેલ છે.

આમ, કુદરતી રોટાવાયરસ ચેપ દરમિયાન રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવનો અભ્યાસ કરવા નિદાન હેતુઓ માટે રોગપ્રતિકારક શક્તિનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે.

તાજેતરના વર્ષોમાં, ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશનને રેડિયો ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન પદ્ધતિ દ્વારા બદલવામાં આવ્યું છે, જેનો ઉપયોગ રસીકરણ પછી અને આરવી ચેપ દરમિયાન ચેપી રોગપ્રતિકારક શક્તિનું મૂલ્યાંકન કરવા અને સુંદર સંશોધન વિકાસ માટે થાય છે.

હાઇબ્રિડાઇઝેશન પદ્ધતિઓ

રોટાવાયરસ માટે એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટે ઇમ્યુનોબ્લોટ પદ્ધતિનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. રોટાવાયરસ ચેપના નિદાનમાં વેસ્ટર્ન બ્લૉટના ઉપયોગનું ઉદાહરણ એચ. ઉશીજીમા (1989)નું કાર્ય છે, જેમણે ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ કરીને, એસીસી ધરાવતા 21 બાળકોમાં આરવીના માળખાકીય પ્રોટીન માટે એન્ટિબોડીઝની વિશિષ્ટતા દર્શાવી હતી, તેમજ ચેપ વિનાના બાળકોમાં આ પ્રોટીન માટે IgA અને IgG વર્ગોના કોપ્રોએન્ટીબોડીઝનું સ્તર. લેખકોએ સૂચવ્યું હતું કે ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ જોડી રક્ત સેરાની તપાસ કર્યા વિના કોપ્રોન્ટીબોડીઝના એક નમૂનાનો ઉપયોગ કરીને રોગનું નિદાન સ્થાપિત કરવાનું શક્ય બનાવે છે. VP1, VP2, VP4, VP6 અને VP7 માટે એન્ટિબોડીઝનું સ્તર નક્કી કરવા માટે વેસ્ટર્ન બ્લૉટનો ઉપયોગ કરવાની શક્યતા પાવલોવ I. et al. (1991) દ્વારા દર્શાવવામાં આવી હતી. લેખકોએ રોટાવાયરસ સ્ટ્રેન્સ SA-11, DS-1, Wan Ito માટે એન્ટિબોડીઝની હાજરી માટે મનુષ્યો અને પ્રાણીઓના લોહીના સેરાની તપાસ કરી અને નિષ્કર્ષ પર આવ્યા કે ક્લિનિકલ પ્રેક્ટિસમાં રોગપ્રતિકારક શક્તિનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે વેસ્ટર્ન બ્લૉટનો સફળતાપૂર્વક ઉપયોગ કરી શકાય છે.

એવું માનવામાં આવે છે કે ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ રોટાવાયરસ ચેપના નિદાનની પુષ્ટિ કરવા માટે એક કોપ્રોન્ટીબોડી નમૂનામાંથી જોડી સેરાનો ઉપયોગ કર્યા વિના કરી શકાય છે.

RTGA અને ELISA સાથે, ઇમ્યુનોબ્લોટનો ઉપયોગ વસ્તીની પ્રતિરક્ષાનો અભ્યાસ કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. VP2, VP4, VP6 અને VP7 માટે બિન-રોગપ્રતિકારક વ્યક્તિઓનું એક જૂથ મળી આવ્યું છે, જે એક જોખમ જૂથનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે જેને મુખ્યત્વે સક્રિય અને નિષ્ક્રિય રોગપ્રતિરક્ષા દ્વારા રક્ષણની જરૂર હોય છે (Andrade J. P. et al., 1996).

કુદરતી આરવી ચેપની પ્રક્રિયામાં સેરોલોજીકલ ફેરફારોના અભ્યાસમાં ઇમ્યુનોબ્લોટિંગનો ઉપયોગ બેગ્યુ આર. એટ અલ દ્વારા પણ નોંધવામાં આવ્યો છે. (1998). લેખકોએ પુષ્ટિ કરી કે VP2 અને VP6 ના એન્ટિબોડીઝ મોટાભાગે ચેપ સામે રોગપ્રતિકારક પ્રતિભાવમાં ભાગ લે છે, અને VP7 અને VP4 ના એન્ટિબોડીઝ ઓછી વાર.

ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ વિશ્લેષણ

રોટાવાયરસથી સંક્રમિત કોષો પર ટેસ્ટ સેરાને ટાઇટ્રેટ કરવા માટે ફ્લોરોક્રોમ સાથે લેબલવાળી એન્ટિ-પ્રજાતિ સેરાનો ઉપયોગ કરીને પરોક્ષ ઇમ્યુનોફ્લોરોસન્ટ પદ્ધતિનો ઉપયોગ થાય છે. પ્રતિક્રિયા લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ અને હોમોલોગસ એન્ટિજેનની ચોક્કસ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા પર આધારિત છે, અને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપનો ઉપયોગ કરીને સરળતાથી શોધી શકાય છે.

આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને, લેખકોએ દક્ષિણ અમેરિકન ભારતીયોના બે જૂથોનો સેરોલોજિકલ સર્વે હાથ ધર્યો અને જાણવા મળ્યું ઉચ્ચ ટકાબંને જૂથોમાં સેરોપોઝિટિવ વ્યક્તિઓ: ELISA અનુસાર 67.8 અને 77.4% અને IFM પરિણામો અનુસાર અનુક્રમે 45.5 અને 56.7%.

IFM નો ઉપયોગ કરીને નાળના રક્તમાં RV જૂથ C માટે એન્ટિબોડીઝના સ્તરની તપાસ કરતા અન્ય અભ્યાસમાં દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે બાળજન્મની ઉંમરની 30% સ્ત્રીઓમાં આ એન્ટિબોડીઝ હતી, જે અગાઉના ચેપને સૂચવે છે.

રોટાવાયરસ ચેપના સેરોલોજીકલ નિદાનમાં PH સાથે હાલમાં એન્ઝાઇમ ઇમ્યુનોસેનો ઉપયોગ અત્યંત વ્યાપકપણે થાય છે. એન્ઝાઇમ-લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ અથવા એન્ટિજેનના ઉપયોગ પર આધારિત આ પદ્ધતિ, તેના અમલીકરણની સરળતા અને ખર્ચ-અસરકારકતાને કારણે, રોટાવાયરસ ચેપના સેરોલોજીકલ નિદાન માટે સૌથી સ્વીકાર્ય અને આશાસ્પદ છે. પદ્ધતિ વસ્તીના સામૂહિક સીરોપીડેમિક સર્વેક્ષણો હાથ ધરવાનું, રસીની રોગપ્રતિકારક અને રોગચાળાની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવાનું અને વિવિધ જૈવિક પ્રવાહીમાં વિવિધ વર્ગોના એન્ટિબોડીઝની રક્ષણાત્મક ભૂમિકાનો અભ્યાસ કરવાનું શક્ય બનાવે છે. માનવ શરીર, તેમજ રોટાવાયરસ ચેપનું સેરોલોજીકલ નિદાન હાથ ધરે છે.

આર. એઝેરેડો (1989) દ્વારા ELISA નો ઉપયોગ કરીને અસંખ્ય અભ્યાસ હાથ ધરવામાં આવ્યા હતા, જે દર્શાવે છે કે સ્થાપિત રોટાવાયરસ ઈટીઓલોજીના તીવ્ર શ્વસન રોગ ધરાવતા દર્દીઓની સંખ્યા સેરોલોજીકલ પરીક્ષાના પરિણામો અનુસાર તેમના ચેપના સ્તર કરતાં નોંધપાત્ર રીતે ઓછી હતી. આ ડેટા દર્શાવે છે કે રોટાવાયરસ ચેપના ઘણા ક્લિનિકલ કેસોનું નિદાન મળમાં આરવીની તપાસ દ્વારા કરવામાં આવતું નથી. વધુ સંશોધનરોટાવાયરસ ચેપના વ્યાપનો અભ્યાસ કરવા માટે આ ધારણાની પુષ્ટિ થઈ. સીરોપીડેમિયોલોજિકલ સર્વેક્ષણો હાથ ધરતી વખતે, એવું જાણવા મળ્યું હતું કે 50-70% વસ્તીમાં એન્ટિબોડીઝનું ઉચ્ચ સ્તર હતું, જે માનવ વસ્તીમાં આરવીનું વ્યાપક પરિભ્રમણ સૂચવે છે.

ELISA ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનના વિવિધ વર્ગો સાથે જોડાયેલા એન્ટિબોડીઝના સ્તરની ગતિશીલતા નક્કી કરવા માટે વધુ મોટી તકો ખોલે છે. આમ, 1989 માં પદ્ધતિના લેખકો અનુસાર, તેઓ દાવો કરે છે કે રસીકરણ પ્રક્રિયા દરમિયાન, રક્તમાં આરવી માટે એન્ટિબોડીઝમાં નોંધપાત્ર વધારો 83-96% માં જોવા મળ્યો હતો. IgA અને IgG વર્ગોના એન્ટિ-રોટાવાયરસ એન્ટિબોડીઝ અનુક્રમે 67.6 અને 70.0% ફોલ્લીઓ ઘટાડીને ELISA અને PH શોધવામાં સમાન રીતે સારા હતા. 53 અને 44% બાળકોમાં અનુક્રમે ELISA અને RSK પદ્ધતિઓ દ્વારા IgM વર્ગના એન્ટિબોડીઝનું સેરોકન્વર્ઝન જોવા મળ્યું હતું. વિવિધ વર્ગોના એન્ટિબોડીઝના ઉત્પાદનની તીવ્રતાના વિશ્લેષણના પરિણામોના આધારે, લેખકોએ તારણ કાઢ્યું હતું કે રસીકરણ પછી સેરોકન્વર્ઝન શોધવા માટેની સૌથી અસરકારક, સરળ અને ઝડપી પદ્ધતિ એ ELISA નો ઉપયોગ કરીને IgA એન્ટિબોડીઝ શોધવાની પદ્ધતિ છે.

આર. બિશપ (1996) ના કાર્યમાં આ નિષ્કર્ષની પુષ્ટિ કરવામાં આવી હતી, જેમાં સૂચવવામાં આવ્યું હતું કે નિદાન કરાયેલ આરવી ચેપ સાથે 68 માતા-બાળક જોડીના સર્વેક્ષણના પરિણામો અનુસાર, તે દર્શાવવામાં આવ્યું હતું કે કોપ્રોમેટરીયલ્સમાં ELISA નો ઉપયોગ કરીને IgA એન્ટિબોડીઝની તપાસ સેવા આપે છે. તબીબી રીતે નોંધપાત્ર અને એસિમ્પટમેટિક ચેપ બંને સૌથી સંવેદનશીલ માર્કર તરીકે. 1998 માં જે. કોલોમિના દ્વારા ગંભીર આરવી ઝાડાવાળા બાળકોની તપાસ કરતી વખતે સમાન પરિણામો પ્રાપ્ત થયા હતા.

જો કે, સેરોકન્વર્ઝન્સની તીવ્રતાનો અભ્યાસ કરવા માટે, પેર કરેલ સેરાનો અભ્યાસ કરવો જરૂરી છે, જે ડાયગ્નોસ્ટિક પ્રક્રિયાને નોંધપાત્ર રીતે લંબાવે છે. તે જ સમયે, તે જાણીતું છે કે આઇજીએમ વર્ગના એન્ટિબોડીઝનો દેખાવ ચેપી પ્રક્રિયાની શરૂઆતનો પુરાવો છે. ELISA અને RSK પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને રોટાવાયરસ ચેપવાળા દર્દીઓની તપાસ દરમિયાન મેળવેલા અમારા ડેટા અનુસાર, તે બહાર આવ્યું છે કે ELISA ના પરિણામો અનુસાર, તમામ તપાસ કરાયેલ વ્યક્તિઓ રક્ત IgMઆરવી માટે એન્ટિબોડીઝ, જ્યારે આરએસસી ડેટા અનુસાર - માત્ર 77% (આર

તાજેતરના વર્ષોમાં, જનીન- અને સેરોટાઇપ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવાની સંભાવનાની અનુભૂતિ સાથે, ELISA એ રોટાવાયરસ ચેપનો અભ્યાસ કરવા માટે ખરેખર સાર્વત્રિક પદ્ધતિ બની ગઈ છે, જેનો ઉપયોગ થાય છે:

• RV ના વ્યક્તિગત માળખાકીય અને બિન-માળખાકીય પ્રોટીન માટે IgA, M, G વર્ગોના એન્ટિબોડીઝના ઉત્પાદનનો અભ્યાસ કરતી વખતે;
• રોગપ્રતિકારક અસરકારકતાના મૂલ્યાંકનમાં વિવિધ પ્રકારોરસીઓ: એટેન્યુએટેડ, ઠંડા-અનુકૂલિત, ડીએનએ, રિસોર્ટન્ટ;
• કુદરતી ચેપની સ્થિતિમાં અને રોગપ્રતિરક્ષા દરમિયાન શરીરના વિવિધ જૈવિક પ્રવાહીમાં એન્ટિબોડીઝના ઉત્પાદનનો અભ્યાસ કરતી વખતે.

આમ, પ્રસ્તુત ડેટામાંથી નીચે મુજબ, રોટાવાયરસ ચેપના રોગપ્રતિકારક પાસાઓનો વ્યાપક શ્રેણીનો ઉપયોગ કરીને અભ્યાસ કરવામાં આવે છે. પ્રયોગશાળા પદ્ધતિઓ. પરિણામે, પસંદગી શ્રેષ્ઠ પદ્ધતિસંશોધન, તેના રિઝોલ્યુશન, આર્થિક અને સમયના ખર્ચને ધ્યાનમાં લેતા, તે ખૂબ જટિલ છે અને તે સંશોધકોની સામેના કાર્યો તેમજ પ્રયોગશાળાના સાધનો પર આધારિત છે. અને તેમ છતાં, વિવિધ પદ્ધતિઓમાંથી, અમારા મતે, બે પર પ્રકાશ પાડવો જોઈએ - સેલ સંસ્કૃતિમાં તટસ્થતાની પ્રતિક્રિયા અને એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે - જે ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનના વિવિધ વર્ગોને એન્ટિબોડીઝનો અભ્યાસ પૂરો પાડે છે. વ્યાપક પ્રેક્ટિસમાં ઉપયોગ માટે આ પદ્ધતિઓનું વિશિષ્ટ વચન રોટાવાયરસ ચેપના ઝડપી નિદાનની અનુભૂતિની શક્યતા દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે.

સેરોલોજિકલ સ્ટડીઝ(લેટિન સીરમ સીરમ + ગ્રીક લોગો સિદ્ધાંત) - ઇમ્યુનોલોજીની પદ્ધતિઓ કે જે સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝને ઓળખવા માટે માનવ અથવા પ્રાણીના રક્તના વિશિષ્ટ ગુણધર્મોનો અભ્યાસ કરે છે.

એસ.ની શરૂઆત અને. છેલ્લી સદીના અંતમાં નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું, જ્યારે તે સ્થાપિત થયું હતું કે એન્ટિજેન સાથે એન્ટિબોડીનું સંયોજન (જુઓ એન્ટિજેન - એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયા) દ્રશ્ય અવલોકન માટે સુલભ અસંખ્ય ઘટનાઓ સાથે છે - એગ્લુટિનેશન (જુઓ), વરસાદ (જુઓ. ) અથવા લિસિસ. હવે એન્ટિજેન્સ (જુઓ) અથવા એન્ટિબોડીઝ (જુઓ) ની ચોક્કસ માન્યતાની શક્યતા છે, જો આ ઘટકોમાંથી એક જાણીતું હોય.

1897 માં, એફ. વિડાલે અહેવાલ આપ્યો કે ટાઇફોઇડ તાવ ધરાવતા દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં ટાઇફોઇડ બેક્ટેરિયા પસંદ કરવામાં આવે છે અને તેથી આ પ્રતિક્રિયા (વિડાલ પ્રતિક્રિયા જુઓ) પ્રયોગશાળામાં વાપરી શકાય છે. ટાઇફોઇડ તાવનું નિદાન. તે જ વર્ષે, તે દર્શાવવામાં આવ્યું હતું કે પ્લેગ, ટાઈફોઈડ અને કોલેરા બેક્ટેરિયાની સંસ્કૃતિના ફિલ્ટ્રેટ્સ, જ્યારે સંબંધિત રોગપ્રતિકારક સેરા સાથે જોડાય છે, ત્યારે ફ્લેક્સ અથવા અવક્ષેપ બનાવે છે.

વરસાદની પ્રતિક્રિયા કોઈપણ પ્રોટીન એન્ટિજેન્સની શોધ માટે યોગ્ય હોવાનું બહાર આવ્યું છે. 1900-1901 માં કે. લેન્ડસ્ટેઇનરને જાણવા મળ્યું કે માનવ એરિથ્રોસાઇટ્સમાં બે અલગ-અલગ એન્ટિજેન્સ (A અને B) હોય છે, અને લોહીના સીરમમાં બે એગ્ગ્લુટિનિન (a અને P) હોય છે, જે રક્ત જૂથો નક્કી કરવા માટે હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાના ઉપયોગમાં ફાળો આપે છે (જુઓ).

રક્ત જૂથ અને આરએચ પરિબળ નક્કી કરવા માટેના એગ્લુટિનેશન ટેસ્ટનો ઉપયોગ પ્રસૂતિ પ્રેક્ટિસમાં, રક્ત તબદિલી અને પેશી પ્રત્યારોપણ માટે થાય છે. આરએચ પરિબળ (જુઓ) સામે એન્ટિબોડીઝ અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ છે; તેઓ આરએચ-પોઝિટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સ સાથે સીધી પ્રતિક્રિયા કરવા સક્ષમ નથી, તેથી, તેમને શોધવા માટે, કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે (જુઓ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા), અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝની શોધના આધારે. એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સેરા. પરીક્ષણ રક્ત સીરમ જાણીતી વિશિષ્ટતાના લાલ રક્ત કોશિકાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે, ત્યારબાદ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ IgG ( પરોક્ષ પ્રતિક્રિયાકોમ્બ્સ). અભ્યાસ હેઠળ લોહીના સીરમના અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝના ફેબ ટુકડાઓ એરિથ્રોસાઇટ્સ સાથે જોડાય છે, અને એન્ટિ-આઇજીજી એન્ટિબોડીઝ આ એન્ટિબોડીઝના મુક્ત Fc ટુકડાઓ સાથે જોડાય છે, અને એરિથ્રોસાઇટ્સનું એકત્રીકરણ થાય છે. હેમોલિટીક એનિમિયાના નિદાન માટે, ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ થાય છે આવા દર્દીઓના શરીરમાં, લાલ રક્ત કોશિકાઓ આરએચ પરિબળ સામે લોહીમાં ફરતા એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાય છે. તેમને ઓળખવા માટે, દર્દી પાસેથી લેવામાં આવેલા લાલ રક્ત કોશિકાઓમાં એન્ટિ-આઇજીજી એન્ટિબોડીઝ ઉમેરવામાં આવે છે. લાલ રક્ત કોશિકાઓના એગ્ગ્લુટિનેશનનો દેખાવ રોગના નિદાનની પુષ્ટિ કરે છે.

હિમેગ્ગ્લુટિનેશન અવરોધક પ્રતિક્રિયા - એચઆરઆઈ (હેમાગ્ગ્લુટિનેશન જુઓ) - વાયરસ દ્વારા એરિથ્રોસાઇટ્સના હિમેગ્ગ્લુટિનેશનના રોગપ્રતિકારક સીરમ દ્વારા નિવારણ (નિરોધ) ની ઘટના પર આધારિત છે. વાયરલ હેમાગ્ગ્લુટિનેશનની ઘટના સેરોલ નથી. પ્રતિક્રિયા અને લાલ રક્ત કોશિકા રીસેપ્ટર્સ સાથે વાયરસના સંયોજનના પરિણામે થાય છે, જો કે, HAI એ એક સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયા છે જેનો ઉપયોગ એન્ટિવાયરલ એન્ટિબોડીઝને શોધવા અને ટાઇટ્રેટ કરવા માટે થાય છે. ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, ઓરી, રૂબેલા, ગાલપચોળિયાં, ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ અને અન્ય વાયરલ ચેપના સેરોડાયગ્નોસિસ માટેની મુખ્ય પદ્ધતિ આરટીજીએ છે, જેનાં કારક એજન્ટો હેમેગ્ગ્લુટિનેટિંગ ગુણધર્મો ધરાવે છે.

નિષ્ક્રિય, અથવા પરોક્ષ, હેમેગ્ગ્લુટિનેશનની પ્રતિક્રિયા. તે લાલ રક્ત કોશિકાઓ અથવા તટસ્થ કૃત્રિમ સામગ્રી (ઉદાહરણ તરીકે, લેટેક્ષ કણો) નો ઉપયોગ કરે છે, જેની સપાટી પર એન્ટિજેન્સ (બેક્ટેરિયલ, વાઇરલ, પેશી) અથવા એન્ટિબોડીઝ શોષાય છે (બોયડેન પ્રતિક્રિયા જુઓ). તેમનું એગ્લુટિનેશન યોગ્ય સેરા અથવા એન્ટિજેન્સના ઉમેરા સાથે થાય છે. એન્ટિજેન્સ સાથે સંવેદનશીલ લાલ રક્ત કોશિકાઓને એન્ટિજેનિક એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિકમ કહેવામાં આવે છે અને તેનો ઉપયોગ એન્ટિબોડીઝને શોધવા અને ટાઇટ્રેટ કરવા માટે થાય છે. એન્ટિબોડીઝ સાથે સંવેદનશીલ લાલ રક્ત કોશિકાઓને ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સ (જુઓ) કહેવામાં આવે છે અને તેનો ઉપયોગ એન્ટિજેન્સ શોધવા માટે થાય છે:

નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ બેક્ટેરિયા (ટાઇફોઇડ અને પેરાટાઇફોઇડ તાવ, મરડો, બ્રુસેલોસિસ, પ્લેગ, કોલેરા, વગેરે), પ્રોટોઝોઆ (મેલેરિયા) અને વાયરસ (ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, એડેનોવાયરલ ચેપ,) દ્વારા થતા રોગોના નિદાન માટે થાય છે. ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ, ક્રિમિઅન હેમોરહેજિક તાવ, વગેરે). નિષ્ક્રિય હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાની સંવેદનશીલતા એરેનોવાયરલ રોગો (જુઓ) માટે વાયરસ અલગ કરવાની પદ્ધતિથી હલકી ગુણવત્તાવાળા નથી, ખાસ કરીને લિમ્ફોસાયટીક કોરીયોમેનિન્જાઇટિસ માટે. લિમ્ફોસાયટીક કોરીયોમેનિન્જાઇટિસના વાયરલ એન્ટિજેનને વાઇરસ કેરિયર્સ (ઘર ઉંદર) માં નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયામાં શોધી કાઢવામાં આવે છે જેમાં અર્ક કરાયેલા અંગોના સસ્પેન્શન સાથે હજારો વખત પાતળું કરવામાં આવે છે. સૅલ્મોનેલોસિસના કિસ્સામાં, નિષ્ક્રિય હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા 1 ગ્રામ મળમાં કેટલાક સો માઇક્રોબાયલ બોડીની સાંદ્રતામાં બેક્ટેરિયા શોધી કાઢે છે; જ્યારે 1 ગ્રામ સામગ્રીમાં ઓછામાં ઓછા 500 માઇક્રોબાયલ બોડી હોય ત્યારે ખાદ્ય ઉત્પાદનોમાં મરડોના બેક્ટેરિયા શોધી કાઢવામાં આવે છે.

નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ વાયરલ હેપેટાઇટિસ બીના નિદાન અને નિવારણમાં થાય છે. સોવિયેત યુનિયનમાં, તીવ્ર હિપેટાઇટિસ બી ધરાવતા દર્દીઓના લોહીમાં HBs એન્ટિજેન (ઓસ્ટ્રેલિયન એન્ટિજેન જુઓ) શોધવા માટે, એક ડાયગ્નોસ્ટિકમ ઉત્પન્ન થાય છે, જે ચિકન એરિથ્રોસાઇટ્સ છે. HBs એન્ટિજેન સામે બકરી ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન સાથે સંવેદનશીલ. ડાયગ્નોસ્ટિકમના એક ટીપાને તપાસવામાં આવતા લોકોના લોહીના સીરમની સમાન માત્રા સાથે જોડવામાં આવે છે, અને જો તેમાં HBs એન્ટિજેન હાજર હોય, તો એગ્લુટિનેશન થાય છે. પ્રતિક્રિયા HBs એન્ટિજેન 1.5 ng/ml સુધી કેપ્ચર કરવામાં સક્ષમ છે. HBs એન્ટિબોડીઝ શોધવા માટે, HBs એન્ટિજેન સાથેના લાલ રક્ત કોશિકાઓનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, જે દર્દીઓના લોહીથી અલગ પડે છે. નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ પણ શોધવા માટે થાય છે અતિસંવેદનશીલતાદર્દીને દવાઓ અને હોર્મોન્સ, ઉદાહરણ તરીકે, પેનિસિલિન અથવા ઇન્સ્યુલિન. આ કિસ્સામાં, માનવ રક્ત જૂથ 0 ના લાલ રક્ત કોશિકાઓ દવા સાથે સંવેદનશીલ બને છે અને પછી દર્દીના લોહીના સીરમમાં એગ્ગ્લુટીનિન શોધવા માટે વપરાય છે.

નિષ્ક્રિય હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સગર્ભાવસ્થા સ્થાપિત કરવા માટે પેશાબમાં ગોનાડોટ્રોપિક હોર્મોન શોધવા માટે થાય છે (કોરિઓનિક ગોનાડોટ્રોપિન જુઓ). આ કરવા માટે, આ હોર્મોન માટે પ્રમાણભૂત સીરમ પેશાબની તપાસ સાથે ઉકાળવામાં આવે છે. લાલ રક્ત કોશિકાઓના અનુગામી ઉમેરા સાથે તેમના પર સોર્બ કરેલા હોર્મોન સાથે, એગ્ગ્લુટિનેશન થતું નથી (સકારાત્મક પ્રતિભાવ), કારણ કે પેશાબમાં સમાયેલ હોર્મોન એગ્લુટિનેટિંગ એન્ટિબોડીઝને તટસ્થ કરે છે.

વરસાદની ઘટના પર આધારિત પ્રતિક્રિયાઓ

તેનો ઉપયોગ એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝની વિશાળ વિવિધતા નક્કી કરવા માટે થાય છે. ગુણાત્મક પ્રતિક્રિયાનું સૌથી સરળ ઉદાહરણ એ ટેસ્ટ ટ્યુબમાં એન્ટિબોડી પર એન્ટિજેનના સ્તરીકરણની સીમા પર અપારદર્શક વરસાદી પટ્ટીની રચના છે. અર્ધ-પ્રવાહી અગર અથવા એગ્રોઝ જેલ્સમાં વિવિધ પ્રકારની વરસાદની પ્રતિક્રિયાઓનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે (ઓચટરલોહન અનુસાર ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પદ્ધતિ, રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પદ્ધતિ, ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસ), જે પ્રકૃતિમાં ગુણાત્મક અને માત્રાત્મક બંને છે (જુઓ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન, ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસિસ).

ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન કરવા માટે, ઓગાળેલા જેલનો એક સ્તર કાચની પ્લેટ પર રેડવામાં આવે છે અને, સખ્તાઇ પછી, 1.5-3 મીમીના વ્યાસવાળા કુવાઓ કાપી નાખવામાં આવે છે. પરીક્ષણ એન્ટિજેન્સ વર્તુળમાં સ્થિત કુવાઓમાં મૂકવામાં આવે છે, અને જાણીતી વિશિષ્ટતાનું રોગપ્રતિકારક સીરમ કેન્દ્રીય કૂવામાં મૂકવામાં આવે છે. એકબીજા તરફ વિખરાઈને, હોમોલોગસ સેરા અને એન્ટિજેન્સ એક અવક્ષેપ બનાવે છે. રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન (મેનસિની પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને) સાથે, અગરમાં રોગપ્રતિકારક સીરમ ઉમેરવામાં આવે છે. કુવાઓમાં મૂકવામાં આવેલ એન્ટિજેન અગર દ્વારા ફેલાય છે, અને રોગપ્રતિકારક સીરમ સાથે વરસાદના પરિણામે, કુવાઓની આસપાસ અપારદર્શક રિંગ્સ રચાય છે, જેનો બાહ્ય વ્યાસ એન્ટિજેનની સાંદ્રતાના પ્રમાણસર છે. આ પ્રતિક્રિયાના ફેરફારનો ઉપયોગ ઈન્ફલ્યુએન્ઝાના નિદાનમાં IgM અને IgG એન્ટિબોડીઝને ઓળખવા માટે થાય છે (ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન જુઓ). ઈન્ફલ્યુએન્ઝા એન્ટિજેન અગરમાં ઉમેરવામાં આવે છે, અને રક્ત સીરમ કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે. પછી પ્લેટોને IgM અથવા IgG એન્ટિબોડીઝ સામે રોગપ્રતિકારક સેરા સાથે સારવાર આપવામાં આવે છે, જે એન્ટિજેન્સ સાથે સંબંધિત એન્ટિબોડીઝની પ્રતિક્રિયા શોધવામાં મદદ કરે છે. પદ્ધતિ તમને એન્ટિબોડી ટાઇટર્સ અને ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનના ચોક્કસ વર્ગ સાથે સંબંધિત તે જ સમયે નક્કી કરવાની મંજૂરી આપે છે.

ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસનો એક પ્રકાર રેડિયોઈમ્યુનોફોરેસીસ છે. આ કિસ્સામાં, એન્ટિજેન્સના ઇલેક્ટ્રોફોરેટિક વિભાજન પછી, એક લેબલ કિરણોત્સર્ગી આયોડિનઓળખાયેલ એન્ટિજેન્સ સામે રોગપ્રતિકારક સીરમ, અને પછી IgG એન્ટિબોડીઝ સામે રોગપ્રતિકારક સીરમ, જે એન્ટિજેન સાથે એન્ટિબોડીના પરિણામી સંકુલને અવક્ષેપિત કરે છે. બધા અનબાઉન્ડ રીએજન્ટ્સ ધોવાઇ જાય છે, અને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ ઓટોરેડિયોગ્રાફી દ્વારા શોધી કાઢવામાં આવે છે (જુઓ).

પૂરક સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓ. પૂરક (જુઓ) ને સંડોવતા પ્રતિક્રિયાઓ પૂરક પેટાકંપોનન્ટ Cl(Clq) અને પછી અન્ય પૂરક ઘટકોની રોગપ્રતિકારક સંકુલ સાથે જોડવાની ક્ષમતા પર આધારિત છે.

પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ દ્વારા પૂરક ફિક્સેશનની ડિગ્રી અનુસાર ટાઇટ્રેટ કરવાની મંજૂરી આપે છે. આ પ્રતિક્રિયામાં બે તબક્કાઓનો સમાવેશ થાય છે: પરીક્ષણ રક્ત સીરમ (પરીક્ષણ સિસ્ટમ) સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા અને ઘેટાંના લાલ રક્ત કોશિકાઓ (સૂચક સિસ્ટમ) સાથે હેમોલિટીક સીરમની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા. જો પ્રતિક્રિયા સકારાત્મક હોય, તો પરીક્ષણ પ્રણાલીમાં પૂરક ફિક્સેશન થાય છે, અને પછી જ્યારે એન્ટિબોડીઝ સાથે સંવેદનશીલ એરિથ્રોસાઇટ્સ ઉમેરવામાં આવે છે, ત્યારે હેમોલિસિસ જોવા મળતું નથી (જુઓ પૂરક ફિક્સેશન પ્રતિક્રિયા). પ્રતિક્રિયાનો વ્યાપકપણે વિસેરલ સિફિલિસ (વાસરમેન પ્રતિક્રિયા જુઓ) અને વાયરલ ચેપના સેરોડાયગ્નોસિસ માટે ઉપયોગ થાય છે (વિરોજિકલ અભ્યાસ જુઓ).

સાયટોલિસિસ. સેલ્યુલર સ્ટ્રક્ચર્સ સામે એન્ટિબોડીઝ, પૂરકની ભાગીદારી સાથે, આ રચનાઓ ધરાવતા કોષોને ઓગાળી શકે છે. હિમોગ્લોબિનના પ્રકાશનની ડિગ્રી અને તીવ્રતા દ્વારા લાલ રક્ત કોશિકાઓના લિસિસનું સરળતાથી મૂલ્યાંકન કરવામાં આવે છે. ન્યુક્લિયર સેલ લિસિસનું મૂલ્યાંકન મૃત કોષોની ટકાવારીની ગણતરી દ્વારા કરવામાં આવે છે જે મેથીલીન વાદળીથી ડાઘ નથી. કિરણોત્સર્ગી ક્રોમિયમનો પણ વારંવાર ઉપયોગ થાય છે, જે અગાઉ કોષો સાથે રાસાયણિક રીતે બંધાયેલું હતું. નાશ પામેલા કોષોની સંખ્યા સેલ લિસિસ દરમિયાન બહાર પાડવામાં આવેલ અનબાઉન્ડ ક્રોમિયમની માત્રા દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે.

એરિથ્રોસાઇટ્સના રેડિયલ હેમોલિસિસની પ્રતિક્રિયા જેલમાં થઈ શકે છે. ઘેટાંના લાલ રક્ત કોશિકાઓનું સસ્પેન્શન એગેરોઝ જેલમાં મૂકવામાં આવે છે, તેમાં પૂરક ઉમેરવામાં આવે છે; કાચ પર જામેલા સ્તરમાં કુવાઓ બનાવવામાં આવે છે અને તેમાં હેમોલિટીક સીરમ ઉમેરવામાં આવે છે. એન્ટિબોડીઝના રેડિયલ પ્રસારના પરિણામે કુવાઓની આસપાસ હેમોલિસિસ ઝોન રચાશે. હેમોલિસિસ ઝોનની ત્રિજ્યા સીરમ ટાઇટર માટે સીધી પ્રમાણમાં છે. જો તમે એરિથ્રોસાઇટ્સ પર કોઈપણ એન્ટિજેન શોષી શકો છો, ઉદાહરણ તરીકે, ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ, રુબેલા અથવા ટિક-બોર્ન એન્સેફાલીટીસનું ગ્લાયકોપ્રોટીન હેમાગ્ગ્લુટીનિન, તો પછી તમે આ વાયરસ માટે રોગપ્રતિકારક સેરા સાથે હેમોલિસિસની ઘટનાનું પુનઃઉત્પાદન કરી શકો છો. જેલમાં રેડિયલ હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા તેના ઉત્પાદનમાં સરળતા, સીરમ અવરોધકો પ્રત્યે અસંવેદનશીલતા અને સીરીયલ ડિલ્યુશનનો આશરો લીધા વિના હેમોલિસીસ ઝોનના વ્યાસ અનુસાર લોહીના સીરમને ટાઇટ્રેટ કરવાની ક્ષમતાને કારણે વાયરલ ચેપના નિદાનમાં ઉપયોગ કરે છે.

રોગપ્રતિકારક સંલગ્નતા. લાલ રક્ત કોશિકાઓ, પ્લેટલેટ્સ અને અન્ય રક્ત કોશિકાઓની સપાટી પર પૂરકના ત્રીજા ઘટક (C3) માટે રીસેપ્ટર્સ હોય છે. જો યોગ્ય રોગપ્રતિકારક સીરમ અને પૂરક એન્ટિજેન (બેક્ટેરિયા, વાયરસ, વગેરે) માં ઉમેરવામાં આવે છે, તો પૂરકના C3 ઘટક સાથે કોટેડ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ રચાય છે. જ્યારે પ્લેટલેટ્સ સાથે મિશ્ર કરવામાં આવે છે, ત્યારે પૂરકના C3 ઘટકને કારણે, એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી કોમ્પ્લેક્સ કોશિકાઓ પર સ્થાયી થાય છે અને તેમના એકત્રીકરણનું કારણ બને છે (પ્રતિકારક સંલગ્નતા જુઓ). આ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ HLA સિસ્ટમના એન્ટિજેન્સ નક્કી કરવા માટે થાય છે (જુઓ ટ્રાન્સપ્લાન્ટેશન ઇમ્યુનિટી) અને સંખ્યાબંધ વાયરલ ચેપ(ટિક-જન્મેલા એન્સેફાલીટીસ, ડેન્ગ્યુ તાવ), જે ઇમ્યુનોપેથોલ સાથે હોય છે. એન્ટિબોડીઝ સાથે સંયોજનમાં વાયરલ એન્ટિજેન્સના લોહીમાં પ્રક્રિયાઓ અને પરિભ્રમણ.

તટસ્થતાની પ્રતિક્રિયા એ એન્ટિબોડીઝની મેક્રોમોલેક્યુલર અથવા દ્રાવ્ય એન્ટિજેન્સના ચોક્કસ કાર્યોને બેઅસર કરવાની ક્ષમતા પર આધારિત છે, ઉદાહરણ તરીકે, એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ, બેક્ટેરિયલ ઝેર અને વાયરસની પેથોજેનિસિટી. બેક્ટેરિયોલોજીમાં, આ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ એન્ટિસ્ટ્રેપ્ટોલિસિન્સ, એન્ટિસ્ટ્રેપ્ટોકિનેઝ અને એન્ટિસ્ટાફાયલોસિન્સ શોધવા માટે થાય છે. ઝેરની તટસ્થતા પ્રતિક્રિયાનું મૂલ્યાંકન બાયોલ દ્વારા કરી શકાય છે. અસર, ઉદાહરણ તરીકે, એન્ટિટેટેનસ અને એન્ટિબોટ્યુલિનમ સીરમ ટાઇટ્રેટેડ છે (જુઓ ટોક્સિન - એન્ટિટોક્સિન પ્રતિક્રિયા). પ્રાણીઓને આપવામાં આવતા ઝેર અને એન્ટિસેરમનું મિશ્રણ તેમના મૃત્યુને અટકાવે છે. વિવિધ વિકલ્પોવાઇરોલોજીમાં તટસ્થતા પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ થાય છે. યોગ્ય એન્ટિસેરમ સાથે વાયરસનું મિશ્રણ કરીને અને આ મિશ્રણને પ્રાણીઓ અથવા કોષ સંસ્કૃતિઓમાં ઇન્જેક્ટ કરવાથી, વાયરસની રોગકારકતા તટસ્થ થઈ જાય છે.

રાસાયણિક અને ભૌતિક લેબલોનો ઉપયોગ કરીને પ્રતિક્રિયાઓ

1942માં A. N. Coons દ્વારા વિકસિત ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સનો ઉપયોગ સેરોલ માટે થાય છે. ફ્લોરોક્રોમ-લેબલવાળી સેરાની પ્રતિક્રિયાઓ (ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ જુઓ). ફ્લોરોક્રોમ-લેબલવાળા સીરમ એન્ટિજેન સાથે એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ બનાવે છે, જે અલ્ટ્રાવાયોલેટ કિરણોમાં માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ અવલોકન માટે સુલભ બને છે, જે ફ્લોરોક્રોમને ઉત્તેજિત કરે છે. ડાયરેક્ટ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ સેલ્યુલર એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ કરવા, ચેપગ્રસ્ત કોષોમાં વાયરસ શોધવા અને સ્મીયરમાં બેક્ટેરિયા અને રિકેટ્સિયાને શોધવા માટે થાય છે. આમ, હડકવાનું નિદાન કરવા માટે, વાયરસ વહનની શંકાસ્પદ પ્રાણીઓના મગજના ટુકડાઓની પ્રિન્ટને લ્યુમિનેસેન્ટ એન્ટિ-રેબીઝ સીરમથી સારવાર આપવામાં આવે છે. જો પરિણામ હકારાત્મક છે, તો ચેતા કોષોના પ્રોટોપ્લાઝમમાં તેજસ્વી લીલા રંગના ગઠ્ઠો જોવા મળે છે. ઈન્ફલ્યુએન્ઝા, પેરાઈનફ્લુએન્ઝા અને એડેનોવાઈરલ ચેપનું એક્સપ્રેસ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ અનુનાસિક શ્વૈષ્મકળામાંથી ફિંગરપ્રિન્ટ કોશિકાઓમાં વાયરલ એન્ટિજેન્સની શોધ પર આધારિત છે.

વધુ વ્યાપક રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ પરોક્ષ ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ છે, જે IgG એન્ટિબોડીઝ સામે લ્યુમિનેસેન્ટ ઇમ્યુન સીરમનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલની શોધ પર આધારિત છે અને તેનો ઉપયોગ માત્ર એન્ટિજેન્સ જ નહીં, પણ ટાઇટ્રેટ એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે થાય છે. હર્પીસ, સાયટોમેગાલિપ્સ અને લાસા તાવના સેરોડાયગ્નોસિસમાં આ પદ્ધતિનો ઉપયોગ થયો છે. પ્રયોગશાળામાં, એન્ટિજેન ધરાવતા કોષોની તૈયારીઓનો સ્ટોક, ઉદાહરણ તરીકે, ટુકડાઓ પર ઉગાડવામાં આવે છે, તેને -20° પર સંગ્રહિત કરવો જોઈએ. પાતળો કાચઅને વાયરસથી સંક્રમિત VERO કોષો અથવા ચિકન ફાઈબ્રોબ્લાસ્ટ્સ એસીટોન સાથે નિશ્ચિત છે. ટેસ્ટ બ્લડ સીરમને તૈયારીઓ પર સ્તર આપવામાં આવે છે, રોગપ્રતિકારક સંકુલ બનાવવા માટે તૈયારીને f 37° પર થર્મોસ્ટેટમાં મૂકવામાં આવે છે, અને પછી, અનબાઉન્ડ રીએજન્ટ્સને ધોયા પછી, આ સંકુલને માનવ ગ્લોબ્યુલિન સામે લેબલવાળા લ્યુમિનેસેન્ટ સીરમ સાથે શોધવામાં આવે છે. IgM અથવા IgG એન્ટિબોડીઝ સામે લેબલવાળા રોગપ્રતિકારક સેરાનો ઉપયોગ કરીને, એન્ટિબોડીઝના પ્રકારને અલગ પાડવાનું અને IgM એન્ટિબોડીઝની હાજરી દ્વારા પ્રારંભિક રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાને શોધી કાઢવાનું શક્ય છે.

એન્ઝાઇમ-ઇમ્યુનોલોજીકલ પદ્ધતિમાં, ઉત્સેચકો સાથે સંયોજિત એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ થાય છે, સીએચ. arr horseradish peroxidase અથવા આલ્કલાઇન ફોસ્ફેટસ. એન્ટિજેન સાથે લેબલવાળા સીરમના સંયોજનને શોધવા માટે, એક સબસ્ટ્રેટ ઉમેરવામાં આવે છે જે સીરમ સાથે જોડાયેલા એન્ઝાઇમ દ્વારા વિઘટિત થાય છે, જે પીળો-બ્રાઉન (પેરોક્સિડેઝ) અથવા પીળો-લીલો (ફોસ્ફેટેઝ) રંગ ઉત્પન્ન કરે છે. ઉત્સેચકોનો પણ ઉપયોગ થાય છે જે માત્ર ક્રોમોજેનિક જ નહીં, પણ લ્યુમોજેનિક સબસ્ટ્રેટને પણ વિઘટિત કરે છે. આ કિસ્સામાં, હકારાત્મક પ્રતિક્રિયા સાથે, એક ગ્લો દેખાય છે. ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સની જેમ, એન્ઝાઇમેટિક ઇમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કોશિકાઓમાં એન્ટિજેન્સ શોધવા અથવા એન્ટિજેન ધરાવતા કોષો પર એન્ટિબોડીઝ ટાઇટ્રેટ કરવા માટે થાય છે.

એન્ઝાઇમ-ઇમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિનો સૌથી લોકપ્રિય પ્રકાર ઇમ્યુનોસોર્પ્શન છે. નક્કર વાહક પર, જે સેલ્યુલોઝ, પોલિએક્રિલામાઇડ, ડેક્સ્ટ્રાન અને વિવિધ પ્લાસ્ટિક હોઈ શકે છે, એન્ટિજેન શોષાય છે. મોટેભાગે, માઇક્રોપેનલ કુવાઓની સપાટી વાહક તરીકે સેવા આપે છે. ટેસ્ટ બ્લડ સીરમને સોર્બ્ડ એન્ટિજેન સાથે કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે, પછી એન્ઝાઇમ-લેબલવાળા એન્ટિસેરમ અને સબસ્ટ્રેટ. પ્રવાહી માધ્યમના રંગમાં ફેરફાર દ્વારા હકારાત્મક પરિણામો ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. એન્ટિજેન્સને શોધવા માટે, એન્ટિબોડીઝને વાહક પર સોર્બ કરવામાં આવે છે, પછી પરીક્ષણ સામગ્રી કુવાઓમાં ઉમેરવામાં આવે છે અને પ્રતિક્રિયા એન્ઝાઇમ-લેબલવાળા એન્ટિમાઇક્રોબાયલ સીરમ સાથે કરવામાં આવે છે.

રેડિયોઈમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિ એન્ટિજેન્સ અથવા એન્ટિબોડીઝના રેડિયોઆઈસોટોપ લેબલના ઉપયોગ પર આધારિત છે. તે મૂળરૂપે લોહીમાં ફરતા હોર્મોન્સના સ્તરને માપવા માટેની ચોક્કસ પદ્ધતિ તરીકે વિકસાવવામાં આવી હતી. પરીક્ષણ પ્રણાલી એક આઇસોટોપ-લેબલવાળા હોર્મોન (એન્ટિજેન) અને તેના માટે એન્ટિસેરમ હતી. જો આવા એન્ટિસેરમમાં ઇચ્છિત હોર્મોન ધરાવતી સામગ્રી ઉમેરવામાં આવે છે, તો તે એન્ટિબોડીઝના ભાગને બાંધી દેશે; લેબલવાળા ટાઇટ્રેટેડ હોર્મોનના અનુગામી ઉમેરા પર, નિયંત્રણની તુલનામાં તેની ઓછી માત્રા એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાઈ જશે. બાઉન્ડ અને અનબાઉન્ડ કિરણોત્સર્ગી ટ્રેસરના વળાંકોની સરખામણી કરીને પરિણામનું મૂલ્યાંકન કરવામાં આવે છે. આ પ્રકારની પદ્ધતિને સ્પર્ધાત્મક પ્રતિક્રિયા કહેવામાં આવે છે. રેડિયોઈમ્યુનોલોજીકલ પદ્ધતિમાં અન્ય ફેરફારો છે. રેડિયોઈમ્યુનોલોજીકલ પદ્ધતિ એ એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટેની સૌથી સંવેદનશીલ પદ્ધતિ છે, જેનો ઉપયોગ હોર્મોન્સ નક્કી કરવા માટે થાય છે, ઔષધીય પદાર્થોઅને એન્ટિબાયોટિક્સ, બેક્ટેરિયલ, વાયરલ, રિકેટ્સિયલ, પ્રોટોઝોઅલ રોગોના નિદાન માટે, રક્ત પ્રોટીન, પેશી એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ.

તબીબી વ્યવહારમાં તુલનાત્મક લાક્ષણિકતાઓ અને સેરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ

પદ્ધતિઓ એસ. અને. સંવેદનશીલતા અને ઉપયોગની વૈવિધ્યતાને વધારવા માટે સતત સુધારવામાં આવે છે. શરૂઆતમાં સેરોલ. નિદાન એન્ટિબોડીઝની શોધ પર આધારિત હતું. 20 મી સદીના મધ્યમાં આગમન સાથે. ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ અને નિષ્ક્રિય હેમાગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાઓ, જે વધુ સંવેદનશીલ હોય છે, તે માત્ર એન્ટિબોડીઝ જ નહીં, પણ દર્દીઓની સામગ્રીમાં સીધા એન્ટિજેનને પણ શોધવાનું શક્ય બનાવે છે. એન્ઝાઇમ-ઇમ્યુનોલોજિકલ અને રેડિયોઇમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિઓ, જે ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ અને નિષ્ક્રિય હેમાગ્ગ્લુટિનેશન કરતાં 2-3 તીવ્રતાના વધુ સંવેદનશીલ હોય છે, તે જૈવિક પદ્ધતિઓની નજીક છે. બેક્ટેરિયા અને વાયરસની શોધ. એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝ બંનેની શોધ માટે તેમની અરજીનો અવકાશ સૈદ્ધાંતિક રીતે અમર્યાદિત છે.

સેરોડાયગ્નોસિસ માહિતી. રોગ એક અલગ અથવા શંકાસ્પદ પેથોજેન માટે એન્ટિબોડીઝના દેખાવ પર આધારિત છે, પછી ભલે તે રોગના તીવ્ર તબક્કામાં પેથોજેન મળી આવ્યો હોય. રોગની શરૂઆતમાં અને 2-3 અઠવાડિયા પછી લેવામાં આવેલા લોહીના સીરમની જોડીની તપાસ કરવામાં આવે છે. પાછળથી પ્રથમની તુલનામાં બીજા રક્ત સીરમમાં એન્ટિબોડીઝમાં ઓછામાં ઓછો 4 ગણો વધારો એ નિદાનની દ્રષ્ટિએ નોંધપાત્ર છે. એન્ટિબોડીઝ કયા વર્ગના ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન દ્વારા રજૂ થાય છે તે પણ મહત્વનું છે. IgM એન્ટિબોડીઝ રોગના તીવ્ર સમયગાળાના અંતે અને માં શોધી કાઢવામાં આવે છે શુરુવાત નો સમયસ્વસ્થતા IgG એન્ટિબોડીઝ વધુ દેખાય છે મોડી તારીખોસ્વસ્થતા અને લાંબા સમય સુધી પરિભ્રમણ. જો ગર્ભાવસ્થાના પ્રથમ ત્રિમાસિક ગાળામાં સ્ત્રીમાં રુબેલા વાયરસના IgM એન્ટિબોડીઝ મળી આવે છે, તો આ ગર્ભાવસ્થાને સમાપ્ત કરવા માટેના આધાર તરીકે કામ કરે છે, કારણ કે આ સમયગાળા દરમિયાન ગર્ભ ખાસ કરીને વાયરસ પ્રત્યે સંવેદનશીલ હોય છે. વિવિધ માહિતી સાથે. રોગો, સૌથી વિશિષ્ટ અને અનુકૂળ પદ્ધતિઓનો પસંદગીપૂર્વક ઉપયોગ કરવામાં આવે છે.

એસ. અને. રોગશાસ્ત્રમાં વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે. વ્યવસ્થિત સંગ્રહ અને વિવિધ વસ્તી જૂથોમાંથી લોહીના નમૂનાઓની તપાસ ચેપી એજન્ટોના સ્ત્રોત સાથે વસ્તીના સંપર્કોને સમજવાનું શક્ય બનાવે છે. રોગો સામૂહિક પ્રતિરક્ષાના સ્તરનો અભ્યાસ કરવાથી આપણે ઉચ્ચ જોખમ ધરાવતા જૂથોને ઓળખી શકીએ છીએ અને રસીકરણ પ્રવૃત્તિઓનું આયોજન કરી શકીએ છીએ અને ચેપના ભૌગોલિક ફેલાવાનો અભ્યાસ કરી શકીએ છીએ. એસ. અને. વસ્તીના વિવિધ વય જૂથોએ તેને શક્ય બનાવ્યું, ઉદાહરણ તરીકે, પૂર્વવર્તી રીતે પરિભ્રમણને ઓળખવું વિવિધ વિકલ્પોચોક્કસ સમયગાળામાં ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ.

એસ. અને. વંશપરંપરાગત રોગો (જુઓ) અને સ્વયંપ્રતિરક્ષા રોગોના અધ્યયનમાં, પેશી- અને અંગ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝના દેખાવ સાથે, જે અનુરૂપ લક્ષ્ય કોષોનો નાશ કરે છે, તેમજ ટ્યુમર એન્ટિજેન્સની શોધ માટે ઓન્કોલોજીમાં ખૂબ મહત્વ ધરાવે છે. આમ, લીવર કેન્સરનું ઇમ્યુનોડાયગ્નોસિસ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પદ્ધતિ અને રેડિયોઇમ્યુનોલોજિકલ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરીને દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં આલ્ફા-ફેટોપ્રોટીન અને અન્ય ગર્ભ એન્ટિજેન્સના નિર્ધારણ પર આધારિત છે.

સેરોલના ઉપયોગ દ્વારા સેલ્યુલર એન્ટિજેન્સ, બેક્ટેરિયા અને વાયરસના એન્ટિજેન્સની ઝીણી એન્ટિજેનિક રચનાના અભ્યાસમાં નોંધપાત્ર વૈજ્ઞાનિક પ્રગતિ પ્રાપ્ત થાય છે. મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝની પ્રતિક્રિયાઓ, જે વ્યક્તિગત એન્ટિજેન નિર્ધારકો માટે મેળવી શકાય છે.

ગ્રંથસૂચિ:ઇમ્યુનોલોજીમાં સંશોધન પદ્ધતિઓ, ઇડી. I. Lefkovits અને B. Pernis, trans. અંગ્રેજીમાંથી, એમ., 1981; ઇમ્યુનોલોજી માટે માર્ગદર્શિકા, ઇડી. O. E. Vyazova અને Sh. X. Khodzhaeva, M., 1973; ક્લિનિકલ લેબોરેટરી ડાયગ્નોસ્ટિક્સ માટે માર્ગદર્શિકા, ઇડી. વી.વી. મેન્શિકોવા, એમ., 1982; ઇમ્યુનોલોજી, ઇડી. J.-F દ્વારા. બેચ, એન.વાય., 1978.

એસ. યા. ગૈદામોવિચ.

સેરોલોજીકલ સંશોધન પદ્ધતિ.

એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાઓ

એન્ટિજેન્સ સાથે એન્ટિબોડીઝની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશેષતાઓ પ્રયોગશાળાઓમાં ડાયગ્નોસ્ટિક પ્રતિક્રિયાઓનો આધાર છે.

પ્રતિક્રિયા માં વિટ્રો એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી વચ્ચે સમાવેશ થાય છે:

ચોક્કસ

અચોક્કસ તબક્કો.

IN મસાલાભૌતિક તબક્કો એન્ટિજેન નિર્ધારક સાથે એન્ટિબોડીના સક્રિય કેન્દ્રનું ઝડપી ચોક્કસ બંધન થાય છે.

પછી આવે છે અચોક્કસ તબક્કો - ધીમી, જે પોતાને પ્રગટ કરે છે દૃશ્યમાન ભૌતિક ઘટના, ઉદાહરણ તરીકે, ફ્લેક્સની રચના (એગ્ગ્લુટિનેશન ઘટના) અથવા ટર્બિડિટીના સ્વરૂપમાં અવક્ષેપ. આ તબક્કામાં ચોક્કસ પરિસ્થિતિઓ (ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સ, પર્યાવરણની શ્રેષ્ઠ પીએચ) ની હાજરી જરૂરી છે.

આ હેતુ માટે તેઓ ઉપયોગ કરે છે સેરોલોજીકલ પદ્ધતિઓ (lat માંથી. સીરમ - છાશ અને લોગો - શિક્ષણ), એટલે કે લોહીના સીરમ અને અન્ય પ્રવાહી તેમજ શરીરના પેશીઓમાં નિર્ધારિત એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સનો અભ્યાસ કરવાની પદ્ધતિઓ.

દર્દીમાંથી સૂક્ષ્મજીવાણુને અલગ કરતી વખતે, રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સેરાનો ઉપયોગ કરીને તેના એન્ટિજેનિક ગુણધર્મોનો અભ્યાસ કરીને પેથોજેનને ઓળખવામાં આવે છે, એટલે કે ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ ધરાવતા હાયપરઇમ્યુનાઇઝ્ડ પ્રાણીઓના બ્લડ સેરા. આ કહેવાતા છે સેરોલોજિકલઓળખ સુક્ષ્મસજીવો

એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાઓ

એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા- આરએ(lat માંથી. અગ્લુટીરાષ્ટ્ર - ગ્લુઇંગ) એ એક સરળ પ્રતિક્રિયા છે જેમાં એન્ટિબોડીઝ કોર્પસ્ક્યુલર એન્ટિજેન્સ (બેક્ટેરિયા, એરિથ્રોસાઇટ્સ અથવા અન્ય કોષો, તેમના પર શોષાયેલા એન્ટિજેન્સ સાથે અદ્રાવ્ય કણો, તેમજ મેક્રોમોલેક્યુલર એગ્રીગેટ્સ) સાથે જોડાય છે. તે ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સની હાજરીમાં થાય છે, ઉદાહરણ તરીકે, જ્યારે આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન ઉમેરવામાં આવે છે.

વિવિધ પ્રતિભાવ વિકલ્પોએકત્રીકરણ:

વિસ્તૃત,

અંદાજિત

પરોક્ષ, વગેરે.

એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ફ્લેક્સની રચના દ્વારા પ્રગટ થાય છેઅથવા કાંપ (એન્ટિબોડીઝ દ્વારા કોષો "એકસાથે ગુંદર ધરાવતા" કે જેમાં બે અથવા વધુ એન્ટિજેન-બંધન કેન્દ્રો હોય છે).

Ra નો ઉપયોગ આ માટે થાય છે:

1) એન્ટિબોડી નિર્ધારણ લોહીના સીરમમાં દુખાવોnykh, ઉદાહરણ તરીકે, બ્રુસેલોસિસ (રાઈટ, હેડેલસન પ્રતિક્રિયા), ટાઇફોઇડ તાવ અને પેરાટાઇફોઇડ તાવ (વિડાલ પ્રતિક્રિયા) અને અન્ય ચેપી રોગો સાથે;

પેથોજેન નક્કી કરવું , દર્દીથી અલગ;

રક્ત જૂથોનું નિર્ધારણ એરિથ્રોસાઇટ એલો-એન્ટિજેન્સ સામે મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ.

દર્દીમાં એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા મૂકોવિગતવાર એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા: દર્દીના લોહીના સીરમના મંદનમાં ઉમેરો નિદાન(મૃત સુક્ષ્મજીવાણુઓનું સસ્પેન્શન) અને 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર કેટલાક કલાકોના સેવન પછી, સૌથી વધુ સીરમ ડિલ્યુશન (સીરમ ટાઇટર) નોંધવામાં આવે છે, જેમાં એગ્ગ્લુટિનેશન થયું હતું, એટલે કે, એક અવક્ષેપ રચાય છે.

એગ્લુટિનેશનની પ્રકૃતિ અને ઝડપ એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીઝના પ્રકાર પર આધારિત છે. ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ સાથે ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સ (ઓ- અને કે-એન્ટિજેન્સ) ની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતાઓનું ઉદાહરણ છે. સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ઓ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ(બેક્ટેરિયા ગરમીથી મરી જાય છે, ગરમી-સ્થિર જાળવી રાખે છે ઓ-એન્ટિજન)ફાઇન-ગ્રેઇન્ડ એગ્ગ્લુટિનેશનના સ્વરૂપમાં થાય છે. એચ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ (ફોર્માલ્ડિહાઇડ દ્વારા માર્યા ગયેલા બેક્ટેરિયા, થર્મોલાબિલ ફ્લેગેલર એચ-એન્ટિજનને જાળવી રાખતા) સાથે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા બરછટ છે અને તે ઝડપથી આગળ વધે છે.

જો દર્દીથી અલગ પેથોજેન નક્કી કરવું જરૂરી હોય, તો મૂકો લગભગ તાત્કાલિક એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા, ડાયગ્નોસ્ટિક એન્ટિબોડીઝ (એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ) નો ઉપયોગ કરીને, એટલે કે, પેથોજેનનું સેરોટાઇપિંગ હાથ ધરવામાં આવે છે. ગ્લાસ સ્લાઇડ પર સૂચક પ્રતિક્રિયા હાથ ધરવામાં આવે છે. દર્દીમાંથી પેથોજેનની શુદ્ધ સંસ્કૃતિ 1:10 અથવા 1:20 ના મંદન પર ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સીરમના ડ્રોપમાં ઉમેરવામાં આવે છે. નજીકમાં એક નિયંત્રણ મૂકવામાં આવે છે: સીરમને બદલે, સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશનનું એક ટીપું લાગુ પડે છે. જ્યારે સીરમ અને સૂક્ષ્મજીવાણુઓ ધરાવતા ડ્રોપમાં ફ્લોક્યુલન્ટ કાંપ દેખાય છે, એ વિસ્તૃત એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા ટેસ્ટ ટ્યુબમાં એગ્લુટિનેટિંગ સીરમના વધતા મંદન સાથે, જેમાં પેથોજેન સસ્પેન્શનના 2-3 ટીપાં ઉમેરવામાં આવે છે. એગ્ગ્લુટિનેશનને કાંપની માત્રા અને પ્રવાહીની સ્પષ્ટતાની ડિગ્રી દ્વારા ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. પ્રતિક્રિયા ગણવામાં આવે છેહકારાત્મક, જો ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમના ટાઇટરની નજીકના મંદન પર એગ્લુટિનેશન જોવા મળે છે. તે જ સમયે, નિયંત્રણો ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે: આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશનથી પાતળું સીરમ પારદર્શક હોવું જોઈએ, સમાન દ્રાવણમાં સૂક્ષ્મજીવાણુઓનું સસ્પેન્શન કાંપ વિના, સમાનરૂપે વાદળછાયું હોવું જોઈએ.

વિવિધ સંબંધિત બેક્ટેરિયા એક જ ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સીરમ દ્વારા એકત્ર થઈ શકે છે, જે તેમની ઓળખ મુશ્કેલ બનાવે છે. તેથી તેઓ ઉપયોગ કરે છે શોષિત એગ્લુટિનેટિંગ સીરમમોંજેમાંથી ક્રોસ-પ્રતિક્રિયા કરતી એન્ટિબોડીઝને સંબંધિત બેક્ટેરિયાના શોષણ દ્વારા દૂર કરવામાં આવી છે. આવા સેરા એન્ટિબોડીઝ જાળવી રાખે છે જે ફક્ત આપેલ બેક્ટેરિયમ માટે વિશિષ્ટ છે. આ રીતે મોનોરેસેપ્ટર ડાયગ્નોસ્ટિક એગ્લુટિનેટિંગ સેરાનું ઉત્પાદન એ. કેસ્ટેલાની (1902) દ્વારા પ્રસ્તાવિત કરવામાં આવ્યું હતું.

પરોક્ષ (નિષ્ક્રિય) હેમાગ્ગ્લુટિન પ્રતિક્રિયારાષ્ટ્ર (RNGA, RPGA)પર આધારિત છે વપરાયેલરેડ બ્લડ સેલ્સ સંશોધન સંસ્થા(અથવા લેટેક્સ) adsorbiro સાથેએન્ટિજેન્સ સાથે તેમની સપાટી પર સ્નાન અથવાએન્ટિબોડીઝ, જે અનુરૂપ સાથેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા એન્ટિબોડીઝઅથવા દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં એન્ટિજેન્સનું કારણ બને છે gluingટેસ્ટ ટ્યુબના તળિયે લાલ રક્ત કોશિકાઓનું અવક્ષય અને નુકશાનઅથવા સ્કેલોપ્ડ કાંપના સ્વરૂપમાં કોષો.

જો ત્યાં નકારાત્મક પ્રતિક્રિયા છેલાલ રક્ત કોશિકાઓ "બટન" ના રૂપમાં સ્થાયી થાય છે. સામાન્ય રીતે, આરએનજીએ એન્ટિજેન એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિકમનો ઉપયોગ કરીને એન્ટિબોડીઝ શોધે છે, જે એરિથ્રોસાઇટ્સ છે જેમાં એન્ટિજેન્સ તેમના પર શોષાય છે. કેટલીકવાર એન્ટિબોડી એરિથ્રોસાઇટ ડાયગ્નોસ્ટિક પ્રવાહીનો ઉપયોગ થાય છે, જેના પર એન્ટિબોડીઝ શોષાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, બોટ્યુલિનમ ટોક્સિનને તેમાં એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડી બોટ્યુલિનમ ડાયગ્નોસ્ટિકમ ઉમેરીને શોધી શકાય છે (આ પ્રતિક્રિયા કહેવામાં આવે છે વિપરીત પ્રતિક્રિયાપરોક્ષ હિમેગ્ગ્લુટિનેશન -રોંગ). RNGA નો ઉપયોગ ચેપી રોગોનું નિદાન કરવા, ગર્ભાવસ્થા સ્થાપિત કરતી વખતે પેશાબમાં ગોનાડોટ્રોપિક હોર્મોન નક્કી કરવા, દવાઓ, હોર્મોન્સ અને અન્ય કેટલાક કિસ્સાઓમાં અતિસંવેદનશીલતાને ઓળખવા માટે થાય છે.

કોગગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા. રોગકારક કોષો સ્ટેફાયલોકોસીનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવે છે જે રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ સાથે પૂર્વ-સારવાર કરવામાં આવે છે. સ્ટેફાયલોકોસી જેમાં પ્રોટીન હોય છે એ,ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિનના એફસી ટુકડા સાથે સંબંધ ધરાવતા, બિન-વિશિષ્ટ રીતે એન્ટિમાઇક્રોબાયલ એન્ટિબોડીઝને શોષતા નથી, જે પછી દર્દીઓથી અલગ પડેલા અનુરૂપ સૂક્ષ્મજીવાણુઓ સાથે સક્રિય કેન્દ્રો સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે. કોગગ્લુટિનેશનના પરિણામે, સ્ટેફાયલોકોસી, ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ એન્ટિબોડીઝ અને શોધાયેલ સૂક્ષ્મજીવાણુઓનો સમાવેશ કરીને ફ્લેક્સ રચાય છે.

હેમાગ્ગ્લુટિનેશન અવરોધક પ્રતિક્રિયા(RTGA)નાકાબંધી પર આધારિત દમનવાયરસ ટાઇજેન્સરોગપ્રતિકારક સીરમના એન્ટિબોડીઝ, જેના પરિણામે વાયરસ લાલ રક્ત કોશિકાઓને એકત્ર કરવાની તેમની ક્ષમતા ગુમાવે છે. આરટીજીએ (RTGA) નો ઉપયોગ ઘણા વાયરલ રોગોના નિદાન માટે થાય છે, જેના કારણભૂત એજન્ટો (ઈન્ફલ્યુએન્ઝા વાયરસ, ઓરી, રૂબેલા, ટિક-બોર્ન એન્સેફાલીટીસ, વગેરે) વિવિધ પ્રાણીઓના લાલ રક્ત કોશિકાઓને એકીકૃત કરી શકે છે.

એન્ટિ-રીસસ એન્ટિબોડીઝ નક્કી કરવા માટે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (પરોક્ષ પ્રતિક્રિયાકોમ્બ્સ) ઇન્ટ્રાવાસ્ક્યુલર હેમોલિસિસવાળા દર્દીઓમાં વપરાય છે. આમાંના કેટલાક દર્દીઓમાં, એન્ટિ-રીસસ એન્ટિબોડીઝ મળી આવે છે, જે અપૂર્ણ અને મોનોવેલેન્ટ છે. તેઓ ખાસ કરીને આરએચ-પોઝિટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સ સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે, પરંતુ તેમના એકત્રીકરણનું કારણ નથી. આવા અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝની હાજરી પરોક્ષ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. આ કરવા માટે, એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ (માનવ ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન સામે એન્ટિબોડીઝ) એન્ટિ-આરએચ એન્ટિબોડીઝ + આરએચ-પોઝિટિવ એરિથ્રોસાઇટ્સની સિસ્ટમમાં ઉમેરવામાં આવે છે, જે એરિથ્રોસાઇટ્સના એકત્રીકરણનું કારણ બને છે. કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ કરીને, રોગપ્રતિકારક મૂળના એરિથ્રોસાઇટ્સના ઇન્ટ્રાવાસ્ક્યુલર લિસિસ સાથે સંકળાયેલ પેથોલોજીકલ પરિસ્થિતિઓનું નિદાન કરવામાં આવે છે, ઉદાહરણ તરીકે, નવજાત શિશુના હેમોલિટીક રોગ: આરએચ-પોઝિટિવ ગર્ભના એરિથ્રોસાઇટ્સ રક્તમાં ફરતા આરએચ પરિબળ સાથે અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાય છે, જેમાં આરએચ-નેગેટિવ માતામાંથી પ્લેસેન્ટામાંથી પસાર થાય છે.