Kateri tumor ima zrnato površino? Zrnati celični tumor. Znaki in diagnoza zrnatoceličnega tumorja. Simptomi in diagnoza

Od številnih obstoječih antigenov v zdravniška praksa Največji pomen imajo tri vrste krvnih aglutinogenov. Eden od njih je tip, ki je odgovoren za manifestacijo Rh faktorja: če je prisoten na membrani eritrocitov, se krvna skupina diagnosticira kot Rh +, če je odsoten - Rh-. Če eritrociti z Rh+ aglutinogeni pridejo v Rh negativno kri, telo sproži imunski odziv in začne proizvajati protitelesa proti temu antigenu, kar povzroči patološka stanja.

REFERENCA! Rh faktor je kompleksen večkomponentni sistem več deset antigenov. Najpogostejši med njimi so aglutinogeni tipa D (85% primerov), pa tudi E in C.

Coombsov test se izvaja le, če obstajajo neposredni dokazi. Splošni seznam razlogov za predpisovanje Coombsovega testa:

načrtovanje in vodenje nosečnosti (starši imajo različne Rh);
darovanje in priprava na transfuzijo krvi (neujemanje krvi po Rh ni nič manj uničujoče kot neujemanje po sistemu AB0);
načrtovano kirurški poseg(v primeru nadomestitve izgube krvi s transfuzijo krvi);
diagnoza hemolitičnih bolezni.

Natančnejše indikacije so odvisne od vrste študije, ki se izvaja.

Neposredni Coombsov test

Direktni test zazna protitelesa na površini rdečih krvničk. To je potrebno za diagnosticiranje obstoječega hemolitične patologije:

avtoimunski (rdeče krvne celice in hemoglobin se uničijo kot posledica napada lastnih protiteles telesa);
zdravilno ( patološki proces začne nekatere sprejemati zdravila kot sta kinidin ali prokainamid);
po transfuziji (če se krvna skupina med transfuzijo ne ujema), pa tudi v obliki Rh konflikta med nosečnostjo (eritroblastoza novorojenčkov).

REFERENCA! Hemolitična anemija je bolezen, povezana s prezgodnjim uničenjem rdečih krvnih celic zaradi hemolize, kar povzroči nezadostno nasičenost krvi s kisikom in hipoksijo možganov in / ali notranjih organov.

Hemolizo krvnih elementov opazimo pri onkoloških, infekcijskih, revmatskih boleznih, zato se lahko uporabi neposredni Coombsov test dodatno pravno sredstvo diagnostiko patološko stanje. Vredno si je zapomniti: negativen pomen analiza ne izključuje možnosti hemolize, vendar je razlog za dodatni pregled.

Indirektni Coombsov test

Posredno testiranje se pogosteje uporablja za preprečevanje patoloških situacij. Pomaga pri odkrivanju protiteles v krvni plazmi, kar je potrebno za oceno združljivosti transfuzije in diagnosticiranje tveganj Rh konflikta med nosečnostjo.

Več kot 80% ljudi ima pozitiven Rh faktor (Rh+), slabih 20% pa je Rh negativnih. Če Rh- mati razvije otroka z Rh +, njeno telo začne proizvajati protitelesa, ki napadajo rdeče krvne celice ploda in povzročajo hemolizo.

Ob upoštevanju dejstva, da odstotek zakonskih zvez z "različnim rezusom" doseže 12-15%, bi moralo biti tveganje za hemolitično bolezen novorojenčkov visoko, v resnici pa le v 1 od 25 takih primerov ženske doživljajo pojav preobčutljivosti. (na 200 uspešnih porodov je 1 primer hemolitične patologije). To je deloma posledica dejstva, da prvi Rh-pozitivni otrok običajno ne povzroči odprte agresije materinega telesa; Velika večina primerov se pojavi pri drugem in naslednjih otrocih. Velja enako načelo kot pri konvencionalni senzibilizaciji na določen alergen.

Ob prvem stiku ni reakcije. Telo se šele seznani z novim antigenom, proizvaja protitelesa razreda IgM, ki so odgovorna za hiter imunski odziv, vendar redko prodrejo skozi placentno pregrado v otrokovo kri. Vse patološke reakcije pojavijo ob drugem "srečanju", ko telo začne proizvajati protitelesa razreda IgG, ki zlahka prodrejo v fetalni krvni obtok in začnejo proces hemolize.

Indirektni Coombsov test med nosečnostjo omogoča odkrivanje prisotnosti protiteles v materinem telesu in pravočasno prepoznavanje začetni fazi preobčutljivost. Pozitiven odgovor zahteva registracijo z mesečnim testiranjem titra protiteles in obvezno hospitalizacijo 3-4 tedne pred porodom.

REFERENCA! Nezdružljivost faktorja Rh na noben način ne vpliva na stanje matere, hemolitična bolezen se razvije le pri otroku. V hudih primerih in brez pravočasnega odziva lahko plod odmre že v maternici ali takoj po porodu.

Priprava na postopek in njegovo izvedbo

Za diagnozo se uporablja venska kri. Za Coombsov test ni potrebna posebna dolgotrajna priprava. Pred odvzemom krvi iz vene za analizo poskusite upoštevati standardna pravila:

opustite alkohol za 3 dni, zdravila(če je možno);
Načrtujte zadnji obrok pozneje kot 8 ur pred odvzemom krvi za analizo;
opustite kajenje, fizični, duševni in čustveni stres v 1 uri;
Pred postopkom popijte kozarec čiste mirne vode.

Raziskovalna metoda temelji na reakciji hemaglutinacije.

Pri izvajanju neposrednega testa vzorec krvi izpostavimo vnaprej pripravljenemu antiglobulinskemu serumu z znanimi indikatorji, zmes nekaj časa hranimo in preverimo aglutinate, ki nastanejo ob prisotnosti protiteles na rdečih krvničkah. Raven aglutinatov se diagnosticira z uporabo aglutinacijskega titra.

Posredni vzorec Coombs ima podobno tehniko, vendar bolj zapleteno zaporedje dejanj. V ločen krvni serum vnesemo antigene eritrocite (z Rh faktorjem) in šele po teh manipulacijah dodamo antiglobulinski serum za diagnozo in aglutinacijski titer.

Rezultati raziskav

Običajno tako naravnost kot posredni Coombsov test mora dati negativen rezultat:

negativen neposredni test kaže, da v krvi ni specifičnih protiteles proti Rh faktorju, povezanih z rdečimi krvnimi celicami, in ne morejo povzročiti hemolize
negativen indirektni test pokaže, da tudi v krvni plazmi ni prostih protiteles proti Rh faktorju; to dejstvo kaže na združljivost krvi darovalca s krvjo prejemnika (ali krvjo matere in otroka) glede na Rh faktor.

Pozitiven Coombsov test kaže na Rh senzibilizacijo telesa, kar je glavni razlog Rh konflikt v primeru transfuzije krvi ali pri nošenju otroka z drugačnim Rh statusom. V tem primeru rezultati ostanejo nespremenjeni 3 mesece (življenjska doba rdečih krvničk). Če je vzrok avtoimunska hemolitična anemija, lahko pozitiven test bolnika spremlja več let (v nekaterih primerih vse življenje).

REFERENCA! Antiglobulinski test je zelo občutljiv, vendar ima malo informacij. Ne beleži aktivnosti hemolitičnega procesa, ne določa vrste protiteles in ne more ugotoviti vzroka patologije. Da bi dobili popolnejšo sliko, mora lečeči zdravnik predpisati dodatne raziskave(krvna mikroskopija, splošna in biokemična analiza, revmatski testi, ESR, ravni železa in feritina).

Stopnjo senzibilizacije lahko izrazimo kvalitativno (od "+" do "++++") ali kvantitativno v obliki titra:

1:2 - nizka vrednost, ni nevarno;
1:4 - 1:8 - začetek razvoja imunološke reakcije; ne predstavlja nevarnosti, vendar zahteva stalno spremljanje;
1:16 -1:1024 - močna oblika preobčutljivosti, treba je takoj ukrepati.

Razlog pozitiven test Jaz sem lahko:

transfuzija netipizirane krvi (ali z napako pri tipkanju), ko se Rh faktor darovalca in prejemnika ne ujemata;
Rh konflikt med nosečnostjo (če se sestava krvnih antigenov pri očetu in materi ne ujema);
avtoimunska hemolitična anemija - tako prirojena (primarna) kot sekundarna, ki je posledica nekaterih bolezni (Evansov sindrom, infekcijska pljučnica, sifilis, hladna hemoglobinurija, limfom);
hemolitična reakcija na zdravilo.

Nobene od naštetih težav bolnik ne more rešiti brez zdravstvena oskrba. V vseh primerih bo potrebno nujno posvetovanje, registracija ali nujna hospitalizacija.

POZOR! V redkih primerih je možen lažno pozitiven Coombsov test. Razlog za to so lahko pogoste transfuzije krvi, pa tudi številne bolezni: revmatoidni artritis, eritematozni lupus, sarkoidoza. Ta pojav lahko opazimo tudi po odstranitvi vranice, pa tudi, ko je reakcija motena (pogosto tresenje vsebine, prisotnost kontaminantov).

Hemolitična anemija, ki jih povzročajo avtoimunska telesa, ki so usmerjena proti lastnim rdečim krvnim celicam, niso natančno razumljeni. Domneva pa se, da nekateri dejavniki (na primer virus, nenormalna beljakovina) spremenijo rdeče krvne celice tako, da jih telo zazna »kot nekaj tujega« in se z njimi bori s pomočjo protiteles. Po drugi teoriji se protitelesa, usmerjena proti rdečim krvnim celicam, pojavijo skoraj po naključju med tvorbo nenormalnih beljakovin v plazmi pri nekaterih boleznih. Takšna beljakovinska telesa lahko prav tako "naključno" povzročijo reakcije, ki jih je mogoče uporabiti za postavitev diagnoze (na primer, virusna pljučnica, kot je znano, povzroči pozitivno Wassermanovo reakcijo, pozitivno Paul-Bunnelovo reakcijo in reakcijo hladne aglutinacije) .

Obstajata dve glavne vrste avtoprotiteles za hemolitično anemijo, in sicer: topla protitelesa (reagirajo pri 37°C) in hladna protitelesa (katerih reaktivnost narašča, ko se temperatura približuje ničli). Topla protitelesa so pogostejša kot hladna protitelesa. Dacie je ugotovil, da se topli hemolizini pojavljajo 2-krat pogosteje kot hladni. Hemolizini in aglutinini niso bistveno različna protitelesa: razlikujejo se le po naravi delovanja. Aglutinini aglutinirajo rdeče krvničke, hemolizini pa jih naredijo bolj dovzetne za kompleksen proces hemolize (komplement!). Avtoprotitelesa, ki se pritrdijo na eritrocite, tvorijo kompleks eritrocit-globin. Ta kompleks se odkrije s Coombsovim antiglobinskim testom.

Coombsov test izvajamo s Coombsovim serumom, za pripravo katerega kunca senzibiliziramo s človeškim serumom, proti kateremu se v kunčjem serumu tvorijo protitelesa. Ko tako senzibiliziran serum deluje na človeške eritrocite, pride do njihove aglutinacije, če so receptorji eritrocitov zasedeni z blokirnimi protitelesi. Ker so ta blokirna protitelesa pridobljena iz človeškega seruma, se aglutinirajo s kunčjim serumom, ki je občutljiv na človeško plazmo in vsebuje precipitine. Ta reakcija se imenuje Coombsov test; Za hemolitična anemija na podlagi avtoimunskih telesc (Lo tit) je skoraj specifična (podrobneje glej Maier).

Na splošno za hemolitične anemije pri primarni motnji eritrocitov je Coombsov test negativen, pri pridobljenih pa pozitiven. Vendar pa obstaja nekaj izjem od tega pravila: lažno pozitiven Coombsov test je bil odkrit med krizami ustavne hemolitične anemije in pri šibka stopnja- včasih tudi po splenektomiji, pri revmatičnem artritisu, sarkoidozi, po pogostih transfuzijah krvi in pri sistemskem eritematoznem lupusu. Seveda je pri pridobljeni hemolitični anemiji brez tvorbe avtoimunskih teles negativen.

Hemolitična anemija ki jih povzročajo avtoimunska telesa, lahko razdelimo na:
a) akutni, subakutni in kronične oblike, kot tudi na
b) idiopatski z neznano etiologijo in c) simptomatski [virusna pljučnica (samo hladni aglutinini), kronična limfna levkemija, retikulosarkom, limfosarkom, sistemski eritematozni lupus (večinoma topli, redkeje hladni aglutinini), sifilis (hladni aglutinini), tumorji jajčnikov (Miescher). z zaposlenimi)).
c) simptomatska [virusna pljučnica (samo hladni aglutinini), kronična limfna levkemija, retikulosarkom, limfosarkom, sistemski eritematozni lupus (predvsem topli, redkeje hladni aglutinini), sifilis (hladni aglutinini), tumorji jajčnikov (Miescher in sodelavci)).

Klinika hemolitične anemije, ki se razvija pod vplivom avtoimunskih teles, je zelo raznolika, zato je komaj mogoče narisati njihovo splošno klinična slika. Osebe vseh starosti in obeh spolov so enako prizadete. Kljub temu se zdi, da so idiopatske oblike pogostejše pri ženskah (Sacks in Workman).

Klinična slika idiopatske oblike razlikuje glede na resnost bolezni. IN kronični primeri Začetek je postopen, bolezen se vleče več let s pogostimi poslabšanji. Resnost anemije se razlikuje glede na stopnjo hemolize. Opažajo se padci hemoglobina do 10%, v drugih primerih hemoglobin dolgo časa ostane pri 50-60%. Intenzivnost retikulocitoze in ikterične barve kože in seruma ustreza stopnji hemolize. Bilirubin se zelo redko nahaja v urinu, ker ne prehaja skozi ledvice, opazimo pa hemoglobinurijo. V kroničnih primerih je vranica pogosto povečana in lahko doseže celo zelo veliko velikost, v drugih primerih pa jo je še vedno mogoče otipati. Jetra redko niso povečana.

V večini primerov v krvi opazimo makrocitozo, v akutnih fazah je tudi veliko mikrocitov, normoblastoza in polikromazija redko nista, levkocitoza lahko doseže 30.000, trombociti so normalni. V nekaterih primerih pa pride do hude trombocitopenije. Evans te primere pojasnjuje s hkratno prisotnostjo protiteles proti trombocitom, tako da pride do hemolitične anemije in trombocitopenije zaradi delovanja avtoimunskih teles – Evansov sindrom. Osmotska rezistenca je rahlo zmanjšana, vendar ne v tolikšni meri in ne tako trajno kot pri konstitucionalni globularnocelični anemiji. Test toplotne odpornosti (Hegglin-Maier) po 6 urah lahko povzroči tudi rahlo hemolizo (lastno opažanje), vendar v manjši meri kot pri anemiji Marchiafava. Hemosiderin najdemo tudi v urinu (lastno opažanje).

Coombsov test

Coombsov test– antiglobulinski test, namenjen odkrivanju v Rh-negativni krvi nepopolnih antieritrocitnih protiteles proti Rh faktorju - specifičnemu proteinu, ki se nahaja na površini eritrocitov Rh-pozitivne krvi. Obstajata dve vrsti ta test: direktno – dokazovanje protiteles na površini rdečih krvničk, posredno – dokazovanje protiteles v krvnem serumu. Neposredno testiranje se izvaja pri diagnostiki in spremljanju zdravljenja krvnih bolezni: hemolitične anemije, hemolitične bolezni novorojenčkov in drugih. Posredni test se izvede za oceno združljivosti krvi darovalca in prejemnika med transfuzijo ter za določitev prisotnosti in tveganja Rh konflikta pri načrtovanju in vodenju nosečnosti. Material za Coombsov test je deoksigenirano kri, študija se izvaja z metodami, ki temeljijo na reakciji aglutinacije. Običajno sta oba testa negativna. Analiza je končana v enem dnevu.

Coombsov test – klinično preskušanje Rh-negativna kri, namenjena odkrivanju protiteles proti Rh faktorju. Test se uporablja za ugotavljanje tveganja za razvoj Rh konflikta in hemolitičnih reakcij. Pri vsaki osebi površina rdečih krvnih celic vsebuje določen niz antigenov ali aglutinogenov - spojin različnih narav, katerih prisotnost ali odsotnost se uporablja za določanje krvne skupine in Rh faktorja. Obstaja veliko vrst antigenov, v medicinski praksi največ praktični pomen imajo aglutinogena A in B, ki določata krvno skupino, in aglutinogen D, ki določa Rh faktor. S pozitivnim Rh faktorjem se antigeni D odkrijejo na zunanji membrani eritrocitov, z negativnim faktorjem pa ne.

Coombsov test, imenovan tudi antiglobulinski test, je namenjen odkrivanju nepopolnih antieritrocitnih protiteles proti sistemu Rh faktorja v krvi. Protitelesa proti Rh faktorju so specifični imunoglobulini, ki nastanejo v Rh negativni krvi, ko vanjo vstopijo rdeče krvne celice z aglutinogeni D. To se lahko zgodi pri mešanju krvi ploda in nosečnice, med transfuzijo krvi brez predhodne krvi. tipkanje. Coombsov test obstaja v dveh različicah - neposredni in posredni. Pri izvajanju neposrednega Coombsovega testa se odkrijejo protitelesa, pritrjena na površino rdečih krvnih celic. Študija se uporablja za določitev vzroka hemolitične reakcije. Indirektni Coombsov test je namenjen odkrivanju protiteles proti eritrocitom v krvni plazmi. Treba je določiti združljivost krvi med darovalcem in prejemnikom ali materjo in plodom ter pomaga preprečiti razvoj Rh konflikta in posledično hemolizo rdečih krvnih celic.

Kri za obe različici Coombsovega testa se vzame iz vene. Analiza poteka z aglutinacijo z antiglobulinskim serumom. Rezultati študije se uporabljajo v hematologiji za odkrivanje vzrokov hemolitičnih reakcij, v kirurgiji in oživljanju pri izvajanju transfuzije krvi, v porodništvu in ginekologiji pri spremljanju nosečnosti pri ženskah z Rh-negativno krvjo.

Indikacije

Direktni Coombsov test, ki odkriva protitelesa, pritrjena na površino rdečih krvnih celic, je predpisan za hemolitične reakcije (uničenje rdečih krvničk) različnega izvora. Študija je indicirana za primarno avtoimunsko hemolitično anemijo, posttransfuzijsko hemolitično anemijo, hemolitično bolezen novorojenčka, hemolizo eritrocitov, ki jo povzroča avtoimunska, tumorska ali nalezljive bolezni, kot tudi recepcija zdravila, na primer kinidin, metildopa, prokainamid. Indirektni Coombsov test, ki določa protitelesa v krvni plazmi, se uporablja za preprečevanje razvoja Rh konflikta. Indicirano je za bolnike, ki se pripravljajo na transfuzijo krvi, pa tudi za nosečnice z negativni Rh faktor pod pogojem, da ima bodoči oče otroka pozitiven Rh faktor.

Za določitev Rh združljivosti Coombsov test ni predpisan bolnikom z Rh pozitivno krvjo. V teh primerih so na površini rdečih krvničk že prisotni antigeni, nastajanja protiteles ne moremo izzvati s transfuzijo krvi ali vstopom plodove krvi v krvni obtok nosečnice. Tudi študija ni indicirana za nosečnice, če imata oba starša negativen Rh faktor - dedno recesivno lastnost. Otrok v takih parih ima vedno Rh negativno kri, imunološki konflikt z materjo je nemogoč. Pri hemolitičnih patologijah se antiglobulinski test ne uporablja za spremljanje uspešnosti terapije, saj rezultati ne odražajo aktivnosti procesa uničenja rdečih krvnih celic.

Omejitev Coombsovega testa je težavnost raziskovalnega postopka - za pridobitev zanesljivih rezultatov je potrebno upoštevati temperaturne in časovne pogoje, pravila za pripravo reagentov in biomateriala. Prednosti Coombsovega testa vključujejo njegovo visoka občutljivost. Pri hemolitični anemiji ostanejo rezultati tega testa pozitivni, tudi če so vrednosti hemoglobina, bilirubina in retikulocitov normalne.

Priprava na analizo in zbiranje materiala

Material za izvedbo Coombsovega testa je venska kri. Za čas postopka odvzema krvi in pripravo pacienta ni posebnih zahtev. Kot pri vsaki študiji je priporočljivo, da si po jedi vzamete vsaj 4-urni odmor in v zadnjih 30 minutah prenehate kaditi. telesna aktivnost, izogibajte se čustvenemu stresu. Prav tako je vredno vnaprej razpravljati s svojim zdravnikom o potrebi po prenehanju jemanja zdravil - nekatera zdravila lahko izkrivljajo rezultate Coombsovega testa. Kri se odvzame z brizgo iz kubitalne vene, manj pogosto iz vene naprej Zadnja stranščetke V nekaj urah je material dostavljen v laboratorij.

Pri izvajanju neposrednega Coombsovega testa pacientovemu krvnemu serumu dodamo antiglobulinski serum. Po določenem času se mešanica pregleda na prisotnost aglutinatov - nastanejo, če so protitelesa na rdečih krvnih celicah. Če je rezultat pozitiven, se določi aglutinacijski titer. Indirektni Coombsov test je sestavljen iz več korakov. Najprej se protitelesa, prisotna v serumu, med inkubacijo pritrdijo na vbrizgane rdeče krvne celice. Nato vzorcu dodamo antiglobulinski serum, čez nekaj časa določimo prisotnost in titer aglutinatov. Obdobje analize je 1 dan.

Normalni rezultati

Običajno je rezultat neposrednega Coombsovega testa negativen (-). To pomeni, da v krvi ni protiteles, povezanih z rdečimi krvnimi celicami, in ne morejo povzročiti hemolize. Normalen rezultat Indirektni Coombsov test je tudi negativen (-), to pomeni, da v krvni plazmi ni protiteles proti faktorju Rh. Pri pripravi na transfuzijo krvi za prejemnika to pomeni združljivost s krvjo darovalca; pri spremljanju nosečnosti to pomeni odsotnost Rh senzibilizacije matere, nizko tveganje za nastanek imunološkega konflikta. Fiziološki dejavniki, kot so prehranjevalne navade oz telesna aktivnost, ne more vplivati na rezultat testa. Če je rezultat pozitiven, je torej potrebno posvetovanje z zdravnikom.

Diagnostična vrednost analize

Pozitiven rezultat Coombsov test je izražen kvalitativno, od (+) do (++++), ali kvantitativno, s titri od 1:16 do 1:256. Določanje koncentracije protiteles na rdečih krvničkah in v krvnem serumu se izvaja v obeh vrstah vzorcev. Če je direktni Coombsov test pozitiven, se na zunanji membrani rdečih krvničk odkrijejo protitelesa, ki povzročijo uničenje teh krvnih celic. Vzrok je lahko transfuzija krvi brez predhodne tipizacije - potransfuzijska hemolitična reakcija, pa tudi eritroblastoza novorojenčka, hemolitična reakcija zaradi uporabe zdravil, primarna ali sekundarna avtoimunska hemolitična anemija. Sekundarno uničenje rdečih krvnih celic lahko povzročijo sistemski eritematozni lupus, Evansov sindrom, Waldenströmova makroglobulinemija, paroksizmalna mrzla hemoglobinurija, kronična limfocitna levkemija, limfom, infekcijska mononukleoza, sifilis, mikoplazmatska pljučnica.

Pozitiven rezultat indirektnega Coombsovega testa kaže na prisotnost protiteles proti faktorju Rh v plazmi. V praksi to pomeni, da je prišlo do Rh senzibilizacije in obstaja možnost razvoja Rh konflikta po infuziji krvi darovalca med nosečnostjo. Za preprečevanje zapletov v nosečnosti se ženske s pozitivnim rezultatom Coombsovega testa vpišejo v poseben register.

Zdravljenje nepravilnosti

Coombsov test se nanaša na izoserološke študije. Njegovi rezultati omogočajo prepoznavanje hemolitične reakcije, pa tudi določitev združljivosti krvi darovalca in prejemnika, matere in ploda, da se prepreči razvoj Rh konflikta. Če je rezultat testa pozitiven, se morate posvetovati z lečečim zdravnikom - porodničarjem-ginekologom, hematologom, kirurgom.

Antiglobulinski test ali Coombsov test To se naredi za identifikacijo določenih protiteles, ki napadajo rdeče krvne celice (eritrocite).

Protitelesa so beljakovine, ki jih proizvaja imunski sistem. Običajno se protitelesa vežejo na tuje snovi, kot so bakterije in virusi, in jih uničijo.

2. Zakaj je potreben test protiteles?

Test protiteles se lahko izvede v naslednjih primerih:

Pred transfuzijo krvi

Verjetno veste, da ima lahko človek eno od štirih krvnih skupin. Za določitev možnosti transfuzije krvi se lahko opravi tudi antiglobulinski test. Če prejemate transfuzijo, mora krv darovalca ustrezati vašemu tipu (imeti enake antigene). Če so antigeni med transfuzijo različni, imunski sistem bo uničil transfuzirane celice. To lahko vodi do hude bolezni in celo smrt. Zato je iskanje prave krvne skupine tako pomembno.

Za prepoznavanje tveganja preobčutljivosti za Rh

Rhesus je antigen. Njegovo polno ime je Rh faktor. Coombsov test se uporablja za odkrivanje protiteles proti Rh faktorju v krvi nosečnic. Če je ženska z negativno Rh krvjo noseča z otrokom s pozitivnim Rh faktorjem (lahko se prenese od očeta), obstaja tveganje za Rh senzibilizacijo. Preobčutljivost za Rh se pojavi, ko se med nosečnostjo ali porodom otrokova kri pomeša z materino. Če krvna skupina matere ni združljiva s krvno skupino otroka, lahko njen imunski sistem napade plod in ga zazna kot tujek. V tem primeru se lahko razvije resna bolezen, ki se imenuje fetalna eritroblastoza. V redkih primerih, če bolezni ne zdravimo, lahko pride do smrti ploda ali novorojenčka.

Ženska z Rh negativno krvjo lahko prejme injekcijo anti-Rh gamaglobulina (npr. RhoGAM), ki se uporablja za preprečevanje razvoja Rh hemolitične bolezni.

Za diagnozo avtoimunske hemolitične anemije

Avtoimunska hemolitična anemija je redka bolezen povezana s tvorbo protiteles proti lastnim antigenom eritrocitov.

3. Vrste antiglobulinskega testa

Obstajata dve vrsti antiglobulinskega testa ali Coombsov test: neposredni in posredni.

Direktni Coombsov test ali direktni antiglobulinski test zazna protitelesa, vezana na rdeče krvne celice. Uporablja se za določanje anemije. Pri tej bolezni se rdeče krvne celice uničijo hitreje, kot se proizvedejo.

Indirektni Coombsov test ali posredni antiglobulinski test izvajajo za iskanje protiteles, ki niso povezana z rdečimi krvnimi celicami. Test uporablja krvni serum, ki vsebuje protitelesa. Ta postopek je precej redek: večinoma se izvaja za ugotavljanje možnosti transfuzije krvi ali kot faza pregleda nosečnic.

4. Rezultati Coombsove reakcije

Norma:

Negativen rezultat testa - protitelesa niso zaznana.

Neposredni Coombsov test. Negativen neposredni antiglobulinski test pomeni, da vaša kri nima protiteles, povezanih z rdečimi krvnimi celicami.
Indirektni Coombsov test. Negativen rezultat indirektnega antiglobulinskega testa pomeni, da je vaša kri združljiva s krvjo darovalca. Za nosečnico ta rezultat pomeni, da njeno telo ni proizvedlo protiteles proti Rh-pozitivni krvni skupini njenega otroka (ni prišlo do Rh-senzibilizacije).

Odstopanje od norme:

Neposredni Coombsov test. Pozitiven neposredni antiglobulinski test pomeni, da ima vaša kri protitelesa, ki se borijo proti rdečim krvnim celicam. To je lahko posledica transfuzije nezdružljiva kri ali bolezni, kot je hemolitična anemija ali hemolitična bolezen novorojenčka (HDN).
Indirektni Coombsov test. Pozitiven indirektni antiglobulinski test pomeni, da vaša kri ni združljiva s krvjo darovalca. Pri nosečnici takšni izvidi pomenijo prisotnost protiteles proti pozitivnemu Rh faktorju otrokove krvi (Rh senzibilizacija). Če ima otrok pozitiven Rh krvni faktor, bo mater ves čas nosečnosti skrbno spremljal zdravnik.

Nanesite 1 veliko kapljico seruma O(I), A(II), B(III) na ploščo ali predmetno steklo s pipetami (drugačno!). Ko si zabeležite čas, uporabite čisto stekleno paličico ali čisti kotiček stekelca, da združite kapljice seruma s kapljicami krvi. Določanje traja 5 minut, ploščo pretresemo, nato vsaki mešanici kapljic dodamo 1 kapljico fiziološke raztopine in ovrednotimo rezultate. Bolje je, če je serum v dveh različnih serijah. Rezultati krvnih skupin se morajo ujemati v obeh serijah seruma.

Vrednotenje rezultatov izohemaglutinacije:

izohemaglutinacija. Če je reakcija pozitivna, se v mešanici pojavijo drobna rdeča zrnca lepljivih rdečih krvničk. Zrna se spajajo v večja zrna, ta pa v kosmiče. Serum je skoraj razbarvan;

če je reakcija negativna, ostane mešanica enakomerno obarvana 5 minut roza barva in zrn ni najti;

Pri delu s 3 serumi skupin O(I), A(II), B(III) so možne 4 kombinacije reakcij:

če so vsi 3 serumi dali negativno reakcijo, to je, da je mešanica enakomerno rožnato obarvana - to je krvna skupina O (I);
če negativna reakcija samo serum skupine A (II) je dal, seruma O (I) in B (III) pa sta dala pozitivno reakcijo, to je, da so se pojavila zrna - to je krvna skupina A (II);
serum skupine B(II) je dal negativno reakcijo, seruma skupine O(I) in A(II) pa pozitivno - to je krvna skupina B(III).

vsi 3 serumi so dali pozitivne reakcije- preiskava krvne skupine AB(IV). V tem primeru se izvede študija s serumom skupine AB(IV).

Opomba! Kapljice testirane krvi morajo biti 5-10-krat manjše od kapljic seruma.

Napake izohemaglutinacije.

Neizvedba aglutinacije tam, kjer bi morala biti, in prisotnost aglutinacije tam, kjer je ne bi smelo biti. To je lahko posledica šibkega serumskega titra in slabe aglutinacije rdečih krvnih celic.

Prisotnost aglutinacije tam, kjer je ne bi smelo biti- To je psevdoaglutinacija, ko kupi rdečih krvničk tvorijo "stolpce kovancev". Stresanje krožnika ali dodajanje fiziološke raztopine jih uniči.

Panaglutinacija, ko serum zlepi vse rdeče krvne celice, vključno s tistimi lastne krvne skupine. Do 5. minute znaki aglutinacije izginejo.

Obstaja tudi tako imenovana hladna panaglutinacija, ko se rdeče krvne celice zlepijo zaradi nizke temperature zraka (pod 15 °C) v prostoru.

V vseh teh primerih se izvede ponovna reakcija ali uporaba standardnih rdečih krvnih celic.

Določitev Rh krvi

Za določitev statusa Rh, to je za odkrivanje prisotnosti ali odsotnosti antigenov sistema Rh v krvi ljudi, se uporabljajo standardni anti-Rh serumi (reagenti), ki se razlikujejo po specifičnosti, to je, da vsebujejo protitelesa proti različnim antigenom tega sistema. Za določitev antigena Rh 0 (D) se najpogosteje uporablja anti-rezusni serum z dodatkom 10% raztopine želatine ali standardni anti-rezusni reagent, pripravljen vnaprej s 33% raztopino poliglucina. Za pridobitev natančnejših rezultatov raziskav, kot tudi za identifikacijo antigenov drugih seroloških sistemov, se uporablja Coombsov test (je tudi zelo občutljiv pri določanju združljivosti transfuzirane krvi). Za raziskave se uporablja nativna kri ali kri, pripravljena z nekim konzervansom. V tem primeru je treba kri sprati s konzervansa z desetkratnim volumnom izotonična raztopina natrijev klorid. Pri določanju Rh statusa- Rh 0 (D) Uporabiti je treba dva vzorca seruma ali anti-rezusnega reagenta dveh različnih serij in hkrati standardne rdeče krvne celice, pridobljene iz krvi Rh-pozitivnih (Rh +) in Rh-negativnih (Rh -) posameznike je treba uporabiti za nadzor. Pri določanju drugih izoantigenov je treba ustrezno uporabiti kontrolne rdeče krvničke, ki vsebujejo ali nimajo antigena, proti kateremu so usmerjena protitelesa v standardnem serumu.

Delni toplotni aglutinini so najpogostejša vrsta protiteles, ki lahko povzročijo razvoj avtoimunske hemolitične anemije. Ta protitelesa pripadajo IgG, redkeje IgM, IgA.

COOMBSOV TEST

Coombsov test: uvod. Coombsov test je laboratorijska diagnostična metoda, ki temelji na reakciji hemaglutinacije.

Glavna metoda za diagnosticiranje avtoimunske hemolitične anemije je Coombsov test. Temelji na sposobnosti protiteles, specifičnih za imunoglobuline (zlasti IgG) ali komponente komplementa (zlasti S3), da aglutinirajo eritrocite, prevlečene z IgG ali S3.

Vezavo IgG in C3b na eritrocite opažamo pri avtoimunski hemolitični anemiji in z zdravili povzročeni imunski hemolitični anemiji. Neposredni Coombsov test. Direktni Coombsov test se uporablja za odkrivanje protiteles ali komponent komplementa, pritrjenih na površini rdečih krvnih celic. Izvaja se na naslednji način:

Za pridobitev protiteles proti humanim imunoglobulinom (antiglobulinski serum) ali komplementu (antikomplementarni serum) žival imuniziramo s humanim serumom, imunoglobulini ali humanim komplementom. Serum, pridobljen iz živali, se očisti iz protiteles proti drugim beljakovinam.

Pacientove rdeče krvne celice speremo s fiziološko raztopino, da popolnoma odstranimo serum, ki nevtralizira protitelesa proti imunoglobulinom in komplementu ter lahko povzroči lažno negativen rezultat.

Če so protitelesa ali komponente komplementa fiksirane na površini rdečih krvnih celic, dodatek antiglobulina ali antikomplementnega seruma povzroči aglutinacijo rdečih krvničk.

Neposredni Coombsov test se uporablja v naslednjih primerih:

Avtoimunska hemoliza.

Hemolitična bolezen novorojenčkov.

Z zdravili povzročena imunska hemolitična anemija.

Hemolitične transfuzijske reakcije. Indirektni Coombsov test. Indirektni Coombsov test zazna protitelesa proti rdečim krvnim celicam v serumu. Da bi to naredili, se bolnikov serum inkubira z rdečimi krvnimi celicami darovalca skupine 0, nato pa se izvede neposredni Coombsov test.

Indirektni Coombsov test se uporablja v naslednjih primerih:

Določitev individualne združljivosti krvi darovalca in prejemnika.

Odkrivanje aloprotiteles, vključno s protitelesi, ki povzročajo hemolitične transfuzijske reakcije.

Določanje površinskih eritrocitnih antigenov v medicinski genetiki in sodni medicini.

Potrditev enojajčnih dvojčkov med presaditvijo kostnega mozga.

Za izvedbo biološkega testa se kri začne čim hitreje transfuzirati (po možnosti v toku). Po transfuziji 25 ml krvi sistemsko cevko pripnemo s spono. Nato sledi 3-minutni premor, med katerim se spremlja stanje prejemnika. Za izvedbo biološkega testa se trikrat vbrizga 25 ml krvi. Na koncu testa (po transfuziji prvih 75 ml krvi v delnih odmerkih po 25 ml v 3-minutnih intervalih) se sistem prilagodi zahtevani hitrosti transfuzije. Pri transfuziji več kot ene stekleničke krvi bolniku je treba iglo odstraniti iz vene. V tem primeru iglo odstranimo iz epruvete viale, v kateri je zmanjkalo krvi, in jo vstavimo v naslednjo vialo. Sistemska cev (gumijasta ali plastična) je v tem trenutku vpeta s spono. Če je med transfuzijo krvi potrebno prejemniku intravensko dati katerokoli drugo zdravilo, se to naredi tako, da se prebode gumijasta cevka sistema. Preboji plastične cevi so nesprejemljivi, saj ne odpadejo. Po vsaki transfuziji krvi je treba bolnika spremljati, da ga prepoznamo in takoj odstranimo možnih zapletov, vključno z alergijske reakcije. 2 uri po koncu transfuzije krvi je treba izmeriti telesno temperaturo. Če se poveča, je treba meritev ponoviti vsako uro naslednje 4 ure. Enako pomembno je spremljanje uriniranja in sestave urina, kar omogoča ugotavljanje prisotnosti toksične posttransfuzijske reakcije. Pojav oligurije in anurije po transfuziji krvi, prisotnost krvnih celic in beljakovin v urinu so neposreden pokazatelj razvoja posttransfuzijske hemolize.