აზითრომიცინი და კლარითრომიცინი, რომელიც უფრო ეფექტურია. კლაციდი ან აზითრომიცინი რომელია უკეთესი. სუმამედი ან კლარითრომიცინი რომელია უკეთესი. ურთიერთქმედება სხვა წამლებთან. გამოყენების ჩვენებები

ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპის დიაგრამა.
1. კონდენსატორის რგოლი
2. საგნის სიბრტყე
3. ფაზის ფირფიტა
4. პირველადი სურათი.
საცნობარო სინათლისგან განსხვავებით, ნიმუშზე მიმოფანტული ობიექტის შუქი, ლურჯად გამოსახულ რეგიონებში, გვერდს უვლის ფაზის ფირფიტას, ამიტომ მისი ოპტიკური ბილიკის სიგრძე განსხვავებულია.

ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია- ოპტიკურ მიკროსკოპებში გამოსახულების მიღების მეთოდი, რომელშიც ელექტრომაგნიტური ტალღის ფაზური ცვლა გარდაიქმნება ინტენსივობის კონტრასტში. ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია აღმოაჩინა ფრიც ზერნიკემ, რისთვისაც მან მიიღო ნობელის პრემია 1953 წელს.

ოპერაციული პრინციპი

ფაზა-კონტრასტული გამოსახულების მისაღებად, წყაროდან შუქი იყოფა ორ თანმიმდევრულ სინათლის სხივად, მათგან ერთს ეწოდება საცნობარო სხივი, მეორეს არის ობიექტის სხივი, რომელიც გადის სხვადასხვა ოპტიკურ ბილიკზე. მიკროსკოპი ისეა მორგებული, რომ ფოკუსურ სიბრტყეში, სადაც გამოსახულება იქმნება, ამ ორ სხივს შორის ჩარევამ გააუქმოს ისინი.

უჯრედის სურათი ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპის ქვეშ

ოპტიკური ბილიკის სიგრძე იცვლება ე.წ. ფაზის ფირფიტის გამოყენებით (ინგლისური)რუსული , მდებარეობს ფაზის რგოლზე. როდესაც ნიმუში ერთ-ერთი სხივის გზაზეა, მასში სინათლის გარდატეხა ცვლის ოპტიკურ გზას და, შესაბამისად, ფაზას, რომელიც ცვლის ჩარევის პირობებს.

ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია განსაკუთრებით პოპულარულია ბიოლოგიაში, რადგან ის არ საჭიროებს უჯრედის წინასწარ შეღებვას, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს მისი სიკვდილი.

აღმოჩენის ისტორია

ჰოლანდიელმა ფიზიკოსმა, მათემატიკოსმა და ქიმიკოსმა ფრიც ზერნიკემ ოპტიკის დარგში მუშაობა 1930 წელს დაიწყო. იმავე წელს მან აღმოაჩინა ფაზა-კონტრასტის მეთოდი. 1930-იან და 1940-იან წლებში ზერნიკემ თავისი წვლილი შეიტანა ოპტიკის სხვა სფეროებში, მაშინ როცა ფაზა-კონტრასტის მეთოდი მეცნიერთა ფართო წრეს არ შეუმჩნევია. ახალი მეთოდისამეცნიერო საზოგადოების თვალთახედვის მიღმა დარჩა მეორე მსოფლიო ომამდე, როდესაც ზერნიკეს აღმოჩენა გამოიყენეს პირველი ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპების შესაქმნელად ჰოლანდიის გერმანული ოკუპაციის დროს. ომის დროს ბევრმა მწარმოებელმა დაიწყო ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპების წარმოება და ისინი ფართოდ გამოიყენეს ბიოლოგიურ და სამედიცინო კვლევებში.

ბმულები

წყაროები

ფონდი ვიკიმედია. 2010 წელი.

ნახეთ, რა არის „ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია“ სხვა ლექსიკონებში:

იხილეთ მიკროსკოპია ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპით. (წყარო: „მიკრობიოლოგიის ტერმინთა ლექსიკონი“) ... მიკრობიოლოგიის ლექსიკონი

მიკროსკოპული გამოკვლევის მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია სპეციალური მოწყობილობების დახმარებით უფერო გამჭვირვალე მიკროობიექტების სტრუქტურების კონტრასტული გამოსახულების მიღებაზე, რომლებიც განსხვავდება სიმკვრივით, მაგალითად, ცოცხალი მიკროორგანიზმებისა და ქსოვილების...

ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია- ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპია, იხილეთ მიკროსკოპი, მიკროსკოპული ტექნიკა... ვეტერინარული ენციკლოპედიური ლექსიკონი

ფაზის კონტრასტული ოპტიკური მიკროსკოპია- 4.34 ფაზის კონტრასტული ოპტიკური მიკროსკოპია: მიკროსკოპული ანალიზის მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია ნიმუშში გამავალი სინათლის ტალღების დიფერენციალური ფაზის ძვრების ამპლიტუდების განსხვავებებად გადაქცევაზე. ნორმატიული და ტექნიკური დოკუმენტაციის ტერმინთა ლექსიკონი-საცნობარო წიგნი

ცოცხალი შეუღებავი ობიექტების M., რომლებშიც გამოსახულების კონტრასტი იზრდება ობიექტზე გამავალი სინათლის სხივების ფაზური განსხვავებების ამპლიტუდად გარდაქმნით ... დიდი სამედიცინო ლექსიკონი

მიკროსკოპის საშუალებით განსხვავებულ ობიექტებზე დაკვირვების მეთოდების ზოგადი სახელწოდება ადამიანის თვალითობიექტები. დამატებითი ინფორმაციისთვის იხილეთ ხელოვნება. (იხ. მიკროსკოპი). ფიზიკური ენციკლოპედიური ლექსიკონი. მ.: საბჭოთა ენციკლოპედია. Მთავარი რედაქტორი A.M. პროხოროვი. 1983... ფიზიკური ენციკლოპედია

მიკროსკოპის გამოყენებით მცირე ობიექტების შესწავლის მეთოდების ნაკრები. M.-ის ტრადიციულ ტიპებს მიეკუთვნება – luminescent M. – დაფუძნებული ფოტოლუმინესცენციის ფენომენზე, რომელიც წარმოიქმნება პრეპარატების შეღებვისას სპეციალური ლუმინესცენტური საღებავებით;…… მიკრობიოლოგიის ლექსიკონი

ბნელი ველის მიკროსკოპის სქემა შემთხვევის შუქზე. ნიმუში განათებულია გვერდიდან (მწვანე ხაზი). გამოსახულება იქმნება ნიმუშში არაჰომოგენურობით მიმოფანტული სინათლის მიერ. ბნელი ველის მიკროსკოპია არის ოპტიკური ... ვიკიპედიის სახეობა

ძირითადად ცოცხალი დაბალი კონტრასტის ობიექტების (პროტოზოები, ბაქტერიები, უჯრედები კულტურაში) შესწავლის მეთოდი ანოპტრალური მიკროსკოპის გამოყენებით (გამოიგონა 1953 წელს ფინელმა ფიზიოლოგმა ა. ვილსკამ), ფაზის კონტრასტული მიკროსკოპის ტიპი... დიდი საბჭოთა ენციკლოპედია

მიკროსკოპის გამოყენებით სხვადასხვა ობიექტების შესწავლის მეთოდები. ბიოლოგიასა და მედიცინაში ეს მეთოდები შესაძლებელს ხდის მიკროსკოპული ობიექტების სტრუქტურის შესწავლას, რომელთა ზომები სცილდება ადამიანის თვალის გარჩევადობას. საფუძველი მ.მ.ი. შეადგენს ... ... სამედიცინო ენციკლოპედია

1. ნათელი ველი

ნათელი ველის მეთოდი გადამცემ შუქში გამოიყენება გამჭვირვალე პრეპარატების შესასწავლად, რომლებშიც სტრუქტურის სხვადასხვა ნაწილი განსხვავებულად შთანთქავს შუქს (ცხოველური და მცენარეული ქსოვილების თხელი ფერის სექციები, მინერალების თხელი სექციები და ა.შ.).
განათების სისტემიდან სხივების სხივი გადის ნიმუშსა და ლინზაში და წარმოქმნის ერთნაირად განათებულ ველს გამოსახულების სიბრტყეში. პრეპარატის სტრუქტურული ელემენტები ნაწილობრივ შთანთქავს და ახდენენ მათზე დაცემული შუქს, რაც იწვევს გამოსახულების გარეგნობას.

მეთოდი ასევე შეიძლება სასარგებლო იყოს არაშთანთქმელ ობიექტებზე დაკვირვებისას, მაგრამ მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ ისინი ისე ძლიერად გაფანტავენ განათებულ სხივს, რომ მისი მნიშვნელოვანი ნაწილი ობიექტივში არ მოხვდება.
არეკლილი შუქის კაშკაშა ველის მეთოდი გამოიყენება გაუმჭვირვალე ობიექტებზე დასაკვირვებლად, მაგალითად, ლითონების, ბიოლოგიური ქსოვილების და სხვადასხვა მინერალების ამოკვეთილ მონაკვეთებზე. პრეპარატი განათებულია ზემოდან, ლინზის მეშვეობით, რომელიც ერთდროულად განათების სისტემის ფუნქციას ასრულებს.
გამოსახულება, ისევე როგორც გადაცემული სინათლის შემთხვევაში, იქმნება იმის გამო, რომ სხვადასხვა სფეროებშიპრეპარატები არათანაბრად ახდენენ მათზე დაცემის შუქს და არეკლილი სხივები განსხვავებული ინტენსივობისაა.

2. ბნელი ველი

ბნელი ველის მიკროსკოპია დაფუძნებულია მიკროორგანიზმების უნარზე, ძლიერად გაფანტონ ნათელი. ბნელი ველის მიკროსკოპისთვის გამოიყენება ჩვეულებრივი მიზნები და სპეციალური ბნელი ველის კონდენსატორები.
ბნელი ველის კონდენსატორების მთავარი მახასიათებელია ის ცენტრალური ნაწილიისინი ჩაბნელებულია და ილუმინატორის პირდაპირი სხივები არ აღწევს მიკროსკოპის ლინზას. ობიექტი განათებულია ირიბი გვერდითი სხივებით და მიკროსკოპის ლინზაში მხოლოდ ნაწილაკებით მიმოფანტული სხივები შედის პრეპარატში. ბნელი ველის მიკროსკოპია დაფუძნებულია ტინდალის ეფექტზე, რომლის ცნობილი მაგალითია ჰაერში მტვრის ნაწილაკების აღმოჩენა მზის ვიწრო სხივით განათებისას.
ილუმინატორის პირდაპირი სხივების ლინზაში შესვლის თავიდან ასაცილებლად, ლინზის დიაფრაგმა უნდა იყოს უფრო მცირე ვიდრე კონდენსატორის დიაფრაგმა. დიაფრაგმის შესამცირებლად ჩვეულებრივ ლინზაში მოთავსებულია დიაფრაგმა ან გამოიყენება ირისის დიაფრაგმით აღჭურვილი სპეციალური ლინზები.
ბნელი ველის მიკროსკოპით მიკროორგანიზმები შავ ფონზე მკვეთრად ანათებენ. მიკროსკოპის ამ მეთოდით შესაძლებელია ყველაზე პატარა მიკროორგანიზმების აღმოჩენა, რომელთა ზომები მიკროსკოპის გარჩევადობას სცილდება. თუმცა, ბნელი ველის მიკროსკოპია საშუალებას გაძლევთ ნახოთ მხოლოდ ობიექტის კონტურები, მაგრამ არ გაძლევთ საშუალებას შეისწავლოთ შიდა სტრუქტურა. ბნელი ველის მიკროსკოპის გამოყენებით შესწავლილია დამსხვრეული „წვეთი“ ტიპის პრეპარატები. სლაიდები არ უნდა იყოს 1,1-1,2 მმ-ზე მეტი სისქის, გადასაფარებლები 0,17 მმ, ნაკაწრებისა და ჭუჭყის გარეშე.
პრეპარატის მომზადებისას თავიდან უნდა იქნას აცილებული ბუშტებისა და დიდი ნაწილაკების არსებობა (ეს დეფექტები შესამჩნევი იქნება კაშკაშა ბზინვარებით და არ მოგცემთ საშუალებას დააკვირდეთ პრეპარატს). ბნელი ველისთვის გამოიყენება უფრო მძლავრი განათება და ნათურის მაქსიმალური ინტენსივობა.
ბნელი ველის განათების დაყენება ძირითადად შემდეგია:
1) დააინსტალირეთ შუქი კოჰლერის მიხედვით;
2) შეცვალეთ ნათელი ველის კონდენსატორი მუქი ველით;
3) ჩაძირვის ზეთი ან გამოხდილი წყალი გამოიყენება კონდენსატორის ზედა ლინზაზე;
4) ასწიეთ კონდენსატორი, სანამ არ მოხვდება კონტაქტში ქვედა ზედაპირიმინის სლაიდი;
5) მომზადებაზე ორიენტირებულია დაბალი გამადიდებელი ობიექტივი;
6) ცენტრირების ხრახნების გამოყენებით, მსუბუქი ლაქა (ზოგჯერ ჩაბნელებული ცენტრალური უბანი) გადადის ხედვის ველის ცენტრში;
7) კონდენსატორის აწევით და დაწევით ქრება ჩაბნელებული ცენტრალური უბანი და მიიღება ერთნაირად განათებული სინათლის ლაქა.
თუ ამის გაკეთება შეუძლებელია, მაშინ თქვენ უნდა შეამოწმოთ შუშის სლაიდის სისქე (ეს ფენომენი ჩვეულებრივ შეინიშნება ძალიან სქელი შუშის სლაიდების გამოყენებისას - სინათლის კონუსი ფოკუსირებულია შუშის სისქეში).
შემდეგ სწორი პარამეტრებისინათლის გამოყენებით დააინსტალირეთ საჭირო გადიდების ობიექტივი და შეამოწმეთ პრეპარატი.

3. პოლარიზაცია

პოლარიზებული სხივის კვლევის მეთოდი გამოიყენება გადაცემული და არეკლილი სინათლეში ეგრეთ წოდებული ანისოტროპული ობიექტებისთვის, რომლებსაც აქვთ ორმაგი რეფრაქცია ან ანარეკლი.
ასეთი ობიექტებია მრავალი მინერალი, ნახშირი, ზოგიერთი ცხოველური და მცენარეული ქსოვილი და უჯრედი, ხელოვნური და ბუნებრივი ბოჭკოები. ანიზოტროპული პრეპარატების შესწავლისას, პოლარიზატორი ემატება ჩვეულებრივ მიკროსკოპის წრეს განათების სისტემის წინ, ხოლო ლინზების შემდეგ ემატება ანალიზატორი, რომლებიც ერთმანეთთან შედარებით ჯვარედინი ან პარალელურ მდგომარეობაში არიან.
როდესაც პოლარიზატორი და ანალიზატორი გადაკვეთილია, ობიექტის მუქი, ღია ან ფერადი ანიზოტროპული ელემენტები ჩანს მიკროსკოპის ბნელ ხედვის ველში. ამ ელემენტების გარეგნობა დამოკიდებულია ობიექტის პოზიციაზე პოლარიზაციის სიბრტყესთან და ორმხრივი შეფერხების სიდიდეზე.
ობიექტის ოპტიკური მონაცემების უფრო ზუსტი განსაზღვრა ხდება სხვადასხვა კომპენსატორების გამოყენებით (ფიქსირებული ბროლის ფირფიტები, მოძრავი სლები და ფირფიტები).

4. ფაზის კონტრასტი

შეუღებავი მიკროორგანიზმების მიკროსკოპირებისას გარდა გარემომხოლოდ რეფრაქციული ინდექსის მიხედვით, არ ხდება სინათლის ინტენსივობის (ამპლიტუდის) ცვლილება, მაგრამ იცვლება მხოლოდ გადაცემული სინათლის ტალღების ფაზა. ამიტომ თვალი ვერ ამჩნევს ამ ცვლილებებს და დაკვირვებული ობიექტები გამოიყურება დაბალი კონტრასტული და გამჭვირვალე.
ასეთ ობიექტებზე დასაკვირვებლად გამოიყენება ფაზა-კონტრასტული მიკროსკოპია, რომელიც ეფუძნება ობიექტის მიერ შემოტანილი უხილავი ფაზის ცვლილებების თვალით ხილულ ამპლიტუდა ცვლილებებად გადაქცევას.
ფაზის კონტრასტის მოწყობილობა შეიძლება დამონტაჟდეს ნებისმიერ სინათლის მიკროსკოპზე და შედგება:
1) ლინზების ნაკრები სპეციალური ფაზის ფირფიტებით;
2) კონდენსატორი მბრუნავი დისკით. იგი შეიცავს რგოლურ დიაფრაგმებს, რომლებიც შეესაბამება ფაზის ფირფიტებს თითოეულ ლინზაში;
3) დამხმარე ტელესკოპი ფაზის კონტრასტის დასარეგულირებლად.
ფაზის კონტრასტის პარამეტრი შემდეგია:
1) შეცვალეთ მიკროსკოპის ლინზები და კონდენსატორი ფაზურით (მითითებულია Ph ასოებით);
2) დააინსტალირეთ დაბალი გამადიდებელი ლინზა. კონდენსატორის დისკზე ხვრელი უნდა იყოს რგოლისებრი დიაფრაგმის გარეშე (მითითებულია რიცხვით "0");
3) დაარეგულირეთ შუქი კოჰლერის მიხედვით;
4) შეარჩიეთ შესაბამისი გადიდების ფაზური ლინზა და ფოკუსირება მოახდინე ნიმუშზე;
5) დაატრიალეთ კონდენსატორის დისკი და დააინსტალირეთ ლინზის შესაბამისი რგოლის დიაფრაგმა;
6) ამოიღეთ ოკულარი მილიდან და ჩადეთ დამხმარე ტელესკოპი მის ადგილას. დაარეგულირეთ ისე, რომ ფაზის ფირფიტა (მუქი რგოლის სახით) და რგოლის დიაფრაგმა (იგივე დიამეტრის მსუბუქი რგოლის სახით) აშკარად ჩანს. კონდენსატორზე მარეგულირებელი ხრახნების გამოყენებით, ეს რგოლები გასწორებულია. ამოიღეთ დამხმარე ტელესკოპი და ხელახლა დააინსტალირეთ ოკულარი.
მიკროსკოპის ამ მეთოდის გამოყენების წყალობით, ცოცხალი დაუცველი მიკროორგანიზმების კონტრასტი მკვეთრად იზრდება და ისინი მუქი ჩნდებიან ღია ფონზე (დადებითი ფაზის კონტრასტი) ან ღია მუქი ფონზე (უარყოფითი ფაზის კონტრასტი).
ფაზა-კონტრასტული მიკროსკოპია ასევე გამოიყენება ქსოვილის კულტურის უჯრედების შესასწავლად, უჯრედებზე სხვადასხვა ვირუსების ზემოქმედების დასაკვირვებლად და ა.შ. ამ შემთხვევაში ხშირად გამოიყენება ბიოლოგიური მიკროსკოპები საპირისპირო ოპტიკით - ინვერსიული მიკროსკოპები. ასეთ მიკროსკოპებში მიზნები მდებარეობს ქვედა ნაწილში, კონდენსატორი კი ზედა.

5. ფლუორესცენცია (ლუმინესცენცია)

ფლუორესცენტური (ლუმინესცენტური) მიკროსკოპია ეფუძნება ზოგიერთი ნივთიერების ლუმინესცენციის უნარს, ანუ ანათებს უხილავი ულტრაიისფერი ან ლურჯი შუქით განათებისას. ლუმინესცენციის ფერი გადაინაცვლებს სპექტრის უფრო ტალღის სიგრძის ნაწილზე, ვიდრე სინათლე, რომელიც ამაღელვებს მას (სტოქსის წესი).
როდესაც ლუმინესცენცია აღფრთოვანებულია ლურჯი შუქით, მისი ფერი შეიძლება მერყეობდეს მწვანედან წითამდე, თუ ლუმინესცენცია აღფრთოვანებულია. ულტრაიისფერი გამოსხივება, მაშინ სიკაშკაშე შეიძლება იყოს ხილული სპექტრის ნებისმიერ ნაწილში. ლუმინესცენციის ეს მახასიათებელი საშუალებას იძლევა, სპეციალური ფილტრების გამოყენებით, რომლებიც შთანთქავენ ამაღელვებელ შუქს, დაიცვან შედარებით სუსტი ლუმინესცენტური ბზინვარება.
ფლუორესცენტული მიკროსკოპის სტრუქტურა და მასთან მუშაობის წესები განსხვავდება ჩვეულებრივი სინათლის მიკროსკოპისგან ძირითადად შემდეგში:
1. მძლავრი სინათლის წყაროს არსებობა ილუმინატორში, რომელიც ასხივებს უპირატესად სპექტრის მოკლე ტალღის (ულტრაიისფერი, ლურჯი) ნაწილში (ვერცხლისწყალ-კვარცის ნათურა ან ჰალოგენური კვარცის ნათურა).
2. ფილტრის სისტემის ხელმისაწვდომობა:
. ამაღელვებელი სინათლის ფილტრები გადასცემს სპექტრის მხოლოდ იმ ნაწილს, რომელიც აღაგზნებს ლუმინესცენციას;
. სითბოს დამცავი სინათლის ფილტრი იცავს სინათლის სხვა ფილტრებს, ნიმუშს და ფლუორესცენტური მიკროსკოპის ოპტიკას გადახურებისგან;
. "ჩამკეტი" ფილტრები განლაგებულია ოკულარებს შორის. ეს ფილტრები შთანთქავს ამაღელვებელ გამოსხივებას და გადასცემს წამლისგან მანათობელ შუქს დამკვირვებლის თვალამდე.
ლუმინესცენციის აღმძვრელი პრეპარატების განათების მეთოდი არის ის, რომ პრეპარატი განათებულია მასზე შუქით ლინზების მეშვეობით. ამის გამო, განათება იზრდება დიდი რიცხვითი დიაფრაგმის მქონე ობიექტების გამოყენებისას, ანუ მიკროორგანიზმების შესასწავლად.
განათების ამ მეთოდში მნიშვნელოვან როლს ასრულებს სპეციალური ჩარევის სხივის გამყოფი ფირფიტა, რომელიც მიმართავს შუქს ობიექტივში. ეს არის გამჭვირვალე სარკე, რომელიც შერჩევით ასახავს და მიმართავს სპექტრის ნაწილს ლინზაში, რომელიც აღაგზნებს ლუმინესცენციას და გადასცემს ლუმინესცენციის შუქს ოკულარში.
ფლუორესცენტური მიკროსკოპის მიზნების ოპტიკა დამზადებულია ოპტიკური მინის არალუმინესცენტური ტიპებისგან და წებოვანი სპეციალური არალუმინესცენტური წებოვანი საშუალებით. ზეთის ჩაძირვის ლინზებთან მუშაობისას გამოიყენება არალუმინესცენტური ჩაძირვის ზეთი.
ვინაიდან მიკროორგანიზმების უმეტესობას არ აქვს საკუთარი ლუმინესცენცია, მათი დამუშავების რამდენიმე გზა არსებობს ფლუორესცენტული მიკროსკოპით დაკვირვებისთვის. უპირველეს ყოვლისა, ეს არის ფტოროქრომირება - შეღებვა ფლუორესცენტური საღებავების (ფტოროქრომების) მაღალგანზავებული (რამდენიმე მიკროგრამ/მლ-მდე) ხსნარებით. ჩვეულებრივ მიკროსკოპასთან შედარებით, ფლუორესცენტული მიკროსკოპია საშუალებას იძლევა:
. დააკავშიროთ ფერადი სურათები და ობიექტების კონტრასტი;
. შეისწავლეთ მიკროორგანიზმების ცოცხალი და მკვდარი უჯრედების მორფოლოგია მკვებავი მედიადა ცხოველებისა და მცენარეების ქსოვილები;
. ფიჭური მიკროსტრუქტურების შესწავლა, რომლებიც შერჩევით შთანთქავენ სხვადასხვა ფტოროქრომებს, რომლებიც ამავდროულად სპეციფიკური ციტოქიმიური მაჩვენებლებია;
. უჯრედებში ფუნქციური და მორფოლოგიური ცვლილებების განსაზღვრა;
. გამოიყენეთ ფტოროქრომები იმუნოლოგიურ რეაქციებში და ბაქტერიების დათვლას ნიმუშებში ბაქტერიების დაბალი შემცველობით.

6. ჰოფმანის კონტრასტი

ჰოფმანის კონტრასტი (HC) არის ირიბი განათების ტექნიკა, რომელიც ზრდის კონტრასტს შეღებილ და შეუღებავ ნიმუშებში ოპტიკური ფაზების გრადიენტის შექმნით. CC საშუალებას გაძლევთ დააკვირდეთ ცოცხალი ნიმუშების სამგანზომილებიან გამოსახულებებს პლასტმასის ჭიქებში მაღალი სიცხადით, რაც იძლევა გაფართოებულ შესაძლებლობებს სამეცნიერო და სპეციალური სამედიცინო პრობლემების გადასაჭრელად. დიდი სამუშაო მანძილების და მაღალი ციფრული დიაფრაგმის გამოყენების გამო, მეთოდი საშუალებას იძლევა გადაადგილების ზუსტი თვალყურის დევნება ხედვის არეში, მაგალითად, მიკრომანიპულაციების შესრულებისას.

სხვა კვლევები - როგორიცაა ელექტროფიზიოლოგია, დამხმარე რეპროდუქციული ტექნოლოგიები და IVF - საჭიროებს არა მხოლოდ კონდენსატორებს, არამედ ლინზებს უფრო გრძელი სამუშაო მანძილით. სქელი ნიმუშების შესწავლისას HC ხელს უწყობს ნიმუშის ფენა-ფენა შესწავლის პრობლემის გადაჭრას ფოკალური გეგმების თანმიმდევრობის არჩევით. ამავდროულად, თითოეული ზედა ფოკალური სიბრტყე არ ატარებს ინფორმაციას ქვემდებარე სიბრტყის შესახებ.
CC შეიძლება გამოყენებულ იქნას მიკროსკოპზე ფლუორესცენტური განათებით. მორფოლოგიის შესწავლა ფლუორესცენციით ან მის გარეშე შესაძლებელია ლინზებისა და ნიმუშების შეცვლის გარეშე. აღსანიშნავია ჰოფმანის კონტრასტის უპირატესობა ფაზის კონტრასტთან შედარებით.
ცნობილია, რომ ფაზური კონტრასტი ხასიათდება ჰალოს ეფექტით - მანათობელი ჰალოს გამოჩენა ობიექტის გამოსახულების კონტურის გასწვრივ. შედეგად, თქვენ შეიძლება დაკარგოთ მნიშვნელოვანი ინფორმაცია. XK არ იძლევა Halo-ს, რაც აადვილებს კიდეების სტრუქტურების თვისებების განსაზღვრას, მაგალითად, ზუსტად გაზომავს კუთხეებს ან მანძილებს.

7. DIC (დიფერენციალური ჩარევის კონტრასტი)

DIC (დიფერენციალური ჩარევის კონტრასტი) არის შესანიშნავი მექანიზმი გამჭვირვალე პრეპარატებში კონტრასტის შესაქმნელად. DIC მიკროსკოპია არის სხივის გაყოფის ჩარევის სისტემა, რომელშიც საცნობარო სხივი გადახრილია მცირე მანძილზე, ჩვეულებრივ, დიფრაქციული წრის დიამეტრზე ნაკლები.
ეს მეთოდი აწარმოებს მონოქრომატულ დაჩრდილულ სურათს, რომელიც აჩვენებს ნიმუშში არსებული ორივე მაღალი და დაბალი სივრცული სიხშირის ოპტიკური ბილიკების გრადიენტს.
ნიმუშის ის ადგილები, რომლებშიც ოპტიკური ბილიკები გრძელდება საკონტროლო სხივთან შედარებით, უფრო კაშკაშა ან ბნელი ჩანს, ხოლო უბნებს, რომლებშიც განსხვავებები უფრო მცირეა, აქვთ საპირისპირო კონტრასტი.
რაც უფრო ციცაბო ხდება ოპტიკური სხივების გრადიენტი, მით უფრო მკვეთრი ხდება გამოსახულების კონტრასტი

მეთოდი, რომელიც საშუალებას გაძლევთ მკვეთრად გაზარდოთ ობიექტის გამოსახულების კონტრასტი. მეთოდის პრინციპია სინათლის ვიბრაციების ფაზური ძვრების გამოვლენა, რაც ხდება მაშინ, როდესაც სინათლე გადის სტრუქტურაში, რომელსაც აქვს გარდატეხის ინდექსი, რომელიც განსხვავდება მიმდებარე გარემოს რეფრაქციული ინდექსისგან.

ფაზის ცვლას თვალი პირდაპირ არ ავლენს, მაგრამ სპეციალური ფაზა-კონტრასტული მიკროსკოპით, სტრუქტურები, რომლებსაც აქვთ მეტი მაღალი რეიტინგირეფრაქციები (თუნდაც სრულიად გამჭვირვალე) უფრო მუქი (ან მსუბუქია მოწყობილობის დიზაინიდან გამომდინარე) ვიდრე მიმდებარე ფონი (სურ. 1.28).

ბრინჯი. 1.28. ამების ფოტო (ფაზა კონტრასტული მიკროსკოპია)

პოლარიზაციის მიკროსკოპია

პოლარიზებულ შუქზე დაკვირვების მეთოდი ოპტიკურად ანიზოტროპული ელემენტების შემცველი პრეპარატების შესასწავლად (ან მთლიანად ასეთი ელემენტებისაგან შემდგარი). ეს მოიცავს ბევრ მინერალს, მარცვლებს შენადნობების თხელ მონაკვეთებში, ზოგიერთ ცხოველურ და მცენარეულ ქსოვილს და ა.შ.

დაკვირვება შეიძლება განხორციელდეს როგორც გადაცემული, ასევე არეკლილი შუქით (სურ. 1.29).

ბრინჯი. 1.29. ნატრიუმის ურატის კრისტალები (Samaras N, Rossi C. N Engl J Med. 2012)

ულტრაიისფერი მიკროსკოპია

მეთოდი ემყარება გარკვეული ნივთიერებების უნარს შერჩევითად შთანთქას ულტრაიისფერი სხივები გარკვეული ტალღის სიგრძით; ფუნდამენტურად, იგი თითქმის არ განსხვავდება ჩვეულებრივი სინათლის მიკროსკოპისგან და ხორციელდება მიკროსკოპების გამოყენებით კვარცის ან ამრეკლავი (სარკე) ოპტიკით. გამოსახულება ვიზუალურად ჩანს ფლუორესცენტულ ეკრანზე და ასევე გადაღებულია. ობიექტების მიკროსკოპია საშუალებას გაძლევთ ამოიცნოთ შესწავლილი ნივთიერებები შეღებვის გარეშე.

ფლუორესცენციის (ლუმინესცენციის) მიკროსკოპიასაშუალებას გაძლევთ შეისწავლოთ როგორც მთელი რიგი ნივთიერებების შინაგანი (პირველადი) ფლუორესცენცია, ასევე მეორადი ფლუორესცენცია, რომელიც გამოწვეულია უჯრედული სტრუქტურების სპეციალური საღებავებით - ფტოროქრომებით შეღებვით. მეთოდის პრინციპია ის, რომ ზოგიერთი ნივთიერება თავად იწყებს ბზინვარებას სინათლის ზემოქმედებისას.

სპექტრის ხილულ ნაწილში ფლუორესცენციის გასააქტიურებლად, ჩვეულებრივ გამოიყენება ლურჯი შუქი ან ულტრაიისფერი სხივები. ბევრი ნივთიერება, რომელიც არ ფლუორესცირდება ხილულ რეგიონში (განსაკუთრებით ნუკლეინის მჟავები) იწყებს ფლუორესცირებას ულტრაიისფერი სხივებით განათებისას და მათი აღმოჩენა შესაძლებელია ფტოროქრომების გამოყენების გარეშე. (სურ. 1.30).

ბრინჯი. 1.30. მიტოზის პროცესი (ფლუორესცენტული მიკროსკოპია)

ელექტრონული მიკროსკოპის მეთოდი

მეთოდი, რომელშიც სინათლის ნაცვლად გამოიყენება ელექტრონების ნაკადი, მინის ლინზებიშეიცვალა ელექტრომაგნიტური ველებით, მაქსიმალური გადიდება 1,5 მილიონი ჯერ. არ საჭიროებს პრეპარატის შეღებვას. (1933 - გერმანია)

ბიოლოგიაში ელექტრონული მიკროსკოპის გამოყენებამ შესაძლებელი გახადა უჯრედგარე ქსოვილის კომპონენტების ულტრაწვრილი უჯრედული სტრუქტურის შესწავლა. ამ მეთოდით მიღებულ შედეგებზე დაყრდნობით (მაქსიმალური გადიდება 800-მდე - 1200 ათასი), 40-იანი წლებიდან. აღწერილია მემბრანების, მიტოქონდრიების, რიბოზომების და სხვა უჯრედული, ასევე უჯრედგარე სტრუქტურების მშვენიერი სტრუქტურა და იდენტიფიცირებული იყო ზოგიერთი მაკრომოლეკულა, როგორიცაა დნმ.

რასტერი (სკანირება) ელექტრონული მიკროსკოპიაშესაძლებელს ხდის უჯრედების და ქსოვილების სტრუქტურების ზედაპირის მშვენიერი სტრუქტურის შესწავლას არა მხოლოდ ფიქსირებული ობიექტების, არამედ ცოცხალი ცხოველების. ელექტრონული მიკროსკოპისთვის ბიოლოგიური პრეპარატების მომზადების ტექნიკა მოიცავს პროცედურებს, რომლებიც ინახავს ქსოვილს ღრმა ვაკუუმში ელექტრონული სხივის ქვეშ და აღწევს მაღალ გარჩევადობას. უჯრედების გამოსახულებებში კონტრასტის გასაზრდელად მათ მკურნალობენ „ელექტრონული საღებავებით“, რომლებიც ძლიერად აფანტავს ელექტრონებს.

ბიოლოგიაში ელექტრონული მიკროსკოპის გამოყენებამ მნიშვნელოვნად შეცვალა და გააღრმავა წინა იდეები თხელი სტრუქტურაუჯრედები (სურ. 1.31-1.34).

ბრინჯი. 1.31. სტაფილოკოკის გამოსახულება რასტერის გამოყენებით ელექტრონული მიკროსკოპი

ბრინჯი. 1.32. ელექტრონული მიკროსკოპი

ბრინჯი. 1.33. ელექტრონული მიკროსკოპის მოწყობილობა

ბრინჯი. 1.34. Helicobacter-ის სკანირების ელექტრონული მიკროსკოპის სურათი

(დოქტორი პატრიცია ფილდსი, დოქტორი კოლეტ ფიცჯერალდი)

ცენტრიფუგაციის მეთოდი

ნარევების დაყოფა კომპონენტურ ნაწილებად ცენტრიდანული ძალის გავლენის ქვეშ. გამოიყენება უჯრედის ორგანელების, მსუბუქი და მძიმე ფრაქციების გასაყოფად ორგანული ნივთიერებებიდა ა.შ. ხოლო აჩქარება 300-ჯერ მეტია გრავიტაციაზე.

ცენტრიფუგა გამოიყენება სხვადასხვა სპეციფიკური სიმძიმის მარცვლოვანი სხეულების ან სითხეების გამოსაყოფად და სითხეების გამოსაყოფად. მყარიცენტრიდანული ძალის გამოყენებით. ცენტრიფუგაში ბრუნვისას ყველაზე მაღალი ხვედრითი სიმძიმის ნაწილაკები განლაგებულია პერიფერიაზე, ხოლო ქვედა ხვედრითი სიმძიმის ნაწილაკები უფრო ახლოს არიან ბრუნვის ღერძთან. (სურ. 1.35).

ბრინჯი. 1.35. ცენტრიფუგა მოწყობილობა