Značenje krvnih grupa prema avo sistemu. Genetika krvnih grupa i njihovi polimorfizmi. Greške zbog tehničkih razloga uključuju

5 minuta za čitanje. Pregleda 2.2k.

Klasifikacija ljudske krvi, u zavisnosti od njenih karakteristika, od praktične je važnosti prilikom hirurških intervencija koje zahtevaju njenu transfuziju, u transplantologiji organa i tkiva, u sudskoj medicini radi utvrđivanja činjenice očinstva, materinstva i u slučaju gubitka dece na ranoj dobi, kao i za planiranje trudnoće.

Grupna pripadnost osobe određena je antigenima koji se nalaze na površini crvenih krvnih zrnaca (eritrocita), nasljedna je osobina i ne mijenja se tijekom života. Svjetska medicinska zajednica prepoznaje različite sisteme ljudskih krvnih grupa, ali opšteprihvaćeno određivanje krvne grupe je ABO sistem.

Klasifikacija

Prema ovom sistemu, krv se deli na podtipove O, A, B i AB, u zavisnosti od prisustva ili odsustva antigena A i B u njoj.

Otkriće i proučavanje grupne identifikacije otkrilo je neravnomjernu raspodjelu A i B antigena među različitim rasama i nacionalnostima čovječanstva. Na primjer, većina stanovnika sjeverne Evrope vlasnici su antigena A. 80% Američki Indijanci imaju prvu grupu, ali se treća i četvrta ne javljaju u njima. Autohtoni narod Australije su ljudi iz prve grupe. I među stanovnicima Centralnog i Istočna Azija treća dominira.

To omogućava etnografima da proučavaju porijeklo postojećih rasa i naroda, da prate njihovo naseljavanje i migracije širom planete.

Koliko često idete na analizu krvi?

Opcije ankete su ograničene jer je JavaScript onemogućen u vašem pretraživaču.

Samo po prepisu ljekara 30%, 667 glasova

Jednom godišnje i mislim da je dovoljno 17%, 372 vote

Najmanje dva puta godišnje 15%, 323 vote

Više od dva puta godišnje, ali manje od šest puta 11%, 248 glasova

Brinem o svom zdravlju i iznajmljujem jednom mjesečno 7%, 151 glas

Plašim se ove procedure i trudim se da ne prođem 4%, 96 glasova

21.10.2019

Osim toga, zahvaljujući savremenim medicinskim zapažanjima, uspostavljen je obrazac između grupne identifikacije ljudi i učestalosti određenih bolesti. Ove studije bi mogle dovesti do važnih medicinskih otkrića.

Grupa 0

Prvi, ili AB0, znači da ne sadrži antigene A ili B. Za dugo vremena pretpostavili da se iz tog razloga krv ove vrste može transfuzirati svim pacijentima, bez obzira na njihovu grupnu pripadnost, pa su njeni vlasnici prozvani univerzalni donatori. Prema istraživanjima antropologa, on je najstariji, njegovi znakovi pronađeni su kod primitivnih ljudi koji su se bavili lovom i sakupljanjem. 40-50% ukupne populacije globus su predstavnici ove grupe podvrsta.

Smatra se da njeni nosioci imaju jak imuni sistem, manje su podložni infekcijama, ali češće od drugih ljudi pate od artritisa, alergija i peptički ulkus.

Grupa A

Crvena krvna zrnca druge krvne grupe po sistemu AB0 sadrže antigen A. Ne mogu se koristiti kao donorski materijal za nosioce onih grupa kod kojih ovaj antigen nema.

Nalazi se na drugom mjestu po rasprostranjenosti - 30-40% čovječanstva. Prednosti zdravlje - dobar metabolizam i zdrava probava. Među nosiocima antigena A češće se dijagnosticiraju poremećaji u radu jetre, žučne kese, kardiovaskularne bolesti i dijabetes.

Grupa B

Zauzvrat, crvena krvna zrnca treće krvne grupe prema ABO sistemu sadrže B antigene, koji se nalaze samo u 10-20% svjetske populacije.

Važna informacija: Da li se krvna grupa i Rh faktor neke osobe mijenjaju iz pozitivnih u negativni tijekom života?

Među predstavnicima ove klase čovječanstva postoji tendencija razvoja hronični umor i prisustvo autoimunih bolesti, dok se slažu da su vlasnici jaki i zdravi probavni sustav.

Grupa AB

Krv ove vrste sadrži i A i B antigene, zbog čega se njeni vlasnici nazivaju univerzalnim primaocima.

Najrjeđi je, njegovi nosioci čine samo 5% populacije. Imaju jak imuni sistem, ali istovremeno i raznovrstan kardiovaskularne bolesti.

Nasljeđivanje grupne pripadnosti prema ABO sistemu odvija se prema klasičnim zakonima genetike:

Ako roditelji nemaju antigene A, B, neće ih imati ni dijete.
U porodicama u kojima su roditelji (jedan ili oba) nosioci AB (IV) krvi, ne može se roditi dijete sa 0 krvi.
Ako majka i otac imaju drugu grupu, onda će dijete imati prvu ili drugu.

Ovisno o prisutnosti ili odsustvu antigena A i B u crvenim krvnim zrncima osobe, njegova plazma može sadržavati antitijela odgovorna za uništavanje stranih antigena. Svaka upotreba krvi primaoca ili njenih komponenti treba da se sprovodi samo uzimajući u obzir grupnu kompatibilnost sa davaocem.

U modernom kliničku praksu transfuzija krvi, crvenih krvnih zrnaca i plazme iste vrste kao i pacijent. U nekim hitnim slučajevima, crvena krvna zrnca grupe 0 mogu se transfuzirati u primaoce drugih podtipova. Crvena krvna zrnca grupe A mogu se koristiti za transfuziju pacijentima grupe A i AB, a crvena krvna zrnca od donatora B do B i AB primatelja. Govorimo samo o crvenim krvnim zrncima; upotreba plazme i pune krvi za pacijente druge grupe može uzrokovati nepopravljivu štetu njihovom zdravlju.

Kompatibilne kartice

Krv donatora	primalac
Krv donatora		A	IN	AB
	+	—	—	—
A	—	+	—	—
IN	—	—	+	—
AB	—	—	—	+
Crvena krvna zrnca donora	primalac
Crvena krvna zrnca donora		A	IN	AB
	+	+	+	+
A	—	+	—	+
IN	—	—	+	+
AB	—	—	—	+

Kako bi se izbjegle komplikacije tijekom transfuzije krvi, čak i kod iste grupe, provodi se preliminarni biološki test: pacijentu se 3 puta ubrizgava 25 ml donorskog materijala sa pauzama od 3 minute, uz praćenje stanja pacijenta. Daljnja transfuzija potrebne ukupne količine materijala provodi se samo ako nema znakova pogoršanja stanja osobe.

Kako se definiše grupa?

Za utvrđivanje koje je ABO krvne grupe osoba nosilac dovoljan je materijal uzet sa njegovog prsta. Test reagensi anti-A i anti-B se nanose na bijelu ploču, pomiješaju se sa test uzorkom i rezultat se procjenjuje nakon 3-5 minuta.

Ako se u prvom uzorku formiraju ugrušci, tj. crvena krvna zrnca se spajaju (aglutinacija), au drugom slučaju se crvena krvna zrnca ne lijepe, to znači da osoba ima antigen A, a nema antigen B. U ovom slučaju davalac ima prvu grupu ( A). Ostale grupe su definisane slično.

AB0 krvne grupe

Krvne grupe sistema AB0 otkrio je 1900. K. Landsteiner, koji je miješanjem crvenih krvnih zrnaca nekih osoba s krvnim serumom drugih osoba otkrio da se kod nekih kombinacija krv zgrušava, stvarajući ljuspice (reakcija aglutinacije) , ali kod drugih nije. Na osnovu ovih studija, Landsteiner je podijelio krv svih ljudi u tri grupe: A, B i C. Godine 1907. otkrivena je još jedna krvna grupa.

Utvrđeno je da se reakcija aglutinacije javlja kada se antigeni jedne krvne grupe (oni se nazivaju aglutinogeni), koji se nalaze u crvenim krvnim zrncima – eritrocitima, zalijepe s antitijelima druge grupe (nazivaju se aglutinini) koja se nalaze u plazmi – tečni dio krvi. Podjela krvi prema sistemu AB0 u četiri grupe zasniva se na činjenici da krv može, ali i ne mora sadržavati antigene (aglutinogene) A i B, kao i antitijela (aglutinine) α (alfa ili anti-A) i β (beta ili anti-B).

Prva krvna grupa - 0 (I)

Grupa I - ne sadrži aglutinogene (antigene), ali sadrži aglutinine (antitijela) α i β. Označen je sa 0 (I). Budući da ova grupa ne sadrži strane čestice (antigene), može se transfuzirati svim ljudima. Osoba sa ovom krvnom grupom je univerzalni davalac.

Druga krvna grupa A β (II)

Grupa II sadrži aglutinogen (antigen) A i aglutinin β (antitela na aglutinogen B). Stoga se može transfuzirati samo u one grupe koje ne sadrže antigen B - to su grupe I i II.

Treća krvna grupa Bα (III)

III grupe a sadrži aglutinogen (antigen) B i aglutinin α (antitijela na aglutinogen A). Stoga se može transfuzirati samo u one grupe koje ne sadrže antigen A - to su grupe I i III.

Četvrta krvna grupa AB0 (IV)

Krvna grupa IV sadrži aglutinogene (antigene) A i B, ali sadrži aglutinine (antitijela). Stoga se može transfuzirati samo onima koji imaju istu, četvrtu krvnu grupu. Ali, budući da u krvi takvih ljudi nema antitijela koja se mogu zalijepiti sa antitijelima unesenim izvana, mogu se transfuzirati krvlju bilo koje grupe. Ljudi sa krvnom grupom IV su univerzalni primaoci.

Krvne grupe po ABO sistemu

Metoda za određivanje krvnih grupa

Krvna grupa prema ABO sistemu se određuje reakcijom aglutinacije. Trenutno postoje tri načina za određivanje krvnih grupa pomoću ABO sistema:

Prema standardnim izohemaglutinirajućim serumima;

Korištenje monoklonskih antitijela (kolikloni anti-A i anti-B).

Određivanje krvnih grupa pomoću standardnih izohemaglutinirajućih seruma

Suština metode je detekcija antigena grupe A i B u testnoj krvi pomoću standardnih seruma. U te svrhe koristi se reakcija aglutinacije. Test treba obaviti u prostoriji sa dobrim osvjetljenjem na temperaturi od 15-25°C.

Za izvođenje testa potrebno je: - Standardni izohemaglutinirajući serumi grupe O (I), A (II), B (III) i AB (IV) dvije različite serije. Serumi za određivanje krvnih grupa pripremaju se od donorske krvi u posebnim laboratorijama. Serumi se čuvaju u frižideru na temperaturi od 4 - 8°C. Rok trajanja seruma je naveden na etiketi. Oznaka također označava titar (maksimalno razrjeđenje seruma pri kojem može doći do reakcije aglutinacije), koji ne smije biti manji od 1:32 (za serum B (III) - ne niži od 1:16/32). Surutka treba da bude providna, bez znakova truljenja. Radi praktičnosti, standardni serumi su obojeni u određenu boju: O (I) - bezbojni (siva), A (II) - plava, B (III) - crvena, AB (IV) - svijetlo žuta. Ove boje prate sve oznake na krvnim proizvodima koji imaju grupnu pripadnost (krv, crvena krvna zrnca, plazma, itd.).

Bijeli porculanski ili emajlirani tanjuri ili drugi tanjuri sa površinom koja se može kvasiti, označena prema krvnoj grupi.

Izotonični rastvor natrijum hlorida.

Igle, pipete, stakleni štapići (slajdovi).

Tehnika reakcije.

1. Pod odgovarajućim oznakama krvne grupe, serum grupe I, II, III nanosi se na ploču (tanjir) u zapremini od 0,1 ml (jedna velika kap prečnika oko 1 cm). Da bi se izbjegle greške, primjenjuju se dvije serije seruma, jer jedna od serija može imati nisku aktivnost i ne dati jasnu aglutinaciju. Tako se dobija 6 kapi, formirajući dva reda od po tri kapi sledećim redom s leva na desno: 0 (I), A (II), B (III).

2. Krv za istraživanje uzima se iz prsta ili iz vene. Koristeći suvu staklenu šipku, 6 kapi krvi za ispitivanje, otprilike veličine glave igle od 0,01 ml (mala kap), sukcesivno se prebacuju na ploču na 6 tačaka, svaka pored kapi standardnog seruma. Štaviše, količina seruma bi trebala biti 10 puta veća od količine krvi koja se testira. Zatim se pažljivo miješaju pomoću staklenih šipki sa zaobljenim rubovima.

Više je moguće jednostavna tehnika: jedna velika kap krvi se nanosi na ploču, zatim se odatle uzima uglom staklenog stakla i svaka kap seruma se prenosi, pažljivo miješajući je s posljednjom. U tom slučaju, krv se svaki put uzima čistim kutom čaše, pazeći da se kapi ne miješaju.

3. Nakon miješanja kapi, povremeno protresite ploču. Aglutinacija počinje u prvih 10-30 sekundi. Ali posmatranje treba provoditi najmanje 5 minuta, jer je moguća kasnija aglutinacija, na primjer s crvenim krvnim zrncima grupe A 2 (II).

4. Dodajte jednu kap izotoničnog rastvora natrijum hlorida u one kapi na kojima je došlo do reakcije, nakon čega se procenjuju rezultati reakcije.

Reakcija aglutinacije može biti pozitivna ili negativna

Ako je reakcija pozitivna, u prvih 10-30 sekundi u smjesi se uočavaju mala crvena zrna (aglutinati), koja se sastoje od lijepljenih crvenih krvnih zrnaca, vidljivih golim okom. Sitna zrna se postepeno spajaju u veća zrna ili čak pahuljice nepravilnog oblika. U negativnoj reakciji, kap ostaje jednolično obojena crvenom bojom.

Rezultati reakcija dvije serije u kapima sa serumom iste grupe moraju se podudarati.

Pripadnost krvi koja se testira odgovarajućoj grupi određuje se prisustvom ili odsustvom aglutinacije pri reakciji sa odgovarajućim serumom.

Kad bi se dali svi serumi pozitivna reakcija, što znači da ispitivana krv sadrži oba aglutinogena - A i B. Ali u takvim slučajevima, kako bi se isključila nespecifična reakcija aglutinacije, potrebno je dodatno kontrolna studija test krvi sa standardnim serumom grupe AB (IV).

Određivanje krvnih grupa pomoću monoklonskih antitijela

Za određivanje krvnih grupa ovom metodom koriste se monoklonska antitijela koja se dobivaju hibridom biotehnologijom.

Hibridom je ćelijski hibrid nastao fuzijom ćelija koštana srž(mijelom) sa imunološkim limfocitom koji sintetizira specifična monoklonska antitijela. Hibridom ima sposobnost neograničenog rasta, karakterističan je za tumorsku ćeliju i ima svojstvenu sposobnost limfocita da sintetizira antitijela.

Razvijeni su standardni reagensi: monoklonska antitijela (mAbs): anti-A i anti-B kolikloni, koji se koriste za određivanje aglutinogena eritrocita. Zolikloni su liofilizirani prah crvene (anti-A) i plave (anti-B) boje, koji se razblaži izotoničnim rastvorom natrijum hlorida neposredno pre uzorka.

Tehnika.

Anti-A i anti-B zolikloni se nanose na bijelu tabletu, jednu veliku kap (0,1 ml) ispod odgovarajućih natpisa: anti-A ili anti-B. Uz kapi antitijela treba staviti jednu malu kap test krvi. Nakon miješanja komponenti, promatrajte reakciju aglutinacije 2-3 minute. Procjena rezultata je vrlo jednostavna.

Određivanje krvne grupe može biti praćeno greškama koje dovode do pogrešne interpretacije rezultata. Mogu se razlikovati tri glavne grupe grešaka: greške povezane sa reagensima niskog kvaliteta; tehničke greške; greške povezane sa karakteristikama Šema za procjenu rezultata određivanja krvnih grupa korištenjem monoklonskih antitijela (kolikloni anti-A i anti-B) krvi koja se testira. Prva dva se mogu izbjeći strogim poštovanjem gore opisanih zahtjeva za serumom, reakcionim uslovima itd. Treća grupa je povezana sa fenomenom nespecifične panaglutinacije (Thomsenov fenomen), čija je suština da serum na sobnoj temperaturi aglutinira sa sva crvena krvna zrnca, čak i sa svojim (autoaglutinacija), a eritrociti istovremeno daju aglutinaciju sa svim serumima, čak i sa serumom grupe AB. Slična pojava je opisana kod brojnih bolesti: bolesti krvi, splenomegalije, ciroze jetre, zarazne bolesti itd. Opisani su i panaglutinacija i autoaglutinacija kod zdravih ljudi.

Fenomen panaglutinacije i autoaglutinacije se uočava samo kada sobnoj temperaturi. Ako se određivanje pripadnosti grupi izvrši na temperaturi od 37°C, oni nestaju.

Mora se striktno imati na umu da u svim slučajevima nejasnih ili upitnih rezultata krvne grupe treba ponovo odrediti korištenjem standardnih seruma iz drugih serija, kao i na način poprečnog presjeka.

66. Metode za određivanje krvnih grupa pomoću Avo i Rh sistema.

Za sprovođenje studije potrebni su standardni hemaglutinirajući serumi I (O), II (A), III (B), IV (AB), a prve tri opcije seruma moraju biti predstavljene u dvije serije.

Serum mora biti prikladan za upotrebu, u tu svrhu potrebno je provjeriti usklađenost s rokom trajanja naznačenim na etiketi seruma i vizualno utvrditi njegovo stanje. Ne možete koristiti serum ako je zamućen, sadrži strane nečistoće, ljuspice, suspenziju ili je promijenio boju.

Serum se smatra prikladnim za upotrebu ako je proziran, ampula ima oznaku na kojoj su naznačena njena glavna svojstva (serija, rok trajanja, pripadnost grupi, oznaka boje prema pripadnosti grupi), ampula nije oštećena ili otvorena.

Potreban vam je čist tanjir, koji se mora podijeliti na četiri dijela, uz napomenu da odgovara svakoj određenoj krvnoj grupi, igla za skarifikaciju, sterilni pamučni štapići, čisto, suho staklo bez masti i alkohol. Nanesite kap svakog seruma na tanjir u skladu sa etiketom. Zatim se koža jastučića četvrtog prsta lijeve ruke tretira sterilnim pamučnim štapićem s alkoholom. Koristeći skarifikator, koža se buši, uklanjajući prvu kap krvi koja se pojavi (primiješaj alkohola i tkivne tekućine u nju može iskriviti rezultate studije). Sljedeća kap krvi uzima se kutom staklenog stakla, za svaku kap seruma - čistim kutom stakla. Za istraživanje dodajte kap krvi u kap hemaglutinirajućeg seruma u omjeru 10:1. Zatim, pažljivo okrećući i protresajući ploču, pomiješajte krv. Aglutinacija se obično otkriva u obliku pahuljica koje se jasno vizualiziraju. Da bi se razjasnio rezultat, u kap se dodaje izotonična otopina natrijevog klorida, nakon čega se rezultat procjenjuje s dovoljno pouzdanosti.

Jedan od obaveznih uslova za provođenje studije je poštivanje temperaturnog režima.

Optimalna temperatura je 20 – 25 °C, jer se već ispod 15 °C uočava hladna aglutinacija, što naglo narušava specifičnost ovog uzorka, a na temperaturi okruženje iznad ovog intervala, brzina reakcije aglutinacije naglo se usporava.

Ako se hemaglutinacija pojavi u kapi sa serumima I (O), III (B), a ne sa serumom II (A), a rezultat je sličan sa serumima dva seruma, to znači da krv koja se testira pripada u grupu III (B) po ABO sistemu.

Ako se hemaglutinacija javlja u kapi sa serumom I (O), II (A), a ne sa serumom III (B), to znači da krv koja se ispituje pripada grupi II (A) prema ABO sistemu.

Ali moguća je i situacija kada se hemaglutinacija ne dogodi ni sa jednim od test seruma, i to u obje serije. To znači da krv koja se testira ne sadrži aglutinogene i da pripada grupi I (O) prema ABO sistemu.

Ukoliko dođe do aglutinacije sa svim serumima, iz obe serije, to znači da test serum sadrži oba aglutinogena (A i B) i da pripada grupi IV (AB) prema ABO sistemu.

Ekspresna metoda za određivanje krvne grupe prema Rh sistemu. Za ispitivanje morate imati standardni antirezus serum koji pripada grupi IV (AB) prema ABO sistemu, Petrijevu posudu, izotonični rastvor natrijum hlorida, 30% rastvor reopoliglucina i čist, suv, masnoće. besplatno staklo. Prvo morate razrijediti standardni anti-Rhesus serum otopinom reopoliglucina i nanijeti kap na Petrijevu posudu. Osim toga, na Petrijevu posudu se nanosi kap seruma grupe IV (AB), koji ne sadrži antitijela. Uzimanje krvi se vrši slično metodi opisanoj prilikom određivanja ABO sistema. Kap krvi se sakupi pomoću ugla stakalca, doda se kapi seruma i lagano promiješa. Pod drugim uglom uzmite kap da je dodate drugom serumu i takođe promiješajte. Preliminarni rezultat se procjenjuje nakon 4 minute, zatim se svakoj kapi mora dodati kap izotonične otopine natrijum hlorida, a konačni rezultat se procjenjuje nakon 2 minute. Ako se u obje kapi ne uoče ljuspice aglutinacije, to znači da je krv koja se testira Rh negativna. Ako je došlo do aglutinacije sa oba seruma, rezultat studije se ne može smatrati pouzdanim. Konačno, ako se aglutinacija dogodila s anti-Rh serumom, ali nije nastupila s drugim, kontrolnim serumom, krv se smatra Rh-pozitivnom.

67. Savremena pravila transfuzije krvi po grupama ABO sistema i Rh sistema. Odgovornosti ljekara za transfuziju krvi

Potrebu za infuzijom krvi ili njenih komponenti, kao i izbor metode i određivanje doze transfuzije, utvrđuje ljekar koji prisustvuje na osnovu kliničkih simptoma i biohemijskih pretraga. Lekar koji vrši transfuziju dužan je da, bez obzira na podatke iz prethodnih studija i testova, lično izvrši sledeće studije: odredi krvnu grupu pacijenta po ABO sistemu i dobijene podatke uporedi sa anamnezom; odrediti krvnu grupu davaoca i uporediti dobivene podatke s podacima na etiketi posude; provjeriti kompatibilnost krvi davatelja i pacijenta; dobiti podatke o biološkom uzorku. Zabranjena je transfuzija krvi i njenih frakcija koje nisu testirane na AIDS, serumski hepatitis i sifilis. Transfuzija krvi se obavlja uz poštivanje svih potrebnih aseptičkih mjera. Infuzija krvi ili njenih frakcija dozvoljena je samo ako se Rh faktor davaoca i primaoca podudara. Ako je potrebno, moguće je ubrizgati Rh negativnu krv prve grupe osobi sa bilo kojom krvnom grupom u zapremini do 0,5 litara (samo odrasli). Rh negativna krv druge i treće grupe može se transfuzirati osobi druge, treće i četvrte grupe, bez obzira na Rh faktor. Osoba s krvnom grupom IV i pozitivnim Rh faktorom može se transfuzirati krvlju bilo koje grupe. Eritrocita masa Rh-pozitivne krvi prve grupe može se infundirati pacijentu sa bilo kojom grupom sa Rh-pozitivnim faktorom. Krv druge i treće grupe sa Rh-pozitivnim faktorom može se uliti osobi sa četvrtim Rh-pozitivnim faktorom. Na ovaj ili onaj način, prije transfuzije potreban je test kompatibilnosti. Kada se u krvi otkriju imunoglobulini rijetke specifičnosti, potreban je individualni pristup odabiru krvi i specifični testovi kompatibilnosti.

Test kompatibilnosti krvi između davaoca i primaoca prije transfuzije.

Konačno, ako se utvrdi da krv donora i krv primaoca odgovaraju ABO i Rh sistemima, mora se izvršiti test biološke kompatibilnosti za transfuziju. Provodi se od samog početka transfuzije krvi. Nakon povezivanja sistema za transfuziju krvi, otvorite stezaljku i ubrizgajte oko 20 ml krvi donora u mlaz, zatim zatvorite stezaljku i pažljivo promatrajte reakciju pacijenta 3 minute. Biološka nekompatibilnost krvi davaoca i pacijenta je rijetka u kliničkoj praksi, ali može biti vrlo opasna po zdravlje primatelja. O njegovom prisustvu možemo govoriti ako se uoči hiperemija lica, psihomotorna uznemirenost, pacijent pokušava da ustane, može se uočiti neprikladno ponašanje, tahikardija i tahipneja, sniženje krvnog pritiska. Pojačano disanje može biti kombinovano sa osećajem nedostatka vazduha. Takva reakcija je apsolutna kontraindikacija za transfuziju krvi od datog davaoca određenom primaocu. Međutim, to ne isključuje korištenje drugih dijelova krvi donora od ove osobe drugim pacijentima. Ako biološki test nije praćen pojavom slične reakcije kada se ponovi dva puta, smatra se prikladnim za transfuziju. Transfuzija se nastavlja, ali je sve vreme potrebno pažljivo pratiti stanje primaoca, njegov krvni pritisak, tjelesnu temperaturu, opšte stanje, učestalost i ritam disanja, procijeniti učestalost i kvalitet pulsa, obratiti pažnju na subjektivne osjećaje pacijenta: osjećaj vrućine, osjećaj nedostatka zraka, svrab, bol u lumbalnoj regiji, drhtavica i sl. stanje pacijenta se provodi u roku od 4 sata nakon transfuzije krvi, a ako nakon tog vremena ne dođe do reakcije na transfuziju, tada se izvršena transfuzija krvi smatra uspješnom, obavljenom bez komplikacija.

Određivanje krvne grupe AB0

Koriste se standardni serumi krvne grupe I II III IV od 2 serije.

Nosite kecelju, masku, naočare, rukavice i rukave.

Metodologija.

1. Kapnite jednu kap standardnih seruma iz 2 serije (6 kapi) na čistu, suvu ploču bez masti. Svaki serum se ukapa u posebnu pipetu. Pipete su označene i stavljene u boce sa fiziološkim rastvorom.

2. Pored kapi standardnog seruma, štapićem ili posebnom pipetom nanosi se kap krvi (omjer seruma i krvi 10:1).

3. Kapi se temeljito izmiješaju posebnim štapićima.

4. Zaljuljajte ploču i posmatrajte rezultate 5 minuta. Nakon 3 minute, da biste isključili lažnu aglutinaciju, dodajte kap fiziološke otopine i nastavite s promatranjem.

Definicija rezultata.

Serumi svih grupa nisu dali reakciju, testirana krv pripada grupi 0(I)

Serumi grupe 0 (I) i B (III) dali su pozitivnu reakciju, serum grupe A (II) nije izazvao aglutinaciju eritrocita - ispitana krv pripada grupi A (II)

Serumi grupe O (I) i A (II) dali su pozitivnu reakciju, serum grupe B (III) nije dao reakciju - krv je dodijeljena grupi

Serumi svih grupa dali su pozitivnu reakciju - krv se može svrstati u grupu AB (IV). ali samo ako pri ispitivanju crvenih krvnih zrnaca koji se ispituju standardnim serumom grupe AB (IV) ne dođe do reakcije aglutinacije. Pozitivna aglutinacija sa AB (IV) serumom znači prisustvo nespecifične aglutinacije.

Određivanje ABO krvne grupe pomoću monoklonskih antitijela.

Ovo savremena metoda određivanje ABO krvne grupe pomoću monoklonskih reagensa (anti-A i anti-B koliklona).

Metoda određivanja: Staviti kecelju, masku, rukavice, volane za ruke

1. kapnite 1 kap anti-A i anti-B ciklona na ploču u dvije ćelije

2. Pored kapi antitijela, nanosi se krv za testiranje u omjeru seruma i krvi od 10:1.

3. Pomiješajte reagense koristeći odvojene staklene šipke.

4. Posmatrajte rezultat 2,5 minuta.

Definicija rezultata:

Nema aglutinacije sa tsoliklonom anti-A ili tsoliklonom anti-B-

krv pripada grupi O(I)

Aglutinacija se opaža samo kod anti-A koliklona - krv pripada grupi A (II)

Aglutinacija se opaža samo kod anti-B koliklona - krv pripada grupi B (III)

Aglutinacija se opaža i sa tsoliklonom anti-A i tsoliklonom anti-B - krv pripada grupi AB (IV)

5. Uzorci prije transfuzije krvi.

Nosite masku, naočare, kecelju, rukavice.

Iz vene pacijenta se uzima 5 ml krvi, centrifugira se i dobije se serum.

A) Test za individualnu kompatibilnost: nanesite 2-3 kapi seruma na tabletu i dodajte kap krvi donatora (10:1). Krv se pomiješa sa serumom suhom staklenom šipkom, tableta se lagano ljulja i vidi se rezultat.

Rezultat: odsustvo aglutinacije - krv je kompatibilna; postoji aglutinacija - krv nije kompatibilna.

B) Test za Rh kompatibilnost:

U čistu epruvetu upišite prezime, ime, patronimiju primaoca i njegovu krvnu grupu, kao i broj bočice davaoca.

Dodajte 2 kapi seruma primaoca, 1 kap krvi donora i 1 kap 33% rastvora poliglucina na dno epruvete pomoću Pasteurove pipete.

Dobivenu smjesu pomiješajte u epruveti i nagnite epruvetu dok horizontalni položaj, okrenite je tako da se sadržaj širi po zidovima epruvete u njenoj donjoj trećini.

Nakon 5 minuta u epruvetu dodajte 2-3 ml izotonične otopine natrijum hlorida i promiješajte sadržaj tako što ćete epruvetu preokrenuti 2-3 puta.

rezultat:

1. Prisustvo aglutinacije crvenih krvnih zrnaca - krv davaoca nije kompatibilna sa krvlju pacijenta.

2. Nema znakova aglutinacije - krv je kompatibilna.

B) Biološki uzorak.

Tehnika:

Protočno transfuzirajte 10-15 ml krvi (eritrocitna masa, plazma), a zatim posmatrajte pacijenta 3 minute. Sa odsustvom kliničke manifestacije reakcije ili komplikacije (povećan broj otkucaja srca, disanje, otežano disanje, otežano disanje i crvenilo lica, itd.), ponovo unesite 10-15 ml krvi (eritrocitna masa, plazma itd.) i posmatrajte pacijenta 3 minuta. Isti postupak se ponavlja i treći put. Nedostatak odgovora kod pacijenta nakon trostrukog testiranja je osnova za nastavak transfuzije. 10-15 ml krvi ostavi se u bočici i čuva 1 dan u frižideru.

6.Nakon transfuzije krvi Primalac se drži u krevetu 2 sata i pod nadzorom je ljekara. Tjelesna temperatura i krvni pritisak mu se mjere svakih sat vremena, a ova očitavanja se zapisuju u anamnezu. Prati se prisustvo mokrenja i normalna boja urina. Sljedeći dan nakon transfuzije potrebno je uraditi opšta analiza urina i krvi. Indikacija za transfuziju krvi upisuje se u anamnezu i sastavlja se transfuzijski protokol koji sadrži sljedeće podatke:

– Puno ime i prezime pacijenta

Krvna grupa i Rh status pacijenta

Podaci o pasošu boca ili komponenti krvi, prezime i inicijali davaoca, krvna grupa i Rh, broj boce, datum nabavke.

Rezultat kontrolnog određivanja krvne grupe pacijenta

Rezultati kontrolnog određivanja grupe svake boce krvi i njenih komponenti.

Rezultati testova kompatibilnosti krvi između davaoca i primaoca na sobnoj temperaturi

Metoda i rezultati ispitivanja temperaturne kompatibilnosti

Rezultati bioloških uzoraka

Stanje pacijenta tokom i nakon transfuzije.

/ 29

29 Metode za određivanje krvnih grupa i Rh faktora. Sprečavanje mogućih grešaka

Određivanje krvnih grupa pomoću standardnih seruma. Jedna velika kap standardnog seruma grupa 0(1), A(P), V(III) iz dvije različite serije svake grupe se uzastopno pipetira u jažice ploče za određivanje krvnih grupa. Zatim se na svaki okular nanese kap test krvi, 5 do 10 puta manje od seruma. Koristeći suhe staklene štapiće ili protresanjem tablete, pomiješajte standardni serum i testirajte krv. Nakon 5 minuta, rezultat se procjenjuje (tabela 2).

tabela 2

Određivanje krvnih grupa pomoću standardnih seruma

Testirajte krvnu grupu	Standardni serumi

Određivanje krvnih grupa pomoću standardnih crvenih krvnih zrnaca. Velike kapi plazme iz krvi koja se testira stavljaju se u jažice ploče. Pored svake kapi plazme, redom se nanosi mala kap standardnih crvenih krvnih zrnaca grupa 0(1), A(II), B(III). Kapi se miješaju protresanjem tablete. Nakon 5 minuta dodajte 1 kap fiziološkog rastvora u svaku kap smjese i uzmite u obzir rezultat.

Tabela 3

Određivanje krvnih grupa pomoću standardnih crvenih krvnih zrnaca

Testirajte krvnu grupu	Standardna crvena krvna zrnca

Određivanje Rh faktora. Nanesite 1 veliku kap univerzalnog antirezus reagensa na dno suhe epruvete, a zatim dodajte istu kap krvi koja se testira. Nakon protresanja epruvete, anti-Rh serum i krv se miješaju duž stijenki epruvete 5 minuta, nakon čega se dodaje 5-7 ml fiziološkog rastvora. Prisustvo aglutinacije ukazuje na prisustvo Rh faktora.

Određivanje krvnih grupa pomoću ciklona. Kolikloni anti-A, anti-B i anti-AB su namenjeni za određivanje ljudskih krvnih grupa ABO sistema u direktnim reakcijama hemaglutinacije i koriste se umesto ili paralelno sa poliklonskim imunim serumima.

Monoklonska anti-A i anti-B antitela proizvode dva mišja hibridoma i pripadaju imunoglobulinima klase M. Kolikloni se pripremaju od ascitesne tečnosti miševa koji nose anti-A i anti-B hibridome. Coliclone anti-AB je mješavina monoklonskih anti-A i anti-B antitijela.

Tsolikloni su dostupni u tečnom obliku u bočicama od 5 - 10 ml. Tsoliclone anti-A - žuta boja, anti-B - plava, anti-AB - bezbojna. Natrijum azid se koristi kao konzervans.

Tehnika određivanja krvnih grupa. Određivanje se vrši u nativnoj krvi uzetoj kao konzervans; u krvi uzetoj bez konzervansa, uključujući i iz prsta. Koristi se metoda direktne hemaglutinacije na ploči ili tableti, određivanje se provodi u prostoriji s dobrim osvjetljenjem na temperaturi od 15 - 25 X.

Anti-A, anti-B i anti-AB zolikloni se nanose na ploču ili tabletu sa pojedinačnim pipetama, jednu veliku kap (0,1 ml) ispod odgovarajućih natpisa.

Jedna mala kap test krvi (0,01 - 0,03 ml) stavlja se pored kapi antitela.

Pomiješajte krv s reagensom protresanjem tablete.

Vizualno posmatrajte napredak reakcije sa zoliklonima laganim trešenjem ploče 3 minute. Aglutinacija eritrocita s koliklonima obično se događa u prvih 3 do 5 sekundi, ali promatranje treba provoditi 3 minute zbog kasnije pojave aglutinacije s eritrocitima koji sadrže slabe varijante antigena A ili B.

Rezultat reakcije u svakoj kapi može biti pozitivan ili negativan. Pozitivan rezultat se izražava u aglutinaciji (sljepljivanju) crvenih krvnih zrnaca. Aglutinati su vidljivi kao mali crveni agregati koji se brzo miješaju u velike ljuspice. U negativnoj reakciji, kap ostaje jednolično obojena crvenom bojom i u njoj se ne detektiraju aglutinati.

Interpretacija rezultata reakcije aglutinacije sa zoliklonima prikazana je u tabeli. 4.

Table 4

Određivanje krvnih grupa pomoću zoliklona

Testirajte krvnu grupu	Standardna crvena krvna zrnca

Napomena: znak (+) označava prisustvo aglutinacije, znak (-) označava njeno odsustvo.

Ako je rezultat reakcije aglutinacije kod svih zveckajućih zoliklona pozitivan, potrebno je isključiti spontanu nespecifičnu aglutinaciju ispitivanih eritrocita. Da biste to učinili, pomiješajte 1 kap ispitivanih crvenih krvnih zrnaca s kapljicom fiziološke otopine u ravnini. Krv se može svrstati u grupu AB(IV) samo ako nema aglutinacije crvenih krvnih zrnaca u fiziološkom rastvoru.

Određivanje Rh faktora pomoću zoliklona. Nanesite 1 veliku kap anti-D-super zoliklona u sočivo tablete i pored nje nanesite 1 malu kap test krvi.

Protresite tabletu, pomiješajte krv sa zoliklonom. Napredak reakcije se prati 3 minute. Prisustvo aglutinacije ukazuje na prisustvo Rh faktora.

Funkcije. Krvne grupe su genetski naslijeđene karakteristike koje se ne mijenjaju tokom života. prirodni uslovi. Krvna grupa je specifična kombinacija površinskih antigena eritrocita (aglutinogena) ABO sistema.Određivanje pripadnosti grupi se široko koristi u kliničkoj praksi pri transfuziji krvi i njenih komponenti, u ginekologiji i akušerstvu pri planiranju i vođenju trudnoće. AB0 sistem krvnih grupa je glavni sistem koji određuje kompatibilnost i nekompatibilnost transfuzirane krvi, jer njeni sastavni antigeni su najimunogeniji. Karakteristika AB0 sistema je da u plazmi neimunih ljudi postoje prirodna antitela na antigen kojih nema na crvenim krvnim zrncima. AB0 sistem krvnih grupa sastoji se od dvije grupe aglutinogena eritrocita (A i B) i dva odgovarajuća antitijela - aglutinina plazme alfa (anti-A) i beta (anti-B). Različite kombinacije antigena i antitijela formiraju 4 krvne grupe:

Grupa 0(I) - nema grupnih aglutinogena na crvenim krvnim zrncima, aglutinini alfa i beta su prisutni u plazmi.
Grupa A (II) - crvena krvna zrnca sadrže samo aglutinogen A, aglutinin beta je prisutan u plazmi;
Grupa B (III) - crvena krvna zrnca sadrže samo aglutinogen B, plazma sadrži aglutinin alfa;
Grupa AB (IV) - antigeni A i B su prisutni na crvenim krvnim zrncima, plazma ne sadrži aglutinine.

Određivanje krvnih grupa vrši se identifikacijom specifičnih antigena i antitijela (dvostruka metoda, odnosno unakrsna reakcija).

Krvna inkompatibilnost se opaža ako crvena krvna zrnca jedne krvi nose aglutinogene (A ili B), a plazma druge krvi sadrži odgovarajuće aglutinine (alfa ili beta) i dolazi do reakcije aglutinacije.

Transfuzija crvenih krvnih zrnaca, plazme i posebno pune krvi od davaoca primatelju mora se strogo pratiti grupna kompatibilnost. Izbjeći kompatibilnost krvi donatora i primaoca, neophodno je laboratorijske metode precizno odrediti njihovu krvnu grupu. Najbolje je transfuzirati krv, crvena krvna zrnca i plazmu iste grupe koja je određena za primaoca. U hitnim slučajevima, crvena krvna zrnca grupe 0 (ali ne puna krv!) mogu se transfuzirati primaocima s drugim krvnim grupama; Crvena krvna zrnca grupe A mogu se transfuzirati primaocima s krvnom grupom A i AB, a crvena krvna zrnca donatora grupe B mogu se transfuzirati primaocima grupe B i AB.

Kartice kompatibilnosti krvnih grupa (aglutinacija je označena znakom +):

Krv donatora

Krv primaoca

Crvena krvna zrnca donora

Krv primaoca

Grupni aglutinogeni nalaze se u stromi i membrani eritrocita. Antigeni ABO sistema se detektuju ne samo na crvenim krvnim zrncima, već i na ćelijama drugih tkiva ili se čak mogu rastvoriti u pljuvački i drugim telesnim tečnostima. Razvijaju se dalje ranim fazama intrauterinom razvoju, a kod novorođenčeta su već prisutni u značajnim količinama. Krv novorođene djece ima starosne karakteristike - karakteristične grupe aglutinina možda još nisu prisutne u plazmi, koji se kasnije počinju proizvoditi (konstantno se otkrivaju nakon 10 mjeseci) i određivanje krvne grupe kod novorođenčadi u ovom slučaju se vrši. izlaze samo prisustvom antigena ABO sistema.

Pored situacija koje uključuju potrebu za transfuzijom krvi, određivanje krvne grupe, Rh faktora, kao i prisutnost aloimunih antieritrocitnih antitijela treba provesti prilikom planiranja ili tokom trudnoće kako bi se utvrdila vjerovatnoća imunološkog sukoba između majke i majke. dijete, što može dovesti do hemolitička bolest novorođenčad.

Hemolitička bolest novorođenčeta

Hemolitička žutica novorođenčadi, uzrokovana imunološkim sukobom između majke i fetusa zbog nekompatibilnosti antigena eritrocita. Bolest je uzrokovana nekompatibilnošću fetusa i majke za D-Rhesus ili ABO antigene, rjeđe postoji nekompatibilnost za druge Rhesus (C, E, c, d, e) ili M-, M-, Kell-, Duffy- , Kidd- antigeni. Bilo koji od ovih antigena (obično D-Rh antigen), koji prodire u krv Rh negativne majke, uzrokuje stvaranje specifičnih antitijela u njenom tijelu. Potonji ulaze u fetalnu krv kroz placentu, gdje uništavaju odgovarajuća crvena krvna zrnca koja sadrže antigen.Predisponiraju nastanku hemolitičke bolesti novorođenčeta poremećenom propusnošću placente, ponovljenim trudnoćama i transfuzijama krvi ženi bez uzimanja u obzir Rh faktor itd. Uz rane manifestacije bolesti, imunološki sukob može uzrokovati prijevremeni porođaj ili pobačaj.

Postoje varijante (slabe varijante) antigena A (u većoj meri) i ređe antigena B. Što se tiče antigena A, postoje opcije: „jaki“ A1 (više od 80%), slabi A2 (manje od 20%) ), pa čak i slabije (A3, A4, Ah - rijetko). Ovaj teorijski koncept je važan za transfuziju krvi i može uzrokovati nezgode kada se donor A2 (II) svrstava u grupu 0 (I) ili donor A2B (IV) u grupu B (III), budući da slab oblik antigena A ponekad uzrokuje greške u određivanje krvnih grupa ABO sistema. Ispravna identifikacija slabih varijanti antigena A može zahtijevati ponovljeno testiranje sa specifičnim reagensima.

Smanjenje ili potpuno odsustvo prirodni aglutinini alfa i beta ponekad se primjećuju u stanjima imunodeficijencije:

neoplazme i bolesti krvi - Hodgkinova bolest, multipli mijelom, kronična limfna leukemija;
kongenitalna hipo- i agamaglobulinemija;
kod dece rane godine i kod starijih osoba;
imunosupresivna terapija;
teške infekcije.

Poteškoće u određivanju krvne grupe zbog supresije reakcije hemaglutinacije nastaju i nakon uvođenja plazma nadomjestaka, transfuzije krvi, transplantacije, septikemije itd.

Nasljeđivanje krvnih grupa

Zakoni nasljeđivanja krvnih grupa temelje se na sljedećim konceptima. Postoje tri moguće varijante (alela) na lokusu gena ABO - 0, A i B, koje su eksprimirane na autozomno kodominantni način. To znači da osobe koje su naslijedile gene A i B eksprimiraju proizvode oba ova gena, što rezultira fenotipom AB (IV). Fenotip A (II) može biti prisutan kod osobe koja je od roditelja naslijedila ili dva gena A, ili gene A i 0. Shodno tome, fenotip B (III) - kada nasljeđuje ili dva gena B, ili B i 0. Fenotip 0 ( I) pojavljuje se kod nasljeđivanja dva gena 0. Dakle, ako oba roditelja imaju krvnu grupu II (genotipovi AA ili A0), jedno od njihove djece može imati prvu grupu (genotip 00). Ako jedan od roditelja ima krvnu grupu A(II) sa mogućim genotipom AA i A0, a drugi ima B(III) sa mogućim genotipom BB ili B0, djeca mogu imati krvne grupe 0(I), A(II) , B(III) ) ili AB (!V).

Hemolitička bolest novorođenčadi (otkrivanje nekompatibilnosti krvi majke i fetusa prema AB0 sistemu);
Preoperativna priprema;
Trudnoća (priprema i praćenje trudnica sa negativnim Rh faktorom)

Priprema za studij: nije potrebna

Ako je potrebno (detekcija podtipa A2), provodi se dodatna ispitivanja pomoću specifičnih reagenasa.

Vrijeme izvođenja: 1 dan

Rezultat istraživanja:

0 (I) - prva grupa,
A (II) - druga grupa,
B (III) - treća grupa,
AB (IV) - četvrta krvna grupa.

Kada se identifikuju podtipovi (slabe varijante) grupnih antigena, rezultat se daje uz odgovarajući komentar, na primjer, „identificirana je oslabljena varijanta A2, potrebna je individualna selekcija krvi“.

Rh faktor Rh

Glavni površinski eritrocitni antigen Rh sistema, kojim se procjenjuje Rh status osobe.

Funkcije. Rh antigen je jedan od eritrocitnih antigena Rh sistema koji se nalazi na površini eritrocita. Postoji 5 glavnih antigena u Rh sistemu. Glavni (najimunogeniji) antigen je Rh (D), koji se obično naziva Rh faktor. Crvena krvna zrnca otprilike 85% ljudi nose ovaj protein, pa se klasificiraju kao Rh pozitivne (pozitivne). 15% ljudi ga nema i Rh negativno (Rh negativno). Prisustvo Rh faktora ne zavisi od pripadnosti grupi po sistemu AB0, ne menja se tokom života, ne zavisi od vanjski razlozi. Pojavljuje se u ranim fazama intrauterinog razvoja, a već se nalazi u značajnoj količini kod novorođenčeta. Određivanje Rh krvi koristi se u opštoj kliničkoj praksi prilikom transfuzije krvi i njenih komponenti, kao i u ginekologiji i akušerstvu prilikom planiranja i vođenja trudnoće.

Nekompatibilnost krvi prema Rh faktoru (Rh konflikt) tokom transfuzije krvi se uočava ako crvena krvna zrnca donora nose Rh aglutinogen, a primatelj je Rh negativan. U ovom slučaju, Rh-negativni primalac počinje proizvoditi antitijela usmjerena protiv Rh antigena, što dovodi do uništenja crvenih krvnih stanica. Transfuzije crvenih krvnih zrnaca, plazme, a posebno pune krvi od davaoca primatelju moraju strogo poštovati kompatibilnost ne samo po krvnoj grupi, već i po Rh faktoru. Prisustvo i titar antitijela na Rh faktor i druga aloimunska antitijela koja su već prisutna u krvi može se odrediti specificiranjem testa "anti-Rh (titar)".

Određivanje krvne grupe, Rh faktora i prisustva aloimunih antieritrocitnih antitijela potrebno je provesti prilikom planiranja ili tijekom trudnoće kako bi se utvrdila vjerovatnoća imunološkog sukoba između majke i djeteta, koji može dovesti do hemolitičke bolesti novorođenčeta. Pojava Rh konflikta i razvoj hemolitičke bolesti novorođenčadi moguća je ako je trudnica Rh negativna, a fetus Rh pozitivan. Ako je majka Rh +, a fetus Rh negativan, ne postoji opasnost od hemolitičke bolesti za fetus.

Hemolitička bolest fetusa i novorođenčadi- hemolitička žutica novorođenčadi, uzrokovana imunološkim sukobom između majke i fetusa zbog nekompatibilnosti antigena eritrocita. Bolest može biti uzrokovana nekompatibilnošću fetusa i majke za D-Rhesus ili ABO antigene, rjeđe postoji nekompatibilnost za druge Rhesus (C, E, c, d, e) ili M-, N-, Kell-, Duffy -, Kidd antigeni (prema statistici, 98% slučajeva hemolitičke bolesti novorođenčadi povezano je sa D - Rh antigenom). Bilo koji od ovih antigena, koji prodire u krv Rh negativne majke, uzrokuje stvaranje specifičnih antitijela u njenom tijelu. Potonji ulaze u fetalnu krv kroz placentu, gdje uništavaju odgovarajuća crvena krvna zrnca koja sadrže antigen. Predispozicija za razvoj hemolitičke bolesti novorođenčadi je poremećena propusnost placente, ponovljene trudnoće i transfuzije krvi ženi bez uzimanja u obzir Rh faktora itd. Kod ranih manifestacija bolesti imunološki sukob može uzrokovati prijevremeni porođaj ili ponovljene pobačaje.

Trenutno postoji mogućnost medicinske prevencije razvoja Rh konflikta i hemolitičke bolesti novorođenčadi. Sve Rh negativne žene tokom trudnoće treba da budu pod medicinskim nadzorom. Takođe je potrebno pratiti nivo Rh antitela tokom vremena.

Postoji mala kategorija Rh-pozitivnih osoba koje su u stanju da formiraju anti-Rh antitela. To su osobe čija crvena krvna zrnca karakterizira značajno smanjena ekspresija normalnog Rh antigena na membrani (“slabi” D, Dweak) ili ekspresija izmijenjenog Rh antigena (parcijalni D, Dpartial). U laboratorijskoj praksi ove slabe varijante D antigena se kombinuju u Du grupu, čija je učestalost oko 1%.

Primatelje koji sadrže Du antigen treba klasificirati kao Rh-negativne i treba im transfuzirati samo Rh-negativnu krv, budući da normalan D antigen može izazvati imuni odgovor kod takvih osoba. Donori sa Du antigenom kvalifikuju se kao Rh-pozitivni davaoci, jer transfuzija njihove krvi može izazvati imuni odgovor kod Rh negativnih primaoca, au slučaju prethodne senzibilizacije na D antigen, teške transfuzijske reakcije.

Nasljeđivanje Rh faktora krvi.

Zakoni nasljeđivanja zasnovani su na sljedećim konceptima. Gen koji kodira Rh faktor D (Rh) je dominantan, alelni gen d je recesivan (Rh-pozitivne osobe mogu imati DD ili Dd genotip, Rh-negativne osobe mogu imati samo dd genotip). Osoba prima po 1 gen od svakog roditelja - D ili d, i tako ima 3 opcije genotipa - DD, Dd ili dd. U prva dva slučaja (DD i Dd) test krvi na Rh faktor će dati pozitivan rezultat. Samo sa dd genotipom osoba će imati Rh negativnu krv.

Razmotrimo neke varijante kombinacije gena koji određuju prisustvo Rh faktora kod roditelja i djece

1) Otac je Rh pozitivan (homozigot, genotip DD), majka je Rh negativna (genotip dd). U ovom slučaju, sva djeca će biti Rh pozitivna (100% vjerovatnoća).
2) Otac je Rh pozitivan (heterozigot, genotip Dd), majka je Rh negativna (genotip dd). U ovom slučaju, vjerovatnoća da ćete imati dijete sa negativnim ili pozitivnim Rh je ista i jednaka je 50%.
3) Otac i majka su heterozigoti za ovaj gen (Dd), oboje su Rh pozitivni. U ovom slučaju moguće je (sa vjerovatnoćom od oko 25%) roditi dijete sa negativnim Rh.

Indikacije za analizu:

Određivanje transfuzijske kompatibilnosti;
Hemolitička bolest novorođenčadi (otkrivanje nekompatibilnosti krvi majke i fetusa prema Rh faktoru);
Preoperativna priprema;
Trudnoća (prevencija Rh konflikta).

Priprema za studij: nije potrebna.

Materijal za istraživanje: puna krv (sa EDTA)

Metoda određivanja: Filtracija uzoraka krvi kroz gel impregniran monoklonskim reagensima - aglutinacija + gel filtracija (kartice, crossover metoda).

Vrijeme izvođenja: 1 dan

Interpretacija rezultata:

Rezultat je dat u obliku:
Rh + pozitivan Rh - negativan
Kada se otkriju slabi podtipovi antigena D (Du), izdaje se komentar: „Detektovan je slab Rh antigen (Du), preporučuje se transfuzija Rh negativne krvi ako je potrebno.

Anti-Rh (aloimuna antitela na Rh faktor i druge antigene eritrocita)

Antitela na klinički najvažnije antigene eritrocita, prvenstveno na Rh faktor, što ukazuje na senzibilizaciju organizma na ove antigene.

Funkcije. Rh antitijela pripadaju takozvanim aloimunim antitijelima. Aloimuna antieritrocitna antitela (na Rh faktor ili druge eritrocitne antigene) pojavljuju se u krvi pod posebnim uslovima - nakon transfuzije imunološki nekompatibilne krvi donora ili tokom trudnoće, kada fetalna crvena krvna zrnca nose očinske antigene koji su imunološki strani majci prodiru kroz placentu u krv žene. Neimuni Rh negativni ljudi nemaju antitijela na Rh faktor. U Rh sistemu postoji 5 glavnih antigena, od kojih je glavni (najimunogeniji) antigen D (Rh), koji se obično naziva Rh faktor. Pored antigena Rh sistema, postoji niz klinički važnih antigena eritrocita na koje može doći do senzibilizacije, što može uzrokovati komplikacije tokom transfuzije krvi. Metoda skrininga krvi na prisustvo aloimunih antieritrocitnih antitela, koja se koristi u INVITRO-u, omogućava da se pored antitela na Rh faktor RH1(D) detektuju i aloimuna antitela na druge antigene eritrocita u test serumu.

Gen koji kodira Rh faktor D (Rh) je dominantan, alelni gen d je recesivan (Rh-pozitivne osobe mogu imati DD ili Dd genotip, Rh-negativne osobe mogu imati samo dd genotip). U trudnoći Rh negativne žene sa Rh pozitivnim fetusom moguć je razvoj imunološkog konflikta između majke i fetusa zbog Rh faktora. Rh konflikt može dovesti do pobačaja ili razvoja hemolitičke bolesti fetusa i novorođenčadi. Stoga, određivanje krvne grupe, Rh faktora, kao i prisutnost aloimunih antieritrocitnih antitijela treba provoditi prilikom planiranja ili tokom trudnoće kako bi se utvrdila vjerovatnoća imunološkog konflikta između majke i djeteta. Pojava Rh konflikta i razvoj hemolitičke bolesti novorođenčadi moguća je ako je trudnica Rh negativna, a fetus Rh pozitivan. Ako majka ima pozitivan Rh antigen, a fetus negativan, sukob oko Rh faktora se ne razvija. Incidencija Rh inkompatibilnosti je 1 slučaj na 200-250 porođaja.

Hemolitička bolest fetusa i novorođenčadi je hemolitička žutica novorođenčadi, uzrokovana imunološkim sukobom između majke i fetusa zbog nekompatibilnosti antigena eritrocita. Bolest je uzrokovana nekompatibilnošću fetusa i majke za D-Rhesus ili ABO (grupe) antigene, rjeđe postoji nekompatibilnost za druge Rhesus (C, E, c, d, e) ili M-, M-, Kell- , Duffy-, Kidd antigeni. Bilo koji od ovih antigena (obično D-Rh antigen), koji prodire u krv Rh negativne majke, uzrokuje stvaranje specifičnih antitijela u njenom tijelu. Prodor antigena u krvotok majke olakšavaju infektivni faktori koji povećavaju propusnost posteljice, manje ozljede, krvarenja i druga oštećenja posteljice. Potonji ulaze u fetalnu krv kroz placentu, gdje uništavaju odgovarajuća crvena krvna zrnca koja sadrže antigen. Predispozicija za nastanak hemolitičke bolesti novorođenčadi je poremećena propusnost placente, ponovljene trudnoće i transfuzije krvi ženi bez uzimanja u obzir Rh faktora itd. Kod ranih manifestacija bolesti imunološki sukob može uzrokovati prijevremeni porođaj ili spontani pobačaj.

Tokom prve trudnoće sa Rh pozitivnim fetusom, trudnica sa Rh "-" ima 10-15% rizik od razvoja Rh konflikta. Dolazi do prvog susreta majčinog tijela sa stranim antigenom, akumulacija antitijela se odvija postepeno, počevši od otprilike 7-8 sedmice trudnoće. Rizik od inkompatibilnosti raste sa svakom sljedećom trudnoćom s Rh pozitivnim fetusom, bez obzira na to kako je završila (vještački pobačaj, pobačaj ili porođaj, operacija vanmaterične trudnoće), krvarenjem tijekom prve trudnoće, ručno odvajanje placente, kao i ako je porođaj obavljen carskim rezom ili je praćen značajnim gubitkom krvi. s transfuzijama Rh-pozitivne krvi (ako su provedene čak iu djetinjstvu). Ako se naredna trudnoća razvije s Rh negativnim fetusom, nekompatibilnost se ne razvija.

Sve trudnice sa Rh "-" stavljaju se na posebnu registraciju u prenatalnu ambulantu i vrši se dinamičko praćenje nivoa Rh antitela. Prvi put se test na antitela mora uraditi od 8. do 20. nedelje trudnoće, a zatim periodično proveravati titar antitela: jednom mesečno do 30. nedelje trudnoće, dva puta mesečno do 36. nedelje i jednom nedeljno do 36. sedmice. Prekid trudnoće na manje od 6-7 nedelja ne može dovesti do stvaranja Rh antitela kod majke. U ovom slučaju, tokom sljedeće trudnoće, ako fetus ima pozitivan Rh faktor, vjerovatnoća razvoja imunološke nekompatibilnosti ponovno će biti 10-15%.

Testiranje na aloimuna antieritrocitna antitela je takođe važno u opštoj preoperativnoj pripremi, posebno za osobe koje su prethodno primale transfuziju krvi.

Indikacije za analizu:

Trudnoća (prevencija Rh konflikta);
Praćenje trudnica sa negativnim Rh faktorom;
Pobačaj;
Hemolitička bolest novorođenčadi;
Priprema za transfuziju krvi.

Priprema za studij: nije potrebna.
Materijal za istraživanje: puna krv (sa EDTA)

Metoda određivanja: aglutinacija + metoda gel filtracije (kartice). Inkubacija standardno tipiziranih eritrocita sa test serumom i filtracija centrifugiranjem smjese kroz gel impregniran polispecifičnim antiglobilinskim reagensom. Aglutinirana crvena krvna zrnca otkrivaju se na površini gela ili u njegovoj debljini.

Metoda koristi suspenzije eritrocita iz grupe 0(1) donora, tipiziranih prema antigenima eritrocita RH1(D), RH2(C), RH8(Cw), RH3(E), RH4(c), RH5(e), KEL1 ( K), KEL2(k), FY1(Fy a) FY2(Fy b), JK (Jk a), JK2(Jk b), LU1 (Lu a), LU2 (LU b), LE1 (LE a), LE2 (LE b), MNS1(M), MNS2 (N), MNS3 (S), MNS4(s), P1 (P).

Vrijeme izvođenja: 1 dan

Kada se otkriju aloimuna antieritrocitna antitijela, vrši se njihovo polukvantitativno određivanje.
Rezultat se daje u titrima (maksimalno razrjeđenje seruma pri kojem je još uvijek otkriven pozitivan rezultat).

Mjerne jedinice i faktori konverzije: U/ml

Referentne vrijednosti: negativne.

Pozitivan rezultat: Preosjetljivost na Rh antigen ili druge antigene eritrocita.

Krvne grupe.

Krvne grupe- normalne imunogenetičke karakteristike krvi koje omogućavaju da se ljudi grupišu u određene grupe prema

sličnost krvnih antigena.

Znanja o krvnim grupama su u osnovi doktrine transfuzije, transplantacije organa i tkiva i sudske medicine.

Antigeni - tvari koje ulaze u tijelo parenteralno i izazivaju specifičnu imunološku reakciju, koja se očituje u proizvodnji specifičnih antitijela.

Antitela - proteini globulinske frakcije krvnog seruma, koji nastaju kao odgovor na uvođenje antigena i specifično stupaju u interakciju s antigenima koji su uzrokovali njihovo stvaranje.

U njemu se nalazi više od 250 izoantigena genetske veze. U klinici je važno sljedeće:

1. AVO sistem

3. Luteranski

4. Kell-Cellano

AVO sistem.

Sistematsko proučavanje krvnih grupa počelo je otkrićem krvnih grupa ABO sistema od strane Landsteinera 1901. godine.

U ovom sistemu, ljudska crvena krvna zrnca su podijeljena prema principu da imaju tri različita antigena svojstva: A, B i AB (A+B). Antigena svojstva "O" ne postoje; u ekstremnim slučajevima možemo govoriti o svojstvu H, ali specifičnim antitijelima anti-N imaju vrlo mali klinički značaj. Dakle, krvna grupa osobe određena je antigenskim svojstvima crvenih krvnih zrnaca.

Po pravilu, u krvi novorođenčeta nema ABO antitijela. Tokom prve godine života dete razvija antitela na one antigene kojih nema u njegovim sopstvenim crvenim krvnim zrncima (izoantigeni, anti-A, anti-B). Nakon toga, serum, na primjer, grupe O, sadrži anti-A i anti-B antitijela, a serum grupe AB ne sadrži ova antitijela.

Sada je utvrđeno da crijeva sadrže bakterije koje nose iste antigene determinante kao i crvena krvna zrnca: takozvane heterofilne antigene. Većina antitela ABO sistema su ovog tipa

imunoglobulini klase M. Posjeduju 10 mjesta vezanja antigena, kompletna su antitijela sposobna da izazovu aglutinaciju crvenih krvnih zrnaca.

Nasljeđivanje krvnih grupa.

Diploidni set hromozoma svake osobe sadrži 2 od tri alelna gena - A, B i 0 (H), koji kodiraju svojstva krvnih elemenata.

Pokazalo se da su svojstva A i B dominantna, pa je krvna grupa 0 fenotipski izražena samo kod homozigota. S obzirom da AO i BO genotipovi mogu proizvesti fenotipove A i B, roditelji s jednom od ovih krvnih grupa mogu imati dijete s krvnom grupom 0. Aleli A i B su u kodominantnom odnosu: u prisustvu oba ova gena , svaki od njih je izražen, a ne u interakciji jedno s drugim.

Poznavajući ove principe nasljeđivanja, možete dobiti neke informacije o roditeljima na osnovu krvne grupe djeteta. U sudsko-medicinskoj praksi opšte je prihvaćeno da muškarac sa grupom AB ne može biti otac deteta sa krvnom grupom 0. Što se više faktora grupe uzme u obzir, to se pouzdanije može isključiti očinstvo (trenutno je verovatnoća da 99% može se postići).

Krvna grupaA podijeljeni u podgrupe A1 i A2. Glavna razlika između ovih podgrupa je da kada se pomiješaju sa anti-A serumom, A1 crvena krvna zrnca aglutiniraju brže i u većoj mjeri od A2. Na crvenim krvnim zrncima grupe A2 ima više H-struktura nego na crvenim krvnim zrncima A1. Otprilike 80% ljudi s krvnom grupom A pripada A1 podgrupi, preostalih 20% pripada A2 podgrupi. Ova podjela nema praktičan značaj za transfuziju krvi, jer su transfuzijske reakcije između podgrupa A1 i A2 slabo izražene i rijetke. Geografska distribucija krvnih grupa.

Više od 40% stanovnika Centralna Evropa imaju krvnu grupu A, otprilike 40% ima grupu 0; 10% ili više je grupa B, a oko 6% je grupa AB. 90% Indijanaca ima grupu 0. Više od 20% stanovništva Centralna Azija imaju krvnu grupu B. Na osnovu podataka o prisutnosti i povezanosti različitih krvnih grupa u pojedinim područjima zemaljske kugle, antropolozi mogu izvući zaključke o porijeklu i miješanju naroda.

Rezus (Rh) sistem.

Većina Evropljana je Rh pozitivna (Rh+). To znači da ako se njihova krv pomiješa sa serumom zečeva koji su prethodno imunizirani crvenim krvnim zrncima rezus majmuna, doći će do aglutinacije. Ako ne dođe do aglutinacije, tada se krv smatra Rh negativnom. Kada se Rh-pozitivna krv transfuzuje u Rh-negativnog primaoca, aglutinini u Rh + eritrocite se postepeno formiraju u telu primaoca tokom nekoliko meseci. Rh faktor eritrocita.

Interakcija eritrocita sa antirezus serumom je posljedica prisustva u različitim oblastima membrane nekoliko antigena (nepotpuni antigeni). Najvažniji od njih su C, D, E, c, e. Najizraženija antigena svojstva ima antigen D. Radi jednostavnosti, krv koja sadrži D-eritrocite naziva se Rh-pozitivna (Rh + ili Rh); a krv bez takvih crvenih krvnih zrnaca je Rh-negativna (Rh - ili rh); 85% Evropljana ima Rh+ krv; 15% - Rh -. Rh+ fenotip može odgovarati DD ili Dd genotipu; a za Rh fenotip - samo dd genotip.

Jedna od razlika između Rh i ABO sistema, koja ima važan praktični značaj, je ta što se aglutinini ABO sistema uvijek nalaze u ljudskoj krvi nakon prvih mjeseci života, dok se Rh aglutinini pojavljuju tek nakon senzibilizacije: kontakta Rh. -negativna osoba sa Rh -antigenima. Stoga prva transfuzija Rh-inkompatibilne krvi obično ne izaziva očitu reakciju. Reakcije antigen-antitijelo javljaju se samo pri ponovljenoj transfuziji takve krvi.

Druga razlika između ova dva sistema je u tome što su većina Rh aglutinina nepotpuna imunoglobulinska G antitijela, čija je veličina, za razliku od veličine kompletnih ABO aglutinina, dovoljno mala da mogu prodrijeti kroz placentnu barijeru.

Rh inkompatibilnost i trudnoća. Tokom trudnoće, male količine crvenih krvnih zrnaca mogu prodrijeti iz krvi Rh-pozitivnog fetusa u krv Rh-negativne majke. To dovodi do proizvodnje aglutinina protiv Rh+ - crvenih krvnih zrnaca. Obično samo tokom porođaja velika količina (10-15 ml) fetalnih crvenih krvnih zrnaca ulazi u krv majke. Budući da se titar antitijela u krvi majke povećava relativno sporo (tokom nekoliko mjeseci), komplikacije se obično ne javljaju tokom prve trudnoće. Međutim, tokom druge trudnoće Rh negativne žene sa Rh-pozitivnim fetusom, titar antitela u njenoj krvi može dostići tako visok nivo da kao rezultat prodiranja aglutinina kroz placentu, fetalna crvena krvna zrnca počinju da se uništavaju. To dovodi do ozbiljnih poremećaja u funkcionisanju fetusa, pa čak i do intrauterine smrti (erythroblastosis fetalis). Formiranje antitijela u tijelu Rh negativne žene može se ograničiti ili potpuno potisnuti takozvanom anti-D profilaksom. Ako se odmah nakon porođaja (uključujući prijevremeni porođaj) ženi daju anti-D-globulin, tada će se Rh-pozitivna crvena krvna zrnca koja su ušla u njezinu krv uništiti i time će se eliminirati faktor koji uzrokuje stvaranje antitijela. imunološki sistem. Reakcije antigen-antitijelo mogu se javiti i kada su majka i fetus nekompatibilni na osnovu karakteristika drugih grupa (posebno, ABO), ali su takve reakcije obično blage.

Transfuzija krvi.

Pravila transfuzije krvi:

1. Transfuzija krvi izogrupe.

2. Određivanje grupne pripadnosti prema ABO sistemu.

3. Određivanje Rh krvi.

4. Određivanje individualne kompatibilnosti krvi.

5. Provođenje biološkog testa.

Određivanje krvne grupe prema ABO sistemu.

1. Metoda standardni serumi - koriste se standardni serumi prve, druge i treće krvne grupe, koji sadrže antitijela odgovarajuće grupe: dakle, antigeni se određuju u krvi za ispitivanje.

2. Metoda standardna crvena krvna zrnca - koriste se standardna crvena krvna zrnca druge i treće grupe, koja sadrže odgovarajuće antigene (A, B); stoga se antitijela određuju u krvi koja se testira.

3. Metoda zolikloni - koriste se anti-A (alfa) kolikloni i

anti-B (beta), to su monoklonska antitijela, otkrivamo u krvi

antigeni. Određivanje Rh krvi.

1. Metoda serumi protiv rezusa - Koristi se anti-Rh serum koji se nanosi na zid epruvete, nakon čega slijedi kap krvi, epruveta se ljulja nekoliko minuta, zatim se dodaje kap fiziološkog rastvora kako bi se eliminisala lažna aglutinacija. Ako postoji aglutinacija, ona je Rh pozitivna; u odsustvu aglutinacije - Rh negativan.

2. Metoda zolikloni - zolikon anti-D-cynep Određivanje individualne kompatibilnosti krvi,

1. Krv davaoca se pomeša sa serumom primaoca. Ako je prisutna aglutinacija, krv je nekompatibilna; ako je odsutan - kompatibilan.

2. Krv primaoca se pomeša sa serumom davaoca. Ocjena

rezultati su slični. Izvođenje biološkog testa.

Prvih 45 ml krvi se transfuzira u frakcijama: nakon 3 minute po 15 ml i prati se stanje pacijenta. Fenomeni nekompatibilnosti:

osjećaj vrućine po cijelom tijelu, bljedilo kože, mali i česti puls, sniženi krvni pritisak; bol u trbuhu, glavi, donjem dijelu leđa; urin je crveno-braon boje: "mesna smetlja".

Ovaj sistem je glavni koji određuje kompatibilnost ili nekompatibilnost transfuzirane krvi. Uključuje dva genetski određena važna antigena: A i B - i dvije vrste antitijela na njih, aglutinine a i b. Kombinacije aglutinogena i aglutinina određuju 4 grupe ABO sistema. Ovaj sistem je jedini u kojem neimuni ljudi imaju prirodna antitela na antigen koji nedostaje u svojoj plazmi. Aglutinogen A kod većine ljudi je dobro izražen (ima veliku antigenu moć): sa anti-A antitelima (a) daje izraženu reakciju aglutinacije eritrocita. Kod otprilike 12% osoba grupa A(11) i AB(IV) antigen ima slaba antigena svojstva, označava se kao A2 antigen. Dakle, postoji grupa antigena A: A1 (jaki) i slabiji A2, A3, A4 itd. Pri određivanju krvnih grupa treba imati na umu postojanje slabih A antigena, jer crvena krvna zrnca sa takvim antigenima mogu da daju samo kasna i slaba aglutinacija, što može dovesti do grešaka. Slabe varijante B antigena su vrlo rijetke. Antitela ABO sistema a (anti-A) i b (anti-B) su normalno svojstvo krvne plazme koje se kvalitativno ne menja tokom života osobe, a i b su potpuna, hladna antitela. U većini slučajeva se ne nalaze kod novorođenčadi i pojavljuju se tokom prva tri mjeseca života ili čak godinu dana. Grupni aglutinini dostižu potpuni razvoj do 18. godine, a u starijoj dobi njihov titar (nivo) opada, što se opaža i kod stanja imunodeficijencije. Pored normalno postojećih (prirodnih) antitijela grupe a i b, u nekim slučajevima nastaju imuna antitijela anti-A i anti-B. Većina zajednički uzrok Ovo je trudnoća u kojoj majka i fetus imaju različite krvne grupe, češće ako je majka grupa 1(0), fetus je 11(A) ili W(B). Određivanje krvne grupe je neophodno za kompatibilnu transfuziju krvi. U ovom slučaju potrebno je pridržavati se pravila: crvena krvna zrnca donora ne bi trebala sadržavati antigen koji odgovara antitijelima primaoca, odnosno A i a, B i c, jer će u suprotnom doći do masovnog uništenja ubrizgane crvene krvi ćelije pacijentovim antitijelima - hemoliza, koja može dovesti do smrti primaoca. Grupna antitijela donora se mogu zanemariti, jer su razrijeđena plazmom primaoca. Stoga se krv tipa O(I), koja ne sadrži aglutinogene, može transfuzirati osobama bilo koje krvne grupe. Osobe sa krvnom grupom 0(1) smatraju se „univerzalnim davaocima“. Krv grupe A(P) može se transfuzirati primaocima grupe A(P) i grupe AB(IV), koji nemaju aglutinine u plazmi. Krv grupe B(III) može se transfuzirati osobama sa grupom B(III) i AB(IV).

Određivanje krvnih grupa ABO sistema vrši se sledećim metodama.

I. Određivanje krvne grupe pomoću standardnih izohemaglutinirajućih seruma. Ovom metodom se utvrđuje prisustvo ili odsustvo aglutinogena u krvi i na osnovu toga se donosi zaključak o grupnoj pripadnosti krvi koja se ispituje.

2. Određivanje krvne grupe unakrsnom metodom, odnosno istovremeno korištenjem standardnih izohemaglutinirajućih seruma i standardnih eritrocita. Ovom metodom, kao i prvom, utvrđuje se prisustvo ili odsustvo aglutinogena, a uz to se pomoću standardnih crvenih krvnih zrnaca utvrđuje prisustvo ili odsustvo grupnih aglutinina.

3. Određivanje krvne grupe pomoću monoklonskih antitela (COLICLONS).

GREŠKE U ODREĐIVANJU KRVNIH GRUPA

Tehničke greške. Kršenje navedenih pravila za određivanje krvnih grupa može dovesti do pogrešne procjene rezultata reakcije. Odstupanja od pravila mogu uključivati:

Upotreba podstandardnih standardnih seruma ili crvenih krvnih zrnaca ( istekao rok trajanja, kontaminacija njima, sušenje seruma);

Miješanje uzoraka krvi;

Netačno postavljanje standardnih seruma ili focita u police;

Nepravilan redosled nanošenja standardnih reagensa na ploču;

Netačan odnos seruma i crvenih krvnih zrnaca (ne 10:1);

Studija na temperaturi manjoj od 15°C (javlja se hladna aglutinacija) ili više od 25°C (aglutinacija se usporava);

Nepoštivanje vremena potrebnog za reakciju (5 minuta);

Nemojte dodavati fiziološki rastvor nakon čega sledi ljuljanje ploče;

Nemojte koristiti kontrolnu reakciju sa serumom grupe ABo(IV);

Upotreba prljavih ili mokrih pipeta, štapića, ploča.

U svim slučajevima nejasnih ili upitnih rezultata potrebno je ponovno odrediti krvnu grupu unakrsnim testiranjem pomoću standardnih seruma iz drugih serija.

Greške povezane s biološkim karakteristikama krvi koja se testira.

Pogrešna identifikacija grupa A 2 i A 2 B. Crvena krvna zrnca sa slabim antigenom A formiraju male, sporo nastajuće aglutinate sa antiserumom. Reakcija se može uzeti u obzir kao negativna, tj. grupa A 2 je greškom registrovana kao O(1), a A 2 B kao B(III). Rizik od takve greške je posebno visok pri istovremenom prisustvu tehničkih grešaka (omjer seruma i crvenih krvnih zrnaca je 10:1, temperatura je iznad 25°C, rezultati se uzimaju u obzir prije 5 minuta).

Greške povezane sa prisustvom nespecifične aglutinacije ispitivanih eritrocita. Ovaj fenomen se opaža kod pacijenata malignih tumora, leukemija, sepsa, opekline, ciroza jetre, autoimuna hemolitička anemija i uzrokovana je disproteinemijom. Detektuje prisustvo nespecifične aglutinacije kontrolom sa serumom ABO (IV) grupe. U tim slučajevima potrebno je ponovo odrediti članstvo u grupi metodom poprečnog presjeka. U kapi gdje je uočena aglutinacija možete dodati fiziološki rastvor zagrejan na 37°C. Ako je potrebno, možete oprati crvena krvna zrnca koja se testiraju toplom (37°C) fiziološkom otopinom i ponovo odrediti krvnu grupu.

Greške povezane s prisustvom ekstraaglutinina. U krvnom serumu osoba grupa A2(P) i A2B(IV) antitijela na A1 antigen - a1 - nalaze se u približno 1% slučajeva. Ovo otežava određivanje krvne grupe unakrsnom metodom, jer serum takvih osoba aglutinira standardna crvena krvna zrnca grupe A(P), odnosno manifestuje se kao serum grupe 0(1).

Kod nekih bolesti uočava se smanjenje aglutinacije eritrocita, posebno grupe A(P).

U stanjima imunodeficijencije, stariji ljudi doživljavaju smanjenje nivoa grupnih aglutinina.

U svim slučajevima dobivanja upitnog rezultata, određivanje krvne grupe treba ponoviti metodom poprečnog presjeka uz korištenje seruma veće aktivnosti.

18. Antigeni Rh sistema. Grupe Rh sistema. Klinički značaj. Metode određivanja Rh antigena i moguće greške.

Rh antigeni su drugi po važnosti u transfuzijskoj praksi nakon ABO krvnih grupa.U periodu aktivnog uvođenja transfuzije krvi u ordinaciju značajno se povećao broj posttransfuzijskih komplikacija nakon ponovljenih transfuzija krvi kompatibilne sa ABO antigenima. Rh sistem uključuje šest antigena, za označavanje kojih se paralelno koriste dvije nomenklature: Wiener (Rh 0, rh", rh", Hr 0, hr", hr"); Fischer i Reis (D, C, E, d, c, e).

Rh 0 - D, rh" - C, rh" - E, Hr 0 - d, hr" - c, hr" - e.

Pošto je Rho(D) antigen najaktivniji u ovom sistemu, naziva se Rh faktor. U zavisnosti od prisustva ili odsustva ovog faktora ljudi se dele na Rh-pozitivne (Rh+) i Rh-negativne (Rh-). Ova podjela je prihvaćena samo u odnosu na primaoce. Antigeni rh"(C) i rh"(E) su manje aktivni od Rho(D), ali se antitela na njih mogu proizvesti i kod ljudi koji ne sadrže antigene C i E u svojim crvenim krvnim zrncima. Stoga su zahtjevi za crvenim krvnim zrncima od Rh negativnih donora stroži. Crvena krvna zrnca ne bi trebala sadržavati ne samo antigen D, već i C i E. Antigene Hro(d), hr"(c), hr"(e) karakteriše niska aktivnost, iako hr"(c) antitijela mogu uzrokovati izoimunološke konflikti.1-3% Rh pozitivnih osoba ima slabu varijantu D - D antigena u svojim eritrocitima, što određuje prisustvo male, upitne aglutinacije prilikom određivanja Rh faktora. U tim slučajevima, Rh faktor krvi primaoca ili trudnice je označen kao Rh negativan (Rh-), a Rh faktor krvi davaoca je označen kao Rh pozitivan (Rh+). Transfuzija krvi sa antigenom D Rh-negativnim primaocima nije dozvoljena. Rh antigeni se formiraju u 8-10 sedmici embriogeneze, a njihova antigenost može čak i premašiti aktivnost antigena kod odraslih. Rh sistem, za razliku od ABO sistema, nema prirodna antitela. Anti-Rhesus antitijela nastaju tek nakon imunizacije Rh-negativnog organizma kao rezultat transfuzije Rh-pozitivne krvi ili trudnoće sa Rh-pozitivnim fetusom. U tijelu senzibiliziranih osoba, antitijela na Rh antigene perzistiraju nekoliko godina, ponekad i cijeli život. U većini slučajeva, titar anti-Rhesus antitijela se postepeno smanjuje, ali opet naglo raste kada Rh-pozitivna krv ponovo uđe u tijelo. Rh antitijela se razlikuju po specifičnosti (anti-D, anti-III C, itd.) i po serološkim svojstvima (potpuna i nepotpuna). Potpuna antitijela uzrokuju aglutinaciju crvenih krvnih zrnaca u fiziološkom okruženju na sobnoj temperaturi. Da bi došlo do aglutinacije pod uticajem nekompletnih antitela, potrebni su posebni uslovi: povišena temperatura, koloidni medij (želatin, protein surutke). Kompletna antitijela (IgM) se sintetiziraju na početku imunološke reakcije i ubrzo nestaju iz krvi. Nepotpuna antitijela (IgG, IgA) se pojavljuju kasnije, dugo se sintetiziraju i uzrokuju razvoj hemolitičke bolesti kod novorođenčadi, prolazeći kroz placentu i oštećuju fetalne stanice.

Određivanje Rh krvi

Način određivanja Rh faktora ovisi o obliku Rh antitijela u standardnom serumu i načinu njegove pripreme. Uz antirezus serum je priloženo uputstvo koje opisuje metodu za koju je ova serija seruma namijenjena.

Za svaku studiju mora se postaviti kontrola kako bi se provjerila specifičnost i aktivnost anti-Rhesus seruma. Za kontrolu se koriste standardni Rh-pozitivni eritrociti grupe 0(1) ili iste grupe kao i krv koja se testira, a standardni Rh-negativni eritrociti moraju biti iste grupe kao i krv koja se testira.

Prilikom određivanja Rh statusa pomoću dvije serije standardnih seruma u slučajevima kada se koriste različitim metodama, rezultat se uzima u obzir kao tačan ako se poklapa u obje serije studija nakon provjere kontrolnih uzoraka koji potvrđuju specifičnost i aktivnost svake serije anti -Rhesus serum, odnosno u odsustvu aglutinacije sa standardnim Rh-negativnim eritrocitima iste grupe i prisutnosti aglutinacije sa standardnim Rh-pozitivnim eritrocitima iste grupe ili grupe 0(1) iu kontrolnim uzorcima bez anti-Rhesus seruma ( reagens). Ako se pri određivanju Rh statusa uoči slaba ili upitna reakcija, potrebno je ponovno ispitati krv osobe istom i drugom serijom antirezus seruma i preporučljivo je uključiti serum koji sadrži kompletna antitijela. Ako sve serije seruma koji sadrže nepotpuna antitijela daju i slabu ili upitnu reakciju, a kod potpunih antitijela reakcija je negativna, to znači da crvena krvna zrnca sadrže slabu vrstu rezus antigena, tzv. faktor D u. U tim slučajevima, Rh-tip krvi pacijenta ili trudnice je indiciran kao Rh-negativan (Rh-), a Rh-tip krvi davaoca kao Rh-pozitivan (Rh+), čime se sprječava transfuzija njegove krvi na Rh-negativne primaoce.

Određivanje Rh faktora se također može izvršiti pomoću sljedećih metoda.

Određivanje Rh faktora Rh 0 (D) reakcijom konglutinacije pomoću želatine (u epruveti zagrijanoj na 46-48 °C).

Određivanje Rh faktora Rho(D) reakcijom konglutinacije u serumskom mediju na zagrijanoj ravni.

Određivanje Rh faktora Rh 0 (D) reakcijom aglutinacije u fiziološkom mediju u malim epruvetama. Reakcija aglutinacije u fiziološkom okruženju pogodna je samo za rad sa serumom koji sadrži kompletna Rh antitijela.

Određivanje Rh faktora Rh 0 (D) korištenjem monoklonskih antitijela.

Određivanje Rh faktora Rho(D) korištenjem indirektnog Coombsovog testa.

19 Anemija. Klasifikacija i kratak opis. Etiologija i patogeneza anemije. Anemija (od grčkog anemija - nedostatak krvi) je velika grupa bolesti koje karakterizira smanjenje količine hemoglobina ili hemoglobina i crvenih krvnih stanica po jedinici volumena krvi. Anemija je različita po etiologiji, mehanizmima razvoja, kliničkoj i hematološkoj slici, pa ih ima mnogo razne klasifikacije, ali nisu dovoljno savršeni. L. I. Idelson je predložio radnu klasifikaciju anemije za kliničare: 1) akutna posthemoragijska anemija; 2) anemija zbog nedostatka gvožđa; 3) anemija povezana sa poremećenom sintezom ili upotrebom porfirina (sideroblastična); 4) anemija povezana sa poremećenom sintezom DNK i RNK (megaloblastna); 5) hemolitička anemija; 6) anemija povezana sa inhibicijom proliferacije ćelija koštane srži (hipoplastična, aplastična); 7) anemija povezana sa zamjenom hematopoetske koštane srži tumorskim procesom (metaplastični).

Anemija može biti kao nezavisna bolest, dakle prateći simptom ili komplikacija određenih unutrašnjih bolesti, infektivnih i onkološke bolesti. Postoje multifaktorske anemije, odnosno mešovitog porekla, na primer: hemolitička anemija sa nedostatkom gvožđa, aplastična anemija sa hemolitičkom komponentom itd.

U zavisnosti od:

1) vrijednosti indikatora boje razlikuju anemiju:

Normohrom (indeks boja 0,9-1,1);

Hipohromna (indeks boje manji od 0,85);

Hiperhromni (indeks boja veći od 1,15);

2) prosječni prečnik crvenih krvnih zrnaca:

Normocitni (prosječni prečnik eritrocita 7,2-7,5 µm)

mikrocitni (prosječni promjer crvenih krvnih zrnaca je manji od 6,5 mikrona),

Makrocitni (prosječni promjer crvenih krvnih zrnaca je veći od 8,0 mikrona),

Megalocitni (prosječni prečnik eritrocita je veći od 12 mikrona);

3) prosječni volumen eritrocita u femtolitrima (fl, 1 fl je jednak 1 mikronu 3):

Normocitni (prosječni volumen eritrocita 87±5 fL);

mikrocitni (prosječni volumen crvenih krvnih zrnaca manji od 80 fL);

Makrocitni (prosječni volumen crvenih krvnih zrnaca je veći od 95 fL);

4) nivo retikulocita u perifernoj krvi.

Regenerativno (broj retikulocita 0,5-5%);

Hiperregenerativno (broj retikulocita je veći od 5%);

Hipo- i aregenerativni (broj retikulocita je smanjen ili odsutan, uprkos teškoj anemiji).

Nivo retikulocita je pokazatelj regenerativne funkcije koštane srži u odnosu na eritropoezu.

Normohromne anemije uključuju akutne posthemoragijske (u prvim danima nakon gubitka krvi), hipo- i aplastične, nesferocitne hemolitičke, autoimune hemolitičke, metaplastične (sa leukemijom, mijelomom itd.), kao i anemiju koja se razvija s endokrinim poremećajima (hipofunkcija). nadbubrežne žlijezde), bolesti bubrega, kronične infekcije.

Hipohromne anemije uključuju nedostatak gvožđa, sideroblastne, neke mijelotoksične i hemolitičke (talasemija).

Nedostatak B12-(folata) i neke hemolitičke anemije su hiperhromne (nasljedna mikrosferocitoza, ako među crvenim krvnim zrncima u razmazu prevladavaju mikrosferociti). Ponekad vitamin B12 -deficitarna anemija može biti normohromna.

Normocitne uključuju akutnu posthemoragijsku, aplastičnu, autoimunu hemolitičku anemiju, itd.

Mikrocitna anemija uključuje nedostatak željeza i sideroblastnu anemiju, makrocitna anemija uključuje anemiju nedostatka vigamina B12 (folata), itd.

Regenerativne anemije uključuju posthemoragijsku anemiju; hiperregenerativna - hemolitička anemija, posebno stanje nakon hemolitičke krize; hipo- i aregenerativna - hipoplastična, aplastična anemija.

Koštana srž reaguje na razvoj nedostatka gvožđa, hemolitičke anemije sa iritacijom i hiperplazije crvenih klica. Kod hipoplastične anemije dolazi do progresivnog pada eritropoeze do njenog potpunog iscrpljivanja.

20.Laboratorijska dijagnostika anemije zasićene i gvožđem nezasićene. Anemija zbog nedostatka gvožđa. Vrste nedostatka gvožđa. Laboratorijski testovi koji odražavaju nedostatak gvožđa u organizmu. Slika periferne krvi i koštane srži u IDA. Laboratorijska dijagnoza sideroblastne anemije. Metabolizam i uloga gvožđa u organizmu

Gvožđe je od velikog značaja za organizam, deo je hemoglobina, mioglobina i respiratornih enzima. Raspoređuje se na osnovna sredstva.

Fond za hemoglobin. Gvožđe u hemoglobinu čini 60-65% ukupnog sadržaja gvožđa u telu.

Fond za hitne slučajeve. Ovo je željezo feritina i hemosiderina, koji se talože u jetri, slezeni, koštanoj srži i mišićima. Čini 30-40% nivoa gvožđa u telu. Feritin je u vodi rastvorljiv kompleks feri gvožđa i proteina apoferitina, koji sadrži 20% gvožđa. To je labilan dio rezervnog fonda željeza. Po potrebi se lako koristi za potrebe eritropoeze. Hemosiderin je protein nerastvorljiv u vodi, sličan po sastavu feritinu, ali sadrži veću količinu željeza - 25-30%. To je stabilan, čvrsto fiksiran dio rezervi gvožđa u tijelu.

Transportni fond predstavlja gvožđe vezano za transportni protein transferin. Čini 1% sadržaja gvožđa u telu.

Tkivni fond predstavljaju željezo, enzimi koji sadrže željezo (citokromi, peroksidaza itd.), mioglobin. Čini 1% sadržaja gvožđa u telu.

Ukupan sadržaj gvožđa u organizmu odraslih je 4-5 g. U organizam ulazi hranom. Sadrži u životinjskim proizvodima i biljnog porijekla(meso, posebno govedina, džigerica, jaja, mahunarke, jabuke, suve kajsije itd.). Gvožđe se puno bolje apsorbira iz životinjskih proizvoda nego iz biljnih, budući da se u njima nalazi u obliku hema. Tako se 20-25% apsorbira iz mesa, 11% iz ribe, biljnih proizvoda- 3-5% gvožđa koje sadrže. Pospješuje se apsorpcija željeza askorbinska kiselina, organske kiseline (limunska, jabučna, itd.), inhibiraju apsorpciju tanina, visok sadržaj masti u ishrani. Apsorpcija gvožđa iz prehrambenih proizvoda ograničeno. Dnevno se apsorbira 2-2,5 mg željeza; kratko vrijeme nakon jakog krvarenja može se apsorbirati do 3 mg željeza. Glavna količina željeza se apsorbira u duodenumu i u početnom dijelu jejunum. Mala količina gvožđa može se apsorbovati u svim delovima tankog creva.

Apsorpcija gvožđa se odvija u dve faze: 1) crevna sluzokoža zahvata gvožđe koje se daje hranom; 2) gvožđe iz crevne sluzokože prelazi u krv, puni se na transferin i dostavlja na mesta upotrebe i depo. Transferin takođe prenosi gvožđe iz svojih fondova i ćelija fagocitnog mononuklearnog sistema, u kojima dolazi do razaranja crvenih krvnih zrnaca, u koštanu srž, gde se delimično koristi za sintezu hemoglobina, a delom se deponuje u obliku rezervi gvožđa, kao i na druga skladišta željeza. Tipično, 1/3 transferina je vezana za gvožđe. Zove se vezani transferin ili serumsko željezo. Normalni nivoi gvožđa u serumu kod muškaraca i žena su 13-30 i 12-25 µmol/l, respektivno. Dio transferina koji nije vezan za željezo naziva se slobodni transferin ili nezasićeni, latentni serumski kapacitet vezivanja željeza. Maksimalna količina gvožđa koju transferin može vezati pre zasićenja označava se kao ukupni kapacitet vezivanja seruma za gvožđe (TIBC) (normalno 30-85 µmol/l). Razlika između vrednosti TIBC i serumskog gvožđa odražava latentni kapacitet vezivanja gvožđa, a odnos serumskog gvožđa prema TIBC, izražen u procentima, odražava procenat zasićenja transferina gvožđem (normalno 16-50%). Da bi se procenila količina rezervi gvožđa u telu, sprovodi se sledeće:

Proučavanje nivoa feritina u serumu korištenjem radioimunih metoda;

Desferalni test. Desferal (desferoksamin) je komplekson koji se nakon unošenja u organizam selektivno vezuje za rezerve gvožđa, odnosno feritinsko gvožđe, i uklanja ga urinom. Pacijentu se intramuskularno ubrizgava 500 mg desferala jednokratno, dnevno se sakuplja urin i utvrđuje sadržaj željeza u njemu. Nakon primjene desferala, 0,8 do 1,2 mg željeza se normalno izlučuje urinom, dok se kod pacijenata sa anemijom zbog nedostatka željeza ili u prisustvu skrivenog nedostatka željeza, količina željeza izlučenog u urinu naglo smanjuje;

Brojanje sideroblasta u punkciji koštane srži i siderocita u perifernoj krvi. Sideroblasti su normoblasti, odnosno ćelije crvenog reda s jezgrom, u čijoj citoplazmi se otkrivaju plave granule rezervi željeza - feritina. Normalno, 20-40% normoblasta su sideroblasti. Siderociti su crvena krvna zrnca u kojima se nalaze granule feritina. Normalno u perifernoj krvi: do 1% siderocita. Zrnca feritina u sideroblastima i siderocitima otkrivaju se posebnim bojenjem pruskom plavom bojom.

Organizam karakterišu fiziološki gubici gvožđa u urinu, fecesu, žuči, ljuštenim ćelijama crevne sluznice, znoju, kao i pri šišanju kose i noktiju. Žene gube željezo s menstruacijom.

Nastanku anemije usled nedostatka gvožđa prethodi skriveni (latentni) nedostatak gvožđa. Pacijenti imaju pritužbe i Klinički znakovi, karakteristična za pijemiju usled nedostatka gvožđa, ali manje izražena (slabost, umereno bledilo kože i vidljivih sluzokoža, glavobolja, lupanje srca, često izopačenost ukusa i mirisa, suha koža, lomljivi nokti i dr.). Pregledom se još ne otkrivaju promjene u sadržaju hemoglobina, crvenih krvnih zrnaca i drugih pokazatelja periferne krvi. Ali otkrivaju se poremećaji u metabolizmu gvožđa: serumsko gvožđe se smanjuje, povećavaju se ukupne i latentne sposobnosti vezivanja gvožđa seruma, smanjuje se procenat zasićenja transferina i smanjuje nivo rezervi gvožđa. Ovo je sideropenija bez anemije. Skriveni nedostatak gvožđa može se razviti u bilo kom životnom dobu, a posebno su skloni da pate od njega žene, adolescenti i deca. Ako se skriveni nedostatak gvožđa ne nadoknadi, već produbi, razvija se anemija deficita gvožđa.

Crvena krvna zrnca donora	Krv primaoca
Crvena krvna zrnca donora