Iz zvjezdanih ćelija jetre se razvijaju. Mogu li perisinusoidne ćelije biti regionalne matične ćelije jetre? Proučavanje uticaja Ito ćelija jetre na matične ćelije


1

Urađena je ultrastrukturna, imunohistohemijska i morfometrijska analiza populacije zvezdastih ćelija jetre u dinamici razvoja fibroze i ciroze infektivnog virusnog porekla. Otkrivena je fibrogena aktivacija zvjezdastih ćelija jetre, koju karakterizira smanjenje lipidnih kapljica i sinhrona ekspresija karakteristika sličnih fibroblastima - pozitivna imunohistokemijska reakcija na α-aktin glatkih mišića, hiperplazija granularnog citoplazmatskog retikuluma i pericelularno stvaranje brojnih kolagena. fibrili. Pokazalo se da, uprkos progresivnom smanjenju numeričke gustine zvezdastih ćelija koje sadrže lipide tokom razvoja fibroze, ostaje potreba da se održi funkcija taloženja retinoida: kod ciroze jetre, zvjezdane ćelije koje sadrže lipide pronađene su u fibroznim septa i unutar lobula. Zaključeno je da su zvjezdane ćelije jetre polimorfna heterogena populacija sa širokim rasponom funkcionalne aktivnosti.

fibrogeneza

zvezdaste ćelije jetre

ultrastruktura

imunohistohemija

1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Uloga zvjezdanih stanica jetre u regeneraciji jetre // J. Hepatol. – 2004. – God. 40. – P. 1023–1026.

2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Ciroza jetre i zvjezdane stanice jetre // Acta Cirúrgica Brasileira. – 2006. – God. 21. – str. 54–57.

3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Klasifikacija kroničnog hepatitisa: dijagnoza, stupnjevanje i stadiranje // Hepatologija. – 1994. – Vol. 19. – P. 1523–1520.

4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Fibroza jetre: signali koji dovode do pojačanja fibrogenih zvjezdanih stanica jetre // Front. Biosc. – 2003. – God. 8. – P. 69–77.

5. Geerts A. O porijeklu zvezdastih ćelija: mezodermalnih, endodermalnih ili neuro-ektodermalnih? // J. Hepatol. – 2004. – God. 40. – P. 331–334.

6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Fibroza jetre: traženje odgovora na stanični model // Liver Intern. – 2007. – God. 10. – P. 434–439.

7. Kiseleva T., Brenner D.A. Uloga zvjezdastih stanica jetre u fibrogenezi i preokretu fibroze // J. Gastroenterol. Hepatol. – 2007. – God. 22. – Str. S73–S78.

8. Ryder S.D. Progresija fibroze jetre kod pacijenata sa hepatitisom C: prospektivna ponovljena studija biopsije jetre // Gut. – 2004. – God. 53. – P. 451–455.

9. Schuppan D., Afdhal N.H. Ciroza jetre // Lancet. – 2008. – God. 371. – P. 838–851.

10. Senoo H. Struktura i funkcija zvjezdanih stanica jetre // Med. Elektron. Microsc. – 2004. – God. 37. – str. 3–15.

Zvezdaste ćelije jetre (lipociti, Ito ćelije, ćelije jetre koje akumuliraju masnoću) su lokalizovane u diseovim prostorima između hepatocita i endotelne obloge sinusoida i igraju vodeću ulogu u regulaciji retinoidne homeostaze, deponujući do 80% vitamina. A. Diseov prostor je područje najveće funkcionalne odgovornosti, pružajući transsinusoidnu razmjenu. U eksperimentalnim modelima i u ćelijskoj kulturi pokazano je da se zvjezdane stanice jetre diferenciraju u velike citoplazmatske lipidne kapljice koje sadrže vitamin A; ovaj fenotip se tumači kao "mirovanje".

Sve veći značaj pridaje se ulozi zvezdastih ćelija u razvoju fibroze i ciroze jetre. Nakon primanja fibrogenih podražaja, "mirne" zvjezdane stanice se "transdiferenciraju" u fenotip sličan miofibroblastu i počinju proizvoditi kolagen, proteoglikane i druge komponente ekstracelularnog matriksa. Fibroza na nivou centralnih vena, sinusoida ili portalnih sudova ograničava normalnu hemodinamiku jetre, što dovodi do smanjenja metabolički efikasnog parenhima, a potom do portalne hipertenzije i portosistemskog ranžiranja. Akumulacija vezivnog tkiva u Disseovim prostorima remeti normalan metabolički promet između krvi i hepatocita, ometajući klirens cirkulirajućih makromolekula, mijenjajući međućelijske interakcije i dovodeći do disfunkcije stanica jetre.

Postoje oprečna mišljenja o tome da li su aktivirane zvjezdane ćelije sposobne da se vrate u mirni fenotip. Dobiveni su dokazi da fibrogene zvjezdane stanice jetre mogu djelomično neutralizirati proces aktivacije, na primjer, kada su izložene retinoidima ili kada su u interakciji s komponentama ekstracelularnog matriksa, uključujući fibrilarni kolagen tipa I ili komponente bazalne membrane. Rješenje ovog problema leži u srcu problema reverzibilnosti fibroze i razvoja terapijskih pristupa liječenju ciroze jetre.

Svrha studije- sprovesti sveobuhvatno istraživanje strukturnih i funkcionalnih karakteristika zvezdastih ćelija jetre u dinamici fibroznih promena u modelu hronične HCV infekcije.

Materijal i metode istraživanja

Izvršeno je opsežno svjetlosno-optičko, elektronsko mikroskopsko i morfometrijsko istraživanje uzoraka biopsije jetre iz kronične HCV infekcije u različitim fazama fibroznih promjena (100 uzoraka podijeljenih u 4 jednake grupe prema težini fibroze). Važno je napomenuti da se zvjezdane ćelije koje sadrže lipide najbolje vizualiziraju na polutankim rezovima, dok se fibrogene zvjezdane stanice najbolje vizualiziraju samo na ultratankim rezovima ili imunohistokemijskim snimanjem.

Uzorci jetre su fiksirani u 4% rastvoru paraformaldehida ohlađenom na 4 °C, pripremljenom u Millonigovom fosfatnom puferu (pH 7,2-7,4); Parafinski rezovi su bojeni hematoksilinom i eozinom u kombinaciji sa Perlsovom reakcijom, prema Van Giesonu uz dodatno bojenje elastičnih vlakana Weigertovim resorcinol fuksinom, te je izvedena CHIC reakcija. Polutanki rezovi su obojeni Schiffovim reagensom i Azure II. Istraživanje je provedeno pomoću univerzalnog mikroskopa Leica DM 4000B (Njemačka). Mikrofotografije su snimljene digitalnom kamerom Leica DFC 320 i kompjuterskim programom Leica QWin. Ultratanki preseci, u kontrastu sa uranil acetatom i olovnim citratom, ispitivani su elektronskim mikroskopom JEM 1010 pri naponu ubrzanja od 80 kW.

Stadij fibroze jetre određivan je na skali od 4 stepena, u rasponu od portalne fibroze (stadijum I) do ciroze sa formiranjem porto-centralnih vaskularizovanih septa i nodularnom transformacijom parenhima. Zvezdaste ćelije jetre i drugi ćelijski elementi koji proizvode matriks identifikovani su u dinamici razvoja fibroze ekspresijom α-aktina glatkih mišića.

Ekspresija α-aktina u glatkim mišićima u ćelijama koje proizvode matriks jetre testirana je metodom indirektne imunoperoksidaze u dva koraka sa sistemom za snimanje proizvoda negativne kontrole streptavidin-biotin. Kao primarna antitela korišćena su mišja monoklonska antitela na α-aktin glatkih mišića (NovoCastra Lab. Ltd, UK) u razblaženju 1:25; kao sekundarna antitijela - univerzalna biotinilirana antitijela. Produkti imunohistohemijske reakcije vizualizirani su diaminobenzidinom, a zatim su rezovi obojeni Mayerovim hematoksilinom. Numerička gustina zvezdastih ćelija koje sadrže lipide procenjena je na polutankim presecima po jedinici vidnog polja od 38.000 μm2. Prilikom statističke obrade podataka korišćen je Studentov test; razlike u upoređenim parametrima smatrane su značajnim ako je vjerovatnoća greške P manja od 0,05.

Rezultati istraživanja i diskusija

Uz minimalne fibrozne promjene u jetri bolesnika s kroničnim hepatitisom C, u pravilu se nalazi prilično veliki broj zvjezdastih stanica, koje su jasno vidljive samo u polutankim i ultratankim presjecima i diferenciraju se u Disseovim prostorima. prisustvom velikih lipidnih kapljica u citoplazmi. Transformacija zvjezdastih stanica iz stanica koje “miruju” koje sadrže retinoide u fibrogene je praćena postupnim smanjenjem broja lipidnih kapljica. S tim u vezi, pravi broj zvjezdastih ćelija može se odrediti korištenjem sveobuhvatne elektronske mikroskopske i imunohistokemijske studije.

U početnim fazama fibroze (0, I) kod kroničnog hepatitisa C, prilikom proučavanja polutankih presjeka, populacija zvjezdastih stanica jetre odlikovala se izraženim polimorfizmom - veličina, oblik, broj lipidnih kapljica i njihova tinktorijalna svojstva oštro su varirali : razlike u osmiofilnosti materijala koji sadrži lipide u različitim stanicama. Numerička gustina zvezdastih ćelija jetre, vizuelizovana u preparatima prisustvom citoplazmatskih lipidnih kapljica, iznosila je 5,01 ± 0,18 po jedinici vidnog polja.

Osobine ultrastrukture zvjezdastih stanica povezane su s heterogenošću elektronske gustoće lipidnih kapljica ne samo unutar jedne ćelije, već i između različitih lipocita: na pozadini lipidnog supstrata koji je proziran elektronom, isticao se osmiofilniji rubni rub; Osim toga, jezgra su bila oštro polimorfna, a dužina citoplazmatskih procesa varirala. Među ultrastrukturnim karakteristikama zvezdastih ćelija koje sadrže lipide, uz prisustvo lipidnih kapljica, može se uočiti vrlo mala količina citoplazmatskog matriksa, siromašna membranskim organelama, uključujući mitohondrije, pa se, očigledno, ovaj fenotip lipocita naziva " mirovanje” ili “pasivno”.

U stadijumima fibroze II i III, ultrastruktura većine zvezdastih ćelija dobija takozvani mešoviti ili prelazni fenotip - istovremeno prisustvo morfoloških karakteristika ćelija koje sadrže lipide i ćelija sličnih fibroblastima. U takvim lipocitima, jezgre su imale duboke invaginacije nukleoleme, veću jezgru i povećan volumen citoplazme koja je zadržavala lipidne kapljice. Istovremeno se naglo povećao broj mitohondrija, slobodnih ribozoma, polisoma i tubula granularnog citoplazmatskog retikuluma. U pravilu je postojao membranski kontakt između lipidnih kapljica i mitohondrija, što ukazuje na „iskorišćavanje“ lipida. U mnogim ćelijama lipidne kapljice se razgrađuju stvaranjem autofagosoma, koji se zatim eliminiraju egzocitozom. U nekim slučajevima zabilježena je proliferacija zvjezdastih stanica mješovitog fenotipa.

Zvjezdane stanice koje proizvode matriks, najbrojnije u stadijumu ciroze jetre, karakterizirane su potpunim odsustvom lipidnih granula, oblikom nalik na fibroblast, razvijenim odjeljenjem za sintezu proteina i formiranjem kontraktilnih fibrilarnih struktura u citoplazmi; Brojni snopovi kolagenih vlakana sa specifičnim poprečnim prugama lokalizirani su pericelularno u Disseovim prostorima.

Općenito, s napredovanjem kroničnog hepatitisa C, praćenom intralobularnom perisinusoidnom fibrogenezom, pojavili su se morfološki znaci aktivacije zvjezdastih stanica jetre, njihova transformacija iz takozvanih “pasivnih” koje akumuliraju vitamin A, u fibrogene i proliferirajuće stanice.

U fazi transformacije u cirozu jetre, došlo je do značajnog smanjenja numeričke gustine zvezdastih ćelija koje sadrže lipide, što ukazuje na njihovu fibrogenu transformaciju. Međutim, s utvrđenom cirozom jetre, u izolovanim slučajevima bilo je područja parenhima jetre sa perisinusoidnim zvjezdastim stanicama koje sadrže lipide. Osim toga, u jednom uzorku pronađeni su brojni lipociti u periportalnom fibroznom tkivu, što vjerovatno ukazuje na važnu ulogu zvjezdastih stanica u metabolizmu retinoida u organizmu, čak iu stadijumu ciroze organa. Osim toga, čini se da zvjezdane stanice imaju niz drugih funkcija, nalaze se iu ekstrahepatičnim organima kao što su gušterača, pluća, bubrezi i crijeva, a vjeruje se da jetrene i ekstrahepatične zvjezdane stanice formiraju diseminirani zvjezdasti ćelijski sistem tijelo, slično APUD sistemu. Na primjer, usprkos povezanosti fibrogenih zvjezdanih stanica s cirozom jetre, njihova aktivacija može imati korisnu ulogu u slučajevima akutne ozljede jer rezultira stvaranjem odgovarajućeg stromalnog kola za regeneraciju parenhimskih stanica.

Ozbiljnost perihepatocelularne fibroze kod hronične HCV infekcije, prema morfometrijskoj analizi, imala je značajnu inverznu korelaciju sa numeričkom gustinom zvezdastih ćelija koje sadrže lipide – u III stadijumu fibroze i ciroze organa iznosila je 0,20 ± 0,03 po jedinici vida. polje, što je značajno manje (str< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).

Testirali smo fibrogenu aktivnost ćelija jetre koje proizvode matriks koristeći imunohistohemijsku studiju ekspresije alfa aktina glatkih mišića. Produkti imunohistohemijske reakcije različitog intenziteta pronađeni su u citoplazmi aktiviranih zvezdastih ćelija lokalizovanih unutar jetrenih lobula. Posebno značajna ekspresija α-aktina glatkih mišića uočena je u citoplazmi fibroblasta i miofibroblasta portalnih zona, vaskularnih glatkih mišićnih ćelija i miofibroblasta oko centralnih vena.

Većina podataka o ćelijskim mehanizmima fibrogeneze dolazi iz studija provedenih na zvjezdanim stanicama jetre, ali je jasno da različite stanice koje proizvode matriks (svaka s različitom lokacijom, imunohistohemijskim i ultrastrukturnim fenotipom) doprinose razvoju fibroze jetre. Uključuju fibroblaste i miofibroblaste portalnih trakta, vaskularne glatke mišićne ćelije i miofibroblaste oko centralnih vena, koji se aktiviraju u uslovima hroničnog oštećenja jetre.

Zaključak

Dokazana je uloga zvjezdastih stanica jetre u nastanku fibroze organa kod kroničnog hepatitisa C. Kako fibroza napreduje, brojčana gustina zvijezdastih stanica koje sadrže lipide značajno opada, dok dio populacije zadržava fenotip tzv. za obavljanje metaboličke funkcije. Zvezdane ćelije jetre slične miofibroblastima u stanju fibrogene aktivacije karakterišu sledeće strukturne i funkcionalne karakteristike: smanjenje broja i naknadni nestanak lipidnih kapljica, hiperplazija granularnog citoplazmatskog retikuluma i mitohondrija, fokalna proliferacija, imunohistohemijska ekspresija karakteristika sličnih fibroblastima, uključujući α-aktin glatkih mišića i formiranje pericelularnih kolagenskih vlakana u Disseovim prostorima.

Dakle, zvijezdaste ćelije jetre nisu statična, već dinamična populacija koja je direktno uključena u remodeliranje intralobularnog perihepatocelularnog matriksa.

Recenzenti:

Vavilin V.A., doktor medicinskih nauka, profesor, dr. Laboratorija za metabolizam lekova, Istraživački institut za molekularnu biologiju i biofiziku, Sibirski ogranak Ruske akademije medicinskih nauka, Novosibirsk;

Kliver E.E., doktor medicinskih nauka, vodeći istraživač u Laboratoriji za patomorfologiju i elektronsku mikroskopiju, Novosibirski istraživački institut za cirkulatornu patologiju po imenu akademika E.N. Meshalkin Ministarstvo zdravlja i socijalnog razvoja Ruske Federacije, Novosibirsk.

Rad je primljen od strane urednika 15. avgusta 2011. godine.

Bibliografska veza

Postnikova O.A., Nepomnyashchikh D.L., Aidagulova S.V., Vinogradova E.V., Kapustina V.I., Nokhrina Zh.V. STRUKTURNE I FUNKCIONALNE KARAKTERISTIKE ZVEZDANIH ĆELIJA JETRE U DINAMICI FIBROZE // Fundamentalna istraživanja. – 2011. – br. 10-2. – P. 359-362;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28817 (datum pristupa: 30.01.2020.). Predstavljamo Vam časopise koje izdaje izdavačka kuća "Akademija prirodnih nauka"

Iznad, šematski prikaz Itoh ćelije (HSC) pored obližnjih hepatocita (PC), ispod jetrenih sinusoidnih epitelnih ćelija (ECs). S - sinusoida jetre; KC - Kupferova ćelija. Dolje lijevo - Ito ćelije u kulturi pod svjetlosnim mikroskopom. Dolje desno - Elektronska mikroskopija otkriva brojne masne vakuole (L) Itoh stanica (HSC) koje pohranjuju retinoide.

Ito ćelije(sinonimi: zvezdasta ćelija jetre, ćelija za skladištenje masti, lipocita, engleski Hepatična zvezdasta ćelija, HSC, Ito ćelija, Ito ćelija) - periciti sadržani u, sposobni da funkcionišu u dva različita stanja - miran I aktiviran. Aktivirane Ito ćelije igraju važnu ulogu u formiranju ožiljnog tkiva kod oštećenja jetre.

U intaktnoj jetri nalaze se zvijezdaste stanice mirno stanje. U tom stanju ćelije imaju nekoliko izbočina koje pokrivaju sinusoidnu kapilaru. Još jedna karakteristična karakteristika ćelija je prisustvo rezervi vitamina A (retinoida) u njihovoj citoplazmi u obliku masnih kapljica. Mirne Ito ćelije čine 5-8% svih ćelija jetre.

Ito-ćelijske izrasline dijele se u dvije vrste: perisinusoidalni(subendotelni) i interhepatocelularni. Prvi izlaze iz tijela ćelije i protežu se duž površine sinusoidne kapilare, prekrivajući je tankim granama nalik prstima. Perisinusoidne izbočine prekrivene su kratkim resicama i imaju karakteristične duge mikroizbojke koji se protežu i dalje duž površine kapilarne endotelne cijevi. Interhepatocelularne projekcije, nakon što su prevladale ploču hepatocita i dosegle susjednu sinusoidu, podijeljene su u nekoliko perisinusoidnih projekcija. Dakle, u prosjeku, Ito ćelija pokriva nešto više od dvije susjedne sinusoide.

Kada je jetra oštećena, Ito ćelije postaju aktivirano stanje. Aktivirani fenotip karakterizira proliferacija, kemotaksija, kontraktilnost, gubitak zaliha retinoida i formiranje stanica sličnih miofibroblastima. Aktivirane zvijezdaste ćelije jetre također pokazuju povećane nivoe novih gena kao što su ICAM-1, hemokini i citokini. Aktivacija ukazuje na početak rane faze fibrogeneze i prethodi povećanom stvaranju ECM proteina. Završnu fazu zacjeljivanja jetre karakterizira povećana apoptoza aktiviranih Ito stanica, zbog čega je njihov broj naglo smanjen.

Bojenje zlatnim hloridom koristi se za vizualizaciju Ito ćelija pod mikroskopom. Takođe je utvrđeno da je pouzdan marker za razlikovanje ovih ćelija od drugih miofibroblasta njihova ekspresija Reelin proteina.

Priča [ | ]

Karl von Kupfer je 1876. opisao ćelije koje je nazvao "Sternzellen" (zvezdane ćelije). Kada se boje zlatnim oksidom, inkluzije su bile vidljive u citoplazmi ćelija. Pogrešno smatrajući da su to fragmenti crvenih krvnih zrnaca zarobljenih fagocitozom, Kupfer je 1898. revidirao svoje stavove o "zvjezdanoj ćeliji" kao zasebnoj vrsti ćelije i klasificirao ih kao fagocite. Međutim, u narednim godinama, opisi ćelija sličnih Kupferovim „zvezdanim ćelijama” redovno su se pojavljivali. Dobili su različita imena: intersticijske ćelije, parasinusoidne ćelije, lipociti, periciti. Uloga ovih ćelija ostala je misterija 75 godina, sve dok profesor (Toshio Ito) nije otkrio određene ćelije koje sadrže inkluzije masti u perisinusoidnom prostoru ljudske jetre. Ito ih je nazvao "shibo-sesshu saibo" - ćelije koje upijaju masti. Shvativši da su inkluzije masnoće koje proizvode ćelije iz glikogena, promijenio je ime u "shibo-chozo saibo" - ćelije koje skladište masnoće. IN

Glavni izvor endotoksina u tijeluje gram-negativna crijevna flora. Trenutno nema sumnje da je jetra glavni organ vršenje čišćenja endotoksina. Endotoksin prvenstveno preuzimaju ćelije kami Kupffer (KK), u interakciji sa membranskim receptorom CD 14. Može se vezati za sam receptor lipopolisaharida(LPS), i njegov kompleks sa proteinom koji vezuje lipid A com plazma. Interakcija LPS-a s makrofagima jetre pokreće niz reakcija zasnovanih na proizvodnji i oslobađanju smanjenje citokina i drugih biološki aktivnih posrednici.

Postoje mnoge publikacije o ulozi makrofagov jetre (LC) u preuzimanju i čišćenju bakterijskog LPS-a, ali interakcija endotela s drugim mezenhimalnićelije, posebno sa perisinusoidalni Ito ćelije praktički nisu proučavane.

ISTRAŽIVAČKA METODOLOGIJA

Bijeli mužjaci pacova težine 200 g ubrizgani su intraperitonealno u 1 ml sterilne fiziološke otopine visoko prečišćen liofilizirani LPS E. coli soj 0111 u dozi od 0,5,2,5, 10, 25 i 50 mg/kg. U periodima od 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 sata i 1 sedmicu, unutrašnji organi su uklonjeni pod anestezijom i stavljeni u puferirani 10% formalin. Materijal je izliven u parafinske blokove. Presjeci debljine 5 µm su obojeni imunohistohemijskistreptavidin-biotin metoda anti-desmin antitijela, α - glatko- mišićni aktin (A-GMA) i nuklearni antigenćelije koje se dobro razmnožavaju ( PCNA, " Dako"). Desmin je korišten kao marker perisinusoidalniIto ćelije, A-GMA - as ve marker miofibroblasti, PCNA - proliferirajuće ćelije. Za otkrivanje endotoksina u ćelijama jetre, pročišćeni anti-Re-glikolipidantitela (Institut za opštu i kliničku patologiju KDO, Moskva).

REZULTATI ISTRAŽIVANJA

Pri dozama od 25 mg/kg i više, uočen je smrtni šok 6 sati nakon primjene LPS-a. Akutna izloženost LPS-u na tkivu jetre izazvala je aktivaciju Ito ćelija, što se manifestovalo povećanjem njihovog broja. Broj desmin positivećelije su se povećale od 6 sati nakon injekcije LPS-a i dostigle maksimum ma do 48-72 sata (sl. 1, a, b).

Rice. 1. Presjeci krovne jetre sove, obrađeno LSAB -ja- vrijedanantitela na des moj(Bend α - glatko cervikalni aktin (c), x400 (A, b), x200 (in).

a - prije primjene endotoksinana, samac desminpozitivanIto ćelije u periportalnoj zoni; b- 72 satanakon primjene endotoksina na: brojni desminpozitivan Ito ćelije; V- 120 sati nakon primjene en dotoksin: α - glatke mišiće prisutan je samo aktivni aktinna ćelije glatkih mišića kah posuda.

U 1 broj sedmice desmin positivećelije su se smanjile, alibio veći od kontrolnih indikatora. At U ovom slučaju, ni u kom slučaju nismo posmatrali izgled A-GMA-pozitivanćelije u sinusu dati jetru. Interno pozitivno kontrolu kada se boje antitelima na A-GMA služi za identifikaciju glatkih mišićnih ćelija krvivenske žile portalnog trakta koje sadrže A-GMA (slika 1, V). Stoga, uprkos povećanju broja Ito ćelija, jednokratno izloženost LPS ne dovodi do transformacije ( transdiferencijacija) ih u miofibroblaste.


Rice. 2. Sekcije jetrepacovi tretirani LSAB -obeležena antitela na PCNA. a - prije uvođenja en dotoksin: pojedinačniproliferirajućih gena patociti, x200; b - 72 sata nakon primjene endotoksina: brojni proliferirajući hepatociti, x400.

Povećanje količine desmin positivećelije su započele unutar zone portala. Od 6 sati do 24 sata nakon primjene LPS-a perisinusoidalnićelije su nađene samo oko portalnih trakta, tj. u 1. zoni ACI noosa. U 48-72 sata, kada je uočen makmaksimalna količina desmin positive ljepilo trenutno, pojavile su se i u drugim područjima acinusa; ipak, većina Ito ćelija je još uvijek bila periportalno.

Možda je to zbog činjenice da periportallocirani CC su prvi koji snimaju endotoksin koji dolazi iz crijeva kroz portalnu venu ili iz sistemske cirkulacije. Ak aktivirani CC proizvode širok spektar citokini, za koje se smatra da pokreću aktivaciju Ito ćelija i transdiferencijacija ih u miofibroblaste. Očigledno, zbog toga Ito ćelije koje se nalaze u blizini aktiviranih makrofaga jetre (u 1. zoni acinusa) prve reaguju na oslobađanje citokina. Međutim, nismo ih uočili u našoj studiji. transdiferencijacija V miofibroblasti, a to sugerira da citokini koje luče CC i hepatociti mogu poslužiti kao faktor koji podržava proces koji je već započeo transdiferencijacija, ali vjerovatno nisu u stanju da ga pokrenu jednom izloženošću jetre LPS-u.

Uočeno je i povećanje proliferativne aktivnosti ćelija uglavnom u 1. zoni acinusa. Ovo vjerovatno sugerira da su svi (ili skoro svi) procesi usmjereni na van O- i parakrina regulacija međućelijskih interakcija javlja se u periportalnim zonama. Uočeno je povećanje broja proliferirajućih ćelija od 24 sata nakon primjene LPS; broj pozitivnih ćelija se povećao do 72 sata (maksimalna proliferativna aktivnost, sl. 2, a, b). Proliferirali su i hepatociti i sinusoidne ćelije. Međutim, mrlje na PCNA ne daje sposobnost da se identifikuje tip proliferacije preživljene sinusoidne ćelije. Prema literaturi, djelovanje endotoksina dovodi do pojačanog zavisno od količine CC. Misle da se radi o dolazi i od proliferacije jetrenih makrofaga i od migracije monocita iz drugih organa. Citokini koje oslobađaju CK mogu povećati proliferativni kapacitet Ito ćelija. Stoga je logično pretpostaviti da su zastupljene proliferirajuće ćelije perisinusoidalni Ito ćelije. Povećanje njihovog broja koje smo zabilježili očigledno je neophodno da bi se povećala sinteza faktora rasta i obnovio intercelularni matriks u uslovima oštećenja. Ovo može biti jedna od karika u kompenzatorno-restorativnim reakcijama jetre, budući da su Ito stanice glavni izvor komponenti intercelularnog matriksa, faktora matičnih stanica i faktora rasta hepatocita, koji su uključeni u popravak i diferencijaciju. formiranje epitelnih ćelija jetre. Odsutan preko transformacije Ito ćelija u miofibroblasti ukazuje da jedna epizoda endotoksinske agresije nije dovoljna za razvoj fibroze jetre.

Dakle, akutni efekti endotok syna uzrokuje povećanje broja desmin positive Ito ćelije, što je indirektan znak oštećenja jetre. Količina perisinusoidalnićelija se povećava, očigledno kao rezultat njihove proliferacije. Jedna epizoda endotoksinske agresije uzrokuje obrnuto moja aktivacija perisinusoidalni Ito ćelije i ne vodi do njih transdiferencijacija u miofibroblaste. S tim u vezi, može se pretpostaviti da u mehanizmima aktivacije i transdiferencijacija Ito ćelije ne uključuju samo endotoksin i citokine, već i neke druge faktore međustaničnih interakcija.

LITERATURA

1. Mayansky D.N., Wisse E., Decker K. // Nove granice hepatologija. Novosibirsk, 1992.

2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Napredovaćemo, biol. 1998. T. 118, br. 1. str. 33-49.

3. Yakovlev M.Yu. // Kazan . m jedinica časopis 1988. br. 5. str. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [B]. 1992. Vol. 61.P. 343-349.

5. Gressner A. M. // Hepatogastronterologija. 1996. Vol. 43. P. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Priroda. 1995. Vol. 373, N 6516. P. 699-702.

7. Wisse E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, N 1. str. 100-111.

Ključne riječi

JETRA / ZVEZDANE ĆELIJE ITO/ MORFOLOGIJA / KARAKTERISTIKE / VITAMIN A / FIBROZA / JETRA / JETRA / ZVEZDANE ĆELIJE / MORFOLOGIJA / KARAKTERISTIKE / VITAMIN A / FIBROZA

anotacija naučni članak o fundamentalnoj medicini, autor naučnog rada - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovič I.A.

Uvod. Uloga Ito zvjezdanih stanica (ISC) identificirana je kao jedna od vodećih u razvoju fibroze u jetri, međutim, intravitalna vizualizacija strukture ISC se minimalno koristi u kliničkoj praksi. Svrha rada: predstaviti strukturne i funkcionalne karakteristike PCI na osnovu rezultata citološke identifikacije intravitalnih biopsija jetre. Materijali i metode. Korištene su klasične metode svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsijskih uzoraka i originalne tehnike ultratankih rezova, fiksacije i bojenja. Rezultati. Foto ilustracije svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsija jetre pacijenata s kroničnim hepatitisom C pokazuju strukturne karakteristike PCI u različitim fazama (mirovanje, aktivacija) iu procesu transformacije u miofibroblaste. Zaključci. Upotreba originalnih metoda kliničke morfološke identifikacije i procjene funkcionalnog stanja jetre poboljšat će kvalitetu dijagnoze i prognoze fibroze jetre.

Povezane teme naučni radovi o fundamentalnoj medicini, autor naučnog rada - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovič I.A.

Uvod. Uloga Ito zvjezdanih stanica (Hepatic Stellate Cells, HSC) je identificirana kao jedna od vodećih u razvoju fibroze jetre, ali je upotreba intravitalne vizualizacije HSC struktura u kliničkoj praksi minimalna. Cilj rada je prikazati strukturne i funkcionalne karakteristike HSC na osnovu nalaza citološke identifikacije uzoraka intravitalne biopsije jetre. Materijali i metode. Primijenjene su klasične metode svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsijskih uzoraka u okviru originalne tehnike korištenja ultratankih rezova, fiksacije i bojenja. Rezultati. Strukturne karakteristike HSC uzoraka biopsije jetre pacijenata sa kroničnim hepatitisom C prikazane su na foto ilustracijama svjetlosne i elektronske mikroskopije. HSC su prikazani u različitim fazama (mirovanje, aktivacija) i tokom procesa transformacije u miofibroblaste. Zaključci. Korištenje originalnih metoda kliničke i morfološke identifikacije i procjene funkcionalnog statusa HSC omogućava poboljšanje kvalitete dijagnoze i prognoze fibroze jetre.

Tekst naučnog rada na temu “Klinička citologija jetre: Ito zvjezdane stanice”

UDC 616.36-076.5

KLINIČKA CITOLOGIJA JETRE: ITO ZVEZDANE ĆELIJE

Tsyrkunov V. M. ( [email protected]), Andreev V. P. ( [email protected]), Kravchuk R. I. ( [email protected]), Kondratovič I. A. ( [email protected]) EE "Grodno State Medical University", Grodno, Bjelorusija

Uvod. Uloga Ito zvjezdanih stanica (ISC) identificirana je kao jedna od vodećih u razvoju fibroze u jetri, međutim, intravitalna vizualizacija strukture ISC se minimalno koristi u kliničkoj praksi.

Svrha rada: predstaviti strukturne i funkcionalne karakteristike PCI na osnovu rezultata citološke identifikacije intravitalnih biopsija jetre.

Materijali i metode. Korištene su klasične metode svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsijskih uzoraka i originalne tehnike ultratankih rezova, fiksacije i bojenja.

Rezultati. Foto ilustracije svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsija jetre pacijenata s kroničnim hepatitisom C pokazuju strukturne karakteristike PCI u različitim fazama (mirovanje, aktivacija) iu procesu transformacije u miofibroblaste.

Zaključci. Upotreba originalnih metoda kliničke morfološke identifikacije i procjene funkcionalnog stanja jetre poboljšat će kvalitetu dijagnoze i prognoze fibroze jetre.

Ključne reči: jetra, Ito zvezdaste ćelije, morfologija, karakteristike, vitamin A, fibroza.

Uvod

Nepovoljan ishod većine kroničnih difuznih lezija jetre različite etiologije, uključujući i kronični hepatitis C (CHC), je fibroza jetre, u čijem su razvoju glavni sudionici aktivirani fibroblasti, čiji su glavni izvor aktivirane Ito zvjezdane stanice (Ito zvjezdane stanice ćelije).

Hepatična zvezdasta ćelija, HSC, Ito ćelija, Ito ćelija. ZCI je prvi opisao 1876. K. Kupffer i nazvao zvjezdanim ćelijama (“Stemzellen”). T. Ito, otkrivši u njima kapljice masti, prvo ih je označio kao apsorbirajuće masti (“shibo-sesshusaibo”), a zatim, utvrdivši da mast proizvode same ćelije iz glikogena, ćelije koje skladište masnoće (“shibo- chozosaibo”) . Godine 1971. K. Wake je dokazao identitet Kupffferovih zvjezdanih ćelija i Ito ćelija koje skladište masnoće i da te ćelije „pohranjuju“ vitamin A.

Oko 80% vitamina A u tijelu se akumulira u jetri, a do 80% svih jetrenih retinoida se taloži u masnim kapljicama jetre. Estri retinola u sastavu hilomikrona ulaze u hepatocite, gdje se pretvaraju u retinol, formirajući kompleks vitamina A sa proteinom koji vezuje retinol (RBP), koji se luči u perisinusoidni prostor, odakle se deponuje u ćelijama.

Bliska veza između PCI i fibroze jetre koju je ustanovio K. Popper pokazala je njihovu ne statičku, već dinamičku funkciju – sposobnost direktnog učešća u remodeliranju intralobularnog perihepatocelularnog matriksa.

Glavna metoda morfološkog pregleda jetre, koja se provodi radi procjene promjena u intravitalnim biopsijama, je svjetlosna mikroskopija, koja u kliničkoj praksi omogućava određivanje aktivnosti jetre.

pečenje i stadij hroničnosti. Nedostatak metode je niska rezolucija, koja ne dozvoljava procjenu strukturnih karakteristika ćelija, unutarćelijskih organela, inkluzija i funkcionalnih karakteristika. Intravitalni elektronski mikroskopski pregled ultrastrukturnih promjena u jetri omogućava dopunu podataka svjetlosne mikroskopije i povećanje njihove dijagnostičke vrijednosti.

U tom smislu, identifikacija jetrenih HCI, proučavanje njihovog fenotipa u procesu transdiferencijacije i određivanje intenziteta njihove proliferacije su najvažniji doprinos predviđanju ishoda bolesti jetre, kao i patomorfologiji i patofiziologija fibrogeneze.

Cilj je prikazati strukturne i funkcionalne karakteristike PCI na osnovu rezultata citološke identifikacije intravitalnih biopsija jetre.

materijali i metode

Intravitalna biopsija jetre dobijena je izvođenjem aspiracijske biopsije jetre kod pacijenata sa CHC (HCV RNA+), od kojih je dobijen pismeni informirani pristanak.

Za svjetlosnu mikroskopiju polutankih rezova, uzorci biopsije jetre pacijenata dimenzija 0,5^2 mm fiksirani su metodom dvostruke fiksacije: prvo metodom Sato Taizan, a zatim su uzorci tkiva dodatno fiksirani na 1 sat u pripremljenom 1% osmijum fiksatoru. sa 0,1 M fosfatnim Sorensen puferom, pH 7,4. Za bolju identifikaciju intracelularnih struktura i intersticijskih supstanci na polutankim rezovima, u 1% osmijum tetroksida dodani su kalijev dihromat (K2Cr2O7) ili kristali hromnog anhidrida (1 mg/ml). Nakon dehidracije uzoraka u nizu alkoholnih rastvora sve veće koncentracije i acetona, stavljeni su u prepolimerizovanu mešavinu butil metakrilata i stirena i polimerizovani na 550C. Polutanki rezovi (debljine 1 µm) su uzastopno obojeni

azurni II-osnovni fuksin. Mikrofotografije su snimljene digitalnom video kamerom (Leica FC 320, Njemačka).

Elektronsko mikroskopsko ispitivanje je obavljeno u uzorcima biopsije jetre dimenzija 0,5x1,0 mm, fiksiranih sa 1% rastvorom osmijum tetroksida u 0,1 M Milloniga puferu, pH 7,4, na +40C tokom 2 sata. Nakon dehidracije u uzlaznim alkoholima i acetonu, uzorci su ugrađeni u Araldite. Od nastalih blokova pripremljeni su polutanki rezovi (400 nm) pomoću Leica EM VC7 ultramikrotoma (Njemačka) i obojeni metilenskim plavim. Preparati su ispitani pod svjetlosnim mikroskopom i odabrano je slično područje za daljnje proučavanje ultrastrukturnih promjena. Ultratanki rezovi (35 nm) su obojeni sa 2% uranil acetata u 50% metanola i olovnog citrata prema E.S. Reynoldsu. Elektronski mikroskopski preparati su proučavani u elektronskom mikroskopu JEM-1011 (JEOL, Japan) pri uvećanjima od 10.000-60.000 i naponu ubrzanja od 80 kW. Za dobijanje slika korišćen je kompleks koji se sastoji od digitalnog fotoaparata Olympus MegaViewIII (Nemačka) i softvera za obradu slike iTEM (Olympus, Nemačka).

Rezultati i diskusija

PCI se nalaze u perisinusoidnom prostoru (Disse) u džepovima između hepatocita i endotelnih ćelija, i imaju duge procese koji prodiru duboko između hepatocita. Većina publikacija posvećenih ovoj populaciji CCI daje njihov šematski prikaz, koji samo omogućava da se ukaže na „teritorijalnu“ pripadnost KCI u jetri iu odnosu na okolne „susjede“ (Slika 1).

PCI imaju bliski kontakt sa endotelnim ćelijama kroz komponente nepotpune bazalne membrane i intersticijalna kolagena vlakna. Nervni završeci prodiru između PCI i parenhimskih ćelija, zbog čega se Disseov prostor definiše kao prostor između ploča parenhimskih ćelija i

kompleks HCI i endotelnih ćelija.

Vjeruje se da PCI potiču iz slabo diferenciranih mezenhimskih stanica poprečnog septuma jetre u razvoju. Eksperimentom je utvrđeno da hematopoetske matične ćelije učestvuju u formiranju HCI i da ovaj proces nije uzrokovan fuzijom ćelija.

Sinusoidne ćelije (SC), prvenstveno HSC, imaju vodeću ulogu u svim vrstama regeneracije jetre. Fibrozirajuća regeneracija jetre nastaje kao rezultat inhibicije matičnih funkcija jetre i matičnih stanica koštane srži. U ljudskoj jetri, HSC čine 5-15%, što je jedan od 4 tipa SC koji su mezenhimskog porijekla: Kupfferove ćelije, endotelne ćelije, Pd ćelije. SC bazen takođe sadrži 20-25% leukocita.

Citoplazma HCI sadrži masne inkluzije sa retinolom, trigliceridima, fosfolipidima, holesterolom, slobodnim masnim kiselinama, α-aktinom i desminom. Bojenje zlatnim hloridom koristi se za vizualizaciju PCI. Eksperimentom je utvrđeno da je marker diferencijacije HCI od drugih miofibroblasta njihova ekspresija Reelin proteina.

HSC postoje u tihim („neaktivni HSC“), prolaznim i dugotrajno aktiviranim stanjima, od kojih je svako okarakterisano ekspresijom gena i fenotipom (α-MA, ICAM-1, hemokini i citokini).

U neaktivnom stanju, HCI imaju okrugli, blago izdužen ili nepravilan oblik, veliko jezgro i jasnu vizualnu osobinu - lipidne inkluzije (kapljice) koje sadrže retinol (slika 2).

Broj lipidnih kapljica u neaktivnom HCI doseže 30 ili više; one su bliske veličine, susjedne jedna uz drugu, pritišću se u jezgro i potiskuju ga na periferiju (slika 2). Male inkluzije mogu se nalaziti između velikih kapi. Boja kapi ovisi o fiksatoru i boji materijala. U jednom slučaju su svijetle (slika 2a), u drugom su tamnozelene (slika 2b).

Slika 1. - Šema lokacije PCI (stellatecell, perisinusoidalni lipocit) u perisinusoidalnom prostoru Disse (prostor Disse), Internet resurs

Slika 2. - ZKI u neaktivnom stanju

a - HCI okruglog oblika sa visokim sadržajem lipidnih kapljica svijetle boje (bijele strelice), hepatocita (Hz) sa devastiranom citoplazmom (crna strelica); b - HCI sa tamno obojenim lipidnim kapljicama, u bliskom kontaktu sa makrofagom (Mph); a-b - polutanki profili. Boja azure II je osnovna magenta. Mikrofotografije. Povećano 1000; c - ZCI sa obiljem lipidnih kapljica (više od 30), nepravilnog oblika (veličine 6.000); d-ultrastrukturne komponente ICI-a: l-lipidne kapljice, mitohondrije (narandžaste strelice), GRES (zelene strelice), Golgijev kompleks (crvena strelica), uv. 15.000; v-d - dijagrami difrakcije elektrona

Elektronskom mikroskopijom formira se osmiofilniji marginalni rub na pozadini laganog lipidnog supstrata (slika 5a). U većini HCI u „mirovanju“, zajedno sa velikim lipidnim inkluzijama, postoji primetno mala količina citoplazmatskog matriksa, siromašnog mitohondrijama (Mx) i granularnog endoplazmatskog retikuluma (GRE). U ovom slučaju, odjeljci srednje razvijenog Golgijevog kompleksa jasno su vidljivi u obliku hrpe od 3-4 spljoštene cisterne sa blago proširenim krajevima (slika 2d).

Pod određenim uslovima, aktivirani HSC dobijaju mešoviti ili prelazni fenotip, kombinujući morfološke karakteristike ćelija koje sadrže lipide i ćelija sličnih fibroblastima (Slika 3).

Prijelazni fenotip PCI također ima svoje morfološke karakteristike. Stanica poprima izduženi oblik, smanjuje se broj lipidnih inkluzija, a smanjuje se broj invaginacija nukleoleme. Volumen citoplazme se povećava, sadrži brojne cisterne GES-a sa vezanim ribosomima i slobodnim ribosomima, Mx. Uočena je hiperplazija komponenti lamelarnog Golgijevog kompleksa, predstavljena s nekoliko naslaga od 3-8 spljoštenih cisterni, povećava se broj lizosoma uključenih u degradaciju.

Slika 3. - ZKI u prelaznom stanju

a - ZKI (bijele strelice). Polutanka kriška. Boja azure II je osnovna magenta. Mikrofotografija. Povećano 1000; b - ZCI izduženog oblika i sa malim brojem lipidnih kapljica; uv. 8.000; c - ZCI u kontaktu sa Kupferovim ćelijama (KC) i limfocitom (Lc), uv. 6000. (Hz - hepatocit, l - lipidne kapi, E - eritrocit); d - mitohondrije (narandžaste strelice), GRES (zelene strelice), Golgijeva ćelija (crvena strelica), lizozomi (plave strelice), nivo 20.000; b, c, d - dijagrami difrakcije elektrona

cija lipidnih kapljica (slika 3d). Hiperplazija komponenti GRES-a i Golgijevog kompleksa povezana je sa sposobnošću fibroblasta da sintetiziraju molekule kolagena, kao i da ih modeliraju kroz posttranslacijsku hidroksilaciju i glikozilaciju u endoplazmatskom retikulumu i elementima Golgijevog kompleksa.

U neoštećenoj jetri, PCI, u mirnom stanju, prekriva sinusoidnu kapilaru svojim procesima. Procesi PCI su podijeljeni u 2 tipa: perisinusoidni (subendotelni) i interhepatocelularni (slika 4).

Prvi napuštaju tijelo ćelije i prostiru se duž površine sinusoidne kapilare, prekrivajući je tankim granama nalik prstima. Prekrivene su kratkim resicama i imaju karakteristične duge mikroejekcije koje se protežu i dalje duž površine endotelne cijevi kapilare. Interhepatocelularne projekcije, nakon što su prevladale ploču hepatocita i dosegle susjednu sinusoidu, podijeljene su u nekoliko perisinusoidnih projekcija. Dakle, ZKI u prosjeku pokriva više od dvije susjedne sinusoide.

Kod oštećenja jetre dolazi do aktivacije PCI i procesa fibrogeneze, u kojem se razlikuju 3 faze. Oni su označeni inicijacijom, produženjem i rezolucijom (razlučivanjem fibroznog tkiva). Ovaj proces transformacije "mirujućih" HSC u fibrozirajuće miofibroblaste iniciraju citokini (^-1,^-6,

Slika 4. - Perisinusoidni (subendotelni) i interhepatocelularni procesi (izrasline) PCI

a - proces PCI (žute strelice) koji izlazi iz tijela ćelije, uv. 30.000; b - produžetak ZCI, smješten duž površine sinusoidne kapilare, sadrži kapljicu lipida, uv. 30.000; c - subendotelno locirani procesi PCI. Procesi endotelnih ćelija (ružičaste strelice); d - interhepatocelularni proces PCI; područje razaranja membrana HCI i hepatocita (crne strelice), uv. 10 000. Obrasci difrakcije elektrona

TOT-a), nedovoljno oksidirani metabolički produkti, reaktivne vrste kisika, dušikov oksid, endotelin, faktor aktivacije trombocita (PDGF), aktivator plazminogena, transformirajući faktor rasta (TGF-1), acetaldehid i mnogi drugi. Direktni aktivatori su hepatociti u stanju oksidativnog stresa, Kupfferove ćelije, endoteliociti, leukociti, trombociti koji proizvode citokine (parakrini signali) i sami PCI (autokrina stimulacija). Aktivaciju prati ekspresija (uključivanje u rad) novih gena, sinteza citokina i proteina ekstracelularnog matriksa (tipovi I, III, U kolagena).

U ovoj fazi, proces aktivacije PCI se može završiti stimulacijom stvaranja protuupalnih citokina u PCI, inhibirajući proizvodnju TOT-a od strane makrofaga u zoni oštećenja. Kao rezultat toga, broj HCI je naglo smanjen, oni prolaze kroz apoptozu i procesi fibroze u jetri se ne razvijaju.

U drugoj fazi (produženoj), uz produženu konstantnu parakrinu i autokrinu izloženost aktivirajućim stimulansima, aktivirani fenotip se „održava“ u PCI, koju karakterizira transformacija PCI u kontraktilne stanice slične miofibroblastu koje provode sintezu ekstracelularnih fibrilarnog kolagena.

Aktivirani fenotip karakterizira proliferacija, kemotaksija, kontraktilnost, gubitak zaliha retinoida i formiranje stanica sličnih miofibroblastima. Aktivirani HSC također pokazuju povećano obilje novih gena kao što su a-SMA, ICAM-1, hemokini i citokini. Aktivacija ćelije ukazuje na početak ranih faza fibrogeneze i prethodi povećanom stvaranju ECM proteina. Nastalo fibrozno tkivo se podvrgava remodeliranju zbog razgradnje matriksa uz pomoć matriksnih metaloproteinaza (MMP). Zauzvrat, razgradnju matriksa regulišu tkivni inhibitori matriksmetaloproteinaza (TIMP). MMP i TIMP su članovi porodice enzima zavisnih od cinka. MMP se sintetizira u HCI u obliku neaktivnih proenzima, koji se aktiviraju cijepanjem propeptida, ali se inhibiraju pri interakciji sa endogenim TIMP-ovima - TIMP-1 i TIMP-2. HCI proizvode 4 tipa MMP-a membranskog tipa, koji se aktiviraju pomoću IL-1β. Među MMP-ima poseban značaj pridaje se MMP-9, neutralnoj matriksnoj metaloproteinazi koja djeluje protiv kolagena tipa 4, koji je dio bazalne membrane, kao i protiv djelomično denaturiranog kolagena tipova 1 i 5.

Povećanje populacije PCI kod različitih vrsta oštećenja jetre prosuđuje se po aktivnosti značajnog broja mitogenih faktora, povezanih receptora tirozin kinaze i drugih identifikovanih mitogena koji uzrokuju najizraženiju proliferaciju PCI: endotelin-1, trombin, FGF - faktor rasta fibroblasta, PDGF - endotelni faktor rasta krvnih sudova, IGF - faktor rasta sličan insulinu. Akumulacija HCI u područjima oštećenja jetre nastaje ne samo zbog proliferacije ovih ćelija, već i zbog njihove usmjerene migracije u ova područja putem kemotakse, uz učešće kemoatraktanata kao što su PDGF i leukocitni kemoatraktant-MCP (monocitni kemotaktički protein -1).

U aktiviranim HSC, broj lipidnih kapljica je smanjen na 1-3 sa njihovom lokacijom na suprotnim polovima ćelije (slika 5).

Aktivirani HSC dobijaju izduženi oblik, značajna područja citoplazme zauzima Golgijev kompleks, a otkrivaju se prilično brojne GRES cisterne (indikator sinteze proteina za izvoz). Broj ostalih organela je smanjen: pronađeno je nekoliko slobodnih ribozoma i polisoma, pojedinačni mitohondriji i nepravilni lizozomi (slika 6).

Godine 2007. HSC su prvi put nazvane matičnim ćelijama jetre, jer eksprimiraju jedan od markera hematopoetskih mezenhimskih matičnih ćelija - CD133.

Slika 5. - ZKI u aktiviranom stanju

a, b - HCI (plave strelice) sa pojedinačnim lipidnim inkluzijama lokalizovanim na suprotnim polovima jezgra. Perisinusoidno vezivno tkivo (na slici 6a) i sloj intercelularnog matriksa oko hepatocita (na slici 6b) obojeni su crvenom bojom. Citotoksični limfociti (ljubičaste strelice). Endotelna ćelija (bijela strelica). Bliski kontakt između plazma ćelije (crvena strelica) i hepatocita. Polutanki profili. Boja azure II je osnovna magenta. Mikrofotografije. Povećano 1000 ; c, d - ultrastrukturne komponente HCI: mitohondrije (narandžaste strelice), Golgijev kompleks (crvena strelica), cisterne njegove osmiofilnije cis-strane okrenute prema proširenim elementima granularnog endoplazmatskog retikuluma (zelene strelice), lizozom (plava strelica) (magnituda 10.000 odnosno 20.000); c, d - dijagrami difrakcije elektrona

Miofibroblasti, kojih nema u normalnoj jetri, imaju tri potencijalna izvora: prvo, tokom intrauterinog razvoja jetre, u portalnim traktovima, miofibroblasti okružuju sudove i žučne kanale tokom njihovog sazrevanja, a nakon potpunog razvoja jetre nestaju. i zamjenjuju se u portalnim traktovima portalnim fibroblastima; drugo, kada je jetra oštećena, nastaju zbog portalnih mezenhimalnih stanica i HCI u mirovanju, rjeđe zbog prijelaznih epitelno-mezenhimalnih stanica. Karakterizira ih prisustvo CD45-, CD34-, Desmin+, glijalnog fibrilarnog proteina (GFAP)+ i Thy-1+.

Nedavne studije su pokazale da hepatociti, holangiociti i endotelne ćelije mogu postati miofibroblasti kroz epitelnu ili endotelnu u mezenhimsku tranziciju (EMT). Ove ćelije uključuju markere kao što su CD45-, albumin+ (tj. hepatociti), CD45-, CK19+ (tj. holangiociti) ili Tie-2+ (endotelne ćelije).

Slika 6. - Visoka fibrotska aktivnost HCI

a, b - miofibroblast (MFB), ćelija sadrži veliko jezgro, elemente GRES-a (crvene strelice), brojne slobodne ribozome, polimorfne vezikule i granule, pojedinačne mitohondrije i svijetli vizualizacijski znak - snop aktinskih filamenata u citoplazmi (žute strelice); odneo 12.000 i 40.000; c, d, e, f - visoka fibrotska aktivnost HCI dok su kapljice lipida koje sadrže retinoid očuvane u citoplazmi. Brojni snopovi kolagenih vlakana (bijele strelice), koji zadržavaju (a) i gube (d, e, f) specifične poprečne pruge; odneo 25 000, 15 000, 8 000, 15 000. Obrasci difrakcije elektrona

Osim toga, stanice koštane srži, koje se sastoje od fibrocita i cirkulirajućih mezenhimskih stanica, mogu se transformirati u miofibroblaste. To su CD45+ ćelije (fibrociti), CD45+/- (cirkulirajuće mezenhimske ćelije), kolagen tip 1+, CD11d+ i MHC klasa 11+ (Slika 7).

Literarni podaci potvrđuju ne samo blisku vezu između proliferacije ovalnih stanica i proliferacije sinusoidnih stanica, već i podaci o mogućoj diferencijaciji HCI u epitel jetre, što je nazvano mezenhimsko-epitelna transformacija perisinusoidnih stanica.

U stanju fibrogene aktivacije, PCI nalik miofibroblastu, zajedno sa smanjenjem broja i naknadnim nestankom kapljica lipida, karakteriziraju se fokalnom proliferacijom (Slika 8), imunohistokemijskom ekspresijom markera sličnih fibroblastima, uključujući α-aktin glatkih mišića. , i formiranje pericelularnih kolagenih vlakana u Disseovim prostorima.

Tokom razvojne faze fibroze, sve veća hipoksija jetrenog tkiva postaje faktor za dodatnu prekomjernu ekspresiju proinflamatornih adhezionih molekula u matičnim ćelijama - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, proinflamatorni

Interakcija jetrenih duktalnih progenitor ćelija sa miofibroblastima jetre

HSC nalik miofibroblastima u stanju fibrogene aktivacije.

Slika 7. - Učesnici u miofibroblastnoj aktivaciji PCI

litički kemoatraktanti - M-CSF, MCP-1 (monocitni kemotaktički protein-1) i SGS (citokini posredovani neutrofilni kemoatraktanti) i drugi koji stimuliraju stvaranje proinflamatornih citokina (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, ET-1) i pojačavaju procese fibrogeneze u jetri, stvarajući uslove za samoodrživu indukciju kontinuirane aktivacije PCI i procesa fibrogeneze.

Na mikroskopskim preparatima, perikapilarna fibroza se manifestuje u obliku intenzivne crvene boje perisinusoidnog vezivnog tkiva i sloja intercelularnog matriksa oko hepatocita (često umirući). Na elektronskim mikroskopskim preparatima fibrozne promjene se vizualiziraju ili u obliku formiranih velikih snopova vlakana kolagenih vlakana koja su zadržala poprečne pruge ili u obliku masivnih

naslage u Disseovom prostoru fibrozne mase, a to su natečena kolagena vlakna koja su izgubila svoje periodične pruge (slika 9).

Prema modernim konceptima, fibroza je dinamičan proces koji može napredovati i nazadovati (Slika 10).

Nedavno je predloženo nekoliko specifičnih markera PCI: vitamin A (VA) procvjeta u kapljice lipida, GFAP, p75 NGF receptor i sinaptofizin. Sprovode se istraživanja o učešću HCI jetre u proliferaciji i diferencijaciji matičnih ćelija jetre.

Proučavali smo sadržaj proteina koji vezuje retinol (RSB-4), koji formira kompleks sa VA, čija koncentracija u krvnoj plazmi normalno korelira sa opskrbom organizma VA, od čega se 80% nalazi u PCI.

Uspostavljen je odnos između sadržaja

Slika 8. - Fokalna proliferacija PCI u stanju fibrogene aktivacije

a - hiperplazija PCI (bijele strelice) u lumenu proširenih sinusoida; b - proliferacija transdiferenciranih HSC (bijele strelice), endotelne ćelije (ružičasta strelica). Polutanki profili. Boja azure II je osnovna magenta. Mikrofotografije. Povećano 1000

Slika 9. - Završna faza miofibroblastične aktivacije PCI

a, b - perisinusoidna fibroza (bijele strelice). Perisinusoidno vezivno tkivo i sloj intercelularnog matriksa oko hepatocita (b) obojeni su bazičnom fuksin crvenom bojom. HCI se aktiviraju i transformišu u fibroblaste (plave strelice). Hz na sl. a - hepatocit sa devastiranom citoplazmom. Polutanki profili. Boja azure II je osnovna magenta. Mikrofotografije. Povećano 1000; c, d - perisinusoidna i perihepatocelularna fibroza u lobulu jetre, povećana gustoća elektrona vlakana kolagenih vlakana; kondenzacija mitohondrijalnog matriksa u hepatocitu (narandžasta strelica). UV.8,000 i 15,000, respektivno. Obrasci difrakcije elektrona

Tabela 1. - Indikatori sadržaja RSB-4 kod pacijenata sa cirozom jetre (LC) i hroničnim hepatitisom (CH) različite etiologije, ng/ml (M±t)

Grupa n M±m r

Ciroza jetre 17 23,6±2,29<0,05

CG, AST normalan 16 36,9±2,05* >0,05

CG, AST >2 norme 13 33,0±3,04* >0,05

CG, ALT normalan 13 37,5±3,02* >0,05

CG, ALT >2 norme 21 35,9±2,25* >0,05

Kontrola 15 31,2±2,82

Napomena: p - značajne razlike u odnosu na kontrolu (str<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

Lažna lobula okružena fibroznim septumom. Masseau bojenje - krug lažnog lobula. Slika po Nu.Uv.x50 Masson. UV.x200

Slika 10. - Dinamika događaja u lažnom lobulu bolesnika sa virusnom cirozom 6 mjeseci nakon transplantacije autolognih mezenhimalnih matičnih stanica u jetru

Jedemo RSB-4 i 4. stadijum fibroze (ciroze), za razliku od hroničnog hepatitisa kod kojeg ovakva zavisnost nije uočena, bez obzira na biohemijske markere upalne aktivnosti u jetri.

Ova činjenica se mora uzeti u obzir kada se opravdava supstituciona terapija za eliminisanje nedostatka VA u organizmu, što može biti posledica iscrpljivanja potencijala PCI uzrokovanog progresijom fibroze u jetri.

1. Maksimalna efikasnost procjene strukturnog i funkcionalnog stanja PCI osigurava se morfološkom studijom intravitalne biopsije uz istovremenu upotrebu skupa tehnika ćelijske vizualizacije (svjetlo, elektronska mikroskopija ultratankih rezova i originalne metode fiksacije i bojenje).

2. Rezultati morfološke studije PCI omogućavaju poboljšanje kvaliteta intravitalne dijagnoze fibroze, njeno praćenje i predviđanje ishoda hroničnih difuznih lezija jetre na višem savremenom nivou.

3. Rezultati morfoloških zaključaka će omogućiti kliničaru da u formulaciju konačne dijagnoze dodatno uključi ažurirane podatke o stadiju hroničnosti (stabilizacija, progresija ili povlačenje fibroze) tokom terapije.

Književnost

1. Ivaškin, V. T. Klinički simptomi prefibroznih promjena: transkript predavanja na Sveruskom Internet kongresu internih specijalista / V. T. Ivaškin, A. O. Bueverov // INTERNIST: Nacionalno internet društvo specijalista interne medicine. - 2013. - Način pristupa: http://internist. ru/publications/detail/6569/. - Datum pristupa: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A.P. Ovalne ćelije - pretpostavljene matične ćelije jetre ili hepatoblasti? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Stanična transplantologija i inženjerstvo tkiva. - 2006. - T. 2, br. 4. - P. 55-58.

1. Ivashkin, V. T. Klinicheskaya simptomatika dofibroticheskih izmenenij: stenogramma lekcii Vserossijskogo Internet-Kongressa specialistov za vnutrennim boleznyam / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNISTA: National "noe Internet-Obshchestvo. //internist.ru/publications/detail/6569/ - Pristup podacima: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A. P. Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki jetre ili hepatoblasty? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2006. - S. 5. 5. - S. 5. - 58.

3. O ulozi sinusoidnih stanica jetre i stanica koštane srži u osiguravanju regenerativne strategije zdrave i oštećene jetre / A. V. Lundup [et al.] // Bilten transplantologije i umjetnih organa. -2010. - T. XII, br. 1. - Str. 78-85.

4. Serov, V.V. Morfološki kriteriji za procjenu etiologije, stupnja aktivnosti i faze procesa kod virusnog kroničnog hepatitisa B i C / V.V. Serov, L.O. Severgina // Arhiv patologije. - 1996. - br. 4. - str. 61-64.

5. Strukturne i funkcionalne karakteristike zvjezdanih stanica jetre u dinamici fibroze / O. A. Postnikova [et al.] // Fundamentalna istraživanja. - 2011. - br. 10.

6. Ultrastrukturna i imunohistokemijska studija zvjezdanih stanica jetre u dinamici fibroze i ciroze jetre infektivnog virusnog porijekla / G. I. Nepomnyashchikh [et al.] // Bilten eksperimentalne biologije i medicine. - 2006. - T. 142, br. 12. - P. 681-686.

7. Shcheglev, A. I. Strukturne i metaboličke karakteristike sinusoidnih ćelija jetre / A. I. Shcheglev, O. D. Mishnev // Napredak moderne biologije. - 1991. - T. 3, br. 1. - P. 73-82.

10. Učinci dijetalnih retinoida i triglicerida na sastav lipida zvjezdanih stanica jetre štakora i lipidnih kapljica zvjezdanih stanica / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatična fibroza 2006: Izvještaj sa treće AASLD konferencije o jednoj temi / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatologija. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Hepatične zvjezdane ćelije tijekom rješavanja ozljede jetre / J. P. Iredale // Semin. Live Dis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Ekspresija reelina u zvjezdanim ćelijama jetre i tijekom popravke jetrenog tkiva: novi marker za diferencijaciju HSC od drugih miofibroblasta jetre / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Miofibroblasti ljudske jetre tokom razvoja i bolesti sa fokusom na portalu (myo)

3. O roli sinusoidalnih "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategiji zdorovoj i povrezhdennoj pecheni" / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov. - 2010. - T. HII, No. 781. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriteriji ocenki ehtiologije, stepeni aktivnosti i stadii procesa pri virusnih hroničnih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - br. 4. - S. 61-64.

5. Strukturno-funkcional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental"nye issledovaniya. - 2011. - br. 10. - P. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroze i ciroza jetre infekcionno-virusnogo geneza / G. I. Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "noj biologii i mediciny. - 20.1.6. - 20.1.2. 681 -686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinusoidal "nyh kletok pecheni" / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, br. 1. - S. 73-82.

8. CD34 jetrene zvjezdane stanice su progenitorne stanice / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Često. - 2007. - Vol. 352(2). - P. 410-417.

9. Degradacija matriksnih proteina u fibrozi jetre / M. J. Arthur // Pathol. Res. Prakt. - 1994. - Vol. 190 (9-10).

10. Učinci dijetalnih retinoida i triglicerida na sastav lipida zvjezdanih stanica jetre štakora i lipidnih kapljica zvjezdanih stanica / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

11. Fetalna jetra se sastoji od stanica u epitelnom prijelazu u mezenhim / J. Chagraoni // Krv. - 2003. - Vol. 101. - P. 2973-2982.

12. Fiksacija, dehidracija i ugradnja bioloških uzoraka / A. M. Glauert // Praktične metode u elektronskoj mikroskopiji. - Njujork: Am. Elsevier, 1975. - Vol. 3, dio 1.

13. Friedman, S. Hepatična fibroza 2006: Izvještaj sa treće AASLD konferencije o jednoj temi / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatologija. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. Ljudske i zvjezdane stanice rathepatic proizvode faktor matičnih stanica: mogući mehanizam za regrutaciju mastocita u fibrozi jetre / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Vol. 30, br. 5. - P. 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite kao medij za ugradnju za elektronsku mikroskopiju / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Cytol. - 1958. - Vol. 4. - P. 409-414.

16. Zvjezdane stanice jetre i portalni fibroblasti glavni su stanični izvori kolagena i lizil oksidaza u normalnoj jetri i rano nakon ozljede / M. Perepelyuk // Am. J. Physiol. Gastrointest. Fiziol jetre. - 2013. - Vol. 304(6). - P. 605614.

17. Jezgra virusa hepatitisa C i nestrukturni proteini induciraju fibrogene efekte u zvjezdanim stanicama jetre / R. Bataller // Gastroenterologija. - 2004. - Vol. 126, br. 2. - P. 529-540.

18. Iredale, J. P. Hepatične zvjezdane ćelije tijekom rješavanja ozljede jetre / J. P. Iredale // Semin. Live Dis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Ekspresija reelina u zvjezdanim ćelijama jetre i tijekom popravke jetrenog tkiva: novi marker za diferencijaciju HSC od drugih miofibroblasta jetre / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Miofibroblasti ljudske jetre tokom razvoja i bolesti sa fokusom na portalne (myo) fibroblaste / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblasti / S. Lepreux, A. Desmouliere // Front. Physiol. - 2015. - Način pristupa: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Datum pristupa: 31.10.2016.

22. Transplantacija matičnih ćelija iz mezenhimske koštane srži kod pacijenata sa cirozom jetre povezanom sa HCV / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, br. 4. - P. 217-221.

23. Millonig, G. A. Prednosti fosfatnog pufera za otopine osmijum tetroksida u fiksaciji / G. A. Millonig // J. Appl. fizika. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

Vol. 24. - P. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - P. 1213-1217.

30. Najnoviji razvoj biologije miofibroblasta: paradigme za remodeliranje vezivnog tkiva / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - P. 1340-1355.

35. Mesotelijum izveden iz septuma transversum stvara zvjezdaste ćelije jetre i perivaskularne mezenhimske stanice u jetri miša u razvoju / K. Asahina // Hepatologija. -2011. - Vol. 53. - P. 983-995.

Vol. 50. - P. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatična angiogeneza i sinusoidno remodeliranje kod kronične bolesti jetre: novi ciljevi u liječenju portalne hipertenzije? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53. - P. 976-980.

39. Wake, K. Zvezdaste ćelije jetre: trodimenzionalna struktura, lokalizacija, heterogenost i razvoj / K.

//Front. Physiol. - 2015. - Način pristupa: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Datum pristupa: 31.10.2016.

21. Ligandi peroksizomskog proliferator-aktiviranog receptora gama modula profibrogenog i proinflamatornog djelovanja u zvjezdanim stanicama jetre / F. Marra // Gastroenterologija. -2000. - Vol. 119. - P. 466-478.

22. Transplantacija matičnih ćelija iz mezenhimske koštane srži kod pacijenata sa cirozom jetre povezanom sa HCV / S. Lukashyk // J. Clin. Transl. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, br. 4. - R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Prednosti fosfatnog pufera za otopine osmijum tetroksida u fiksaciji / G. A. Millonig // J. Appl. Rhysics. - 1961. - Vol. 32. - P. 1637-1643.

24. Podrijetlo i strukturna evolucija ranih proliferirajućih ovalnih stanica u jetri štakora / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

25. Porijeklo miofibroblasta u fibrozi jetre / D. A. Brenner // Fibrogenesis Tissue Repair. - 2012. - Vol. 5, dop. 1. - S. 17.

26. Porijeklo i funkcije miofibroblasta jetre / S. Lemoinne // Biochim. Biophys. Acta. - 2013. - Vol. 1832 (7). - P. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF i transdukcija signala u zvjezdanim stanicama jetre / M. Pinzani // Front. Biosci. - 2002. - Vol. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Raspodjela vitamina A u tkivu otkrivena fluorescentnom mikroskopijom / H. Popper // Physiol. Rev. - 1944.

Vol. 24. - R. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - R. 1213-1217.

30. Najnoviji razvoj biologije miofibroblasta: paradigme za remodeliranje vezivnog tkiva / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Upotreba olovnog citrata pri visokom pH kao elektronepropusne boje u elektronskoj mikroskopiji / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - Vol. 17. - P. 208-212.

32. Safadi, R. Imunološka stimulacija jetrene fibrogeneze CD8 stanicama i atenuacija transgenim interleukinom-10 iz hepatocita / R. Safadi // Gastroenterologija. - 2004. - Vol. 127(3). - P. 870-882.

33. Sato, T. Elektronsko mikroskopsko istraživanje uzoraka fiksiranih na duže periode u formalinu puferiranom fosfatom / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - Vol. 31, br. 4. - P. 423-428.

34. Senoo, H. Ćelije koje pohranjuju vitamin A (Stellate Cells) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - Vol. 75.

35. Mesotelijum izveden iz septuma transversum stvara zvjezdaste ćelije jetre i perivaskularne mezenhimske stanice u jetri miša u razvoju / K. Asahina // Hepatologija. -2011. - Vol. 53. - R. 983-995.

36. Stanciu, A. Novi podaci o ITO ćelijama / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei // Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iasi. -2002. - Vol. 107, br. 2. - P. 235-239.

37. Suematsu, M. Profesor Toshio Ito: vidovnjak u biologiji pericita / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Vol. 50. - R. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatična angiogeneza i sinusoidno remodeliranje kod kronične bolesti jetre: novi ciljevi u liječenju portalne hipertenzije? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53. - R. 976-980.

39. Wake, K. Hepatične zvjezdane stanice: trodimenzionalna struktura, lokalizacija, heterogenost i razvoj / K. Wake // Proc. Jpn. Akad. Ser. B. Phys. Biol. Sci. - 2006. - Vol.

Wake // Proc. Jpn. Akad. Ser. B. Phys. Biol. Sci. - 2006. - Vol. 82(4). - P. 155-164.

82(4). - P. 155-164.

40. Wake, K. U ćelijama jetrenih sinusoida / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, Nizozemska). - 1986. - Vol. 1. - P. 215-220.

41. Watson, M. L. Bojenje presjeka tkiva za elektronsku mikroskopiju teškim metalima / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - Vol. 4. - P. 475-478.

KLINIČKA CITOLOGIJA JETRE: ITO ZVEZDADEĆE ĆELIJE (HEPATIČNE ZVEZDAĆE ĆELIJE)

Tsyrkunov V. M., Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Obrazovna ustanova "Grodno State Medical University", Grodno, Bjelorusija

Uvod. Uloga Ito zvjezdanih stanica (Hepatic Stellate Cells, HSC) je identificirana kao jedna od vodećih u razvoju fibroze jetre, ali je upotreba intravitalne vizualizacije HSC struktura u kliničkoj praksi minimalna.

Cilj rada je prikazati strukturne i funkcionalne karakteristike HSC na osnovu nalaza citološke identifikacije uzoraka intravitalne biopsije jetre.

Materijali i metode. Primijenjene su klasične metode svjetlosne i elektronske mikroskopije biopsijskih uzoraka u okviru originalne tehnike korištenja ultratankih rezova, fiksacije i bojenja.

Rezultati. Strukturne karakteristike HSC uzoraka biopsije jetre pacijenata sa kroničnim hepatitisom C prikazane su na foto ilustracijama svjetlosne i elektronske mikroskopije. HSC su prikazani u različitim fazama (mirovanje, aktivacija) i tokom procesa transformacije u miofibroblaste.

Zaključci. Korištenje originalnih metoda kliničke i morfološke identifikacije i procjene funkcionalnog statusa HSC omogućava poboljšanje kvalitete dijagnoze i prognoze fibroze jetre.

@ 2024 wowway.ru - Dijeta i prehrana. Dijagnostika i testovi. Lijekovi. Holesterol. Ateroskleroza