Antigeni i u vrsti šta. Imunologija. Humoralni faktori adaptivnog imuniteta

Antigeni su tvari koloidne strukture strane organizmu, koje su, kada se unesu u njegovu unutrašnju sredinu, sposobne izazvati specifičan imunološki odgovor, koji se očituje, prije svega, u stvaranju specifičnih antitijela, pojavi senzibiliziranih limfocita ili nastanak stanja tolerancije na ovu supstancu.

Tabela 12

Indikatori glavnih humoralnih faktora zdravih ljudi

Supstance koje su antigeni moraju biti organizmu strane, makromolekularne, u koloidnom stanju, a u organizam ući parenteralno, tj. zaobilazeći gastrointestinalni trakt, u kojem se supstanca obično razgrađuje i gubi stranost. Stranost antigena treba shvatiti kao određeni stepen hemijske razlike između antigena i makromolekula organizma u unutrašnju sredinu u koju ulazi.

Prosti elementi (gvožđe, bakar, sumpor itd.), jednostavna i složena neorganska jedinjenja (kiseline, soli itd.), kao i jednostavni organski molekuli kao što su monosaharidi, disaharidi, aminokiseline nisu antigeni. Biosinteza ovih molekula završava se izgradnjom hemijski sličnih molekula, bez obzira da li se odvija u životinjskoj, biljnoj ili mikrobnoj ćeliji, tj. ove supstance nemaju specifičnost, specifičnost se manifestuje na više visoki nivo organizacija bioloških makromolekula. Dakle, aminokiseline povezane u polimerni lanac postaju antigene ako ovaj lanac uključuje više od 8 aminokiselina. Izraz "antigenost" obično se odnosi ne samo na sposobnost strane tvari da indukuje stvaranje antitijela u tijelu, već i da uđe u specifičnu vezu s njima.

Antigena svojstva povezana su s molekulskom težinom makromolekule - ona mora biti najmanje 10 hiljada daltona. Što je veća molekularna težina supstance, to je veća njena antigenost. Međutim, pogrešno je pretpostaviti da je visoka molekularna težina obavezno svojstvo antigena. Dakle, glukagon (hormon pankreasa, mm 3800) vazopresin - angiotenzin (mm 1000) takođe ima antigena svojstva.

Uobičajeno je razlikovati kompletne antigene, inferiorne antigene (haptene) i poluhaptene. Punopravni antigeni su oni koji izazivaju stvaranje antitijela ili senzibilizaciju limfocita i sposobni su s njima reagirati kako u tijelu tako iu laboratorijskim reakcijama. Proteini, polisaharidi, visokomolekularne nukleinske kiseline i složena jedinjenja ovih supstanci imaju svojstva punopravnih antigena.

Defektni antigeni ili hapteni sami po sebi nisu u stanju da izazovu stvaranje antitela ili senzibilizaciju limfocita. Ovo svojstvo se pojavljuje samo kada im se dodaju punopravni antigeni (“provodnici”), a među nastalim antitijelima ili senzibiliziranim limfocitima, neki su specifični za “provodnik”, a neki su specifični za hapten, s kojim mogu reagirati. i in vivo i in vitro.

Hemihapteni su relativno jednostavne supstance koje se ulaskom u unutrašnje okruženje organizma mogu hemijski spojiti sa proteinima ovog organizma i dati im svojstva antigena. Ove supstance mogu uključivati ​​i neke lekove (jod, brom, antipirin, itd.).

Molekul antigena se sastoji od dva nejednaka dijela. Aktivni (mali dio) molekulske težine od oko 350-1000 daltona naziva se antigenska determinanta (epitop) i određuje antigensku specifičnost. Antigene determinante se nalaze na onim mjestima molekule antigena koja su u najvećoj povezanosti sa mikrookruženjem. U proteinskom molekulu, na primjer, mogu se nalaziti ne samo na krajevima polipeptidnog lanca, već iu drugim njegovim dijelovima. Antigenske determinante sadrže najmanje tri aminokiseline krute strukture (tirozin, triptofan, fenilalanin). Specifičnost antigena je takođe povezana sa redosledom alternacije aminokiselina polipeptidnog lanca i kombinacijom njihovih položaja u odnosu jedan na drugi. Za otprilike svakih 5000 daltona relativne molekulske težine molekula antigena postoji jedna antigenska determinanta (epitop). Broj antigenskih determinanti u molekulu antigena određuje njegovu valenciju. Što je veća relativna molekulska težina molekula antigena, to je veća. Dakle, toksin difterije ima 8 valencija, hemocijanin ima 231, itd.

Vjeruje se da preostali (neaktivni) dio molekule antigena igra ulogu nosioca determinante i potiče prodiranje antigena u unutarnju sredinu tijela, njegovu pinocitozu ili fagocitozu, ćelijsku reakciju na prodiranje antigena. antigen, formiranje medijatora međućelijske interakcije u imunološkom odgovoru (T limfociti imaju receptore za nosač, B- za antigensku determinantu). Antigene determinante nekih antigena dobijaju se veštački. Njihovo unošenje u organizam životinja bez nosača, suprotno očekivanjima, dovodi do niskog imunološkog odgovora. Trenutno je u toku razvoj stvaranja sintetičkih nosača za sintetičke antigene determinante.

Za ispoljavanje antigenosti od velike je važnosti put unošenja antigena u organizam i njegova doza. Za većinu antigena bakterija i virusa, intradermalna i potkožna primjena je najefikasnija. Oba puta su mnogo efikasnija od intramuskularne ili intravenske. Enteralni put ulaska za mnoge antigene je neefikasan. Predoziranje sporo oslobađajućih antigena može uzrokovati imunološku paralizu. Unošenje antigena u embrij dovodi do pojave tolerancije nakon rođenja životinje. Ovisno o putu ulaska, uočava se dominantna akumulacija antigena u jednom ili drugom organu: s intravenskom primjenom - u slezeni, koštanoj srži, jetri; sa supkutanim tretmanom - u regionalnim limfnim čvorovima. Antigeni ulaze u ćeliju tijela kao rezultat fago- ili pinocitoze. Očuvanje antigena u organizmu zavisi, pod jednakim uslovima, od veličine i hemijske strukture njegovih molekula. Njegov najduži boravak u tijelu (nekoliko stotina dana) se opaža kada se antigen spoji sa supstancom koja ima dugo poluvrijeme. Antigen se oslobađa iz organizma, uglavnom u urinu i (manje) u izmetu.

Proteini i ugljikohidrati u krvi i unutrašnje organe obično nisu antigenski za organizam u kojem se sintetiziraju, a istovremeno i antigeni za druge jedinke iste vrste (izoantigeni). Ovaj obrazac se ne odnosi na takozvane barijerne organe, tj. organi odvojeni od krvotoka posebnom barijerom (krvno-mozak, hematotestikularni, itd.), čiji proteini inače ne ulaze u krv i antigeni su za tijelo. Ovi organi uključuju mozak, očno sočivo, paratireoidne žlijezde i testis.

Zbog složenosti svoje strukture i hemijskog sastava, različiti mikrobi sadrže različite antigene: proteine ​​(pune antigene), ugljikohidrate, lipoidne spojeve (haptene) i njihove komplekse.

Prema anatomskim strukturama bakterijske ćelije razlikuju se H-antigeni (bičasti, ako ih bakterija ima), K-antigeni (površinski, antigeni ćelijskog zida - polisaharidi, lipopolisaharidi, proteini), O-antigeni (somatski, unutarćelijski - proteini, nukleoproteini, bakterijski enzimi), antigeni koje bakterije izlučuju u svoju okolinu (proteini egzotoksina, polisaharidi u kapsulama).

Među brojnim antigenima mikrobne ćelije postoje oni koji su svojstveni samo određenoj vrsti mikroba (tip antigena), datoj vrsti (species antigens), kao i oni zajednički za grupu (porodicu) mikroorganizama (grupa antigeni). Takvi antigeni se ekstrahuju iz dezintegrisanih mikroba, životinje se imuniziraju njima i, shodno tome, dobijaju se antiserumi tipa, vrste i grupe. Takvi serumi se koriste za identifikaciju nepoznatih bakterija izoliranih iz tijela pacijenta (ili okoline), određujući ne samo vrstu, već i serotip unutar vrste.

Dakle, bakterijska stanica (kao i mikroorganizmi drugih mikrobnih carstava - virusi, protozoe, gljive) predstavljaju složen kompleks brojnih antigena. Kada uđu u unutrašnje okruženje makroorganizma, mnogi od ovih antigena će formirati svoja specifična antitela. Neki antigeni indukuju stvaranje jedva primjetne količine antitijela (titar), dok drugi izazivaju brzo i značajno stvaranje antitijela. Prema tome, razlikuju se „slabi“ i „jaki“ antigeni.

Nisu svi antigeni bakterijske ćelije podjednako uključeni u indukciju imuniteta (imuniteta) na ponovni ulazak patogenih mikroba iste vrste u makroorganizam. Sposobnost antigena da indukuje imunitet naziva se imunogenost, a takav antigen se naziva imunogen. Utvrđeno je i da određeni antigeni određenih mikroorganizama mogu uzrokovati razvoj različitih vrsta preosjetljivosti (alergija). Takvi antigeni se nazivaju alergeni.

Antigeni bakterijskih ćelija se dobijaju na dva načina: preparativno – izolovanjem ćelijskih struktura nakon raspadanja mikroba (fizička metoda) ili ekstrakcijom antigenskih frakcija hemikalijama (hemijska metoda).

Šta su antigeni

To su sve supstance sadržane u (ili koje luče) mikroorganizmi i druge ćelije koje nose znakove genetski stranih informacija i koje potencijalno može prepoznati imunološki sistem tijela. Kada se unesu u unutrašnje okruženje organizma, ove genetski strane supstance su sposobne da izazovu imuni odgovor različitih tipova.

Svaki mikroorganizam, ma koliko primitivan bio, sadrži nekoliko antigena. Što je njegova struktura složenija, to se više antigena može naći u njegovom sastavu.

Antigena svojstva imaju različiti elementi mikroorganizma - flagela, kapsula, ćelijski zid, citoplazmatska membrana, ribozomi i druge komponente citoplazme, kao i razni proizvodi proteinske prirode, koju bakterije oslobađaju u vanjsko okruženje, uključujući toksine i enzime.

Postoje egzogeni antigeni (koji ulaze u tijelo izvana) i endogeni antigeni (autoantigeni - proizvodi vlastitih ćelija tijela), kao i antigeni koji izazivaju alergijske reakcije - alergeni.

Šta su antitela

Tijelo se neprestano susreće sa raznim antigenima. Napada se kako izvana - od virusa i bakterija, tako i iznutra - od tjelesnih stanica koje stiču antigena svojstva.

- proteini u serumu koje proizvode plazma ćelije kao odgovor na prodiranje antigena u tijelo. Antitijela proizvode ćelije limfoidnih organa i cirkuliraju krvnom plazmom, limfom i drugim tjelesnim tekućinama.

Glavna važna uloga antitijela je da prepoznaju i vežu strani materijal (antigen), kao i da pokrenu mehanizam za uništavanje ovog stranog materijala. Bitno i jedinstveno svojstvo antitijela je njihova sposobnost da direktno vežu antigen u obliku u kojem ulazi u tijelo.

Antitijela imaju sposobnost razlikovanja jednog antigena od drugog. Sposobni su za specifičnu interakciju s antigenom, ali stupaju u interakciju samo s antigenom (uz rijetke izuzetke) koji je inducirao njihovo stvaranje i uklapa ih u prostornu strukturu. Ova sposobnost antitela se zove komplementarnost.

Potpuno razumijevanje molekularnog mehanizma stvaranja antitijela još ne postoji. Molekularni i genetski mehanizmi koji su u osnovi prepoznavanja miliona različitih antigena pronađenih u okolini nisu proučavani.

Antitijela i imunoglobulini

Krajem 30-ih godina 20. stoljeća počelo je proučavanje molekularne prirode antitijela. Jedna od metoda proučavanja molekula bila je elektroforeza, koja je iste godine uvedena u praksu. Elektroforeza omogućava razdvajanje proteina na osnovu njihovog električnog naboja i molekularne težine. Elektroforeza serumskih proteina obično proizvodi 5 glavnih traka, koje odgovaraju (od + do -) frakcijama albumina, alfa1, alfa2, beta i gama globulina.

Godine 1939. švedski hemičar Arne Tiselius i američki imunohemičar Alvin Kabat koristili su elektroforezu za frakcioniranje krvnog seruma imuniziranih životinja. Naučnici su pokazali da se antitijela nalaze u određenoj frakciji serumskih proteina. Naime, antitijela se uglavnom odnose na gama globuline. S obzirom da su neki spadali i u područje beta globulina, predložen je bolji termin za antitijela - imunoglobuline.

U skladu sa međunarodnom klasifikacijom, naziva se ukupnost serumskih proteina koji imaju svojstva antitijela imunoglobulini i označeni su simbolom Ig (od riječi “imunoglobulin”).

Termin "imunoglobulini" odražava hemijsku strukturu molekula ovih proteina. Termin "antitelo" određuje funkcionalna svojstva molekula i uzima u obzir sposobnost antitijela da reagira samo sa specifičnim antigenom.

Ranije se pretpostavljalo da su imunoglobulini i antitijela sinonimi. Trenutno postoji mišljenje da su sva antitijela imunoglobulini, ali nemaju svi molekuli imunoglobulina funkciju antitijela.

O antitelima govorimo samo u odnosu na antigen, tj. ako je antigen poznat. Ako ne znamo komplementaran antigen određenom imunoglobulinu koji imamo u rukama, onda imamo samo imunoglobulin. U svakom antiserumu, pored antitijela na dati antigen, postoji veliki broj imunoglobulina, čija aktivnost antitijela nije mogla biti otkrivena, ali to ne znači da ovi imunoglobulini nisu antitijela ni na jedan drugi antigen. Ostaje otvoreno pitanje postojanja molekula imunoglobulina koji u početku nemaju svojstva antitijela.

Antitela (AT, imunoglobulini, IG, Ig) su centralna figura humoralnog imuniteta. Glavnu ulogu u imunološkoj odbrani organizma imaju limfociti koji su podijeljeni u dvije glavne kategorije - T-limfociti i B-limfociti.

Antitijela ili imunoglobuline (Ig) sintetiziraju B limfociti, tačnije ćelije koje stvaraju antitijela (AFC). Sinteza antitijela počinje kao odgovor na ulazak antigena u unutrašnje okruženje tijela. Da bi sintetizovale antitela, B ćelije zahtevaju kontakt sa antigenom i rezultirajuće sazrevanje B ćelija u ćelije koje formiraju antitela. Značajan broj antitijela proizvode takozvane plazma ćelije formirane od B-limfocita - AOC, koje se otkrivaju u krvi i tkivima. Imunoglobulini se nalaze u velikim količinama u serumu, međućelijskoj tečnosti i drugim izlučevinama, dajući humoralni odgovor.

Klase imunoglobulina

Imunoglobulini (Ig) se razlikuju po strukturi i funkciji. Postoji 5 različitih klasa imunoglobulina koji se nalaze kod ljudi: IgG,IgA,IgM,IgE,IgD, od kojih su neke dalje podijeljene u podklase. Postoje podklase za imunoglobuline klasa G (Gl, G2, G3, G4), A (A1, A2) i M (M1, M2).

Klase i podklase zajedno se pozivaju izotipovi imunoglobulini.

Antitijela različitih klasa razlikuju se po veličini molekula, naboju proteinske molekule, sastavu aminokiselina i sadržaju ugljikohidratne komponente. Najviše proučavana klasa antitijela je IgG.

U ljudskom krvnom serumu normalno prevladavaju imunoglobulini IgG klase. Oni čine otprilike 70-80% ukupnih serumskih antitijela. Sadržaj IgA - 10-15%, IgM - 5-10%. Sadržaj imunoglobulina IgE i IgD klasa je vrlo mali - oko 0,1% za svaku od ovih klasa.

Ne treba misliti da antitela protiv određenog antigena pripadaju samo jednoj od pet klasa imunoglobulina. Naprotiv, antitela protiv istog antigena mogu biti predstavljena različitim klasama Ig.

Najvažniju dijagnostičku ulogu ima određivanje antitijela klase M i G, jer se nakon zaraze osobe prvo pojavljuju antitijela klase M, zatim klase G, a na kraju se pojavljuju imunoglobulini A i E.

Imunogenost i antigenost antigena

Kao odgovor na ulazak antigena u tijelo, počinje cijeli kompleks reakcija usmjerenih na oslobađanje unutrašnjeg okruženja tijela od proizvoda stranih genetskih informacija. Ovaj skup zaštitnih reakcija imunog sistema naziva se imuni odgovor.

Imunogenost naziva se sposobnost antigena da izazove imuni odgovor, odnosno da izazove specifičnu zaštitnu reakciju imunog sistema. Imunogenost se takođe može opisati kao sposobnost stvaranja imuniteta.

Imunogenost u velikoj meri zavisi od prirode antigena, njegovih svojstava (molekulska težina, pokretljivost molekula antigena, oblik, struktura, sposobnost promene), od puta i načina ulaska antigena u organizam, kao i od dodatnih uticaja i genotip primaoca.

Kao što je već spomenuto, jedan od oblika odgovora imunološkog sistema kao odgovor na uvođenje antigena u tijelo je biosinteza antitijela. Antitijela su u stanju da vežu antigen koji je izazvao njihovo formiranje i na taj način zaštiti tijelo od mogućih štetno djelovanje strani antigeni. U tom smislu uvodi se koncept antigenosti.

Antigenost- to je sposobnost antigena da specifično stupa u interakciju s imunološkim faktorima, odnosno da stupi u interakciju s proizvodima imunološkog odgovora uzrokovanog ovom određenom tvari (antitijela i receptori za prepoznavanje T- i B-antigena).

Neki pojmovi molekularne biologije

Lipidi(od starogrčkog λίπος - mast) - velika grupa prilično raznolikih prirodnih organskih spojeva, uključujući masti i tvari slične mastima. Lipidi se nalaze u svim živim ćelijama i jedna su od glavnih komponenti bioloških membrana. Nerastvorljivi su u vodi i vrlo topljivi u organskim rastvaračima. Fosfolipidi- složeni lipidi koji sadrže više masne kiseline i ostatak fosforne kiseline.

Konformacija molekule (od latinskog conformatio - oblik, struktura, raspored) - geometrijski oblici koje molekule organskih jedinjenja mogu poprimiti kada rotiraju atome ili grupe atoma (supstituenata) oko jednostavnih veza uz zadržavanje reda hemijske veze atoma (hemijska struktura) , dužina veza i vezni uglovi.

Organska jedinjenja (kiseline) posebne strukture. Njihovi molekuli istovremeno sadrže amino grupe (NH 2) i karboksilne grupe (COOH). Sve aminokiseline se sastoje od samo 5 hemijskih elemenata: C, H, O, N, S.

Peptidi(grč. πεπτος - hranljiv) - porodica supstanci čiji su molekuli izgrađeni od dva ili više aminokiselinskih ostataka povezanih u lanac peptidnim (amidnim) vezama. Zovu se peptidi čija je sekvenca duža od oko 10-20 aminokiselinskih ostataka polipeptidi.

U polipeptidnom lancu postoje N-terminus, formiran slobodnom α-amino grupom i C-end, koji imaju slobodnu α-karboksilnu grupu. Peptidi se pišu i čitaju od N-terminala do C-terminala - od N-terminalne aminokiseline do C-terminalne aminokiseline.

Aminokiselinski ostaci- To su monomeri aminokiselina koje čine peptide. Aminokiselinski ostatak koji ima slobodnu amino grupu naziva se N-terminal i piše se na lijevoj strani, a onaj koji ima slobodnu α-karboksilnu grupu naziva se C-terminal i piše se na desnoj strani.

Proteini obično se nazivaju polipeptidi koji sadrže otprilike 50 aminokiselinskih ostataka. Termin „proteini” se takođe koristi kao sinonim za termin „proteini” (od grčkog protos - prvi, najvažniji). Molekul bilo kojeg proteina ima jasno definiranu, prilično složenu, trodimenzionalnu strukturu.

Aminokiselinski ostaci u proteinima obično se označavaju pomoću koda od tri ili jedno slovo. Kod od tri slova je skraćenica od engleskih naziva aminokiselina i često se koristi u naučnoj literaturi. Jednoslovni kodovi, uglavnom, nemaju intuitivnu vezu sa nazivima aminokiselina i koriste se u bioinformatici za predstavljanje sekvenci aminokiselina u tekstu za laku kompjutersku analizu.

Peptidna kičma. U polipeptidnom lancu, sekvenca atoma -NH-CH-CO- se ponavlja mnogo puta.Ova sekvenca formira peptidnu kičmu. Polipeptidni lanac sastoji se od polipeptidne kičme (skeleta), koja ima pravilnu strukturu koja se ponavlja, i pojedinačne bočne grupe (R-grupe).

Peptidne veze kombinuju aminokiseline u peptide. Peptidne veze nastaju interakcijom α-karboksilne grupe jedne aminokiseline i α-amino grupe sledeće amino kiseline. Peptidne veze su veoma jake i ne pucaju spontano u normalnim uslovima koji postoje u ćelijama.

Grupe atoma -CO-NH- koje se mnogo puta ponavljaju u molekulima peptida nazivaju se peptidne grupe. Peptidna grupa ima krutu planarnu (ravnu) strukturu.

Konformacija proteina- lokacija polipeptidnog lanca u prostoru. Prostorna struktura karakteristična za proteinski molekul nastaje zbog intramolekularnih interakcija. Zbog interakcije funkcionalnih grupa aminokiselina, linearni polipeptidni lanci pojedinačnih proteina dobijaju određenu trodimenzionalnu strukturu, koja se naziva "konformacija proteina".

Proces formiranja funkcionalno aktivne proteinske konformacije naziva se preklapanje. Krutost peptidne veze smanjuje broj stupnjeva slobode polipeptidnog lanca, koji igra važnu ulogu u procesu savijanja.

Globularni i fibrilarni proteini. Proteini koji su do sada proučavani mogu se podijeliti u dvije velike klase prema njihovoj sposobnosti da poprime određeni geometrijski oblik u otopini: fibrilar(razvučeno u nit) i globularni(smotani u loptu). Polipeptidni lanci fibrilarnih proteina su izduženi, smješteni paralelno jedan s drugim i formiraju duge niti ili slojeve. U globularnim proteinima, polipeptidni lanci su čvrsto presavijeni u globule - kompaktne sferne strukture.

Treba napomenuti da je podjela proteina na fibrilarne i globularne konvencionalna, jer postoji veliki broj proteina srednje strukture.

Primarna struktura proteina(primarna struktura proteina) je linearni niz aminokiselina koje čine protein u polipeptidnom lancu. Aminokiseline su međusobno povezane peptidnim vezama. Aminokiselinska sekvenca je zapisana počevši od C-kraja molekula, prema N-kraju polipeptidnog lanca.

P.s.b - ovo najjednostavniji nivo strukturna organizacija proteinske molekule. Prvi P.s.b. ustanovio je F. Sanger za inzulin (Nobelova nagrada za 1958.).

(sekundarna struktura proteina) - savijanje polipeptidnog lanca proteina kao rezultat interakcije između blisko raspoređenih aminokiselina unutar istog peptidnog lanca - između aminokiselina smještenih nekoliko ostataka jedna od druge.

Sekundarna struktura proteina je prostorna struktura koja nastaje kao rezultat interakcije između funkcionalne grupe, uključen u peptidnu kičmu.

Sekundarna struktura proteina određena je sposobnošću grupa peptidnih veza da se podvrgnu interakcijama vodonika između -C=O i -NH- funkcionalnih grupa peptidne kičme. U ovom slučaju, peptid teži da usvoji konformaciju sa formiranjem maksimalnog broja vodoničnih veza. Međutim, mogućnost njihovog formiranja ograničena je prirodom peptidne veze. Dakle, peptidni lanac ne dobija proizvoljnu, već strogo definisanu konformaciju.

Sekundarna struktura se formira od segmenata polipeptidnog lanca koji učestvuju u formiranju pravilne mreže vodoničnih veza.

Drugim riječima, sekundarna struktura polipeptida se odnosi na konformaciju njegovog glavnog lanca (kičme) bez uzimanja u obzir konformacije bočnih grupa.

Polipeptidni lanac proteina, savijajući se pod uticajem vodoničnih veza u kompaktan oblik, može formirati niz pravilnih struktura. Poznato je nekoliko takvih struktura: α (alfa)-heliks, β (beta)-struktura (drugi naziv je β-naborani sloj ili β-naborani list), nasumični namotaj i okret. Rijetka vrsta sekundarne strukture proteina su π-helike. U početku su istraživači vjerovali u to ovaj tip spirale se ne javljaju u prirodi, ali su kasnije ove spirale otkrivene u proteinima.

α-heliks i β-struktura su energetski najpovoljnije konformacije, jer su obe stabilizovane vodoničnim vezama. Osim toga, i α-heliks i β-struktura su dodatno stabilizirane bliskim pakiranjem atoma okosnice, koji se uklapaju zajedno kao dijelovi slagalice.

Ovi fragmenti i njihova kombinacija u određenom proteinu, ako su prisutni, nazivaju se i sekundarnom strukturom ovog proteina.

U strukturi globularnih proteina fragmenti pravilne strukture svih tipova mogu se naći u bilo kojoj kombinaciji, ali ih možda neće biti. U fibrilarnim proteinima, svi ostaci pripadaju jednom tipu: na primjer, vuna sadrži α-helike, a svila sadrži β-strukture.

Dakle, najčešće je sekundarna struktura proteina savijanje polipeptidnog lanca proteina u α-helikalne regije i β-strukturne formacije (slojeve) koje uključuju vodonične veze. Ako se vodikove veze formiraju između područja savijanja jednog lanca, onda se nazivaju unutarlančane, a ako su između lanaca, nazivaju se međulančane. Vodikove veze se nalaze okomito na polipeptidni lanac.

α-heliks-nastaje intralančanim vodoničnim vezama između NH grupe jednog aminokiselinskog ostatka i CO grupe četvrtog ostatka iz njega. Prosječna dužinaα-helike u proteinima - 10 aminokiselinskih ostataka

U α-helixu se formiraju vodikove veze između atoma kisika karbonilne grupe i vodika amidnog dušika 4. aminokiseline iz nje. Sve C=O grupe i N-H glavni polipeptidni lanac. Bočni lanci aminokiselinskih ostataka nalaze se duž periferije heliksa i ne učestvuju u formiranju sekundarne strukture.

β-strukture formiraju se između linearnih regiona peptidne kičme jednog polipeptidnog lanca, čime se formiraju presavijene strukture (nekoliko cik-cak polipeptidnih lanaca).

β-struktura nastaje zbog stvaranja mnogih vodoničnih veza između atoma peptidnih grupa linearnih lanaca. U β-strukturama, vodonične veze se formiraju između aminokiselina ili različitih proteinskih lanaca koji su relativno udaljeni jedan od drugog u primarnoj strukturi, a ne blisko locirani, kao što je slučaj u α-helixu.

U nekim proteinima, β-strukture mogu nastati zbog formiranja vodoničnih veza između atoma peptidne kičme različitih polipeptidnih lanaca.

Polipeptidni lanci ili njihovi dijelovi mogu formirati paralelne ili antiparalelne β-strukture. Ako je nekoliko lanaca polipeptida povezano u suprotnim smjerovima, a N- i C-kraj se ne poklapaju, tada antiparalelnoβ-struktura, ako se poklapaju – paralelnoβ-struktura.

Drugi naziv za β-strukture je β-listovi(β presavijeni slojevi, β listovi). β-list se formira od dva ili više β-strukturnih regiona polipeptidnog lanca koji se naziva β-lanci. Obično se β-limovi nalaze u globularnim proteinima i ne sadrže više od 6 β-lanaca.

β-pramenovi(β-lanci) su regije proteinske molekule u kojima su veze peptidne kičme nekoliko uzastopnih polipeptida organizirane u planarnu konformaciju. U ilustracijama, β-lanci proteina su ponekad prikazani kao ravne "trake sa vrhovima strelice" kako bi se naglasio smjer polipeptidnog lanca.

Glavni dio β-lanaca nalazi se pored drugih lanaca i sa njima formira opsežan sistem vodoničnih veza između C=O i N-H grupa glavnog proteinskog lanca (peptidne kičme). β-lanci se mogu pakovati , stabiliziran poprečno s dvije ili tri vodikove veze između uzastopnih lanaca. Ova metoda polaganja naziva se β-list.

Neuredna zavrzlama- ovo je dio peptidnog lanca koji nema nikakvu pravilnu, periodičnu prostornu organizaciju. Takvi regioni u svakom proteinu imaju svoju fiksnu konformaciju, koja je određena sastavom aminokiselina ovog regiona, kao i sekundarnim i tercijarnim strukturama susednih regiona koji okružuju „haotični kalem“. U područjima nasumične zavojnice, peptidni lanac se može relativno lako savijati i mijenjati konformaciju, dok su α-heliksa i β-list sloj prilično krute strukture.

Drugi oblik sekundarne strukture označava se kao β-turn. Ovu strukturu čine 4 ili više aminokiselinskih ostataka sa vodikovom vezom između prve i zadnje, i to na način da peptidni lanac mijenja smjer za 180°. Struktura petlje takvog zavoja stabilizirana je vodikovom vezom između karbonilnog kisika aminokiselinskog ostatka na početku zavoja i NH grupe trećeg ostatka duž lanca na kraju zavoja.

Ako se antiparalelni β-lanci približavaju β-zavoju sa oba kraja, tada se formira sekundarna struktura tzv. β-ukosnica(β-ukosnica)

Tercijarna struktura proteina(tercijarna struktura proteina) - U rastvoru u fiziološkim uslovima, polipeptidni lanac se savija u kompaktnu formaciju koja ima određenu prostornu strukturu, koja se naziva tercijarna struktura proteina. Nastaje kao rezultat samosklapanja zbog interakcija između radikala (kovalentne i vodikove veze, ionske i hidrofobne interakcije). Po prvi put T.s.b. osnovan za protein mioglobin od strane J. Kendrew i M. Perutza 1959. (Nobelova nagrada za 1962.). T.s.b. gotovo potpuno određena primarnom strukturom proteina. Trenutno su metodama rendgenske difrakcijske analize i nuklearne magnetske spektroskopije (NMR spektroskopija) određene prostorne (tercijarne) strukture velikog broja proteina.

Kvartarna struktura proteina. Proteini koji se sastoje od jednog polipeptidnog lanca imaju samo tercijarnu strukturu. Međutim, neki proteini su izgrađeni od nekoliko polipeptidnih lanaca, od kojih svaki ima tercijarnu strukturu. Za takve proteine ​​uveden je koncept kvaternarne strukture, što je organizacija više polipeptidnih lanaca tercijarne strukture u jednu funkcionalnu proteinsku molekulu. Takav protein s kvaternarnom strukturom naziva se oligomer, a njegovi polipeptidni lanci tercijarne strukture nazivaju se protomeri ili podjedinice.

Konjugirati(konjugat, lat. conjugatio - veza) - vještački sintetizirana (hemijski ili rekombinacijom in vitro) hibridna molekula u kojoj su spojena (kombinovana) dva molekula različitih svojstava; široko se koristi u medicini i eksperimentalnoj biologiji.

Haptens

Haptens- to su “defektni antigeni” (izraz je predložio imunolog K. Landsteiner). Kada se unesu u organizam u normalnim uslovima, hapteni nisu u stanju da izazovu imuni odgovor u telu, jer imaju izuzetno nisku imunogenost.

Najčešće su hapteni jedinjenja male molekularne težine (molekulska težina manja od 10 kDa). Tijelo primatelja ih prepoznaje kao genetski strane (tj. imaju specifičnost), ali zbog niske molekularne težine ne uzrokuju imunološke reakcije. Međutim, oni nisu izgubili svoje antigensko svojstvo, što im omogućava specifičnu interakciju sa gotovim imunološkim faktorima (antitijela, limfociti).

Pod određenim uslovima, moguće je prisiliti imuni sistem makroorganizma da specifično odgovori na hapten kao punopravni antigen. Da biste to učinili, potrebno je umjetno povećati molekul haptena - povezati ga snažnom vezom s dovoljno velikom proteinskom molekulom ili drugim polimerom nosačem. Ovako sintetizirani konjugat će imati sva svojstva punopravnog antigena i izazvati imunološki odgovor kada se unese u tijelo.

Epitopi (antigenske determinante)

Tijelo može formirati antitijela na gotovo bilo koji dio molekula antigena, ali to se obično ne dešava tokom normalnog imunološkog odgovora. Kompleksni antigeni (proteini, polisaharidi) imaju posebna područja na koja se zapravo formira specifičan imunološki odgovor. Takva područja se nazivaju epitopi(epitop), od grčkog. epi - na, iznad, preko i topos - mjesto, površina. Sinonim - antigena determinanta.

Ovi dijelovi se sastoje od nekoliko aminokiselina ili ugljikohidrata, svaki dio je grupa aminokiselinskih ostataka proteinskog antigena ili dio polisaharidnog lanca. Epitopi su u stanju da stupe u interakciju i sa specifičnim limfocitnim receptorima, čime izazivaju imuni odgovor, i sa centrima specifičnih antitela za vezivanje antigena.

Epitopi su raznoliki po svojoj strukturi. Antigenska determinanta (epitop) može biti područje površine proteina formirano od radikala aminokiselina, haptena ili prostetske grupe proteina (neproteinska komponenta povezana s proteinom), posebno često polisaharidnih grupa glikoproteina.

Antigene determinante ili epitopi su specifične regije trodimenzionalne strukture antigena. Postoje različite vrste epitopa - linearno I konformacijski.

Linearni epitopi se formiraju linearnom sekvencom aminokiselinskih ostataka.

Kao rezultat proučavanja strukture proteina, ustanovljeno je da proteinski molekuli imaju složenu prostornu strukturu. Kada se umotaju (u kuglu), makromolekule proteina mogu spojiti ostatke koji su udaljeni jedan od drugog u linearnom nizu, formirajući konformacionu antigensku determinantu.

Osim toga, postoje terminalni epitopi (nalaze se na krajevima molekula antigena) i centralni. Određuju se i “duboke” ili skrivene antigenske determinante, koje se pojavljuju kada se antigen uništi.

Molekuli većine antigena su prilično veliki. Jedna proteinska makromolekula (antigen), koja se sastoji od nekoliko stotina aminokiselina, može sadržavati mnogo različitih epitopa. Neki proteini mogu imati istu antigensku determinantu u više kopija (ponovljene antigenske determinante).

Protiv jednog epitopa stvara se širok raspon različitih antitijela. Svaki od epitopa je sposoban stimulirati proizvodnju različitih specifičnih antitijela. Za svaki od epitopa mogu se proizvesti specifična antitijela.

Postoji fenomen imunodominacija, što se manifestuje u činjenici da se epitopi razlikuju po svojoj sposobnosti da izazovu imuni odgovor.

Nisu svi epitopi u proteinu obilježeni jednakom antigenošću. Po pravilu, neki epitopi antigena imaju posebnu antigenost, koja se očituje u preferencijalnom stvaranju antitijela protiv ovih epitopa. Uspostavljena je hijerarhija u spektru epitopa proteinske molekule – neki od epitopa su dominantni i većina antitijela se formira specifično za njih. Ovi epitopi su imenovani imunodominantni epitopi. Gotovo uvijek se nalaze na istaknutim dijelovima molekule antigena.

Struktura antitela (imunoglobulina)

IgG imunoglobulini na osnovu eksperimentalnih podataka. Svaki aminokiselinski ostatak proteinske molekule prikazan je kao mala kuglica. Vizuelizacija je napravljena pomoću RasMol programa.

Tokom 20. veka biohemičari su nastojali da otkriju koje varijante imunoglobulina postoje i kakva je struktura molekula ovih proteina. Struktura antitijela utvrđena je raznim eksperimentima. U osnovi, oni su se sastojali u tome da su antitijela tretirana proteolitičkim enzimima (papain, pepsin), te su podvrgnuta alkilaciji i redukciji merkaptoetanolom.

Zatim su proučavana svojstva nastalih fragmenata: određena je njihova molekularna masa (hromatografijom), kvarterna struktura (rendgenskom difrakcijom), sposobnost vezivanja za antigen itd. Antitela na ove fragmente su takođe korišćena da bi se utvrdilo da li se antitela na jedan tip fragmenta mogu vezati za fragmente drugog tipa. Na osnovu dobijenih podataka napravljen je model molekula antitijela.

Više od 100 godina istraživanja strukture i funkcije imunoglobulina samo je naglasilo kompleksnu prirodu ovih proteina. Trenutno, struktura molekula humanog imunoglobulina nije u potpunosti opisana. Većina istraživača nije koncentrisala svoje napore na opisivanje strukture ovih proteina, već na razjašnjavanje mehanizama pomoću kojih antitela interaguju sa antigenima. Osim toga, molekule antitijela , proučavanje antitijela koja su pohranjena netaknuta postaje izazovna. Mnogo češće je moguće odrediti tačnu strukturu pojedinačnih fragmenata antitijela.

Uprkos navodnoj raznolikosti imunoglobulina, njihovi molekuli su klasifikovani prema strukturama uključenim u ove molekule. Ova klasifikacija se zasniva na činjenici da su imunoglobulini svih klasa izgrađeni prema opštem planu i imaju određenu univerzalnu strukturu.

Molekuli imunoglobulina su složene prostorne formacije. Sva antitijela, bez izuzetka, pripadaju istoj vrsti proteinskih molekula koji imaju globularnu sekundarnu strukturu, što odgovara njihovom nazivu - "imunoglobulini" (sekundarna struktura proteina je način na koji je njegov polipeptidni lanac položen u svemiru). Oni mogu biti monomeri ili polimeri izgrađeni od nekoliko podjedinica.

Teški i laki polipeptidni lanci u strukturi imunoglobulina

Peptidni lanci imunoglobulina. Shematska ilustracija. Varijabilne regije su označene tačkastim linijama.

Strukturna jedinica imunoglobulina je monomer, molekul koji se sastoji od polipeptidnih lanaca povezanih jedan s drugim disulfidnim vezama (S-S mostovi).

Ako se Ig molekul tretira sa 2-merkaptoetanolom (reagensom koji uništava disulfidne veze), on će se raspasti u parove polipeptidnih lanaca. Dobijeni polipeptidni lanci su klasifikovani prema molekularnoj težini: laki i teški. Laki lanci imaju malu molekularnu težinu (oko 23 kDa) i označeni su slovom L, sa engleskog. Svetlo - svetlo. Teški lanci H (od engleskog Heavy - teški) imaju visoku molekularnu težinu (koja varira između 50 - 73 kDa).

Takozvani monomerni imunoglobulin sadrži dva L lanca i dva H lanca. Laki i teški lanci se drže zajedno disulfidnim mostovima. Disulfidne veze povezuju lake lance sa teškim lancima i teške lance jedan s drugim.

Glavna strukturna podjedinica svih klasa imunoglobulina je par laki lanac-teški lanac (L-H). Struktura imunoglobulina različitih klasa i podklasa razlikuje se po broju i lokaciji disulfidnih veza između teških lanaca, kao i po broju (L-H) podjedinica u molekulu. H-lanci se drže zajedno različitim brojem disulfidnih veza. Razlikuju se i vrste teških i lakih lanaca koji čine različite klase imunoglobulina.

Na slici je prikazan dijagram organizacije IgG kao tipičnog imunoglobulina. Kao i svi imunoglobulini, IgG sadrži dva identična teška (H) lanca i dva identična laka (L) lanca, koji su povezani u četverolančani molekul preko međulančanih disulfidnih veza (-S-S-). Jedina disulfidna veza koja povezuje H i L lance nalazi se blizu C-terminusa lakog lanca. Između dva teška lanca postoji i disulfidna veza.

Domeni unutar molekula antitijela

Laki i teški polipeptidni lanci u Ig molekulu imaju specifičnu strukturu. Svaki lanac je konvencionalno podijeljen na specifične dijelove zvane domene.

I laki i teški lanci ne formiraju ravnu nit. Unutar svakog lanca, u pravilnim i približno jednakim intervalima od 100-110 aminokiselina, postoje disulfidni mostovi koji formiraju petlje u strukturi svakog lanca. Prisustvo disulfidnih mostova znači da svaka petlja u peptidnim lancima mora formirati kompaktno presavijeni globularni domen. Dakle, svaki polipeptidni lanac u imunoglobulinu formira nekoliko globularnih domena u obliku petlji, uključujući otprilike 110 aminokiselinskih ostataka.

Možemo reći da su molekuli imunoglobulina sastavljeni iz zasebnih domena, od kojih se svaki nalazi oko disulfidnog mosta i homologan je ostalima.

U svakom od lakih lanaca molekula antitijela postoje dvije unutarlančane disulfidne veze, shodno tome, svaki laki lanac ima dva domena. Broj takvih veza u teškim lancima varira; teški lanci sadrže četiri ili pet domena. Domeni su razdvojeni lako organizovanim segmentima. Prisustvo ovakvih konfiguracija potvrđeno je direktnim zapažanjima i genetskom analizom.

Primarna, sekundarna, tercijarna i kvartarna struktura imunoglobulina

Struktura molekula imunoglobulina (kao i drugih proteina) određena je primarnom, sekundarnom, tercijarnom i kvarternom strukturom. Primarna struktura je niz aminokiselina koje čine lake i teške lance imunoglobulina. Analiza difrakcije rendgenskih zraka pokazala je da se laki i teški lanci imunoglobulina sastoje od kompaktnih globularnih domena (tzv. imunoglobulinskih domena). Domeni su raspoređeni u karakterističnu tercijarnu strukturu zvanu imunoglobulinski nabor.

Imunoglobulinski domeni su regije u tercijarnoj strukturi Ig molekula koje karakteriše određena autonomija strukturne organizacije. Domene formiraju različiti segmenti istog polipeptidnog lanca, presavijeni u “loptice” (globule). Globula sadrži otprilike 110 aminokiselinskih ostataka.

Domeni imaju sličnu opštu strukturu i specifične funkcije jedna drugoj. Unutar domena, peptidni fragmenti koji čine domen formiraju kompaktno presavijenu antiparalelnu strukturu β-listova stabilizovanu vodoničnim vezama (proteinska sekundarna struktura). U strukturi domena praktično nema regiona sa α-helikalnom konformacijom.

Sekundarna struktura svakog domena formirana je presavijanjem produženog polipeptidnog lanca naprijed-nazad na sebe u dva antiparalelna β-lista (β-listova) koji sadrže nekoliko β-listova. Svaki β-list ima ravan oblik - polipeptidni lanci u β-listovima su gotovo potpuno izduženi.

Dva β-lista koji čine imunoglobulinski domen raspoređeni su u strukturu koja se zove β-sendvič („kao dva komada hljeba jedan na drugom”). Struktura svake imunoglobulinske domene je stabilizirana intradomenskom disulfidnom vezom - β-limovi su kovalentno povezani disulfidnom vezom između cisteinskih ostataka svakog β-lista. Svaki β-list se sastoji od antiparalelnih β-lanaca povezanih petljama različitih dužina.

Domeni su, zauzvrat, međusobno povezani nastavkom polipeptidnog lanca, koji se proteže izvan β-listova. Otvoreni dijelovi polipeptidnog lanca prisutni između globula posebno su osjetljivi na proteolitičke enzime.

Globularni domeni para lakog i teškog lanca međusobno djeluju kako bi formirali kvartarnu strukturu. Zbog toga se formiraju funkcionalni fragmenti koji omogućavaju molekulu antitijela da se specifično veže za antigen i istovremeno obavlja niz bioloških efektorskih funkcija.

Varijabilni i konstantni domeni

Domeni u peptidnim lancima razlikuju se po konzistenciji sastava aminokiselina. Postoje varijabilni i konstantni domeni (regije). Varijabilni domeni su označeni slovom V, sa engleskog. varijabilne - “promjenjive” i nazivaju se V-domene. Stalni (konstantni) domeni su označeni slovom C, od engleske konstante - "permanent" i nazivaju se C-domeni.

Imunoglobulini proizvedeni od strane različitih klonova plazma ćelija imaju varijabilne domene različitih sekvenci aminokiselina. Konstantni domeni su slični ili vrlo slični za svaki izotip imunoglobulina.

Svaki domen je označen slovom koje označava da li pripada lakom ili teškom lancu i brojem koji označava njegovu poziciju.

Prva domena na lakim i teškim lancima svih antitijela je izuzetno varijabilna u sekvenci aminokiselina; označava se kao V L i V H respektivno.

Drugi i sljedeći domeni na oba teška lanca su mnogo konstantniji u sekvenci aminokiselina. Oni su označeni kao CH ili CH 1, CH 2 i CH 3. Imunoglobulini IgM i IgE imaju dodatni CH 4 domen na teškom lancu, koji se nalazi iza C H 3 domena.

Polovina lakog lanca uključujući karboksilni kraj naziva se konstantna regija C L , a N-terminalna polovina lakog lanca naziva se varijabilna regija V L .

Ugljikohidratni lanci su također povezani sa CH2 domenom. Imunoglobulini različitih klasa uvelike se razlikuju po broju i lokaciji grupa ugljikohidrata. Ugljikohidratne komponente imunoglobulina imaju sličnu strukturu. Sastoje se od konstantnog jezgra i promjenljivog vanjskog dijela. Komponente ugljikohidrata utiču na biološka svojstva antitijela.

Fab i Fc fragmenti molekula imunoglobulina

Varijabilni domeni lakih i teških lanaca (V H i V L), zajedno sa njima najbližim konstantnim domenima (C H 1 i C L 1), formiraju Fab fragmente antitela (fragment, vezivanje antigena). Imunoglobulinski region koji se vezuje za specifični antigen formiran je od N-terminalnih varijabilnih regiona lakog i teškog lanca, tj. V H - i V L -domeni.

Preostali dio, predstavljen C-terminalnim konstantnim domenima teških lanaca, označen je kao Fc fragment (fragment, koji se može kristalizirati). Fc fragment uključuje preostale CH domene koje se drže zajedno disulfidnim vezama. Na spoju Fab i Fc fragmenata postoji zglobna regija koja dozvoljava fragmentima koji se vezuju za antigen da se razviju radi bližeg kontakta sa antigenom.

Područje šarke

Na granici Fab i Fc fragmenata nalazi se tzv. "oblast šarki" koja ima fleksibilnu strukturu. Osigurava mobilnost između dva Fab fragmenta molekula antitijela u obliku slova Y. Mobilnost fragmenata molekula antitijela jedan u odnosu na drugi je važna strukturna karakteristika imunoglobulina. Ova vrsta interpeptidne veze čini strukturu molekula dinamičnom - omogućava vam da lako promijenite konformaciju ovisno o okolnim uvjetima i stanju.

Zglobna regija je dio teškog lanca. Zglobna regija sadrži disulfidne veze koje povezuju teške lance jedan s drugim. Za svaku klasu imunoglobulina, zglobna regija ima svoju strukturu.

U imunoglobulinima (sa mogućim izuzetkom IgM i IgE), zglobni region se sastoji od kratkog segmenta aminokiselina i nalazi se između CH 1 i CH 2 regiona teških lanaca. Ovaj segment se pretežno sastoji od ostataka cisteina i prolina. Cisteini su uključeni u formiranje disulfidnih mostova između lanaca, a ostaci prolina sprečavaju sklapanje u globularnu strukturu.

Tipična struktura molekula imunoglobulina koristeći IgG kao primjer

Šematski prikaz na planarnom crtežu ne odražava tačno strukturu Ig; u stvarnosti, varijabilni domeni lakih i teških lanaca nisu raspoređeni paralelno, već su usko isprepleteni jedan s drugim na unakrsni način.

Pogodno je razmotriti tipičnu strukturu imunoglobulina na primjeru molekula IgG antitijela. U IgG molekulu ima ukupno 12 domena - 4 na teškim lancima i 2 na lakim lancima.

Svaki laki lanac uključuje dva domena - jednu varijabilnu (V L, ​​varijabilni domen lakog lanca) i jednu konstantnu (CL, konstantna domena lakog lanca). Svaki teški lanac sadrži jedan varijabilni domen (V H, varijabilni domen teškog lanca) i tri konstantna domena (CH 1–3, konstantni domeni teškog lanca). Otprilike četvrtina teškog lanca, uključujući N-terminus, klasifikovan je kao varijabilni region H lanca (VH), a ostatak je konstantni region (CH1, CH2, CH3).

Svaki par varijabilnih domena V H i V L koji se nalaze u susednim teškim i lakim lancima formira varijabilni fragment (Fv, varijabilni fragment).

Vrste teških i lakih lanaca u molekulima antitijela

Na osnovu razlika u primarnoj strukturi stalnih regija, kola se dijele na tipove. Tipovi su određeni primarnom sekvencom aminokiselina lanaca i stepenom glikozilacije. Laki lanci se dijele na dva tipa: κ i λ (kappa i lambda), teški lanci se dijele na pet tipova: α, γ, μ, ε i δ (alfa, gama, mu, epsilon i delta). Među nizom teških lanaca alfa, mu i gama tipova razlikuju se podtipovi.

Klasifikacija imunoglobulina

Imunoglobulini su klasifikovani prema njihovom tipu H-lanca (teški lanac). Konstantni regioni teških lanaca imunoglobulina različitih klasa nisu isti. Ljudski imunoglobulini su podijeljeni u 5 klasa i nekoliko podklasa, prema tipovima teških lanaca koji su uključeni u njihov sastav. Ove klase se zovu IgA, IgG, IgM, IgD i IgE.

Sami H-lanci su označeni grčkim slovom, koje odgovara velikom latinskom slovu imena jednog od imunoglobulina. IgA ima teške lance α (alfa), IgM – μ (mu), IgG – γ (gama), IgE – ε (epsilon), IgD – δ (delta).

Imunoglobulini IgG, IgM i IgA imaju nekoliko podklasa. Podjela na podklase (podtipove) se također dešava u zavisnosti od karakteristika H-lanaca. Kod ljudi postoje 4 podklase IgG: IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4, koje sadrže teške lance γ1, γ2, γ3 i γ4, respektivno. Ovi H lanci se razlikuju po malim detaljima Fc fragmenta. Za μ-lanac poznata su 2 podtipa - μ1- i μ2-. IgA ima 2 podklase: IgA1 i IgA2 sa α1 i α2 podtipovima α lanaca.

U svakom molekulu imunolobulina, svi teški lanci su istog tipa, u skladu sa klasom ili podklasom.

Svih 5 klasa imunoglobulina sastoje se od teških i lakih lanaca.

Laki lanci (L-lanci) imunoglobulina različitih klasa su isti. Svi imunoglobulini mogu imati oba κ (kapa) ili oba λ (lambda) laka lanca. Imunoglobulini svih klasa se dijele na K- i L-tipove, u zavisnosti od prisustva lakih lanaca κ- ili λ-tipa u njihovim molekulima, respektivno. Kod ljudi je odnos K- i L-tipova 3:2.

Klase i podklase zajedno se nazivaju izotipovi imunoglobulina. Izotip antitela (klasa, podklasa imunoglobulina - IgM1, IgM2, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgD, IgE) je određen C-domenima teških lanaca.

Svaka klasa uključuje veliki izbor pojedinačnih imunoglobulina, koji se razlikuju po primarnoj strukturi varijabilnih regija; ukupan broj imunoglobulina svih klasa je ≈ 10^7.

Struktura molekula antitijela različitih klasa

Sheme strukture imunoglobulina. (A) - monomerni IgG, IgE, IgD, IgA; (B) - polimerni sekretorni Ig A (slgA) i IgM (B); (1) - sekretorna komponenta; (2) - povezivanje J-lanca.

1. Klase antitela IgG, IgD i IgE

Molekuli antitijela klase IgG, IgD i IgE su monomerni; oni su u obliku slova Y.

IgG klase imunoglobulina čine 75% ukupnog broja humanih imunoglobulina. Nalaze se i u krvi i izvan krvnih sudova. Važno svojstvo IgG je njegova sposobnost da prođe kroz placentu. Dakle, majčina antitijela ulaze u tijelo novorođenčeta i štite ga od infekcije u prvim mjesecima života (prirodni pasivni imunitet).

IgD se uglavnom nalazi na membrani B limfocita. Imaju strukturu sličnu IgG, 2 aktivna centra. Teški lanac (δ lanac) se sastoji od varijabilne i 3 konstantna domena. Zglobna regija δ lanca je najduža, a lokacija ugljikohidrata u ovom lancu je također neobična.

IgE - koncentracija ove klase imunoglobulina u krvnom serumu je izuzetno niska. IgE molekuli su uglavnom fiksirani na površini mastocita i bazofila. IgE je po strukturi sličan IgG i ima 2 aktivna centra. Teški lanac (ε lanac) ima jedan varijabilni i 4 konstantna domena. Pretpostavlja se da je IgE bitan u razvoju anthelmintičkog imuniteta. IgE igra važnu ulogu u patogenezi nekih alergijskih bolesti (bronhijalna astma, peludna groznica) i anafilaktičkog šoka.

2. Klase antitela IgM i IgA

Imunoglobulini IgM i IgA formiraju polimerne strukture. Za polimerizaciju, IgM i IgA uključuju dodatni polipeptidni lanac sa molekulskom težinom od 15 kDa, nazvan J-lanac (zglob). Ovaj J-lanac vezuje terminalne cisteine ​​na C-krajevima μ- i α-teških lanaca IgM i IgA, respektivno.

Na površini zrelih B limfocita, IgM molekuli se nalaze u obliku monomera. Međutim, u serumu postoje u obliku pentamera: IgM molekul se sastoji od pet strukturnih molekula raspoređenih radijalno. IgM pentamer je formiran od pet monomera "praćke", sličnih IgG, povezanih disulfidnim vezama i J lancem. Njihovi Fc fragmenti su usmjereni prema centru (gdje su povezani J-lancem), a njihovi Fab fragmenti usmjereni su prema van.

U IgM, teški (H) lanci se sastoje od 5 domena, budući da sadrže 4 konstantna domena. IgM teški lanci nemaju zglobnu regiju; njegovu ulogu igra C H 2 domen, koji ima određenu konformacionu labilnost.

IgM se uglavnom sintetiše tokom primarnog imunološkog odgovora i pretežno se nalazi u intravaskularnom krevetu. Količina Ig M u krvnom serumu zdravih ljudi iznosi oko 10% ukupne količine Ig.

IgA antitela se grade od različitog broja monomera. Imunoglobulini klase A dijele se na dva tipa: serumski i sekretorni. Većina (80%) IgA prisutnih u krvnom serumu ima monomernu strukturu. Manje od 20% IgA u serumu predstavljaju dimerni molekuli.

Sekretorni IgA se ne nalazi u krvi, već kao dio egzokreta na sluznicama i označen je kao sIgA. U izlučevinama sluzokože IgA je predstavljen u obliku dimera. Sekretorni IgA formira dimer od dvije „praćke“ (Ig monomera). C-termini teških lanaca u sIgA molekulu su međusobno povezani J-lancem i proteinskim molekulom koji se naziva "sekretorna komponenta".

Sekretornu komponentu proizvode epitelne stanice sluzokože. Veže se za IgA molekul dok prolazi kroz epitelne ćelije. Sekretorna komponenta štiti sIgA od cijepanja i inaktivacije proteolitičkim enzimima, koji se u velikim količinama nalaze u sekretima sluzokože.

Glavna funkcija sIgA je zaštita sluznice od infekcije. Uloga sIgA u obezbeđivanju lokalnog imuniteta je veoma značajna, jer Ukupna površina sluznice u odraslom ljudskom tijelu je nekoliko stotina kvadratnih metara i daleko premašuje površinu kože.

Visoke koncentracije sIgA nalaze se u majčinom mlijeku, posebno u prvim danima laktacije. Oni štite gastrointestinalni trakt novorođenčeta od infekcije.

Djeca se rađaju bez IgA i dobijaju ga kroz majčino mlijeko. Pouzdano je dokazano da djeca koja su dojena značajno manje obolijevaju od crijevnih infekcija i bolesti respiratornog trakta u odnosu na djecu koja se vještače.

Antitijela IgA klase čine 15-20% ukupnog sadržaja imunoglobulina. IgA ne prodire kroz placentnu barijeru. Ig A sintetiziraju plazma ćelije smještene uglavnom u submukoznom tkivu, na površini epitela sluzokože respiratornog trakta, urogenitalnog i intestinalnog trakta, te u gotovo svim žlijezdama za izlučivanje. Dio Ig A ulazi u opću cirkulaciju, ali se većina izlučuje lokalno na sluznicama u obliku sIgA i služi kao lokalna zaštitna imunološka barijera za sluzokože. IgA i sIgA u serumu su različiti imunoglobulini; sIgA se ne nalazi u krvnom serumu.

Osobe sa imunodeficijencijom IgA imaju sklonost ka autoimunim bolestima, infekcijama respiratornog trakta, maksilarnih i frontalnih sinusa i crijevnim poremećajima.

Varenje molekula imunoglobulina enzimima

Proteolitički enzimi (kao što su papain ili pepsin) razgrađuju molekule imunoglobulina na fragmente. Istovremeno, pod uticajem različitih proteaza, mogu se dobiti različiti proizvodi. Tako dobijeni fragmenti imunoglobulina mogu se koristiti u istraživačke ili medicinske svrhe.

Globularna struktura imunoglobulina i sposobnost enzima da razgrađuju ove molekule na velike komponente na strogo određenim mjestima, a ne da ih razgrađuju u oligopeptide i aminokiseline, ukazuje na izuzetno kompaktnu strukturu.

1. Cepanje molekula imunoglobulina papainom. Fab i Fc fragmenti antitijela.

Krajem 50-ih - ranih 60-ih, engleski naučnik R.R. Porter je analizirao strukturne karakteristike IgG antitela odvajanjem molekula papainom (pročišćeni enzim iz soka papaje). Papain uništava imunoglobulin u zglobnoj regiji, iznad međulančanih disulfidnih veza. Ovaj enzim dijeli molekul imunoglobulina na tri fragmenta približno iste veličine.

Dva od njih su imenovana Fab fragmenti(od engleskog fragment antigen-binding - antigen-binding fragment). Fab fragmenti su potpuno identični i, kako su studije pokazale, dizajnirani su da se vežu za antigen. Područje teškog lanca Fab fragmenta naziva se Fd; sastoji se od V H i C H 1 domena.

Treći fragment može kristalizirati iz otopine i ne može vezati antigen. Ovaj fragment je imenovan Fc fragment(od engleskog fragment crystallizable - fragment kristalizacije). Odgovoran je za biološke funkcije molekula antitijela nakon vezivanja antigena i Fab dijela intaktnog molekula antitijela.

Fc fragment ima istu strukturu za antitijela svake klase i potklase i različitu za antitijela koja pripadaju različitim podklasama i klasama.

Fc fragment molekula stupa u interakciju sa ćelijama imunog sistema: neutrofilima, makrofagima i drugim mononuklearnim fagocitima koji na svojoj površini nose receptore za Fc fragment. Ako se antitijela vežu za patogene mikroorganizme, mogu stupiti u interakciju s fagocitima sa svojim Fc fragmentom. Zahvaljujući tome, ćelije patogena će biti uništene od strane ovih fagocita. Zapravo, antitijela u ovom slučaju djeluju kao posredni molekuli.

Kasnije je postalo poznato da su Fc fragmenti imunoglobulina unutar jednog izotipa u datom organizmu striktno identični, bez obzira na antigensku specifičnost antitijela. Zbog ove nepromjenjivosti počele su se zvati konstantne regije (konstanta fragmenta - Fc, skraćenica je ista).

2. Cepanje molekula imunoglobulina pepsinom.

Drugi proteolitički enzim, pepsin, cijepa molekulu na drugom mjestu, bliže C-terminusu H lanaca nego papain. Cepanje se dešava „nizvodno“ od disulfidnih veza koje drže H lance zajedno. Kao rezultat toga, pod djelovanjem pepsina, formiraju se dvovalentni antigen-vezujući F(ab")2 fragment i skraćeni pFc" fragment. PFc" fragment je C-terminalni dio Fc regije.

Pepsin seče pFc" fragment iz velikog fragmenta sa konstantom sedimentacije 5S. Ovaj veliki fragment se zove F(ab")2 jer je, kao i roditeljsko antitelo, bivalentan u odnosu na vezivanje antigena. Sastoji se od povezanih Fab fragmenata povezanih disulfidnim mostom na području šarke. Ovi Fab fragmenti su monovalentni i homologni papain Fab fragmentima I i II, ali njihov Fd fragment je otprilike deset aminokiselinskih ostataka veći.

Centri antitela za vezivanje antigena (paratopi)

Fab fragment imunoglobulina uključuje V domene oba lanca, C L i C H 1 domene. Regija koja se vezuje za antigen Fab fragmenta dobila je nekoliko imena: aktivni ili antigen-vezujući centar antitela, antideterminanta ili paratop.

Varijabilni segmenti lakih i teških lanaca učestvuju u formiranju aktivnih centara. Aktivno mjesto je rascjep koji se nalazi između varijabilnih domena lakih i teških lanaca. Oba ova domena učestvuju u formiranju aktivnog centra.

Molekul imunoglobulina. L - laki lanci; H - teški lanci; V - varijabilni region; C - konstantna oblast; N-terminalni regioni L i H lanaca (V region) formiraju dva centra za vezivanje antigena unutar Fab fragmenata.

Svaki Fab fragment IgG imunoglobulina ima jedno mjesto vezanja antigena. Aktivni centri antitijela drugih klasa, sposobni za interakciju s antigenom, također se nalaze u Fab fragmentima. Antitijela IgG, IgA i IgE imaju po 2 aktivna centra, IgM - 10 centara.

Imunoglobulini mogu vezati antigene različite hemijske prirode: peptide, ugljikohidrate, šećere, polifosfate, molekule steroida.

Bitno i jedinstveno svojstvo antitijela je njihova sposobnost da se vežu za netaknute, prirodne molekule antigena, direktno u obliku u kojem je antigen prodro u unutrašnju sredinu tijela. Ovo ne zahtijeva nikakvu premetaboličku obradu antigena

Struktura domena u molekulima imunoglobulina

Sekundarna struktura polipeptidnih lanaca molekula imunoglobulina ima strukturu domena. Pojedinačni dijelovi teških i lakih lanaca presavijeni su u globule (domene), koje su povezane linearnim fragmentima. Svaki domen je približno cilindričnog oblika i predstavlja strukturu β-lista formiranu od antiparalelnih β-limova. Unutar osnovne strukture postoji jasna razlika između C i V domena, što se može vidjeti na primjeru lakog lanca.

Na slici je šematski prikazano savijanje jednog polipeptidnog lanca Bence-Jones proteina koji sadrži V L i C L domene. Shema se temelji na podacima rendgenske difrakcije - metodi koja vam omogućava da uspostavite trodimenzionalnu strukturu proteina. Dijagram pokazuje sličnosti i razlike između V i C domena.

Gornji dio slike šematski prikazuje prostorni raspored konstantnih (C) i varijabilnih (V) domena lakog lanca proteinskog molekula. Svaki domen je cilindrična struktura u obliku bačve u kojoj su dijelovi polipeptidnog lanca (β-lanci) koji se kreću u suprotnim smjerovima (tj. antiparelle) spakovani da formiraju dva β-lista koji se drže zajedno disulfidnom komunikacijom

Svaki od domena, V- i C-, sastoji se od dva β-lista (slojevi sa strukturom β-listova). Svaki β-list sadrži nekoliko antiparalelnih (teče u suprotnim smjerovima) β-lanaca: u C-domenu β-limovi sadrže četiri i tri β-lanca, u V-domenu oba sloja se sastoje od četiri β-lanca. Na slici su β-lanci prikazani žutom i zelenom bojom za C domen i crvenom i plavom za V domen.

U donjem dijelu slike, domeni imunoglobulina su detaljnije razmotreni. Ova polovina slike prikazuje dijagram relativnog rasporeda β-lanaca za V- i C-domene lakog lanca. Moguće je jasnije ispitati način na koji se njihovi polipeptidni lanci slažu pri formiranju β-listova, čime se stvara konačna struktura. Da bi se prikazalo savijanje, β-lanci su označeni slovima latinične abecede, prema redosledu njihovog pojavljivanja u nizu aminokiselina koje čine domen. Redoslijed pojavljivanja u svakom β-listu je karakteristika domena imunoglobulina.

β-limovi (listovi) u domenima povezani su disulfidnim mostom (vezom) otprilike u sredini svakog domena. Ove veze su prikazane na slici: između slojeva postoji disulfidna veza koja povezuje nabore B i F i stabilizuje strukturu domena.

Glavna razlika između V i C domena je u tome što je V domen veći i sadrži dodatne β-lančeve, označene kao Cʹ i Cʹʹ. Na slici, β-nidovi Cʹ i Cʹʹ, prisutni u V-domenima, ali odsutni u C-domenima, istaknuti su plavim pravougaonikom. Može se vidjeti da svaki polipeptidni lanac formira fleksibilne petlje između uzastopnih β-lanaca prilikom promjene smjera. U domeni V, fleksibilne petlje formirane između nekih β-lanaca čine dio strukture aktivnog mjesta molekula imunoglobulina.

Hipervarijabilne regije unutar V domena

Nivo varijabilnosti unutar varijabilnih domena nije ravnomjerno raspoređen. Nije cijeli varijabilni domen varijabilan u svom sastavu aminokiselina, već samo mali dio - hipervarijabilna oblasti. Oni čine oko 20% sekvence aminokiselina V-domena.

U strukturi čitavog molekula imunoglobulina, V H i V L domeni su kombinovani. Njihove hipervarijabilne regije su susjedne jedna uz drugu i stvaraju jednu hipervarijabilnu regiju u obliku džepa. Ovo je regija koja se specifično vezuje za antigen. Hipervarijabilni regioni određuju komplementarnost antitela sa antigenom.

Pošto hipervarijabilni regioni igraju ključnu ulogu u prepoznavanju i vezivanju antigena, oni se takođe nazivaju regionima koji određuju komplementarnost (CDR). Postoje tri CDR-a u varijabilnim domenima teških i lakih lanaca (V L CDR1–3, V H CDR1–3).

Između hipervarijabilnih regiona nalaze se relativno konstantni delovi sekvence aminokiselina, koji se nazivaju regioni okvira (FR). Oni čine oko 80% sekvence aminokiselina V-domena. Uloga takvih regiona je da održavaju relativno uniformnu trodimenzionalnu strukturu V-domena, što je neophodno da bi se obezbedila afinitetna interakcija hipervarijabilnih regiona sa antigenom.

U sekvenci varijabilnog domena regije 3, hipervarijantne regije se izmjenjuju sa 4 relativno nepromjenjiva "okvirna" regiona FR1-FR4,

H1–3 – CDR petlje uključene u lance.

Od posebnog interesa je prostorni raspored hipervarijabilnih regiona u tri odvojene petlje varijabilnog domena. Ove hipervarijabilne regije, iako se nalaze na velikoj udaljenosti jedna od druge u primarnoj strukturi lakog lanca, ali, kada se formira trodimenzionalna struktura, nalaze se u neposrednoj blizini jedna drugoj.

U prostornoj strukturi V-domena, hipervarijabilne sekvence se nalaze u zoni savijanja polipeptidnog lanca, usmerene ka odgovarajućim delovima V-domena drugog lanca (tj. CDR-ovi lakog i teškog lanca su usmereni jedno prema drugom). Kao rezultat interakcije varijabilnog domena H- i L-lanaca, formira se mjesto vezanja antigena (aktivni centar) imunoglobulina. Prema elektronskoj mikroskopiji, to je šupljina duga 6 nm i široka 1,2-1,5 nm.

Prostorna struktura ove šupljine, određena strukturom hipervarijabilnih regiona, određuje sposobnost antitela da prepoznaju i vežu specifične molekule na osnovu prostorne korespondencije (specifičnost antitela). Prostorno razdvojeni regioni H- i L-lanaca takođe doprinose formiranju aktivnog centra. Hipervarijabilni regioni V domena nisu u potpunosti uključeni u aktivni centar - površina regiona koji se vezuje za antigen pokriva samo oko 30% CDR-a.

Hipervarijabilni regioni teškog i lakog lanca određuju individualne strukturne karakteristike centra za vezivanje antigena za svaki Ig klon i raznolikost njihovih specifičnosti.

Ultra-visoka varijabilnost CDR-a i aktivnih centara osigurava da su molekuli imunoglobulina koje sintetiziraju B limfociti istog klona jedinstveni, ne samo po strukturi, već i po svojoj sposobnosti da vežu različite antigene. Uprkos činjenici da je struktura imunoglobulina prilično poznata i da su CDR-ovi odgovorni za njihova svojstva, još uvijek nije jasno koji je domen najodgovorniji za vezivanje antigena.

Interakcija antitijela i antigena (interakcija epitopa i paratopa)

Reakcija antigen-antitelo zasniva se na interakciji između epitopa antigena i aktivnog centra antitela, na osnovu njihove prostorne korespondencije (komplementarnosti). Kao rezultat vezivanja patogena za aktivni centar antitijela, patogen je neutraliziran i njegov prodor u ćelije tijela je otežan.

U procesu interakcije sa antigenom ne učestvuje cela molekula imunoglobulina, već samo njen ograničeni deo - centar za vezivanje antigena, ili paratop, koji je lokalizovan u Fab fragmentu Ig molekula. U ovom slučaju, antitijelo ne stupa u interakciju s cijelim molekulom antigena odjednom, već samo sa njegovom antigenskom determinantom (epitopom).

Aktivni centar antitijela je struktura koja je prostorno komplementarna (specifična) za determinantnu grupu antigena. Aktivni centar antitijela ima funkcionalnu autonomiju, tj. sposoban da veže antigenske determinante u izolovanom obliku.

Na strani antigena, epitopi koji stupaju u interakciju sa specifičnim antitijelima odgovorni su za interakciju s aktivnim centrima molekula za prepoznavanje antigena. Epitop direktno ulazi u jonske, vodikove, van der Waalsove i hidrofobne veze sa aktivnim centrom antitijela.

Specifična interakcija antitijela s molekulom antigena povezana je s relativno malom površinom njegove površine, koja po veličini odgovara mjestu vezivanja antigena receptora i antitijela.

Vezivanje antigena za antitelo se dešava kroz slabe interakcije unutar centra za vezivanje antigena. Sve ove interakcije se javljaju samo kada su molekuli u bliskom kontaktu. Tako mala udaljenost između molekula može se postići samo zahvaljujući komplementarnosti epitopa i aktivnog centra antitijela.

Ponekad se isto mjesto vezanja antigena molekula antitijela može vezati za nekoliko različitih antigenskih determinanti (obično su ove antigene determinante vrlo slične). Takva antitijela se nazivaju unakrsno reaktivan, sposoban za polispecifično vezivanje.

Na primjer, ako antigen A ima zajedničke epitope sa antigenom B, tada će neka od antitela specifičnih za A takođe reagovati sa B. Ovaj fenomen se naziva unakrsna reaktivnost.

Potpuna i nepotpuna antitijela. Valence

Valence- ovo je broj aktivnih centara antitijela koji se mogu kombinirati s antigenskim determinantama. Antitijela imaju različit broj aktivnih centara u molekuli, što određuje njihovu valenciju. U tom pogledu postoji razlika pun I nepotpuno antitela.

Puna antitijela imaju najmanje dva aktivna centra. Puna (dvovalentna i petovalentna) antitijela, u interakciji in vitro s antigenom na koji nastaju, daju vizualno vidljive reakcije (aglutinacija, liza, precipitacija, fiksacija komplementa, itd.).

Nepotpuna ili monovalentna antitijela razlikuju se od običnih (potpunih) antitijela po tome što imaju samo jedan aktivni centar; drugi centar ne radi u takvim antitijelima. To ne znači da je drugi aktivni centar molekula odsutan. Drugi aktivni centar takvih imunoglobulina zaštićen je različitim strukturama ili ima nisku avidnost. Takva antitijela mogu stupiti u interakciju s antigenom, blokirati ga, vezati epitope antigena i spriječiti kontakt punih antitijela s njim, ali ne izazivaju agregaciju antigena. Stoga se i zovu blokiranje.

Reakcija između parcijalnih antitijela i antigena nije praćena makroskopskim pojavama. Nepotpuna antitijela, kada su u specifičnoj interakciji sa homolognim antigenom, ne daju vidljivu manifestaciju serološke reakcije, jer ne mogu agregirati čestice u velike konglomerate, već ih samo blokirati.

Nepotpuna antitijela se formiraju nezavisno od kompletnih i obavljaju iste funkcije. Takođe su predstavljeni različitim klasama imunoglobulina.

Idiotipi i idiotopi

Antitijela su složeni proteinski molekuli koji sami po sebi mogu imati antigena svojstva i uzrokovati stvaranje antitijela. U njihovom sastavu razlikuje se nekoliko tipova antigenskih determinanti (epitipova): izotipovi, alotipovi i idiotipi.

Različita antitijela se međusobno razlikuju po svojim varijabilnim regijama. Antigene determinante varijabilnih regiona (V regiona) antitela se nazivaju idiotopi. Idiotopi se mogu konstruisati od karakterističnih delova V-regija samo H-lanaca ili L-lanaca. U većini slučajeva, oba lanca su uključena u formiranje idiotopa odjednom.

Idiotopi mogu biti povezani sa mjestom vezanja antigena (idiotopi povezani s mjestom) ili nepovezani s njim (nepovezani idiotopi).

Idiotopi povezani sa mestom zavise od strukture antigen-vezujućeg regiona antitela (koji pripada Fab fragmentu). Ako je ovo mjesto zauzeto antigenom, tada antiidiotopsko antitijelo više ne može reagirati s antitijelom koje ima ovaj idiotop. Čini se da drugi idiotopi nemaju tako blisku povezanost s mjestima vezanja antigena.

Skup idiotopa na molekulu bilo kojeg antitijela označava se kao idiote. Dakle, idiotip se sastoji od skupa idiotopa - antigenskih determinanti V regije antitijela.

Grupne konstitucijske varijante antigenske strukture teških lanaca nazivaju se alotipovi. Alotipovi su determinante kodirane alelima datog imunoglobulinskog gena.

Izotipovi su determinante koje razlikuju klase i podklase teških lanaca i varijante κ (kapa) i λ (lambda) lakih lanaca.

Afinitet i avidnost antitela

Jačina vezivanja antitela može se okarakterisati imunohemijskim karakteristikama: avidnošću i afinitetom.

Ispod afinitet razumiju silu vezivanja između aktivnog mjesta molekula antitijela i odgovarajuće determinante antigena. Jačina hemijske veze jednog antigenskog epitopa sa jednim od aktivnih centara Ig molekula naziva se afinitet vezivanja antitela za antigen. Afinitet se obično kvantificira konstantom disocijacije (u mol-1) jednog antigenskog epitopa s jednim aktivnim mjestom.

Afinitet je tačnost podudarnosti prostorne konfiguracije aktivnog centra (paratopa) antitijela i antigenske determinante (epitopa). Što se više veza formira između epitopa i paratopa, to će biti veća stabilnost i životni vijek rezultirajućeg imunološkog kompleksa. Imunološki kompleks formiran od antitijela niskog afiniteta je izuzetno nestabilan i ima kratak životni vijek.

Afinitet antitela za antigen se naziva avidity antitela. Avidnost veze između antitijela i antigena je ukupna snaga i intenzitet veze između cijelog molekula antitijela i svih antigenskih epitopa koje je uspjelo vezati.

Avidnost antitijela karakterizira brzina formiranja kompleksa antigen-antitijelo, potpunost interakcije i snaga nastalog kompleksa. Avidnost, kao i specifičnost antitela, zasniva se na primarnoj strukturi determinante (aktivnog centra) antitela i povezanom stepenu adaptacije površinske konfiguracije polipeptida antitela na determinantu (epitop) antigena.

Avidnost je određena kako afinitetom interakcije između epitopa i paratopa, tako i valentnošću antitijela i antigena. Avidnost zavisi od broja centara za vezivanje antigena u molekulu antitela i njihove sposobnosti da se vežu za brojne epitope datog antigena.

Tipičan IgG molekul, kada su uključena oba mjesta vezanja antigena, vezat će se za multivalentni antigen najmanje 10.000 puta jače nego kada je uključeno samo jedno mjesto.

Antitijela klase M imaju najveću avidnost, jer imaju 10 centara za vezivanje antigena. Ako su afiniteti pojedinačnih mesta za vezivanje antigena IgG i IgM isti, molekul IgM (koji ima 10 takvih mesta) pokazaće neuporedivo veću avidnost za multivalentni antigen od IgG molekula (koji ima 2 mesta). Zbog svoje visoke ukupne avidnosti, IgM antitela, glavna klasa imunoglobulina proizvedenih u ranoj fazi imunog odgovora, mogu efikasno funkcionisati čak i sa niskim afinitetom pojedinačnih mesta vezivanja.

Razlika u avidnosti je važna jer antitijela proizvedena u ranoj fazi imunološkog odgovora obično imaju mnogo manji afinitet za antigen nego ona koja se proizvode kasnije. Povećanje prosječnog afiniteta antitijela proizvedenih tokom vremena nakon imunizacije naziva se sazrijevanje afiniteta.

Specifičnost interakcije između antigena i antitijela

U imunologiji, specifičnost se odnosi na selektivnost interakcije induktora i produkata imunoloških procesa, posebno antigena i antitijela.

Specifičnost interakcije za antitela je sposobnost imunoglobulina da reaguje samo sa specifičnim antigenom, odnosno sposobnost da se veže za strogo definisanu antigensku determinantu. Fenomen specifičnosti se zasniva na prisustvu aktivnih centara u molekulu antitela koji dolaze u kontakt sa odgovarajućim determinantama antigena. Selektivnost interakcije je posljedica komplementarnosti između strukture aktivnog centra antitijela (paratopa) i strukture antigene determinante (epitopa).

Specifičnost antigena je sposobnost antigena da izazove imuni odgovor na strogo definirani epitop. Specifičnost antigena je u velikoj mjeri određena svojstvima njegovih sastavnih epitopa.

Jedna od najvažnijih funkcija imunoglobulina je vezivanje antigena i stvaranje imunoloških kompleksa. Proteini antitijela specifično reagiraju s antigenima, formirajući imune komplekse - komplekse antitijela povezanih s antigenima. Ova veza je nestabilna: nastali imunološki kompleks (IC) može se lako raspasti na svoje sastavne komponente.

Svakom molekulu antigena može se pridružiti nekoliko molekula antitijela, jer postoji nekoliko antigenskih determinanti na antigenu i na svaku od njih mogu se formirati antitijela. Kao rezultat, nastaju složeni molekularni kompleksi.

Formiranje imunoloških kompleksa sastavni je dio normalnog imunološkog odgovora. Formiranje i biološka aktivnost imunoloških kompleksa zavise, prije svega, od prirode antitijela i antigena uključenih u njihov sastav, kao i od njihovog omjera. Karakteristike imunoloških kompleksa zavise od svojstava antitijela (valencija, afinitet, brzina sinteze, sposobnost fiksiranja komplementa) i antigena (rastvorljivost, veličina, naboj, valencija, prostorna distribucija i gustina epitopa).

Interakcija antigena i antitijela. Reakcija antigen-antitijelo

Reakcija antigen-antitijelo je stvaranje kompleksa između antigena i antitijela usmjerenih na njega. Proučavanje ovakvih reakcija je od velikog značaja za razumevanje mehanizma specifične interakcije bioloških makromolekula i za rasvetljavanje mehanizma seroloških reakcija.

Efikasnost interakcije antitela sa antigenom u značajnoj meri zavisi od uslova pod kojima se reakcija odvija, pre svega od pH medijuma, osmotske gustine, sastava soli i temperature medijuma. Optimalni za reakciju antigen-antitijelo su fiziološki uvjeti unutrašnje sredine makroorganizma: bliska neutralnoj reakciji okoline, prisustvo fosfatnih, karbonatnih, hloridnih i acetatnih jona, osmolarnost fiziološke otopine (koncentracija otopine 0,15 M), kao i temperaturu od 36-37 °C.

Interakcija molekula antigena s antitijelom ili njegovim aktivnim Fab fragmentom je praćena promjenama u prostornoj strukturi molekula antigena.

Budući da ne nastaju hemijske veze kada se antigen kombinuje sa antitijelom, snaga ove veze određena je prostornom preciznošću (specifičnošću) međudjelujućih dijelova dvaju molekula - aktivnog centra imunoglobulina i antigenske determinante. Mjera snage veze određena je afinitetom antitijela (veličina veze jednog centra za vezivanje antigena sa pojedinačnim epitopom antigena) i njegovom avidnošću (ukupnom snagom interakcije antitijela sa antigenom u slučaj interakcije polivalentnog antitela sa polivalentnim antigenom).

Sve reakcije antigen-antitijelo su reverzibilne; kompleks antigen-antitijelo može se disocirati i osloboditi antitijela. U ovom slučaju, reverzna reakcija antigen-antitijelo teče mnogo sporije od direktne.

Postoje dva glavna načina na koja se već formirani kompleks antigen-antitijelo može djelomično ili potpuno odvojiti. Prvi je pomicanje antitijela viškom antigena, a drugi je utjecaj vanjskih faktora na imunološki kompleks, što dovodi do prekida veza (smanjenje afiniteta) između antigena i antitijela. Djelomična disocijacija kompleksa antigen-antitijelo općenito se može postići povećanjem temperature.

Kada se koriste serološke metode, najuniverzalniji način odvajanja imunoloških kompleksa formiranih od širokog spektra antitijela je njihovo liječenje razrijeđenim kiselinama i alkalijama, kao i koncentriranim otopinama amida (urea, gvanidin hidroklorid).

Heterogenost antitela

Antitela nastala tokom imunološkog odgovora organizma su heterogena i međusobno se razlikuju, tj. Oni heterogena. Antitijela su heterogena po svojim fizičko-hemijskim, biološkim svojstvima i, prije svega, po svojoj specifičnosti. Glavna osnova za heterogenost (raznolikost specifičnosti) antitijela je raznolikost njihovih aktivnih centara. Ovo posljednje je povezano sa varijabilnosti sastava aminokiselina u V regijama molekula antitijela.

Antitijela su također heterogena u pripadnosti različitim klasama i podklasama.

Heterogenost antitela je takođe posledica činjenice da imunoglobulini sadrže 3 vrste antigenskih determinanti: izotipske, koje karakterišu pripadnost imunoglobulina određenoj klasi; alotipski, koji odgovara alelnim varijantama imunoglobulina; idiotipski, koji odražava individualne karakteristike imunoglobulina. Sistem idiotip-antiidiotip čini osnovu takozvane Jerneove teorije mreže.

Izotipovi, alotipovi, idiotipi antitijela

Imunoglobulini sadrže tri vrste antigenskih determinanti: izotipske (jednake za svakog predstavnika date vrste), alotipske (determinante koje se razlikuju među predstavnicima date vrste) i idiotipske (determinante koje određuju individualnost datog imunoglobulina i različite su za antitijela iste klase ili podklase).

U svakoj biološkoj vrsti, teški i laki lanci imunoglobulina imaju određene antigenske karakteristike, prema kojima se teški lanci dijele u 5 klasa (γ, μ, α, δ, ε), a laki lanci u 2 tipa (κ i λ). Ove antigene determinante nazivaju se izotipske (izotipovi); za svaki lanac one su iste kod svakog predstavnika date biološke vrste.

Istovremeno, postoje intraspecifične razlike u imenovanim lancima imunoglobulina - alotipovima, koje su određene genetskim karakteristikama organizma koji proizvodi: njihove karakteristike su genetski određene. Na primjer, više od 20 alotipova je opisano za teške lance.

Čak i kada antitijela na određeni antigen pripadaju istoj klasi, podklasi ili čak alotipu, karakteriziraju ih specifične razlike jedna od druge. Ove razlike se nazivaju idiotipi. Oni karakterišu „individualnost“ datog imunoglobulina u zavisnosti od specifičnosti induktorskog antigena. Ovo zavisi od strukturnih karakteristika V-domena H- i L-lanaca i mnogih različitih varijanti njihovih aminokiselinskih sekvenci. Sve ove antigene razlike određuju se upotrebom specifičnih seruma.

Klasifikacije antitijela prema reakcijama u kojima mogu sudjelovati

U početku su antitijela konvencionalno klasificirana prema svojim funkcionalnim svojstvima na neutralizirajuća, lizirajuća i koagulacijska. Neutralizirajuća sredstva uključivala su antitoksine, antienzime i lizine koji neutraliziraju viruse. Sredstva za koagulaciju uključuju aglutinine i precipitine; na lizirajuća - hemolitička i antitijela koja fiksiraju komplement. Uzimajući u obzir funkcionalnu sposobnost antitijela, serološke reakcije su davali nazivima: aglutinacija, hemoliza, liza, precipitacija itd.

Studije antitela. Prikaz faga.

Do nedavno je proučavanje antitijela bilo teško tehnički razlozi. Imunoglobulini u tijelu su složena mješavina proteina. Imunoglobulinska frakcija krvnog seruma je mješavina velikog broja različitih antitijela. Štaviše, relativni sadržaj svake od njih je po pravilu vrlo mali. Do nedavno je bilo teško dobiti čista antitijela iz frakcije imunoglobulina. Teškoća izolacije pojedinačnih imunoglobulina dugo je bila prepreka kako za njihovo biohemijsko proučavanje tako i za uspostavljanje njihove primarne strukture.

IN poslednjih godina Pojavila se nova oblast imunologije - inženjering antitijela, koja se bavi proizvodnjom neprirodnih imunoglobulina sa željenim svojstvima. Za to se obično koriste dva glavna pravca: biosinteza antitijela pune dužine i proizvodnja minimalnih fragmenata molekula antitijela, koji su neophodni za efikasno i specifično vezivanje za antigen.

Savremene tehnologije za proizvodnju antitela in vitro kopiraju selekcione strategije imunog sistema. Jedna od ovih tehnologija je prikaz faga, koji omogućava dobijanje fragmenata ljudskih antitijela različitih specifičnosti. Geni iz ovih fragmenata mogu se koristiti za konstruiranje antitijela pune dužine.

Osim toga, vrlo često terapeutski lijekovi stvoreni na bazi antitijela ne zahtijevaju uključivanje svojih efektorskih funkcija preko Fc domene, na primjer, u inaktivaciji citokina, blokiranju receptora ili neutraliziranju virusa. Stoga je jedan od trendova u dizajnu rekombinantnih antitijela smanjenje njihove veličine na minimalni fragment koji zadržava i aktivnost vezivanja i specifičnost.

Takvi fragmenti u nekim slučajevima mogu biti poželjniji zbog njihove sposobnosti da bolje prodiru u tkivo i brže se eliminišu iz tijela od molekula antitijela pune dužine. Istovremeno, željeni fragment se može proizvesti u E. coli ili kvascu, što značajno smanjuje njegovu cijenu u usporedbi s antitijelima dobivenim korištenjem staničnih kultura sisara. Osim toga, ova metoda razvoja omogućava izbjegavanje biološke opasnosti povezane s upotrebom antitijela izoliranih iz krvi donora.

Imunoglobulini mijeloma

Bence Jones protein. Primjer molekule takvog imunoglobulina, koji je dimer kapa lakih lanaca

Termin imunoglobulini ne odnosi se samo na normalne klase antitela, već i na veliki broj abnormalni proteini, koji se obično nazivaju proteini mijeloma. Ovi proteini se sintetišu u velikim količinama kod multiplog mijeloma, maligne bolesti u kojoj degenerisane specifične ćelije sistema za stvaranje antitela proizvode velike količine određenih proteina, na primer Bence-Jones proteine, mijeloma globuline, fragmente imunoglobulina različitih klasa.

Bence Jones proteini su ili pojedinačni κ ili λ lanci ili dimeri dva identična lanca povezana jednom disulfidnom vezom; izlučuju se urinom.

Mijeloma globulini se nalaze u visokim koncentracijama u plazmi pacijenata sa multiplim mijelomom; njihovi H i L lanci imaju jedinstven niz. Nekada se pretpostavljalo da su mijeloma globulini patološki imunoglobulini karakteristični za tumor u kojem se formiraju, ali sada se vjeruje da je svaki od njih jedan od pojedinačnih imunoglobulina, nasumično "odabranih" od mnogih hiljada normalnih antitijela formiranih. u ljudskom tijelu.

Određena je kompletna aminokiselinska sekvenca nekoliko pojedinačnih imunoglobulina, uključujući mijeloma globuline, Bence Jones proteine, te lake i teške lance istog mijeloma imunoglobulina. Za razliku od antitela zdrava osoba svi proteinski molekuli svake imenovane grupe imaju istu sekvencu aminokiselina i jedno su od mnogih hiljada mogućih antitijela kod pojedinca.

Hibridomi i monoklonska antitijela

Dobijanje antitijela za ljudske potrebe počinje imunizacijom životinja. Nakon nekoliko injekcija antigena (u prisustvu stimulansa imunog odgovora), specifična antitijela se akumuliraju u krvnom serumu životinja. Takvi serumi se nazivaju imuni serumi. Iz njih se izoluju antitijela posebnim metodama.

Međutim, imunološki sistem životinje proizvodi posebna antitijela na veliki broj antigena. Ova sposobnost se zasniva na prisutnosti raznovrsnosti klonova limfocita, od kojih svaki proizvodi antitijela istog tipa sa uskom specifičnošću. Ukupan broj klonova kod miševa, na primjer, dostiže 10^7 –10^10 stepeni.

Stoga imuni serumi sadrže mnogo molekula antitijela s različitim specifičnostima, odnosno imaju afinitet za mnoge antigene determinante. Antitijela dobivena iz imunoloških seruma usmjerena su i protiv antigena koji je imuniziran i protiv drugih antigena koje je životinja donor naišla.

Za savremenu imunohemijsku analizu i kliničku upotrebu, specifičnost i standardizacija upotrijebljenih antitijela su vrlo važne. Potrebno je dobiti apsolutno identična antitijela, što se ne može učiniti imunološkim serumima.

J. Köhler i S. Milstein su 1975. riješili ovaj problem predlažući metodu za proizvodnju homogenih antitijela. Razvili su takozvanu "hibridomsku tehnologiju" - tehniku ​​za proizvodnju ćelijskih hibrida (hibridoma). Ovom metodom dobijaju se hibridne ćelije koje se mogu beskonačno razmnožavati i sintetisati antitela uske specifičnosti - monoklonska antitela.

Da bi se dobila monoklonska antitijela, plazmocitne tumorske stanice (plazmocitom ili multipli mijelom) spajaju se sa stanicama slezene imunizirane životinje, najčešće miša. Köhler i Milsteinova tehnologija uključuje nekoliko faza.

Miševima se ubrizgava specifičan antigen, koji uzrokuje proizvodnju antitijela protiv tog antigena. Mišje slezene se uklanjaju i homogenizuju da se dobije ćelijska suspenzija. Ova suspenzija sadrži B ćelije koje proizvode antitijela protiv primijenjenog antigena.

Ćelije slezene se zatim miješaju sa ćelijama mijeloma. To su tumorske ćelije koje su sposobne kontinuirano rasti u kulturi; također im nedostaje rezervni put za sintezu nukleotida. Neke stanice slezene koje proizvode antitijela i stanice mijeloma se spajaju u hibridne stanice. Ove hibridne ćelije su sada sposobne kontinuirano rasti u kulturi i proizvoditi antitijela.

Mješavina ćelija se stavlja u selektivni medij koji omogućava rast samo hibridnih ćelija. Nefuzionisane ćelije mijeloma i B-limfociti umiru.

Hibridne ćelije se razmnožavaju, formirajući hibridomski klon. Hibridomi se testiraju na proizvodnju željenih antitijela. Odabrani hibridomi se zatim uzgajaju kako bi se proizvele velike količine monoklonskih antitijela koja su bez stranih antitijela i toliko su homogena da se mogu tretirati kao čisti hemijski reagensi.

Treba napomenuti da se antitijela proizvedena u jednoj kulturi hibridoma vezuju samo za jednu antigenu determinantu (epitop). S tim u vezi, moguće je dobiti onoliko monoklonskih antitijela na antigen sa više epitopa koliko ima antigenskih determinanti. Također je moguće odabrati klonove koji proizvode antitijela samo jedne željene specifičnosti.

Razvoj tehnologije za proizvodnju hibridoma bio je od revolucionarnog značaja u imunologiji, molekularnoj biologiji i medicini. To je omogućilo stvaranje potpuno novih naučnih pravaca. Hibridomi su otvorili nove puteve za proučavanje i liječenje malignih tumora i mnoge druge bolesti.

Trenutno su hibridomi postali glavni izvor monoklonskih antitela koji se koriste u osnovnim istraživanjima iu biotehnologiji za kreiranje sistema za testiranje. Monoklonska antitijela se široko koriste u dijagnostici zaraznih bolesti domaćih životinja i ljudi.

Zahvaljujući monoklonskim antitijelima, enzimski imunoeseji, imunofluorescentne reakcije, metode protočne citometrije, imunohromatografija i radioimunotestovi postali su rutinski.

Razvijene su mnoge tehnologije za poboljšanje sinteze antitijela. To su tehnologije rekombinacije DNK, metode kloniranja ćelija i druge transgene tehnologije. U 90-im godinama, korištenjem metoda genetskog inženjeringa, bilo je moguće minimizirati postotak mišjih aminokiselinskih sekvenci u umjetno sintetiziranim antitijelima. Zahvaljujući tome, osim mišjih, dobijena su himerna, humanizirana i potpuno ljudska antitijela.

Egzogeni, endogeni;

Potpuni i inferiorni (hapteni, poluhapteni);

Ovisno o timusu i neovisno o timusu;

Superantigeni;

Heterogene;

Autoantigeni;

Tumori;

Bakterijski (specifični za grupu, specifični za vrstu, specifični za tip, O-, K-, H-antigeni i drugi);

virusni;

Gljivične;

Protective;

izoantigeni;

Antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti.

Egzogeni antigeni – ulaze u organizam iz okoline, podvrgavaju se endocitozi i cijepanju u ćelijama koje predstavljaju Ag (makrofagi, dendritske ćelije timusa, folikularne procesne ćelije limfnih čvorova i slezene, M-ćelije limfnih folikula probavnog trakta, Langerhansove ćelije kože). Zatim se determinanta Ag (epitop), u kompleksu sa molekulom MHC klase II, ubacuje u plazma membranu ćelije koja predstavlja Ag i predstavlja CD 4 + T limfocitima (T pomoćne ćelije);

Endogeni antigeni - proizvodi sopstvenih ćelija organizma. Najčešće su to abnormalni proteini tumorskih ćelija i virusni proteini koje sintetiziraju virusom zaražene ćelije domaćini. Njihove antigenske determinante (epitopi) su predstavljene u kompleksu sa molekulom MHC klase I za CD 8 + T-limfocite (T-ćelije ubice).

Full Ag – imaju sposobnost izazivanja stvaranja antitijela i interakcije s njima;

Defective Ag (hapteni) – niskomolekularne supstance koje nemaju sposobnost da induciraju stvaranje antitijela i, ali stupaju u interakciju sa gotovim specifičnim antitijelima. Hapteni dobijaju svojstva punopravnih antigena kada se vežu na visokomolekularne supstance, kao što su proteini (schleppers). Hapteni uključuju lijekove, kao što su antibiotici, koji su sposobni pokrenuti imunološki odgovor kada se vežu za proteine ​​u tijelu (albumin), kao i za proteine ​​na površini stanica (crvena krvna zrnca, bijela krvna zrnca). Kao rezultat, formiraju se antitijela koja mogu stupiti u interakciju sa haptenom. Kada se hapten ponovo unese u tijelo, javlja se sekundarni imunološki odgovor, često u obliku alergijske reakcije, kao što je anafilaksija;

Polu-hapteni – neorganske supstance – jod, brom, hrom, nikl, nitro grupa, azot itd. – vezujući se za proteine, na primjer, kožu, mogu izazvati alergijski kontaktni dermatitis (HCT), koji se razvija ponovnim dodirom kože s hromiranim, niklovanim predmetima, nanošenjem joda na kožu itd.

Antigeni zavisni od timusa – to su antigeni koji zahtijevaju učešće T-limfocita da bi izazvali imuni odgovor; to su većina antigena;

Nezavisno od timusa – antigeni koji su sposobni stimulirati sintezu antitijela bez pomoći T stanica, na primjer, LPS zidova bakterijskih stanica, sintetički polimeri visoke molekularne težine.

Superantigeni (bakterijski enterotoksini (stafilokok, kolera), neki virusi (rotavirusi) itd. posebna grupa antigeni koji u značajno nižim dozama od ostalih antigena izazivaju poliklonalnu aktivaciju i proliferaciju velikog broja T limfocita (više od 20%, dok konvencionalni antigeni stimulišu 0,01% T limfocita). Ovo proizvodi mnogo IL-2 i drugih citokina koji uzrokuju upalu i oštećenje tkiva.

Heterogena Ag – to su unakrsno reagujući Ag, uobičajeni antigeni u različitim vrstama mikroba, životinja i ljudi. Ovaj fenomen se naziva antigenska mimikrija. Na primjer, hemolitički streptokoki grupe A sadrže unakrsno reagirajuće antigene (posebno M-protein), uobičajene za antigene endokarda i glomerula ljudskih bubrega. Takvi bakterijski antigeni uzrokuju stvaranje antitijela koja unakrsno reagiraju s ljudskim stanicama, što dovodi do razvoja reumatizma i poststreptokoknog glomerulonefritisa. Uzročnik sifilisa Postoje fosfolipidni antigeni slični fosfolipidima srca ljudi i životinja, pa se kardiolipinski antigen goveđeg srca koristi za otkrivanje antitijela na Treponema pallidum u serodijagnostici sifilisa (Wassermannova reakcija). Forsmanov antigen – otkrivena u eritrocitima ovaca, mačaka, pasa, bubrezima zamoraca, salmonela.

Autoantigeni – to su endogeni antigeni koji uzrokuju proizvodnju autoantitijela. Oni su:

- prirodni primarni (normalno tkivo očnog sočiva, nervno tkivo itd.), što je povezano sa narušavanjem autotolerancije,

Stečeni sekundarni - produkti oštećenja tkiva mikrobima, virusima, opekotinama, zračenjem, hladnoćom, koji nastaju iz vlastitih tkiva kao rezultat promjena tkiva uslijed opekotina, promrzlina i izlaganja radioaktivnom zračenju.

Tumor (onkoantigeni, T-antigeni ( tumor - tumor ) - kao rezultat maligne transformacije normalnih stanica u tumorske, one počinju da eksprimiraju (manifestiraju) specifične abnormalne antigene kojih nema u normalnim stanicama. Detekcija tumorskih antigena imunološkim metodama omogućit će rano dijagnosticiranje raka.

Bakterijski antigeni:

specifično za grupu - zajednički antigeni u različitim vrstama istog roda ili porodice,

specifično za vrstu - antigeni karakteristični za predstavnike jedne vrste,

specifično za tip - odrediti serološke varijante (serovari, serotipovi) unutar jedne vrste,

H-antigeni (flagelati) – protein flagelin, koji je dio bakterijskih flagela, je termolabilan;

O-antigeni (somatski) – je LPS Gr-bakterija, termostabilan. Epitopi somatskog antigena su predstavljeni heksozama (galaktorza, ramnoza itd.) i amino šećerima (N-acetilglukozamin, N-acetilgalaktozamin). U Gr+ bakterijama somatski antigen predstavljaju gliceril teihoična i ribitolteihoična kiselina.

K-antigeni (antigeni kapsule) – nalaze se u kapsuli i povezani su sa površinskim slojem lipopolisaharida ćelijskog zida. Sadrže kisele polisaharide, koji uključuju galakturonsku, glukuronsku i iduronsku kiselinu. Antigeni kapsule se koriste za pripremu vakcina protiv meningokoka, pneumokoka i klebsiele. Međutim, primjena velikih doza polisaharidnih antigena može uzrokovati toleranciju. U E. coli, K-antigen je podijeljen na frakcije A (termički stabilan), B, L (toplotno labilan). Tip K-antigena je površinski Vi-antigen (kod salmonele), koji određuje virulentnost mikroba i postojanost patogena u bakterijskim nosiocima.

Antigeni bakterija su i njihovi toksini, ribozomi i enzimi.

Virusno – a) superkapsid (protein i glikoprotein, na primjer hemaglutinin i neuraminidaza virusa influence), b) kapsid (protein), c) jezgro (nukleoprotein).

Gljivične – gljivice slične kvascu Candida albicans sadrže polisaharide stanične stijenke – manan, citoplazmatske i nuklearne proteine. Među njima je identifikovano 80 antigena. Ovi antigeni izazivaju trenutne (antitijela Ig m, Ig G, Ig A, Ig E klase) i odgođene (T-ćelije) reakcije i senzibilizaciju bez kliničkih manifestacija. Gljivični antigeni imaju imunostimulirajuće i imunosupresivno djelovanje.

Zaštitni – to su antigene determinante (epitopi) mikroorganizama koji izazivaju najsnažniji imuni odgovor, koji daje imunitet na odgovarajući patogen prilikom ponovljene infekcije. Prvi put su otkriveni u eksudatu zahvaćenog tkiva tokom antraksa. Za stvaranje sintetičkih vakcina koriste se najimunogeniji, zaštitni peptidi virusa.

Izoantigeni – antigeni po kojima se jedinke iste vrste razlikuju jedni od drugih (na primjer, antigeni eritrocita - ABO sistem krvnih grupa, Rh faktor, leukocitni antigeni - glavni kompleks histokompatibilnosti).

Antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti – glikoproteini ćelijskih membrana, koji igraju važnu ulogu u imunološkom odgovoru, odbacivanju transplantata i određuju predispoziciju za određene bolesti. Spektar molekula glavnog kompleksa histokompatibilnosti jedinstven je za svaki organizam i određuje njegovu biološku individualnost, što omogućava razlikovanje „sebe“ (histokompatibilnog) od „stranog“ (nekompatibilnog). Glavni kompleks histokompatibilnosti označen je kao MHC (Major Histocompability Complex). MHC antigeni se različito označavaju kod različitih životinjskih vrsta: kod miševa - H2 sistem, kod pasa - DLA, kod zečeva - RLA, kod svinja - SLA. Kod ljudi, antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti su označeni kao HLA (Human leucocyte antigenes), jer se za kliničke i eksperimentalne svrhe leukocitni antigeni definiraju kao antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti. Ljudski leukocitni antigeni kodirani su genima lokaliziranim na kromosomu 6. Na osnovu svoje hemijske strukture i funkcionalne namene, HLA se deli u dve klase.

MHC antigeni klase l prisutna na površini svih ćelija sa jezgrom. Oni regulišu interakciju između T ćelija ubica i ciljnih ćelija. Glavna biološka uloga antigena klase 1 je da su oni markeri "sopstvenih". Ćelije koje nose antigene klase I nisu napadnute od strane sopstvenih T-ubica zbog činjenice da se tokom embriogeneze uništavaju autoreaktivni T-ubice koji prepoznaju antigene klase I na sopstvenim ćelijama. Antigeni klase I stupaju u interakciju sa CD 8 molekulom na membrani T ćelije ubice.

MHC antigeni klase ll nalazi se pretežno na membrani imunokompetentnih ćelija (makrofagi, monociti, B- i aktivirani T-limfociti. Antigeni klase ll stupaju u interakciju s CD 4 molekulom T-pomoćne membrane, što uzrokuje oslobađanje limfokina koji stimuliraju proliferaciju i sazrijevanje T-ćelija ubica i plazma ćelija.

Određivanje HLA antigena je neophodno u sledećim situacijama:

Prilikom tipizacije tkiva u svrhu odabira donora za primaoca;

Uspostaviti vezu između prisustva određenih MHC antigena i predispozicije za određenu bolest. Najizraženija korelacija nađena je između prisustva HLA-B27 i ankilozantnog spondilitisa (ankilozantni spondilitis): 95% pacijenata ima ovaj antigen.

Prilikom procjene imunološkog statusa (detekcija a) aktiviranih T-limfocita koji nose HLA-DR antigene i b) mononuklearnih ćelija uključenih u prepoznavanje antigena.

Sva tkiva i ćelije ljudskog tela imaju antigena svojstva. Neki antigeni su specifični za sve sisare, drugi su specifični za ljude, a treći su za određene grupe; nazivaju se izoantigeni (na primjer, antigeni krvne grupe). Antigeni karakteristični samo za određeni organizam nazivaju se aloantigeni (grč. allos - drugi). To uključuje antigene histokompatibilnosti - proizvode gena glavnog kompleksa histokompatibilnosti MHC (Major Histocompatibiliti Complex), karakterističnih za svakog pojedinca. Antigeni različitih individua koji nemaju razlike nazivaju se singeničnim. Organi i tkiva, pored drugih antigena, imaju za njih specifične antigene organa i tkiva. Ljudska i životinjska tkiva istog imena imaju antigensku sličnost. Postoje stadijum-specifični antigeni koji se pojavljuju i nestaju u pojedinačnim fazama razvoja tkiva ili ćelije. Svaka ćelija sadrži antigene karakteristične za vanjsku membranu, citoplazmu, jezgro i druge komponente.

Antigeni svakog organizma obično ne izazivaju imunološke reakcije u njemu, jer je tijelo tolerantno na njih. Međutim, pod određenim uvjetima oni dobivaju znakove stranosti i postaju autoantigeni, a reakcija koja nastaje protiv njih naziva se autoimuna.

Tumorski antigeni i antitumorski imunitet. Zloćudne tumorske ćelije su varijante normalnih ćelija u telu. Stoga ih karakteriziraju antigeni tih tkiva iz

iz kojih su nastali, kao i tumor-specifični antigeni koji čine mali udio svih antigena ćelija. Tokom karcinogeneze dolazi do dediferencijacije ćelija, pa može doći do gubitka nekih antigena i pojave antigena karakterističnih za nezrele ćelije, uključujući i embrionalne (fetoproteine). Tumorsko-specifični antigeni su specifični samo za datu vrstu tumora, a često i za tumor kod date osobe. Tumori inducirani virusima mogu imati virusne antigene koji su isti u svim tumorima izazvanim datim virusom. Pod uticajem antitela, rastući tumor može promeniti svoj antigeni sastav.

Laboratorijska dijagnoza tumorske bolesti uključuje identifikaciju antigena karakterističnih za tumor u krvnom serumu. U tu svrhu medicinska industrija trenutno priprema dijagnostičke komplete koji sadrže sve potrebne sastojke za detekciju antigena pomoću enzimskog imunoeseja, radioimunoeseja i imunoluminiscencione analize.

Otpornost organizma na rast tumora osigurava se djelovanjem prirodnih stanica ubica, koje čine 15% svih limfocita koji stalno kruže u krvi i svim tkivima tijela. Prirodne ćelije ubice (NK) imaju sposobnost da razlikuju sve ćelije koje imaju znakove stranosti, uključujući tumorske ćelije, od normalnih ćelija tela i uništavaju strane ćelije. U stresnim situacijama, bolestima, imunosupresivnim uticajima i nekim drugim situacijama smanjuje se broj i aktivnost NK i to je jedan od razloga za početak rasta tumora. Tokom razvoja tumora, njegovi antigeni izazivaju imunološku reakciju, ali ona obično nije dovoljna da zaustavi rast tumora. Razlozi za ovu pojavu su brojni i nedovoljno shvaćeni. To uključuje:

niska imunogenost tumorskih antigena zbog njihove blizine normalnim antigenima tijela, na koje je tijelo tolerantno;

razvoj tolerancije umjesto pozitivnog odgovora;

razvoj imunog odgovora humoralnog tipa, dok samo ćelijski mehanizmi mogu suzbiti tumor;

imunosupresivni faktori koje proizvodi maligni tumor.

Kemoterapija i radioterapija tumora, stresne situacije tokom hirurških intervencija mogu biti dodatni faktori koji smanjuju imunološku odbranu organizma. Mjere za povećanje nivoa antitumorske rezistencije uključuju primjenu imunostimulirajućih sredstava, preparata citokina, stimulaciju imunocita pacijenta in vitro sa povratkom u krvotok pacijenta.

Izoantigeni. To su antigeni po kojima se pojedinci ili grupe jedinki iste vrste međusobno razlikuju.

Nekoliko desetina vrsta izoantigena otkriveno je u eritrocitima, leukocitima, trombocitima, kao iu krvnoj plazmi čovjeka.

Izoantigeni, genetski srodni, kombinuju se u grupe koje se zovu: LBO sistem, Rhesus itd. Podela ljudi u grupe prema ABO sistemu zasniva se na prisustvu ili odsustvu antigena na crvenim krvnim zrncima, označenih A i B. U skladu sa s tim, svi ljudi su podijeljeni u 4 grupe. Grupa I (0) - nema antigena, grupa II (A) - eritrociti sadrže antigen A, grupa

III (B) - eritrociti imaju antigen B, grupa IV (AB) - eritrociti imaju oba antigena. Pošto u okolini postoje mikroorganizmi koji imaju iste antigene (oni se nazivaju unakrsno reagujući), osoba ima antitela na te antigene, ali samo na ona koja nema. Tijelo je tolerantno na vlastite antigene. Shodno tome, krv osoba grupe I sadrži antitela na antigene A i B, krv osoba grupe II sadrži anti-B, krv osoba grupe III sadrži anti-A, a krv osoba grupe II sadrži anti-A.

Antitela grupe IV na A i Vantigene nisu sadržana. Kada se krv ili crvena krvna zrnca transfuzuju primatelju čija krv sadrži antitijela na odgovarajući antigen, dolazi do aglutinacije transfuziranih nekompatibilnih crvenih krvnih zrnaca u žilama, što može uzrokovati šok i smrt primatelja. Shodno tome, osobe iz grupe I (0) nazivaju se univerzalnim donorima, a osobe iz grupe IV (AB) nazivaju se univerzalnim primaocima. Pored antigena A i B, ljudski eritrociti mogu imati i druge izoantigene (M, M 2, N, N 2) itd. Na ove antigene nema izoantitela, pa se njihovo prisustvo ne uzima u obzir prilikom transfuzije krvi. .

Antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti. Pored antigena zajedničkih za sve ljude i grupnih antigena, svaki organizam ima jedinstven skup antigena koji su jedinstveni za sebe. Ovi antigeni su kodirani grupom gena koji se nalaze na ljudskom hromozomu 6 i nazivaju se antigeni glavnog kompleksa histokompatibilnosti i označeni su kao MHC antigeni (Major histocompatibility complex). Ljudski MHC antigeni su prvi put otkriveni na leukocitima i stoga imaju drugo ime HLA (Human leucocyte antigens). MHC antigeni pripadaju glikoproteinima i sadržani su na membranama tjelesnih stanica, određujući njegova pojedinačna svojstva i izazivajući transplantacijske reakcije, zbog čega su dobili treće ime - transplantacijski antigeni. Osim toga, MHC antigeni igraju obaveznu ulogu u izazivanju imunološkog odgovora na bilo koji antigen.

MHC geni kodiraju tri klase proteina, od kojih su dvije direktno povezane sa funkcionisanjem imunog sistema i o njima se govori u nastavku, a proteini klase III uključuju komponente komplementa, TNF citokine i proteine ​​toplotnog šoka.

Proteini klase I nalaze se na površini gotovo svih ćelija u tijelu. Sastoje se od dva polipeptidna lanca: teški lanac je nekovalentno vezan za drugi lanac. Teški lanac postoji u tri varijante, što određuje podjelu antigena klase u tri serološke grupe A, B i C. Teški lanac određuje kontakt cijele strukture sa ćelijskom membranom i njenu aktivnost. Lanac je mikroglobulin koji je isti za sve grupe. Svaki antigen klase I označen je latiničnim slovom i serijskim brojem ovog antigena.

Antigeni klase I obezbeđuju prezentaciju antigena citotoksičnim CO8 + limfocitima, a prepoznavanje ovog antigena od strane antigen-prezentujućih ćelija drugog organizma tokom transplantacije dovodi do razvoja transplantacionog imuniteta.

Antigeni MHC klase II nalaze se pretežno na ćelijama koje predstavljaju antigen - dendritskim ćelijama, makrofagima i B limfocitima. Na makrofagima i limfocitima njihova ekspresija se naglo povećava nakon aktivacije ćelije. Antigeni klase II podijeljeni su u 5 grupa, od kojih svaka sadrži od 3 do 20 antigena. Za razliku od antigena klase I, koji se detektuju u serološkim testovima korišćenjem seruma koji sadrže antitela na njih, antigeni klase II se najbolje detektuju u ćelijskim testovima - aktivacija ćelija ko-kultivacijom test ćelija sa standardnim limfocitima.

Nesumnjivo ste čuli za koncepte antigena i antitijela. Ali, ako se ne bavite medicinom ili biologijom, onda najvjerovatnije ne znate za ulogu antigena i antitijela. Većina ljudi ima opću ideju o tome šta antitijela rade, ali ne shvaćaju svoj ključni odnos s antigenima. U ovom članku ćemo pogledati razliku između ove dvije formacije i naučiti o njihovim funkcijama u tijelu.

Koje su razlike između antigena i antitijela?

Najlakši način da se bolje razumije razlika između antigena i antitijela je da uporedite dva entiteta. Imaju različite strukture, funkcije i lokacije u tijelu. Neki, po pravilu, imaju pozitivne kvalitete, jer štite organizam, dok drugi mogu izazvati negativnu reakciju.

Šta je to?

Antigen je strana čestica koja može izazvati imuni odgovor u ljudskom tijelu. Uglavnom se sastoje od proteina, ali mogu biti i nukleinske kiseline, ugljikohidrati ili lipidi. Antigeni su takođe poznati kao imunogeni. To uključuje hemijska jedinjenja, polen, viruse, bakterije i druge supstance biološkog porekla.

Antitijela se mogu nazvati imunoglobulinima. To su proteini koje sintetiše tijelo. Njihovi proizvodi su neophodni za borbu protiv antigena.

Koje su vrste i funkcije antigena i antitijela?

Svi antigeni se dijele na vanjske i unutrašnje. Unutar tijela nastaju autoantigeni, kao npr ćelije raka. Spoljni antigeni ulaze u organizam iz spoljašnje sredine. Oni stimulišu imuni sistem da proizvodi više antitela koja štite organizam od raznih vrsta oštećenja.

Postoji samo 5 različitih tipova antitijela. To su IgA, IgE, IgG, IgM i IgD.

IgA štiti površinu tijela od vanjskih supstanci.

IgE izaziva zaštitnu reakciju u tijelu protiv stranih tvari, uključujući životinjsko porijeklo, polen biljaka i spore gljivica. Ova antitijela su dio alergijskih reakcija na određene otrove i lijekove. Oni sa alergijama imaju tendenciju da imaju velike količine ovog tipa antitijela.

IgG igra ključnu ulogu u borbi protiv bakterijskih ili virusnih infekcija. Ovo su jedina antitijela koja mogu prodrijeti u placentu trudnice, pružajući zaštitu fetusu dok je još u maternici.

Kada se infekcija razvije, IgM antitijela su prva vrsta antitijela koja se proizvode u tijelu kao imuni odgovor. Oni će dovesti do toga da druge ćelije imunog sistema uništavaju strane supstance.

Naučnicima još nije jasno šta tačno rade IgD antitela.

Gdje se mogu naći antigen i antitijela?

Druga razlika između antigena i antitijela je gdje se nalaze. Antigeni su kao „kuke“ na površini ćelija i nalaze se u skoro svakoj ćeliji.

IgA antitijela možete pronaći u vagini, očima, ušima, probavnom traktu, respiratornim putevima i nosu, kao iu krvi, suzama i pljuvački. Otprilike 10-15% antitijela u tijelu su IgA. Mali je broj ljudi koji ne sintetiziraju IgA antitijela.

IgD antitijela se mogu naći u malim količinama u masnom tkivu prsa ili stomak.

Pronaći ćete IgE antitijela u sluzokoži, koži i plućima.

IgG antitela se nalaze u svim telesnim tečnostima. Oni su najzastupljenija i najmanja antitijela u tijelu.

IgM antitijela su najveća antitijela i mogu se naći u limfnoj tekućini i krvi. Oni čine 5-10% antitela u telu.

Kako djeluju antigeni i antitijela: imuni odgovor

Da bismo bolje razumjeli razliku između antigena i antitijela, pomaže razumjeti imuni odgovor. Sve zdrave odrasle osobe imaju hiljade različitih antitijela u malim količinama u cijelom tijelu. Svako antitijelo je visoko specijalizirano i prepoznaje jednu vrstu strane tvari. Većina molekula antitijela je u obliku slova Y, sa veznim mjestom duž svake ruke. Svako mesto vezivanja ima specifičan oblik i prihvata samo antigene istog oblika. Antitijela su dizajnirana da se vežu za antigene. Kada se vežu, one čine antigene neaktivnim, dozvoljavajući drugim procesima u tijelu da preuzmu strane tvari, uklanjajući ih i uništavajući ih.

Prvi put kada strana tvar uđe u tijelo, možete osjetiti simptome bolesti. Ovo se dešava kada imuni sistem stvori antitela koja će se boriti protiv strane supstance. U budućnosti, kada isti antigen ponovo napadne tijelo, stimulira se imunološka memorija. To rezultira trenutnom proizvodnjom velikih količina antitijela koja su stvorena u prvom napadu. Brz odgovor na daljnje napade znači da možda više nećete osjećati nikakve simptome bolesti ili čak znati da ste bili izloženi antigenu. Zbog toga većina ljudi više ne dobije bolesti poput vodenih kozica.

Iz gore navedene razlike između antigena i antitela, testiranje na antitela može lekaru pružiti korisne informacije u dijagnostičkom procesu.

Vaš lekar može da testira vašu krv na antitela iz više razloga, uključujući:

• dijagnoza alergija ili autoimunih bolesti
• identifikaciju trenutne infekcije ili jedne od prošlih infekcija
• dijagnoza rekurentnih infekcija, uzroci recidiva zbog nizak nivo IgG antitijela ili drugi imunoglobulini
• provjera odgovora na imunizaciju kao način da se uvjerite da ste još uvijek imuni na određenu bolest
• dijagnosticiranje efikasnosti liječenja različitih vrsta karcinoma, posebno onih koji utiču Koštana srž osoba
• Dijagnoza specifičnih vrsta karcinoma, uključujući makroglobulinemiju ili multipli mijelom.

Čitaj više:

Produžena mala temperatura: uzroci i liječenje

Leukopenija: uzroci, simptomi, liječenje

Koja je razlika između urođenog i stečenog imuniteta?