Mehanizam negativne reakcije šika. Naučna elektronska biblioteka. Serumi i imunoglobulini
Chicova reakcija može pomoći diferencijalna dijagnoza između atipične difterije i drugih bolesti sa istovremenim prijenosom bacila difterije (u slučajevima kada se Schick test radi prije primjene seruma protiv difterije).
Istraživanja u protekle dvije godine dijagnostičke vrijednosti Schick testa u metodi titracije prema V.I.Ioffeu, sa 1/40, 1/10, 1/5 DLM toksina difterije (1, 4 i 8 kožnih doza), dovela su do na zaključak da Određivanje visine imuniteta pomaže u diferencijalnoj dijagnozi.
Većina nositelja toksigenih bacila difterije ima intenzivan antitoksični imunitet, izražen negativnim reakcijama ne samo na jednu, već i na 4 i 8 kožnih doza toksina (K.V. Blumenthal).
Kod nekih pacijenata sa difterijom, kod kojih je bilo moguće utvrditi stanje imuniteta po Schick reakciji prije primjene seruma, potonji se pokazao pozitivnim nakon jedne doze kože.
Dakle, u slučaju sumnje kliničku sliku a detekcija toksigenih bacila difterije, Schickova reakcija u uobičajenoj formulaciji (1/40 DLM toksina) daje pozitivan rezultat, pretpostavka o difteriji je razumnija.
Reakcija aglutinacije može pomoći i u diferencijalnoj dijagnozi, jer kod difterije dolazi do prirodnog porasta antitijela u krvi do 2. - 3. sedmice od početka bolesti, dok, prema autorima, popratno nošenje ne daje primjetnu povećanje antitela u navedenom periodu.
U zaključku, treba reći da odbijanje dijagnoze difterije kada se otkriju bacili difterije u svim slučajevima treba biti dovoljno opravdano uvjerljivim kliničkim podacima.
S obzirom da diferencijalna dijagnoza u ovakvim slučajevima često predstavlja velike poteškoće, posebno za lokalnog ljekara, preporučuje se upućivanje ovih pacijenata na dijagnostičke odjele. U nedostatku dijagnostičkih kreveta, dijagnoza difterije može se ukloniti tek nakon konzultacije s iskusnim liječnikom.
„Difterija kod djece“, M.E. Sukhareva, K.V. Blumenthal
Otkrivanje BL u tipičnoj kliničkoj slici folikularnog tonzilitisa, kada se gnojni folikuli, poput zrna prosa, pojavljuju ispod sluzokože krajnika, takođe se lako može smatrati pratećim prijenosom, jer se otočići plakova difterije uvijek nalaze na površine sluznice. Hronični tonzilitisčesto praćeno manje ili više dugotrajnim nošenjem bacila difterije i zbog toga je često potrebno razlikovati atipičnu difteriju...
Iskusnom lekaru nije teško postaviti dijagnozu gljivičnog tonzilitisa (uzrokovanog leptotriksom) uz istovremeni prenos bacila difterije, jer klinička manifestacija mikoza ždrijela u suštini nema sličnosti s procesom difterije; ali, po svemu sudeći, isti razlozi, najčešće kronično oštećenje nazofarinksa, istovremeno doprinose dugotrajnoj vegetaciji gljivica i prijenosu bacila difterije. Diferencijalna dijagnoza je složenija...
Lyuda P., stara 8 godina, primljena je u bolnicu po imenu. I. V. Rusakova 9. septembra 1960. godine sa dijagnozom "difterija ždrela?" Djevojčica je propisno vakcinisana protiv difterije i vrlo često pati od upale grla. Razbolio se 5. septembra, temperatura 37,5°, glavobolja, umjerena upala grla. 6. - 7. septembra temperatura u granicama 38 - 39°, loš osjećaj, grlobolja je trajala...
Detekcija bacila difterije u kulturama iz grla ili nosa sa tipičnom kliničkom slikom sapi gripe ili sapi sa katarom gornjeg respiratornog trakta ne može biti odlučujući argument u prilog difterijske etiologije sapi. U takvim slučajevima neophodna je identifikacija izolovanih mikroba, ali je sasvim moguće nositi BL u grlu ili nosu, prateći nedifterijski sapi. Evo odlomka iz priče...
Borya B., star 8 godina, primljen je na odjel za dijagnostiku difterije bolnice po imenu. I. V. Rusakova 27. septembra 1960. godine sa dijagnozom "difterija ždrela?" Dječak je propisno vakcinisan protiv difterije. Često pati od upale krajnika. Razbolio sam se 24. septembra, temperatura 39,5°, jeza, grlobolja. 25. IX dete je pregledano kod lekara: temperatura je ostala visoka, primećena je svetla hiperemija ždrela, žućkasta, labav, ali prilično opsežna...
CHIC REACTION(Schick) predložen je 1913. godine za određivanje stepena podložnosti difteriji. Sh.r. izvodi se striktno intradermalnim ubrizgavanjem toksina difterije u zapremini od 0,2 cm 3, koji sadrži 1/40 Dim (vidi difterija). Toksin se ubrizgava u kožu lijeve ruke; u kožu desna ruka Za kontrolu se unosi ista količina toksina, zagrijavana na 100° 10 minuta. Rezultati injekcije se primjećuju nakon 24 i 96 sati, a mogu se uočiti sljedeće pojave: 1. Kada potpuno odsustvo reaktivne pojave na mjestu ubrizgavanja “kontrolnog” (zagrijanog) toksina na mjestu ubrizgavanja aktivnog toksina pojavljuju se crvenilo i infiltracija, popraćeni osećaj lakoće peckanje i svrab. Ove pojave se razvijaju prvog dana, dostižu maksimum četvrtog dana, zatim nestaju, ostavljajući pigmentaciju kože neko vrijeme. Po veličini crvenila i infiltrata može se suditi o stupnju reakcije, koji se označava na sljedeći način: + („sumnjiva“ reakcija - s nejasno izraženim infiltratom i blagim crvenilom), + (sa crvenilom u prečniku ne više od 1.5 cm), + +(ako crvenilo ima prečnik od 1,5 do 3 cm) i + + + (ako je crvenilo više od 3 cm); ova vrsta reakcije se naziva “pozitivna” Sh. 2. U nedostatku bilo kakvih reaktivnih pojava na mjestu ubrizgavanja i zagrijanog i aktivnog toksina, govore o „negativnom“ Shch. 3. Ako se reaktivni fenomeni primjećuju na obje ruke u istoj mjeri, onda se takva pojava označava kao „lažna“ Sh. r. Stepen lažne (sa zagrijanim toksinom) reakcije je označen (kao pozitivna) sa jednim, dva, tri znaka. Reakcija na zagrijani toksin ima određene kvalitativne razlike u odnosu na reakciju na aktivni toksin: brzu pojavu i nestanak (obično unutar 36-48 sati) i prevlast eksudativnih pojava nad infiltrativnim. 4. Ako su reaktivne pojave zabilježene na obje ruke, ali je njihov stepen različit, onda govore o „kombinovanom” Sh. r. - sa prevlašću pojava na strani aktivnog toksina i o „pervertiranom” Sh. r. - uz dominaciju fenomena na strani zagrijanog toksina. Opšteprihvaćene ideje o suštini Sh. r. svodi se na sljedeće: ako u krvi ispitanika nema antitoksina ili ga sadrži u količini manjoj od /zo -A-E u 1,0 serumu, tada ubrizgani intradermalni toksin izaziva reaktivne pojave, označene kao "pozitivne" III Ako postoji dovoljna količina antitoksina u krvi ispitanika (prema Schicku 1/30, prema Behringu 1/xoo i više AE u 1,0 serumu), onda ovaj neutralizira ubrizgani toksin, a “negativan” Dobija se Sh.r. Ove odredbe potvrđuju sljedeće zapažanje: ako se neutralna mješavina toksin-antitoksin ubrizgava u subjekta osjetljivog na toksin difterije, tada se po pravilu ne opaža reakcija na mjestu ubrizgavanja ove mješavine. Osim toga, rađeno je više simultanih direktnih determinacija količine antitoksina u krvi po Roemerovoj metodi paralelno sa Sh. Ponekad uočena neslaganja između ovih pojava ne mogu se pokolebati opšte pravilo, jer se dešavaju prilično rijetko: Jensen, na primjer. primetio prisustvo negativnog Sh. r. sa neznatnim sadržajem antitoksina “I /i 00 AE u 1,0 serumu) u 9% slučajeva. Prilikom procjene rezultata Sh. potrebno je uzeti u obzir da se u ranom djetinjstvu često opaža negativan Sh. r. u odsustvu antitoksina u krvi. Ovo se objašnjava inherentnim ranim djetinjstvo anergija kože. Što se tiče tzv false Sh. r. i njegove varijante (kombinovani, izopačeni Sh. r.), tj. reakcija kože na zagrijani toksin, objašnjava se osjetljivošću tijela na termostabilne metaboličke produkte bacila difterije i tvari u hranjivoj juhi. Ova osjetljivost je alergijske prirode. Kako je pokazao Siegl, sastoji se od dvije komponente - specifične i nespecifične u odnosu na difteriju. Zollerova zapažanja su pokazala potpuni identitet lažne reakcije sa intradermalnom reakcijom na toksoid (0,2 toksoid, razrijeđen u omjeru 1:100) - to je takozvana Zellerova reakcija. Ovisno o rezultatu reakcije na toksin i toksoid, Zeller dijeli sve ljude u 4 grupe (vidi tabelu). Zeller zamišlja proces imunizacije protiv difterije na sljedeći način: osobe osjetljive na difteriju (grupa I sa karakteristikama grupe Reakcija | Zeller Schlk reakcija f 1 Osetljiva na II f dlfterchi III 1 Imun na df-IV / teriju + + + 1 Faze + ) alergije pozitivne Sh.r.) kada naiđu na bacil difterije (b-n ili nosilac) ili tokom vještačke imunizacije postaju senzibilizirani na mikrob i njegove produkte. Njihova koža izaziva alergijsku reakciju; ali pošto još nije proizvedena dovoljna količina antitoksina, koža reaguje i na aktivni toksin (grupa II sa lažnim ili kombinovanim Sh. r.). Nakon toga, količina antitoksina u krvi raste toliko da reakcija na aktivni toksin postaje negativna, ali alergija i dalje ostaje ( III grupa sa izopačenim Sh. r.); konačno, ovaj drugi nestaje i nastupa trajni imunitet, karakterističan za osobe IV grupe (sa negativnim Sh. r.). Sh.r. vrijednost kako je imunološka reakcija određena preovlađujućim stavovima o prirodi imuniteta kod difterije. Prema modernim konceptima, potonji se temelji na prisutnosti dovoljne količine antitoksina u krvi. Ove ideje, kao što je poznato, određuju savremenu praksu imunizacije prevencije difterije (toksino-antitoksin mješavine, toksoid). Sa ove tačke gledišta, Sh. r., pogodno zamenjujući glomazno direktno određivanje antitoksina u krvi Remerovom metodom, može se smatrati idealnim načinom za određivanje stanja imuniteta, odn. preosjetljivost osobe na difteriju. Pitanje minimalne količine antitoksina u krvi potrebnog za postizanje trajnog imuniteta na difteriju je kontroverzno; u svakom slučaju, potrebno je napomenuti komparativnu rijetkost bolesti difterije kod osoba s negativnim Sh. r.; osim toga, možemo ukazati na direktnu eksperimentalnu potvrdu ovog pitanja: Guetrie, Marshall i Moss zarazili su osam dobrovoljaca mazanjem ždrijela virulentnom kulturom difterije, od kojih su četiri imala pozitivan Sh. negativan. Kao rezultat, 4 osobe u prvoj grupi su imale tipičnu bolest, od 4 osobe sa negativnim Sh. 3 su privremeno nosili bacile difterije bez ikakvih znakova bolesti. Epidemiološki značaj Sh. r. tome je posvećen ogroman rad. Iz njih je jasno da je GL. R. je pouzdana metoda utvrđivanje stepena imunološkog sloja kolektiva u odnosu na difteriju. Ispostavilo se da ako distribuirate pozitivne Sh. po godinama, onda se dobija krivulja (Zin-gher) starosne osjetljivosti na difteriju, koja se sasvim precizno poklapa sa starosnom distribucijom incidencije difterije. Relativno visok imunitet male djece djetinjstvo(do šest mjeseci) može se objasniti pasivnim prijenosom imunoloških tijela kroz majčino mlijeko. Što se tiče smanjenja osjetljivosti na difteriju s godinama (počevši od godinu dana), praćeno nakupljanjem antitoksina u krvi, neki autori (Friedberger i drugi) ovu pojavu smatraju izrazom „fiziološke serogeneze“, tj. akumulacija antitoksina se dešava u fiziološkom redu, praćena takvim od. sazrevanje odjednom ljudsko tijelo, a drugi autori (Zinger, Dedley, Ramon i dr.) smatraju da ljudi akumuliraju antitoksin u krvi kao rezultat očigledne, a češće „tihe infekcije“ difterijom (vidi sliku). Epidemiološka vrijednost Sh. r. također leži u činjenici da je pogodan za korištenje za odabir osoba koje podliježu (u slučaju pozitivan rezultat) aktivna imunizacija protiv difterije. Obično se koristi kod djece"-~-" $osobe sa antitoksinom u krvi (prema Greeru)
°--«> % osoba o pozitivnoj reakciji. Schick (prema Park i Tsknger) barovi - učestalost difterije Distribucija prema godinama: osobe sa antitoksinom u krvi (u%); osobe sa pozitivnom Schick reakcijom (u%); učestalost difterije (°/ooo u svakoj životnoj dobi). u dobi preko 5 godina, imajući u vidu relativnu rijetkost negativnih Sh. mlađi od 5 godina. Konačno III. R. Koristi se i kao objektivna kontrola efikasnosti preventivnih vakcinacija protiv difterije. Ova efikasnost je dokazana prelaskom pozitivnog (prije vakcinacije) Sh. negativan nakon vakcinacije (obično 6 sedmica nakon posljednje vakcinacije). Tehnika proizvodnje Sh. r.: 1. Da bi se pripremilo potrebno razblaživanje toksina u potrebnoj zapremini, poći od Dim toksina. Recimo Dim toksina = 0,0032. Za pripremu toksina koji sadrži I/4l) Dim u 0,2 zapremine, postupite na sledeći način: uzmite lOODlm, u ovom slučaju = 0,32, i dodajte fiziološki rastvor na 10,0, tj. 9,68. Uzmite 1,0 ovog razblaženja (tj. 10 Dim) i dodajte ga u 79,0 fiziol. rješenje. Zatim u 80.0 drugog razblaženja ima 10.Dim; u 1 cm 3 dakle - V" Dim, au 0,2 - Vio Dim. Za svako razrjeđivanje potrebno je uzeti svježu, suhu pipetu, isprati je najmanje 10 puta. U ovom slučaju potrebna je posebna preciznost u mjerenju i preciznost pipeta (polovica pripremljenog razrjeđenja toksina se sipa u posebnu tikvicu i stavlja u ključalu vodenu kupelj na 10 minuta; tako se dobiva zagrijani toksin za „kontrolu“) . S obzirom na činjenicu da je toksin, razrijeđen fiziol. rastvor, brzo gubi svoju aktivnost, pogodnije je uzimati i sl. za razblaživanje. rastvor boratnog pufera (vidi. Dickova reakcija) u kojoj razrijeđeni toksin zadržava svoju moć nekoliko mjeseci. 2. Injekcija se vrši striktno intradermalno, najpogodnije korišćenjem tuberkulinskog šprica sa vrlo tankom platinastom iglom (br. 18, 19). Igla treba da ima kratak bod. Prilikom ubrizgavanja, bradu treba držati prema van. Toksin se primjenjuje polako uz određenu napetost karakterističnu za intradermalno ubrizgavanje tekućine, i kao rezultat, na mjestu injekcije se formira dobro razgraničen mjehur (Quaddel), sa udubljenjima na mjestu folikula dlake. 3. Aktivni toksin se ubrizgava u kožu podlaktice lijeve ruke, zagrijani toksin se ubrizgava u kožu podlaktice desne ruke. Tokom masovne proizvodnje III. R. Preporučuje se da ga dva doktora rade istovremeno – jedan ubrizgava aktivni, drugi zagrijani toksin. 4. Odbrojavanje Sh.r. se izvodi dva puta: nakon 24 sata radi uračunavanja lažnih reakcija i nakon 96 sati, kada je pravi Sh. dostiže svoj vrhunac. Lit.: Zdrodovsky P., Savremena pitanja specifična profilaksa difterije, arh. biol. nauke, tom XXXV, ser. A, pitanje. 2, 1934; Doull J., Faktori koji utječu na selektivnu distribuciju tn difterije, Journ. ol spriječiti, med., v. IV, 1930; Frost W., Infekcija, imunitet i bolesti u epidemiologiji difterije, Ibid., v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets a Schick negativna reakcija, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxin-antitoksin imunizacija protiv difterije, Journ. Amer. med. Ass., v. LXXIX, str. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VII, 1930; Schick V., Die Diphtherietoxin-Hautreaktion des Menschen als Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M "inch. med. Wo-chenschr., 1913, No. 47; S iegl J., Zur Fragehunger der Entse e Entse. Diphtherietoxinreaktion nach Schick, Arch.f. Kinderheilk., B. XCVÍII, 1932; Z i n g he r A., The Schick test, Journ. of Amer. Med. Ass., v. LXXVÍII, 1922; Zoeller C, L. "intradermo- reakcija al"anatoxine diphterique ili anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Vidi također lit. do čl. Šarlah. G. Orlov.
Alergeni i toksini
Dijagnostički lijekovi
Humani antipertussis imunoglobulin antitoksičan (Rusija)
Pročišćeni koncentrirani tekući serum protiv difterije za konje (Rusija)
Serumi i imunoglobulini
Suva vakcina protiv tuberkuloze BCG-M (za blagu primarnu imunizaciju, Rusija)
Vakcina protiv tuberkuloze (BCG) suha za intradermalnu primjenu (Rusija)
Akt-Hib (Hib-vac, sjeverna koreja)
monovakcina protiv pertusis (Rusija)
Sadrži bakterije pertusisa, konzervans – mertiolat. Koristiti samo za epidemiološke indikacije u područjima infekcije pertussisom.
Sadrži 10 mcg polisaharida po dozi Haemophilus influenzae tip b, konjugiran sa tetanus toksoidom, konzervans – trometamol. Koristi se za vakcinaciju djece od 2 mjeseca prema epidemiološkim indikacijama.
Mycobacterium bovis BCG-1. Vakcinalni soj je dobijen dugotrajnim (13 godina) uzgojem goveđe mikobakterije tuberkuloze u nepovoljnim uslovima na krompir-glicerinskoj podlozi uz dodatak žuči. Koristi se za specifičnu prevenciju tuberkuloze. Vakcinacija se provodi 5-7 dana života, kada je tijelo oslobođeno mikobakterijske infekcije. Sva zdrava djeca, adolescenti i odrasli do 30 godina starosti koji negativno reaguju na tuberkulin podliježu revakcinaciji. Mehanizam imuniteta kod tuberkuloze nije u potpunosti otkriven. IN kliničku praksu glavni kriterijum za intenzitet imunosti vakcine je prelazak negativnog kožna reakcija pozitivan na tuberkulin.
Sadrži žive bakterije soja vakcine osušene zamrzavanjem u 1,2% rastvoru natrijum glutamata Mycobacterium bovis BCG-1. Koristi se za blagu specifičnu prevenciju tuberkuloze (primarna vakcinacija) kod novorođenčadi u područjima sa nepovoljnom situacijom za tuberkulozu.
Sadrži antitijela protiv egzotoksina bacila difterije. Antitoksična aktivnost se izražava u međunarodnim jedinicama (10.000 i 20.000 IU/ml). Koristi se za liječenje pacijenata sa difterijom. Osim u terapeutske svrhe, serum protiv difterije koristi se za određivanje toksičnosti kultura bacila difterije u reakciji taloženja gela.
Sadrži imunološki aktivnu frakciju krvne plazme donatora s antitijelima na egzotoksin mikroba pertusisa (najmanje 750 jedinica antitoksičnih anti-pertusis antitijela). Koristi se za liječenje velikog kašlja.
Sadrži prečišćeni toksin difterije u 0,2 ml 1/40 DLM toksinskog preparata za zamorac. Koristi se za intradermalne testove u svrhu imunodijagnoze. Kod osoba na mjestu uboda, upalna reakcija. Ako krv sadrži više od 0,03 IU antitoksina, test je negativan. Ranije se Schickov test često koristio za identifikaciju osoba podložnih difteriji. Trenutno je, zbog mogućnosti komplikacija, njegova upotreba ograničena na stroge epidemijske indikacije.
Toksini (od grčkog toxikon - otrov), supstance bakterijskog porijekla, sposoban da inhibira fiziološke funkcije, što dovodi do bolesti ili smrti životinja i ljudi. Po hemijskoj prirodi, svi toksini su proteini ili polipeptidi. Za razliku od drugih organskih i anorganskih toksičnih supstanci, toksini, kada uđu u organizam, uzrokuju stvaranje antitijela.
Za neke zarazne bolesti (difterija, šarlah) koriste se intradermalni testovi pomoću odgovarajućih razblaženih toksina za određivanje jačine imunog sistema i osetljivosti dece. Pozitivna reakcija(lokalna upala kože u području gdje se toksin primjenjuje) uzrokovana je toksičnim djelovanjem toksina na tkivo kože. Negativan rezultat reakcije objašnjava se neutralizacijom toksina unešenog u kožu odgovarajućim antitoksinom sadržanim u imunološkom tijelu u dovoljnoj količini za tu svrhu.
Toksini se dobijaju iz toksigenih sojeva mikroba (bacila difterije ili streptokoka šarlaha) inokulacijom na tečnost hranljivi medij(juha na otvorenom ognjištu) nakon čega slijedi filtracija kroz bakterijske filtere. Od dobijenih toksina pripremaju se dijagnostički toksini Schick (difterija) i Dika (šarlah). Toksini se daju intradermalno, u količini od 0,2 ml (Shika) i 0,1 ml (Dika), u srednji dio unutrašnja površina podlaktice.
Anatoksini su filtrati bujonskih kultura toksigenih mikroorganizama koji su posebnim tretmanom izgubili toksičnost, ali su u značajnoj mjeri zadržali antigena i imunogena svojstva izvornih toksina.
Kada se unesu u ljudski ili životinjski organizam, toksoidi izazivaju stvaranje antitoksičnog imuniteta, što im omogućava da se koriste za prevenciju zarazne bolesti, koji se zasnivaju na djelovanju egzotoksina koje luče patogeni, kao i za hiperimunizaciju životinja koje proizvode antitoksične serume.
Bez obzira na vrstu toksoida, njegova imunogenost i antigenost određuju se odgovarajućim svojstvima originalnog toksina. Stoga laboratorije koje proizvode ove lijekove posvećuju veliku pažnju stvaranju optimalnih uslova za stvaranje toksina.
Za dobijanje toksina visoka čvrstoća potrebni su sojevi koji imaju posebno izraženu sposobnost stvaranja toksina u veštačkim uslovima. Nemaju svi sojevi toksičnih bakterija ova svojstva. Za potrebe proizvodnje koriste se sojevi koji su prilagođeni vještačkom okruženju i trajno zadržavaju sposobnost stvaranja toksina.
Kulture agenasa koji stvaraju toksine čuvaju se ili u osušenom stanju ili na podlozi optimalnom za datu vrstu bakterija. Prije upotrebe za setvu masovnih serija, sojevi se pasiraju na mediju koji se koristi za dobijanje toksina.
Pod svim ostalim uslovima, jačina toksina je određena kvalitetom podloge za kulturu, pa laboratoriji obraćaju pažnju na pripremu podloge. Sirovine, hemikalije i drugi sastojci uključeni u životnu sredinu podležu najpažljivijoj kontroli u biohemijskim laboratorijama proizvodnih instituta.
Za formiranje toksina koriste se tečni hranljivi mediji koji uključuju mesnu vodu i produkte peptičke (Martinova juha, Ramonova podloga) ili triptičke (Popeov medij) varenja mesa.
Proces hidrolize mesa kontroliše se određivanjem ukupnog aminskog azota i koeficijenta razgradnje proteina, koji se izračunava iz odnosa aminskog azota prema ukupnom. Koristi se i kazein bez mesa, polusintetički mediji.
Ugljikohidrati (glukoza, maltoza ili njihova mješavina) se dodaju u hranjivu podlogu namijenjenu stvaranju toksina. Kada se ugljikohidrati fermentiraju, oslobađa se velika količina energije koja je neophodna za procese sinteze koji se odvijaju u kulturi u razvoju. Dodavanje ugljikohidrata dramatično povećava snagu toksina proizvedenih u okolišu.
Osim ugljikohidrata, neki metali su potrebni u minimalnim dozama za stvaranje toksina. Formiranje toksina bacila difterije inhibira višak gvožđa u okolini koliko i njegovo odsustvo. U prisustvu optimalnih količina gvožđa, stvaranje toksina se naglo povećava.
Stvaranje toksina se u potpunosti događa pri određenom pH okoline. U međuvremenu, tokom rasta kulture, pH vrijednost se mijenja i može dostići vrijednosti koje će inhibirati stvaranje toksina.
Da bi se ovo eliminisalo, dodaju se puferske supstance kako bi se održala željena pH vrednost. Jedna od ovih supstanci koja ima puferska svojstva je natrijum acetat, koji se dodaje u juhu u količini od 0,5-0,75 %.
Ovisno o biološkim karakteristikama mikroba koji proizvodi toksin, različitim uslovima reguliše se uzgoj, a posebno aeracija okoliša. Bacil difterije stvara toksin u uslovima maksimalne aeracije, naprotiv, bacilu tetanusa i drugim toksigeni anaerobi ne treba kiseonik. Prema ovo je prvi put U ovom slučaju, usjev se uzgaja u tankom sloju medija sa velikom površinom kontakt sa zrakom, u drugom - medij se izlije u visokom sloju i dodaju se razni adsorbenti kisika (vata, suha crvena krvna zrnca).
Temperatura i trajanje uzgoja variraju za različite mikrobe. Zajedničko za proces stvaranja toksina je potreba za savršenom kontrolom temperature u termostatu. Temperaturne fluktuacije negativno utječu na snagu toksina. Stoga su termostati u kojima dolazi do stvaranja toksina opremljeni preciznim termostatima.
U svakom pojedinačnom slučaju, trajanje uzgoja kulture određeno je intenzitetom stvaranja toksina u datoj seriji medija. Da bi se riješilo pitanje kada treba prekinuti uzgoj, određuje se jačina toksina i pH podloge. različiti datumi raste.
Kada jačina toksina dostigne svoj maksimum, odvaja se od mikrobnih tijela, a to se vrši filtriranjem kroz posebne bakterijske filtere (anaerobni mikroorganizmi) ili obične papirne filtere (bacil difterije).
Prijenos toksičnih filtrata u vanatoksin vrši se produženim izlaganjem formaldehidu na temperaturi od 39-40 °C. Formalin se kombinuje sa slobodnim amino grupama aminokiselina, polipeptidima i toksinskim proteinima, te stoga gubi svoja toksična svojstva. Tranzicija toksina vanatoksin se dešava u roku od 3-4 nedelje. Za pravilno formiranje toksoida važan je pH toksina. Najpovoljnija je neutralna ili blago alkalna reakcija okoline.
Anatoksine karakterizira potpuna neškodljivost za životinje. Međutim, ako se ne neutraliziraju u potpunosti, mogu zadržati ostatke toksina, koji uzrokuju kasna oštećenja osjetljivog tijela. Zbog toga se prilikom provjere neškodljivosti toksoida životinje prate kroz duži vremenski period. Bezopasnost toksoida je nepovratna. Nijedan uticaj ne dovodi do vraćanja izgubljene toksičnosti.
Toksoidi gotovo u potpunosti zadržavaju antigena svojstva toksina. Ovo se može provjeriti razne metode in vitro (reakcija flokulacije, reakcija vezivanja toksoida) i u eksperimentima na životinjama u kojima primjena toksoida uzrokuje stvaranje odgovarajućih antitoksina i stvaranje antitoksičnog imuniteta.
Toksoidi su postojani; podnose ponovljeno zamrzavanje i odmrzavanje, otporne su na djelovanje visoke temperature i stabilni su tokom dugotrajnog skladištenja.
Osim specifičnih proteina, toksoidi sadrže i balastne tvari od kojih se mogu osloboditi različite metode. Zasnivaju se na sposobnosti toksoida da se talože kada su zasićeni neutralnim solima, solima teških metala, kiselinama (hlorovodonična, trihloroctena, metafosforna), kao i u prisustvu etil i metil alkohola na niskim temperaturama. Ove metode se trenutno koriste za dobivanje pročišćenih, koncentriranih toksoida.
Toksoidi se adsorbuju na različite nerastvorljive supstance (fosforne soli, aluminijum hidroksid), od kojih se pripremaju sorbovani toksoidi koji se odlikuju sporom apsorpcijom u organizmu, usled čega se postiže intenzivniji imuni sistem.
Toksoidi su zbog svoje neškodljivosti, visoke antigenosti i imunogenosti sa najvrednijim sredstvima prevenciji i terapiji niza bolesti.
Trenutno se dobijaju toksoidi: difterija, tetanus, botulinum, stafilokok, dizenterija, iz toksina koje proizvode uzročnici gasne gangrene, kao i iz zmijskog otrova.
Schickova reakcija ukazuje na prisustvo ili odsustvo potrebnog nivoa antitoksina u krvi da bi se tijelo zaštitilo od difterije. Trenutno se ova reakcija rjeđe koristi zbog uvođenja osjetljivijih metoda (RPGA) u praksu.
Šikova reakcija se sprovodi kod dece vakcinisane protiv difterije koja su završila vakcinaciju i najmanje jednu revakcinaciju. U dobi od 13 godina i više, reakcija se može dijagnosticirati čak i uz nepoznatu anamnezu vakcinacije. Stanje imunosti protiv difterije provjerava se najranije 6 mjeseci nakon posljednje revakcinacije i ne prije dva mjeseca nakon akutne bolesti.
Šikovu reakciju dobijaju i novopridošla djeca u grupama u nepovoljnom položaju od difterije, kada nema informacija o vakcinaciji. Djeca s negativnom Schickovom reakcijom ne primaju dodatne vakcine. Dodatne vakcinacije, bez obzira na imunološki sloj u timu, daju se djeci sa pozitivnim i upitnim reakcijama.
Rezultati Schickove reakcije se unose u računovodstvenu karticu preventivne vakcinacije(f. 63) sa naznakom datuma kada je reakcija obavljena i testirana, serije toksina i instituta koji je proizveo toksin.
Za izvođenje Schickove reakcije koristi se razrijeđeni aktivni (nezagrijani) toksin difterije. 0,2 ml sadrži jednu Chic dozu.
Za izvođenje Schickove reakcije potrebno je koristiti špriceve od jednog grama (tuberkulina), pažljivo ispitane sa preciznim gradacijama, koje ne dozvoljavaju prolazak tekućine između stijenki šprica i njegovog klipa.
Strogo je zabranjeno obavljanje Šikove reakcije u prostorijama u kojima je tog dana obavljena revakcinacija protiv tuberkuloze, kao i upotreba špriceva, igala i drugih instrumenata koji se koriste za imunizaciju protiv tuberkuloze.
Koža na mjestu uboda obriše se vatom navlaženom 70% etil alkoholom. Toksin (0,2 ml) se ubrizgava intradermalno u srednji dio površine dlana, obično u lijevu podlakticu. Uvođenje se vrši polako uz poznati napon, karakterističan za intradermalno ubrizgavanje tekućine. Injekcija se vrši sa vrlo blagim nagibom šprica prema podlaktici, skoro paralelno sa površinom kože. Rez igle treba u potpunosti ući u kožu i biti vidljiv kroz epidermu. Na mestu uboda treba da se formira beličasta, dobro definisana vezikula (papula) prečnika oko 1 cm, sa udubljenjem na mestu folikula dlake („limunova kora“). Ova vezikula (papula) se povlači u roku od 10 do 15 minuta. Ako se prilikom ubrizgavanja toksina vezikula (papula) ne formira ili nestane prebrzo, to ukazuje da je injekcija napravljena pogrešno, duboko, a toksin koji je ušao potkožno možda neće izazvati reakciju. Kao rezultat, mogu se dobiti netačni rezultati.
Reakcija se uzima u obzir nakon 72 ili 96 sati, a rezultati se procjenjuju na sljedeći način:
a) Schickova reakcija je pozitivna ako se na mjestu ubrizgavanja toksina pojave crvenilo i infiltracija. Stepen reakcije je naznačen: “+” - ako je crvenilo prečnika 1 -1,5 cm, (+ + " - ako je 1,5 - 3 cm, "+ + +" - ako je više od 3 cm;
b) Schickova reakcija je negativna kada nema crvenila ili infiltrata na mjestu ubrizgavanja toksina;
c) Schickova reakcija je upitna ako su crvenilo i infiltrat nakon davanja toksina ili nejasno izraženi, ili ako je reakcija izražena, prečnik crvenila je približno 0,5 cm (označeno sa “±”).
Kontraindikacije za Schickovu reakciju: spazmofilija, epilepsija, pustularne bolesti, kontakt sa pacijentima virusni hepatitis, bronhijalna astma.